HPLC-MS/MS法在伊马替尼、达沙替尼与尼洛替尼治疗CML患者血药浓度监测中的应用

目的建立测定慢性粒细胞白血病(CML)患者血浆伊马替尼、达沙替尼与尼洛替尼浓度的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),并应用于临床血药浓度监测。方法血浆经甲醇沉淀蛋白处理,采用内标法定量。色谱柱为Ultimate XB-C18,柱温60℃,流动相为甲醇(0.1%甲酸)和水(0.1%甲酸和2mmol/L乙酸铵),梯度洗脱。质谱检测方式为电喷雾离子阱正离子模式,多反应监测模式(MRM)扫描,监测离子对:伊马替尼m/z 494.3→394.1,达沙替尼m/z 488→401,尼洛替尼m/z 530.2→289.2。结果伊马替尼浓度在50～2500ng/mL与峰面积比值线性关系良好,Y=0.001 17 X+0.006 17(r=0.999 5);达沙替尼浓度在1～250ng/mL与峰面积比值线性关系良好,Y=0.013 7 X+0.000 435(r=0.999 2);尼洛替尼浓度在50～2 500ng/mL与峰面积比值线性关系良好,Y=1.1e+0.03 X+1.05e+0.04(r=0.998 5)。日内及日间相对标准偏差(RSD)均小于5%,相对回收率在90.0%～110.0%。结论该方法前处理简单,检测的特异性及灵敏度高,可适用于CML患者血浆伊马替尼、达沙替尼与尼洛替尼血药浓度的快速、准确测定。     

HPLC-MS/MS检测血液病患者体内鲁索替尼血药浓度

目的 建立测定血液病患者鲁索替尼血药浓度的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),并用于血液病患者鲁索替尼的个体化给药.方法 采用同位素内标法,通过含内标(鲁索替尼-d9)的甲醇沉淀蛋白,萃取鲁索替尼,用HPLC-MS/MS分离和测定鲁索替尼和鲁索替尼-d9.以鲁索替尼和鲁索替尼-d9峰面积比为定量依据,计算...     

HPLC-MS/MS法在白血病患者血浆维生素C水平测定中的临床应用

目的建立测定白血病患者血浆维生素C水平的高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法,并应用于临床。方法采用HPLC-MS/MS法,L-Ascorbic Acid-1-13 C为内标,XBridge?C18(4.6 mm×50.0mm,5μm)色谱柱,流动相为(0.1%甲酸)甲醇-(2mmol/L乙酸铵-0.1%甲酸)水,梯度洗脱,流速为0.8mL/min,柱温60℃,进样量10μL。采用电喷雾电离源,以多反应监测(MRM)方式进行负离子检测。并对123份白血病患者标本及407份健康志愿者标本进行了检测,测定结果用t检验进行比较分析。结果维生素C的水平在0.5～50.0μg/mL范围内线性关系良好(r0.990 0),日内及日间精密度(RSD)均小于5%,回收率在90%～110%;与健康人相比,患者体内维生素C水平明显偏低[(8.8±3.0)vs.(2.4±3.9)μg/mL,P0.01]。结论该方法快速、准确、灵敏度高、操作简单,适用于临床中患者血浆中维生素C水平的检测。建议白血病患者应适当补充维生素C。     

伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病出现脑水肿一例

患者,男,4 0岁,2 0 0 1年12月在我院门诊检查:WBC170×10 9/L ,骨髓:粒系占0 .80 0 ,中幼粒细胞以后阶段占0 .76 5 ,Ph染色体阳性。诊断为慢性粒细胞白血病(CML)慢性期,予羟基脲治疗。2 0 0 2年12月复诊,血常规:WBC 6×10 9/L ,原始细胞0 .0 1,Hb 12 9g/L ,BPC 113×10 9/L ,骨髓检查示:粒、红细胞比为2 .84∶1,粒系占0 .6 5 5 ,原始粒细胞占0 .2 15 ,诊断为CML急变期。给予伊马替尼(商品名格列卫)治疗,6 0 0mg/d。服药期间出现恶心、乏力、充血性皮疹、味觉异常及踝部轻度水肿。服用2 0d后,出现头痛、头晕、近期记忆减退、神志恍…     

甲磺酸伊马替尼治疗慢性粒细胞性白血病的疗效观察

目的：分析甲磺酸伊马替尼治疗慢性粒细胞性白血病不同时期的疗效。方法：对12例不同时期的慢粒患者应用甲磺酸伊马替尼400～600mg／d。其中慢性期8例：400mg／d，加速期3例，急变期1例：600mg／d。同时检测慢粒融合基因及ph染色体的动态变化。结果：8例慢性期患者取得血液学缓解，其中3例取得完全细胞学缓解．3例加速期患者2例取得完全血液学缓解．1例进展至急变期死亡，未取得细胞学缓解。1例急淋变患者取得细胞学和完全血液学缓解。结论：甲磺酸伊马替尼治疗慢性粒细胞性白血病疗效好，不良反应少。     

伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病26例临床观察

我们应用伊马替尼(商品名格列卫)治疗37例Ph染色体阳性慢性粒细胞白血病(CML)患者,现将疗程在30d以上并随访资料完整的2 6例临床研究结果报告如下。对象和方法1　研究对象　2 6例白血病患者均符合FAB诊断标准,全部表现Ph染色体和bcr/abl融合基因阳性,其中CML慢性期(CP) 7例(诊断后病程平均3年) ,加速期(AP) 5例,急变期(BP) 1 4例,男性1 5例,女性1 1例,中位数年龄38(1 2～6 3)岁。CML BP的类型:急性非淋巴细胞白血病(ANLL) 1 3例,急性淋巴细胞白血病(ALL) 1例。急变前的中位病程1 9.5(7～1 1 2 )个月。应用伊马替尼治疗前曾隔日…     

伊马替尼与干扰素联合治疗慢性粒细胞白血病的疗效分析

目的：探讨伊马替尼与干扰素联合化疗治疗慢性粒细胞白血病（CML）的疗效。方法：2004年6月-2009年7月新诊断的58例Ph染色体阳性CML慢性期患者,随机分为伊马替尼组和干扰素联合化疗组,比较两组临床疗效。结果：两组总有效率差异无统计学意义（P〉0．05）;伊马替尼组完全血液学缓解率,完全细胞遗传学缓解率、完全分子学效应率、5年总生存率均明显高于干扰素联合化疗组（P〈0．05）。结论：伊马替尼和干扰素联合化疗都可作为CML慢性期的有效治疗方法,应依据不同情况实施个体化治疗。     

伊马替尼治疗儿童慢性粒细胞白血病二例

例1,女,6岁。因面色苍白1年余,左髋关节疼痛半个月入院。查体:中度贫血貌,腹股沟淋巴结黄豆大小,肝肋缘下3cm,脾大入盆腔,Ⅰ线8.5cm,Ⅱ线13cm,Ⅲ线4cm。血常规:WBC45.2×109/L,中性粒细胞0.14,淋巴细胞0.30,幼稚细胞0.56,BPC470×109/L,Hb74g/L。血沉:39mm/1h。肝肾功能无异常。骨髓象示慢性粒细胞白血病(CML)加速期(原始及早幼粒细胞占0.415),FISH法检查bcr/abl融合基因阳性细胞百分率为66%,骨髓病理检查示纤维化Ⅱ～Ⅲ级。确诊后单用伊马替尼100mg/d口服,服药3d后血常规:WBC50.3×109/L,中性粒细胞0.24,淋巴细胞0.18,嗜酸粒细胞0…     

氟马替尼治疗慢性粒细胞白血病患者的疗效及安全性分析

目的：分析氟马替尼治疗慢性粒细胞白血病（CML）患者的疗效及安全性。方法：回顾性分析南昌大学第一附属医院2020年1月至2021年12月接受氟马替尼治疗的56例CML患者的临床资料，将患者分为3组，氟马替尼治疗初诊CML患者35例（A组），伊马替尼/达沙替尼不耐受（B组）和耐药（C组）转氟马替尼治疗患者分别为10和11例，评价3组患者使用氟马替尼治疗的分子学反应和不良反应。结果：A组患者3个月早期分子学反应（EMR）为40.0%,6和12个月主要分子学反应（MMR）分别为43.7%和46.2%。B组患者3个月EMR为50.0%,6和12个月MMR分别为70.0%和66.7%；在可评估患者中，6例转氟马替尼治疗后均达到12个月分子学反应4.5。C组3例伊马替尼耐药转氟马替尼达到12个月分子学反应4.5，但2例达沙替尼耐药转氟马替尼治疗失败。使用EUTOS长期生存（ELTS）评分系统行亚组分析，结果显示，ELTS评分中高危组3个月EMR、6个月MMR和12个月分子学反应4.5分别为18.8%、15.4%和15.4%，较低危组的57.9%、63.2%和69.2%均显著更差（P=0.036,P...     

伊马替尼治疗慢性粒细胞性白血病耐药机制研究进展

伊马替尼（格列卫,Imatinib）是一种选择性酪氨酸激酶抑制剂,临床应用于慢性粒细胞性白血病（CML）的治疗。尽管取得了良好的疗效,但是药物耐药性一直是困扰和阻碍其临床应用的主要问题。该耐药性的机制尚不清楚,但是许多研究从不同方面对这一问题进行了探讨。本文从药效学和药代动力学两方面对伊马替尼治疗慢性粒细胞性白血病耐药机制的研究进展进行了综述。     

双色双融合荧光原位杂交探针检测慢性髓系白血病Bcr/Abl基因重排的研究

本研究探讨双色双融合荧光原位杂交技术(DC-DF-FISH)在慢性髓系白血病(CML)中的应用价值,应用常规R-显带技术、DC-DF-FISH、RT-PCR技术检测41例CML患者的染色体核型及bcr/abl融合基因.结果表明,对于初诊CML的18例患者,R-显带显示Ph染色体阳性检出率为94.4%(17/18),DC-DF-FISH阳性检出率也为94.4%(17/18),对于治疗后CML的18例患者,R-显带显示14例有可分析分裂相,其中有11例存在Ph染色体,阳性检出率为78.6%(11/14);而用DC-DF-FISH检测治疗后患者的阳性率为94.4%(17/18);移植后的5例患者R-显带均未检出Ph染色体,而FISH检测出1例bcr/abl基因阳性,RT-PCR证实了FISH的检测结论,但在移植患者中,RT-PCR无阳性发现.结论:双色双融合荧光原位杂交技术具有高度的准确性、可靠性,是检测CML患者bcr/abl基因重排的可靠方法,适用于CML的诊断、疗效判定及微小残留病灶的检测.     

巢式PCR法检测髓系白血病患者外周血人类疱疹病毒-6的DNA

人类疱疹病毒-6型(human herpesvirus-6,HHV-6)是一种常见的病毒,与多种人类疾病有关.由于研究过程所采取方法不同,对于白血病病人感染HHV-6情况的报道也不一致.本研究首次运用巢式PCR检测了38例髓系白血病病人外周血单个核细胞中的HHV-6 DNA,其中急性髓性白血病(AML)30例和慢性粒细胞白血病(CML)8例.结果显示:与正常对照HHV-6的DNA检出率相比,AML患者的阳性率明显降低,而CML中则无明显异常,其临床意义有待进一步探讨.     

巢式PCR法检测髓系白血病患者外周血人类疱疹病毒—6的NDA

人类疱疹病毒－６型（ｈｕｍａｎ ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ－６,ＨＨＶ－６）是一种常见的病毒,与多种人类疾病有关。由于研究过程所采取方法不同,对于白血病病人感染ＨＨＶ－６情况的报道也不一致。本研究首次运用巢式ＰＣＲ检测了３８例髓系白血病病人外周血单个核细胞中的ＨＨＶ－６ ＤＮＡ,其中急性髓性白血病（ＡＭＬ）３０例和慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）８例。结果显示：与下沉对照ＨＨＶ－６的ＮＤＡ检出率相比,ＡＭＬ     

一步法RT-PCR检测慢性粒细胞白血病BCR-ABL融合基因

目的：建立一步法RT-PCR检测CML患者BCR—ABL融合基因的实验方法。方法：Trizol试剂提取细胞RNA,用特异引物一步法RT—PCR检测BCR—ABL融合基因．并作灵敏度试验。结果：本方法的灵敏度可达到10pg水平。对25例CML患者检测BCR-ABL融合基因,阳性率为100％．并可检测出BCR—ABL融合基因各种融合方式。结论：一步法RT—PCR检测BCR-ABL融合基因有很好的灵敏度和特异性,操作简便、快速,特别适用于临床检测。     

急性和慢性髓系白血病患者VEGF表达的研究

目的：探究急性髓系白血病（AML）与慢性髓系白血病（CML）血清及CML骨髓细胞VEGF含量的变化。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）对49例AML和17例CML患者血清及20例CML患者骨髓细胞VEGF浓度进行检测。结果：AML患者血清平均VEGF浓度为201．17pg/ml,与正常对照组（133．37pg/ml)比较,有明显的统计差异（P＜0．05）;而CML患者血清VEGF水平可达517．79pg/ml,显著高于正常对照组（P＜0．001）,AML患者各亚型中VEGF水平无明显差异,但以M3型最高（299．31pg/ml),CML患者骨髓细胞培养上清液ＶＥＧＦ的浓度（649．16pg/ml)也显著高于正常骨髓细胞对照组（P＜0．01）,结论：AML和CML患者存在VEGF的异常高表达,提示血管生成和血管内皮生长因子可能在急性与慢性髓系白血病的发病中发挥重要作用。     

Lyn激酶在伊马替尼耐药的慢性髓系白血病中的作用

本研究探讨Lyn激酶在伊马替尼耐药的慢性髓系性白血病（CML）中的作用。76例CML患者分为初治组、伊马替尼耐药组和伊马替尼治疗有效组,用Western blot方法检测CML患者骨髓单个核细胞中Lyn蛋白的表达水平,比较各组患者Lyn的表达差异,分析Lyn与I临床特征、BCR／ABL融合基因和染色体的关系。结果表明,76例CML均表达Lyn;伊马替尼耐药组Lyn表达明显高于正常对照组、初治组及伊马替尼治疗有效组（P〈0．05）,初治组和伊马替尼治疗有效组的Lyn表达水平与正常对照组无明显差别（P〉0．05）。Lyn表达水平与性别、年龄、平均血红蛋白水平、平均血小板计数、外周血幼稚细胞比例和脾脏大小无明显相关（P〉0．05）,但与初诊时外周血白细胞计数增高相关（P〈0．05）。Lyn表达与BCR／ABL融合基因定量无明显相关性（P〉0．05）;10例伊马替尼耐药的CML中,1例患者存在t（6;22）和t（2;9）改变,与Ph染色体共存,其余9例患者仅存在Ph染色体改变。结论：CML患者和正常人骨髓细胞均表达Lyn,Lyn在伊马替尼耐药的CML中表达明显增高,Lyn高表达与CML患者初诊时白细胞计数明显增高相关。     

格列卫治疗慢性粒细胞白血病加速期、急变期患者的临床观察

目的 :探讨格列卫治疗慢性粒细胞白血病加速期、急变期患者的近期临床疗效。方法 :所选病例为慢性粒细胞白血病加速期或急变期患者 ,将服用格列卫的病人设为治疗组 ,传统化疗的病人设为对照组 ,三月后观察疗效。结果 :治疗组的总有效率为 72 7% ,而对照组为 16 7% (两组比较有统计学意义 ,P <0 0 5 )。结论 :格列卫对慢性粒细胞白血病的病人有较好的疗效 ,没有严重的毒副作用 ,病人的耐受性好。     

慢性淋巴细胞白血病外周血免疫球蛋白异常研究

为了解慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者外周血免疫球蛋白（Ig）异常与年龄、性别、疾病分期及预后的关系,运用免疫速率比浊法测定83例CLL患者血清中IgG、IgA和IgM水平,用多参数流式细胞术（FCM）检测患者外周血CD38、ZAP－70表达水平。结果表明：83例CLL患者中IgG减低12例（14．5％）;IgA减低26例（31．3％）,IgM减低34例（41．0％）。BinetC期组Ig减低发生率明显高于BinetA和B期组（P=0．011）,Rai分期高危组的Ig减低发生率明显高于低危组（P=0．011）。Ig减低组CD38和ZAP－70表达阳性率明显较Ig正常组高（P＝0．033和P=0．038）。CD38和ZAP－70在疾病晚期患者表达阳性率更高,其中BinetC期组ZAP－70表达阳性率明显高于BinetA和B期组（P=0．047）。而年龄和性别与Ig异常没有明显相关性（P〉0．05）。结论：CLL患者体液免疫功能与疾病分期密切相关,检测CLL患者外周血Ig水平的变化,对了解CLL患者免疫功能状态,从而判断病情及预后具有重要作用。     

南方汉族慢性髓细胞性白血病与HLA-DPB1 等位基因的相关性研究

为了探讨慢性髓细胞性白血病(CML)与人类白细胞抗原(HLA)DPB1基因的相关性和分析其遗传易感性，采用测序分型技术(SBT)对86例主要为广东籍的南方汉族CML患和82例健康对照进行HLA-DPB1基因分型。结果表明HLA-DPB1*1301和DPB1*20011的基因频率在病例组高于对照组。结论：这些等位基因与CML间可能存在正相关关系。