头穴丛刺结合环境刺激对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马MAP-2和p38表达影响的实验研究

目的:探讨头穴丛刺结合环境刺激对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马微管相关蛋白-2和突触素表达的影响。方法:7日龄Wistor大鼠通过结扎左侧颈总动脉后,吸入8%的氮氧混合气体2 h,制成缺氧缺血性脑病(HIE)模型。随机分为5组,假手术组(A)16只,造模组(B)16只,头穴丛刺组(C)16只,环境刺激组(D)16只,头穴丛刺加环境刺激组(E)16只。治疗14天和28天后采用免疫组织化学方法对海马微管相关蛋白-2和突触素的表达进行分析。结果:海马微管相关蛋白-2和突触素的免疫组化结果显示,C、D、E组MAP-2和P38的表达在14天和28天时均高于A、B组(P<0.01),而E组与C、D组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:头穴丛刺结合环境刺激可促进HIBD后大鼠海马微管相关蛋白-2和突触素的阳性表达。     

“头穴丛刺法"对局灶性脑梗死大鼠可塑性蛋白map-2的影响

目的:探讨"头穴丛刺法"对局灶性脑梗死大鼠神经可塑性影响的物质基础和可能机制.方法:采用线栓法制备大脑中动脉急性脑梗死大鼠模型,将132只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、头穴透刺组(C组)及头穴丛刺组(D组).C组采用针刺"百会"透"曲鬓"穴;D组采用"头穴丛刺"("百会"及"百会"左右侧各旁开4 mm处).均快速捻转1 min后留针30 min,每日1次,6 d为一疗程,共治疗4个疗程.A组与B组不予治疗.采用Bederson评分评价神经功能变化;免疫组织化学染色(S-P)法观察缺血半暗带微管相关蛋白2(MAP-2)阳性信号的表达.结果:7 d时,D组与B组比较,大鼠神经功能评分降低(P<0.05);14 d、28 d时,C组、D组分别与B组比较,神经功能评分均降低(均P<0.05);28 d时D组与C组比较,D组神经功能评分降低(P<0.05).7 d、14 d、28 d时,D组、C组与B组比较,缺血皮层MAP-2阳性信号的表达均上升(均P<0.05),14 d和28 d时D组与C组比较,皮层MAP-2阳性信号的表达升高(P<0.05).结论:"头穴丛刺"能改善脑梗死大鼠的神经功能,增加缺血皮层MAP-2阳性信号的表达.     

头穴丛刺结合丰富环境刺激对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠突触超微结构和EGFmRNA表达的影响

目的：观察头穴丛刺结合丰富环境刺激对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后突触超微结构和EG-FmRNA表达的影响。方法：采用Rice法建立HIBD动物模型。随机分为造模组（ A）、头穴丛刺组（ B）、丰富环境刺激组（ C）、头穴丛刺结合丰富环境刺激组（ D）。选取7 d、14 d、21 d,应用透射电镜和原位杂交技术观察头穴丛刺结合丰富环境刺激对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠突触超微结构和EGFmRNA表达的影响。结果：头穴丛刺结合丰富环境刺激组突触结构好,突触小泡数量较多,神经元细胞线粒体水肿明显减轻;14 d、21 d头穴丛刺结合丰富环境刺激组EGFmRNA表达明显高于相同时间段头穴丛刺组和丰富环境刺激组（P＜0．01）。结论：头穴丛刺结合丰富环境刺激能够明显减轻缺血缺氧所致的突触超微结构损伤和增加EGFmRNA的表达。     

头穴丛刺法对局灶性脑缺血大鼠突触形态可塑性的影响

目的探讨头穴丛刺法对MCAO大鼠的突触可塑性的影响,为临床应用头穴丛刺法治疗脑卒中提供理论依据。方法将27只SD大鼠随机分为头穴丛刺、模型组与假手术组;将头穴丛刺组与模型组的大鼠制备大脑中动脉缺血模型。于造模当天起,头穴丛刺组予每日一次的头穴丛刺治疗,模型组与假手术组不做治疗。分别在造模后1 d、7 d、14 d进行大鼠神经功能评分并取材。透射电镜观察大脑皮层半暗带区突触间隙宽度、突触界面曲率及突触后致密物厚度的变化。结果 (1)各时间点头穴丛刺组神经功能评分均优于模型组,但1 d时,头穴丛刺组、模型组组间比较无统计学意义(P0.05);7 d、14 d时,具有统计学意义(P0.05)。(2)1 d时:头穴丛刺组、模型组的突触各形态学参数与假手术组相比,均无明显差异(P0.05);7 d时:头穴丛刺组突触后致密物厚度明显高于模型组,具有统计学意义(P0.05);14 d时,头穴丛刺组的突触后致密物厚度、突触间隙宽度与模型组相比,具有统计学意义(P0.05)。各组大鼠各时间点突触界面曲率比较均无统计学意义(P0.05)。结论头穴丛刺法具有一定程度的促进突触形态可塑性的作用。     

头穴丛刺法对急性脑梗死大鼠病理形态学及凋亡相关基因 Caspase-3的影响

目的 通过观察头穴丛刺对急性脑梗死大鼠病理形态学及凋亡相关基因caspase-3表达的影响,探讨该方法治疗脑梗死的作用机制.方法 将72只雄性Wister大鼠随机分为三组:假手术组(A)、模型组(B)、头穴丛刺组(C),每组24只.各组再按脑梗死后不同时间点分为6 h、24 h、3 d三个亚组,每组8只.采用线栓法制备急性脑梗死动物模型.观察头穴丛刺法对急性脑梗死大鼠不同时间点缺血侧脑组织病理形态学及凋亡相关基因Caspase-3表达的变化.结果 脑梗死第3 d,B组大鼠梗死灶中心区坏死彻底,周围区神经细胞数目明显减少,脑组织水肿明显,可见神经毡疏松、淡染.与B组比较,C组大鼠梗死灶周边可见胶质细胞增生,脑组织水肿减轻;脑梗死后24 h至3 d,C组大鼠缺血侧皮层促凋亡基因Cmspase-3表达明显减少,与B组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 头穴丛刺疗法能够改善脑梗死缺血半暗区神经细胞功能状态,促进神经胶质细胞的增生;并可通过抑制促凋亡基因Caspase-3的表达,而发挥一定的脑保护作用.     

头穴丛刺法对急性脑梗死大鼠生长相关蛋白-43 mRNA表达的影响

目的:研究头穴丛刺法对急性脑梗死大鼠生长相关蛋白-43(GAP-43)mRNA的影响,探讨针刺对脑梗死大鼠神经可塑性影响的机制。方法:将健康雄性W istar大鼠随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、头穴透刺组(C组)、头穴丛刺组(D组)。通过建立大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,测定以上各组在7天、14天、28天不同时间点GAP-43mRNA变化情况。结果:头穴丛刺组脑组织GAP-43的表达与假手术组、模型组相比差异有统计学意义(P0.05);而在不同时间窗内头穴丛刺组、模型组与假手术组比较差异有统计学意义(P0.01)。结论:头穴丛刺能够提高脑缺血后神经功能,促进肢体功能恢复,增加GAP-43的表达,发挥对脑组织神经细胞可塑性的调节作用。     

头穴丛刺法对急性缺血性脑梗死大鼠神经可塑性影响的实验研究

目的:观察脑缺血大鼠皮质神经元突触结构的变化并试图探讨大鼠急性脑梗死后神经可塑性的物质基础及其发生机制.方法采用大脑中动脉闭塞(MCAO)制作脑缺血模型,运用神经功能评分及电子显微镜摄像技术观察假手术组,模型组和头穴丛刺组大鼠神经功能的改善,皮质神经元突触的结构、突触活性区长度、突触致密物质厚度的改变.结果:模型组突触结构模糊、线粒体肿胀、突触数目与假手术组比较明显减少;头穴丛刺法组突触结构较清晰、结构相对完整突触数目与模型组比较有所增加.     

头穴丛刺法对急性脑梗死大鼠病理形态学及凋亡相关基因Caspase-3的影响

目的通过观察头穴丛刺对急性脑梗死大鼠病理形态学及凋亡相关基因Caspase-3表达的影响，探讨该方法治疗脑梗死的作用机制。方法。将72只雄性Wister大鼠随机分为三组：假手术组（A）、模型组（B）、头穴丛刺组（C），每组24只。各组再按脑梗死后不同时间点分为6h、24h、3d三个亚组，每组8只。采用线栓法制备急性脑梗死动物模型，观察头穴丛刺法对急性脑梗死大鼠不同时间点缺血侧脑组织病理形态学及凋亡相关基因Caspase-3表达的变化。结果脑梗死第3d，B组大鼠梗死灶中心区坏死彻底，周围区神经细胞数目明显减少，脑组织水肿明显，可见神经毡疏松、淡染，与B组比较，C组大鼠梗死灶周边可见胶质细胞增生，脑组织水肿减轻；脑梗死后24h至3d，C组大鼠缺血侧皮层促凋亡基因Caspase-3表达明显减少，与B组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论头穴丛刺疗法能够改善脑梗死缺血半暗区神经细胞功能状态，促进神经胶质细胞的增生；并可通过抑制促凋亡基因Caspase-3的表达，而发挥一定的脑保护作用。     

头穴丛刺结合环境刺激对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后学习记忆能力影响的实验研究

目的:观察头穴丛刺结合环境刺激对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后学习记忆的影响.方法:7日龄Wistar大鼠通过结扎左侧颈总动脉后,吸入8％的氮氧混合气体2h,制成缺氧缺血性脑病(HIE)模型.随机分为假手术组(A)、造模组(B)、头穴丛刺组(C)、环境刺激组(D)、头穴丛刺加环境刺激组(E).治疗14天和21天后采用水迷宫实验检测学习和记忆能力.结果:定位航行实验和空间探索实验,A组与B组比较有显著性差异(P＜0.01),14天和21天各治疗组C、D、E组与B组比较有显著性差异(P＜0.01).结论:头穴丛刺结合环境刺激可改善HIBD后大鼠学习和记忆能力.     

Influence of Scalp Point-through-point Acupuncture on 200 kDa Neurofilament Protein in Rats with Acute Cerebral Infarction

目的研究头穴透刺对急性脑梗死大鼠神经丝蛋白-200(NF-200)的影响,探讨针刺对脑梗死大鼠神经可塑性影响的机制.方法将健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、针刺组(C组).通过建立大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法,测定以上各组在7 d、14 d、28 d不同时间点NF200 mRNA变化情况.结果头穴透刺组脑组织NF-200的表达与假手术组、造模组相比差异有统计学意义(P＜0.05);而在不同时间窗内头穴透刺组,模型组与假手术组比较差异有统计学意义(P＜0.01).表明头穴透刺可以促进脑组织神经丝蛋白-200的表达.结论头穴透刺能够提高脑缺血后神经功能,促进肢体功能恢复,增加神经丝蛋白-200的表达,发挥对脑组织神经细胞可塑性的调节作用.     

电针结合运动疗法对脑缺血大鼠神经功能恢复的影响

目的观察电针结合运动疗法对脑缺血大鼠神经功能恢复影响。方法70只SD大鼠随机分为A组(假手术组)、B组(对照组)、C组(电针组)、D组(运动训练组)和E组(电针结合运动训练组)各14只,制作大脑中动脉阻断再灌注模型。再灌注1d起C组每日接受电针治疗,D组每日给予滚笼运动训练,E组同时接受针刺治疗和运动训练,A组和B组不作任何干预,分别于再灌注1、12、21d测试神经功能。结果再灌注1d,B组、C组、D组、E组的神经功能评分相近;再灌注12、24d,C组、D组、E组神经功能总体评分均优于B组,E组神经功能评分优于C组、D组。结论电针结合运动训练能更好地促进大鼠脑缺血再灌注后的肢体神经功能恢复。     

Effect of cluster needling at scalp acupoints on differential protein expression in rat brain tissue after acute focal cerebral ischemia

ObjectiveTo explore the function of cluster needling at scalp points therapy on regulating differential protein’s expression at different time points in middle cerebral artery occlusion (MCAO) model rats.MethodsFifty-four rats were divided into three groups randomly and 18 rats in each group. The groups respectively were the model group (group M, n = 18), cluster needling at scalp points group (group C, n = 18), false operation group (group F, n = 18). Each group was then assigned in three subgroups, including 24-h, 7-day, and 14-day subgroups. Six rats in each subgroup. Acupuncture at Baihui (GV20) and 2 points beside Baihui, which was 3–4 mm away from the midline. Longa score was used to evaluated neurological effects. Proteomics methods were used to identify differentially expression proteins with a standard of fold change greater than 1.5 and P < .05 at different times.Results1. Nerve function scoring: The nerve function scores at 7 and 14 days decreased in group C, which showed better neural function than group M (P < .05). 2. Fold change in proteins: Group M showed 932 differentially expressed proteins compared with group F, and among them, 414 proteins showed significant changes in expression after acupuncture. The expression levels of Cdc42 and GFAP were increased, and Mag, Shank2, and MBP levels were decreased. In the Gene Ontology analysis, the cellular component consisted of the terms cytoplasm, cytoskeleton, lysosome, and plasma membrane. The main related biological processes were cell–cell signaling, protein transport, aging, and cell adhesion. Many synaptic and metabolic pathways were found by KEGG analysis.ConclusionCluster needling at scalp acupoints can improve the nerve function score and improve dyskinesia in MCAO model rats. Cluster needling at scalp acupoints can regulate the expression of 414 proteins, including Cdc42, GFAP, Mag, Shank2, and MBP, which are related to cerebral ischemia. The differential proteins are major concentration in cytoplasm, cytoskeleton, lysosomes, and plasma membrane, participate in cell–cell signaling, protein transport, aging, and cell adhesion, and act through multiple synaptic and metabolic pathways to exert their biological functions.     

三七二醇预处理诱导脑缺血耐受及对GFAP表达的影响

目的:观察三七二醇皂甙(PDS)预处理诱导脑缺血耐受及对胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达水平的影响。方法:SD雄性健康大鼠120只,随机分为6组。空白组未行任何干预;模型组(MCAO组)采用longa氏二次线栓法;预缺血 模型组(IPC MCAO组)先预缺血10 min,3 d后行MCAO术2 h;三七二醇预处理组(PDS MCAO组)予腹腔注射PDS 50 mg/kg.d,3 d后行MCAO术2 h;三七二醇治疗组(MCAO PDS组)予MCAO术后2 h腹腔注射PDS 50 mg/kg.d,3 d后处死;假手术组(SS SS组)间隔3 d分别施以10 min和2 h假手术。比较各组神经功能缺损评分、脑梗死体积及GFAP的表达水平。结果:IPC MCAO组、PDS MCAO组脑梗死体积较MCAO组缩小,GFAP表达水平较MCAO组升高,有统计学差异(P<0.05)。结论:PDS预处理诱导了脑缺血耐受,对将要发生的严重脑缺血具有保护作用。星形胶质细胞的活化可能是三七二醇预处理诱导脑缺血耐受的重要机制。     

电针对脑梗死大鼠神经功能及胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的观察电针对高血压基础上形成脑梗死大鼠的不同时间点神经功能评分及灶周胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达的影响,证实电针对星形胶质细胞（AST）变化的影响是其促进脑梗死功能恢复的机制之一。方法双肾双夹法制备RHRSP模型,双侧肾动脉狭窄术后12周,取血压≥l80mmHg大鼠,电凝法制备大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,随机分为MCAO假手术组、MCAO组（模型组）、穴位治疗组、非穴位治疗组,后两组行电针刺激。MCAO后各组分别于1d、3d、7d、14d、21d进行神经功能缺损评分,HE染色观察病理形态变化,GFAP免疫荧光染色观察电针对局灶性脑梗死缺血灶周围GFAP的表达。结果假手术组大鼠在各时间点神经功能缺损评分均为0分;各时间点模型组神经功能评分均高于穴位治疗组,1d时两组差异无统计学意义,3d、7d、14d、21d,两组差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。3d时模型组大鼠神经缺损症状最重,而电针组随着时间的延长其神经功能缺损评分在逐渐降低。在各时间点模型组与非穴位组无明显差异。HE染色可见穴位治疗组ASI及组织肿胀较模型组明显减轻。在五个时间点模型组和电针组GFAP表达都明显增高,与假手术组比较（P〈0.01）,电针组GFAP表达均明显低于同时段模型组（P〈0.05）。各时间点模型组GFAP表达与非穴位组比较无显著性差异。结论穴位电针治疗能下调脑缺血后GFAP表达,进而改善神经功能。     

头针对脑缺血再灌注大鼠脑组织MMP-9表达调控的动态研究

目的:探讨大鼠脑缺血再灌注后MMP-9的表达及早期头针干预对其的影响。方法:将205只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和头针组。采用线栓法复制右侧大脑中动脉缺血再灌注模型;应用干湿比重法测定各组大鼠脑水含量;应用免疫组化和Western blot技术检测各组大鼠缺血侧脑组织MMP-9的表达。结果:头针组大鼠在再灌注24h、48h、72h,脑组织水含量较模型组显著降低(P<0.05)。再灌注各时间点头针组大鼠缺血侧脑组织MMP-9表达较模型组显著减少(P<0.05)。结论:早期进行头针治疗能够显著减少脑缺血再灌注后缺血侧脑组织中MMP-9的表达,减轻其脑水肿程度。MMP-9下调可能是该疗法拮抗脑缺血再灌注损伤的分子机制之一。     

颅针与头针对急性脑梗死患者血清血管内皮生长因子影响的观察

目的:探讨颅针与头针对急性脑梗死(CI)效应机制的差异。方法:分别采用单纯药物(A组)和针刺颅骨缝区(冠状缝、矢状缝、人字缝等)加药物(B组)、针刺标准化头针方案穴区(对侧顶颞前斜线、顶颞后斜线)加药物(C组)治疗急性CI患者各20例,对照观察患者血清血管内皮生长因子(VEGF)。结果:治疗前后A组血清VEGF含量变化差异无显著性意义(P>0·05),B组、C组血清VEGF含量升高差异显著(P<0·01,P<0·05),与A组比较差异有显著性意义(P<0·05),B组治疗后VEGF水平与C组比较差异无显著性意义(P>0·05)。结论:颅针加药物治疗对急性脑梗死血清内皮生长因子的影响与标准头针加药物治疗相当。     

头穴透刺对急性脑梗死大鼠神经丝蛋白-200的影响

目的研究头穴透刺对急性脑梗死大鼠神经丝蛋白-200（NF-200）的影响，探讨针刺对脑梗死大鼠神经可塑性影响的机制。方法将健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组（A组）、模型组（B组）、针刺组（C组）。通过建立大鼠局灶性脑缺血模型（MCAO），用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法，测定以上各组在7d、14d、28d不同时间点NF200mRNA变化情况。结果头穴透刺组脑组织NF-200的表达与假手术组、造模组相比差异有统计学意义（P〈0．05）；而在不同时间窗内头穴透刺组，模型组与假手术组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。表明头穴透刺可以促进脑组织神经丝蛋白-200的表达。结论头穴透刺能够提高脑缺血后神经功能，促进肢体功能恢复，增加神经丝蛋白-200的表达，发挥对脑组织神经细胞可塑性的调节作用。     

头针对急性局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑血流量和环核苷酸的影响

目的观察头针对急性局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑血流量和环核苷酸的影响.方法大脑中动脉线栓法制作局灶性脑缺血再灌注损伤模型.将 24只大鼠分为假手术组、模型组、观察组和对照组,采用氢清除法测定患侧大脑皮层和海马区的血流量,用放射免疫分析测定血浆环磷酸腺苷 (cAMP)和环磷酸鸟苷 (cGMP)的含量.结果局灶性脑缺血模型大鼠患侧大脑皮层和海马区血流量显著减少,血浆 cAMP含量降低,与假手术组比较,差异有显著性;给予头针和体针治疗后大鼠大脑皮层血流量、血浆 cAMP含量均明显增加,但组间比较差异有显著性.结论头针治疗能增加脑缺血局部血流量,升高血浆 cAMP含量,对急性局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠有明显的治疗和预防作用.