基于“精血同源”探讨左归丸治疗“过度瘦身”所致继发性闭经的临床研究

随着社会发展与生活方式的改变,人们普遍形成"以瘦为美"的观念,致使许多女性通过各种方法达到瘦身目的。而过度瘦身不仅减少后天水谷之精的摄入,使后天气血运化不足,也使体内之阴血过度消耗,最终导致精血亏乏,精血亏乏日久则先天肾精无以养,致使肾藏精主生殖功能失常。女子以血为本,基于"肾主生殖""精血同源"理论,予左归丸补肾填精,滋养真水,使得精有所藏,胞宫得以养,月事以时下。     

基于“精血理论”探讨卵巢储备功能下降性不孕的治疗思路

卵巢储备功能下降性不孕是女性生殖健康领域研究的热点与难点,目前认为卵泡数量和质量下降是其病理学基础。“精血”是女性生理的重要物质基础,精为生殖之本,催生天癸,充养血海,天癸至,血海盈,冲任脉通,月事时下,而能孕育。基于“精血理论”,结合现代医学的认识,文章认为精血亏虚是卵巢储备功能下降性不孕的核心病机,提出从调补精血入手,滋补肝肾以充精血,健运脾胃以助养精血,疏肝理气以畅达精血,同时注重顺应月经周期灵活用药的治疗思路,同时发挥中医整体观与辨证施治的优势,取得了较好的临床疗效。     

中医“肾主生殖”理论对多囊卵巢综合征生殖功能障碍的认识

肾藏精,藏先天之精,又受后天水谷之精所充养。精化气,肾气充盛,天癸至,任脉通,太冲脉盛,故月经来潮,而能有子。多囊卵巢综合征的临床表现以月经稀发,闭经,不孕等生殖障碍为主;中医辨证论治,对上述的生殖障碍则主要是从肾气-天癸-月经轴来调节,而该轴最重要的则是对肾的论治,针对肾的气、阴、阳的不足给予补肾益气、滋肾益阴、温肾助阳等治法。     

基于Bcl-2/Bax凋亡探讨仙子益真胶囊对大鼠卵巢储备功能减退的作用机制

【目的】基于Bcl-2/Bax凋亡途径,探讨仙子益真胶囊（熟地黄、菟丝子等）对卵巢储备功能减退大鼠的作用机制。【方法】选用动情周期规律的60只SPF级雌性大鼠,随机分为正常组,模型组,中药低、中、高剂量组,西药组,每组10只。除正常组,其余组别大鼠构建卵巢储备功能减退模型。造模14 d后给药,中药低、中、高剂量组分别给予0.625、1.25、2.5 g·kg-1·d-1仙子益真胶囊灌胃,西药组给予补佳乐、地屈孕酮灌胃序贯治疗。干预28 d后,选择动情间期取材,实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测卵巢组织凋亡因子Bcl-2、Bax、Caspase-3、p53 mRNA表达水平,蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测卵巢组织核转录因子kappaB(NF-κB) p65、子宫内膜ERα、PR的蛋白表达水平。【结果】与正常组比较,模型组卵巢组织Bcl-2 mRNA表达水平降低,Bax、Caspase-3、p53 mRNA表达水平升高,Bcl-2/Bax比率降低,卵巢组织NF-κB p65,子宫内膜ERα、 PR蛋白表达水平降低（均P<0.05）;与模型组比较,中药组卵巢组...     

杞月茶对卵巢储备功能下降大鼠卵巢组织Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的 探讨杞月茶治疗卵巢储备功能下降大鼠的潜在机制。方法 2021年3—5月于北京中医药大学东直门医院中心实验室进行实验。6周龄SD大鼠24只,随机数字表法分为空白组、模型组、杞月茶组、戊酸雌二醇片(补佳乐)组,每组6只。除空白组外,其余大鼠腹腔注射VCD 160 mg/kg制备卵巢储备功能下降(DOR)模型,造模成功后,杞月茶组予杞月茶24 g/kg剂量灌胃,补佳乐组予补佳乐0.12 mg/kg灌胃,空白组及模型组予生理盐水3 ml/kg灌胃,连续灌胃4周。干预结束后,ELISA检测各组大鼠血清促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E₂)、抗苗勒管激素(AMH)的含量,取卵巢组织采用HE染色观察卵巢形态,免疫组织化学法检测卵巢Bax与Bcl-2蛋白表达,蛋白印迹法检测卵巢Bcl-2/Bax表达水平。结果 与空白组比较,模型组大鼠中初次级卵泡减少,闭锁卵泡增多;杞月茶组及补佳乐组初次级卵泡及成熟卵泡较多,闭锁卵泡较模型组减少。与空白组比较,模型组卵巢体质量指数、AMH水平降低,FSH水平升高(P<0.05);与模型组比较,杞月茶组及补佳乐组卵巢体质量指数、AMH水平...     

补肾益冲抗衰汤对卵巢储备功能下降大鼠卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2、Bax、Caspase-3的影响

[目的]观察补肾益冲抗衰汤对卵巢储备功能下降模型大鼠卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响。[方法]以70只8周龄雌性SD大鼠为研究对象,采用雷公藤多苷片制作卵巢储备功能下降大鼠模型。观察大鼠一般情况、卵巢指数、卵巢组织病理形态、血清E2、FSH、FSH/LH水平及卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达。[结果]补肾益冲抗衰汤能使卵巢储备功能下降大鼠动情周期缩短、子宫、卵巢重量增加,大鼠血清FSH水平、FSH/LH降低,血清E2水平增高（P〈0.05或P〈0.01）,使卵巢颗粒细胞抑制细胞凋亡因子Bcl-2蛋白表达增加,促进细胞凋亡因子Bax、Caspase-3蛋白表达减少（P〈0.05或P〈0.01）。[结论]雷公藤多甙片致DOR大鼠模型与人类卵巢储备功能下降的临床表现基本一致。细胞凋亡调节因子Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白与卵巢储备功能密切相关,补肾益冲抗衰汤有抑制卵巢颗粒细胞凋亡、减少卵泡闭锁从而改善卵巢储备功能的作用。     

西拉普利对糖尿病大鼠肾小球VEGF、ICAM-1表达的影响

目的　探讨血管紧张素转化酶抑制剂西拉普利对糖尿病肾病 (DN)保护作用和对肾小球血管内皮生长因子 (VEGF)和细胞间粘附分子 1(ICAM- 1)表达的影响。方法　采用链脲佐菌素 (STZ)诱发糖尿病 (DM)大鼠模型并给予西拉普利 1mg/ (kg· d)治疗 2周、8周 ,观察大鼠肾小球肥大、肾功能和尿蛋白的变化以及用免疫组织化学及计算机图像分析技术定位、半定量检测 VEGF和 ICAM- 1的表达。结果　 2周时糖尿病组肾重 /体重、CCr和 2 4 h尿蛋白升高 ,与对照组比较有显著性差异 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1)。免疫组化提示 ,肾小球 VEGF、ICAM- 1表达也增加 ,8周时达高峰 ,与对照组比较亦有显著性差异 (P<0 .0 1)。西拉普利作用 8周后 ,可降低肾重 /体重、CCr和 2 4 h尿蛋白 ,减少肾小球 VEGF、ICAM- 1表达水平 ,与糖尿病组比较 ,P<0 .0 5。结论　西拉普利可抑制糖尿病大鼠 VEGF和 ICAM- 1的表达 ,延缓糖尿病肾病的发生、发展     

HIF-1对大鼠心肌iNOS、VEGF蛋白表达的影响

目的观察缺氧诱导因子-1(HIF-1)对大鼠心肌诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响。方法应用HIF-1活性诱导剂氯化钴预处理大鼠,观察大鼠心肌iNOS、VEGF蛋白表达的变化。结果HIF-1α、iNOS、VEGF蛋白表达在预处理前分别为0.57±0.04、1.39±0.07、5.87±0.58。HIF-1α在预处理后3h(3.88±0.62)显著增加(t=3.04,P<0.01),6h(12.82±0.58)达高峰(F=3.87,P<0.01);iNOS蛋白表达在预处理后3h(8.10±0.40)显著增加(t=2.95,P<0.01),24h(13.74±0.58)达高峰(F=3.92,P<0.01);VEGF蛋白表达在处理后1h(9.18±0.75)即显著增加(t=3.08,P<0.01),之后在预处理后3h(21.72±0.53)和12h(23.97±0.73)分别形成两个表达高峰(均F=3.58,P<0.01)。结论氯化钴预处理大鼠后,HIF-1可促进心肌内iNOS、VEGF蛋白的表达,同时VEGF表达增高可能还存在其他的作用机制。     

通络方剂对1型糖尿病大鼠肾脏Ang Ⅱ、VEGF、ERK1/2表达的影响

目的研究通络方剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病大鼠肾脏组织ERK1/2信号转导通路的影响及对肾脏的保护机制。方法健康SD大鼠随机分为正常组(10只)和造模组。造模组给予单次腹腔注射STZ 60mg/kg,造模成功后按体质量随机分为5组:糖尿病非治疗组,通络方剂低剂量组[0.5g/(kg.d)]、中剂量组[1.0g/(kg.d)]、高剂量组[2.0g/(kg.d)]和氯沙坦组[30mg/(kg.d)],每组10只。适应性饲养1周后,按分组分别给予不同处理,持续给药12周后处死,称体质量,取血检测血糖、血脂、血肌酐、尿素氮,留24h尿检测尿肌酐、尿蛋白、尿微量白蛋白,ELISA法检测血清及肾脏组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量,取左肾称质量,H-E、PAS染色观察肾脏病理改变,免疫组织化学法检测p-ERK1/2蛋白的表达,蛋白质印迹法检测VEGF蛋白的表达。结果与糖尿病非治疗组比较,糖尿病大鼠系膜细胞增殖受到抑制,蛋白尿明显降低,体质量增加,肾肥大指数降低,肌酐清除率、血尿素氮降低,肾功能改善,血清及肾组织AngⅡ含量降低,VEGF及p-ERK1/2蛋白的表达降低(P<0.05)。中剂量通络方剂与氯沙坦在改善糖尿病大鼠肾功能及抑制AngⅡ、VEGF、p-ERK1/2表达方面差异无统计学意义。结论通络方剂对糖尿病大鼠肾脏的保护作用可能与抑制AngⅡ、VEGF表达,阻断ERK1/2信号转导通路有关。     

通络方剂对1型糖尿病大鼠肾脏AngⅡ、VEGF、ERK1/2表达的影响

目的 研究通络方剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病大鼠肾脏组织ERK1/2信号转导通路的影响及对肾脏的保护机制.方法 健康SD大鼠随机分为正常组(10只)和造模组.造模组给予单次腹腔注射STZ 60 mg/kg,造模成功后按体质量随机分为5组:糖尿病非治疗组,通络方剂低剂量组[0.5 g/(kg·d)]、中剂...     

VEGF对大鼠胰岛瘤细胞增殖、凋亡及胰岛素分泌功能的影响

目的 探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）对大鼠胰岛瘤细胞（INS-1）增殖、凋亡、胰岛素分泌以及相关基因表达的影响。方法 用不同浓度（0、40、80、160 ng/mL)VEGF对大鼠INS-1细胞进行处理,采用CCK-8试剂盒检测INS-1细胞增殖,用Annexin Ⅴ及碘化丙啶(PI)双染试剂检测细胞凋亡;INS-1细胞经VEGF处理后做标准葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验, ELISA法检测胰岛素,实时定量PCR技术检测胰岛分泌过程中相关基因表达,Western blot检测VEGF对Insulin蛋白表达的影响。结果 不同浓度VEGF对INS-1细胞作用24 h、48 h、72 h,其细胞活性均无明显变化（P>0.05）。但当VEGF浓度为80 ng/mL和160 ng/mL时对细胞凋亡具有抑制作用(PSur)、内向整流性钾离子通道基因 (inwardly rectifying potassium channel 6.2, Kir6.2)的表达随VEGF浓度增高呈下降趋势,葡萄糖激酶基因（glucokinase,GCK）的表达先降低后升高,葡萄糖转运蛋白基因2（glucose transporter 2,Glut2）表达呈先升高后降低趋势,Insulin蛋白的表达量随VEGF浓度增高呈逐渐下降趋势。结论 VEGF在高糖状态下对细胞凋亡和胰岛素分泌有抑制作用,为探索VEGF在糖代谢中的作用提供了新的线索。     

N-乙酰半胱氨酸对糖尿病大鼠肾脏VEGF、MCP-1表达的影响

目的 观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对糖尿病肾脏氧化应激以及血管内皮生长因子(VEGF)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响,探讨NAC对糖尿病肾脏的保护作用及机制.方法 建立STZ糖尿病大鼠模型,随机分为正常对照组(CON组)、糖尿病模型组(DM组)和NAC低、中、高剂量(NACⅠ、NACⅡ、NACⅢ)用药组.12周后分别检测血糖、尿蛋白排泄率、肾脏质量指数、尿素及肌酐水平,测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;PAS染色观察肾组织形态改变;免疫组化法和Western Blot方法检测肾组织VEGF、MCP-1的蛋白表达.结果 与CON组比较,DM组和NAC各剂量组尿蛋白排泄率增加(P＜0.01),血清中血糖、尿素、肌酐水平升高(P＜0 05),肾脏质量指数增加(P＜0.01),GSH-Px活性下降(P＜0.01),肾组织中VEGF、MCP-1表达水平升高(P＜0.05),肾脏病理改变明显.与DM组比较,NAG各剂量组尿蛋白排泄率减少(P＜0.01),血糖水平无显著差异(P＞0.05),尿素、肌酐水平降低(P＜0.05),肾脏质量指数下降(P＜0.01),GSH-Px活性上升(P＜0.05),肾组织中VEGF、MCP-1表达水平降低(P＜0.05),且以高剂量组降低最明显.肾脏病理改变较轻.结论 NAC对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用,其机制可能与抗过氧化损伤,下调VEGF、MCP-1的表达有关.     

健脾补肺化痰方对哮喘大鼠血清VCAM-1、ICAM-1、VEGF水平的影响

目的:探讨健脾补肺化痰方对幼龄哮喘大鼠的血清VCAM-1、ICAM-1、VEGF水平的影响。方法:将40只大鼠随机分为正常组、模型组、健脾补肺化痰方组、地塞米松组4组,每组10只。用卵白蛋白(OVA)雾化激发建立哮喘大鼠模型,用双抗体夹心法检测大鼠动脉血清VCAM-1、ICAM-1、VEGF的水平。结果:与正常组比,哮喘各组大鼠血清VCAM-1、ICAM-1、VEGF水平明显升高,差异有统计学意义(P0.01)。与模型组比,健脾补肺化痰方组、地塞米松组VCAM-1、ICAM-1、VEGF水平偏低,有显著差异(P0.01)。健脾补肺化痰方组、地塞米松组之间比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:健脾补肺化痰方可降低大鼠血清VCAM-1、ICAM-1、VEGF的表达,进而对哮喘气道重塑产生抑制。     

西洋参茎叶皂苷对脑梗死大鼠ET-1、VEGF及脑梗死面积的影响

目的：探讨西洋参茎叶皂苷（PQS）对脑梗死大鼠内皮素-1（ET-1）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）及梗死面积的影响。方法采用栓线法对大鼠右侧大脑中动脉进行栓塞并随机分成假手术组、模型对照组、尼莫地平组、PQS高、低剂量组,用药后检测各组神经功能缺损情况、大鼠脑组织中ET-1及VEGF含量、大鼠脑梗死面积,并对各组检测数据进行比较分析。结果 PQS高、低剂量组神经功能损伤恢复状况均比尼莫地平组效果明显（P＜0．05）;与模型对照组比较,尼莫地平组、PQS低、高剂量组、假手术组脑组织中ET-1含量呈现明显下降趋势（P＜0．05）,各组之间两两比较差异均有统计学意义（P＜0．05）;PQS高剂量组效果最好;PQS高剂量组VEGF含量均高于其余各组（P＜0．05）;PQS高剂量组脑梗死面积最小,效果明显（P＜0．05）,PQS随着剂量的增加,脑缺血区有明显好转,可见少量胶质细胞增生。结论 PQS对提高血管活性、改善脑梗死病情具有显著效果。     

依达拉奉对血管性认知功能损害大鼠IL-1β、TNF-α与VEGF表达的影响

目的:观察依达拉奉对血管性认知功能损害大鼠脑组织和血清VEGF、IL-1β和TNF-α表达的影响,探讨依达拉奉对血管性认知功能损害脑保护作用机制.方法:永久性结扎大鼠双侧颈总动脉法建立血管性认知功能损害血管性认知功能损害动物模型,Wistar大鼠随机分为假手术组(S组)、血管性认知功能损害模型组(M组)、依达拉奉治疗组(MT组).酶联免疫吸附法检测大鼠脑组织IL-1β、TNF-α.表达水平和血清水平,蛋白质免疫印迹法和酶联免疫吸附法检测大鼠脑组织VEGF,水迷宫实验和跳台实验检测行为学改变.结果模型组大鼠有明显的学习、记忆、行为障碍,经过依达拉奉治疗后血管性认知功能损伤大鼠的学习、记忆、行为功能明显改善.MT组IL-1β、TNF-α表达较M组降低(P＜0.01),MT组VEGF表达较M组增高(P＜0.01);MT组VEGF、IL-1β、TNF-α表达较S组增高(P＜0.01);M组VEGF、IL-1β、TNF-α表达较N、S组显著增高(P＜0.01).结论依达拉奉能降低血管性认知功能损害大鼠脑组织和血清IL-1β、TNF-α水平、增强VEGF表达,依达拉奉可以通过抑制血管性认知功能损害炎症反应和增强血管修复发挥脑保护作用.