PAE-MHT法检测铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶的临床适用性的评估

目的评估铜绿假单胞菌-改良Hodge（PAE-MHT）法对铜绿假单胞菌（PAE）金属β-内酰胺酶（MBLs）检测的临床适用性。方法收集82株临床分离的耐亚胺培南的PAE,通过双纸片协同法、E-test法及PAE-MHT法作为MBLs表型初筛试验,并对几种方法进行比较。聚合酶链反应（PCR）法检测IMP型和VIM型MBLs基因并测序。结果 PAE-MHT法的敏感性、特异性和准确率分别为84.6%,97.2%,97.6%.PAE-MHT法和双纸片协同法、Etest法有非常好的一致性。结论 PAE-MHT法简便、快捷,不失为临床快速筛查非发酵菌产MBLs的一种新方法。     

铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的临床调查研究

目的调查临床分离铜绿假单胞菌产金属β内酰胺酶株分布情况及耐药现状，为临床合理应用抗生素提供依据。方法收集临床分离的铜绿假单胞菌，采用κ—B法筛选对亚胺培南和头孢他啶同时耐药菌株，E—test法检测产金属伊内酰胺酶菌株，最后用最低抑菌浓度（MIC）法测定产金属β-内酰胺酶菌株对8种常用抗菌药物的敏感度。结果300株铜绿假单胞菌中同时耐亚胺培南和头孢他啶者34株，占11．3％（34／300）；其中检出产金属伊内酰胺酶15株，占5．0％（15／300），产酶株分布较为集中，产酶株对亚胺培南和头孢他啶等抗生素高水平耐药，对阿米卡星和环丙沙星部分耐药。结论铜绿假单胞菌产金属伊内酰胺酶检出率升高，产酶株的多重耐药较严重，应高度重视产金属β内酰胺酶铜绿假单胞菌的监测与控制。     

铜绿假单胞菌的耐药性与金属β-内酰胺酶检测

目的检测铜绿假单胞菌的耐药性以及β-内酰胺金属酶阳性率。方法采用K-B法检测356株铜绿假单胞菌对20种常用抗生素的耐药率,采用IPM EDTA与CAZ EDTA抑菌环直径之差判断金属酶阳必性率。结果356株铜绿假单胞菌有86株对IPM耐药。有155株对CAZ耐药,82株同时对CAZ与IPM耐药,从中共检测出16株铜绿假单胞菌产金属酶,对大多数抗生素形成耐药。结论金属酶对氨曲南和多粘菌素B稳定,可作为产金属酶铜绿假单胞菌临床感染治疗的首选药物。通过密切监视产金属酶菌株的发展趋势,合理使用抗生素,减少耐药菌株的传播。     

产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌协同试验方法评价

目的在临床微生物实验室建立简便的纸片扩散试验方法,用于产金属β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌的检测。方法以头孢他啶、亚胺培南为底物,乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）和2-巯基乙醇（2-ME）为酶抑制剂,在MH平板上用纸片扩散法进行抗生素协同敏感试验,并与聚合酶链反应（PCR）检测金属β-内酰胺酶基因结果进行比较。结果任一药敏纸片与含酶抑制剂纸片间出现抑菌环扩大现象则表示受试菌产金属β-内酰胺酶表型初筛试验阳性,在144株受试菌中,协同试验阳性29株,PCR检测金属肛内酰胺酶阳性26株。结论CAZ-EDTA纸片协同法在检测产IMP-1型金属酶的铜绿假单胞菌时的特异性和敏感性可与PCR技术相媲美,适用于临床微生物实验室对产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的日常初步鉴定。     

产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌协同试验方法评价

[目的]在临床微生物实验室建立简便的纸片扩散试验方法,用于产金属β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌的检测。[方法]以头孢他啶、亚胺培南为底物,乙二胺四乙酸二钠（EDTA—Na2）和2-巯基乙醇（2-ME）为酶抑制剂,在MH平板上用纸片扩散法进行抗生素协同敏感试验,并与聚合酶链反应（PCR）检测金属β-内酰胺酶基因结果进行比较。[结果]任一药敏纸片与含酶抑制剂纸片间出现抑菌环扩大现象则表示受试菌产金属β-内酰胺酶表型初筛试验阳性,在144株受试菌中,协同试验阳性29株,PCR检测金属β-内酰胺酶阳性26株。[结论]CAZ—EDTA纸片协同法在检测产IMP-1型金属酶的铜绿假单胞菌时的特异性和敏感性可与PCR技术相媲美,适用于临床微生物实验室对产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的日常初步鉴定。     

106株铜绿假单胞菌耐药性分析及金属β-内酰胺酶检测

目的分析医院铜绿假单胞菌的分布、耐药性及产金属β-内酰胺酶的现状,为临床治疗铜绿假单胞菌感染提供合理用药的实验依据。方法将VITEK-2全自动鉴定仪鉴定出的106株铜绿假单胞菌,采用琼脂纸片扩散(K-B)法进行体外耐药性监测及统计耐药率,同时用双纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶的百分率。结果 106株铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的22株,占20.8%。金属β-内酰胺酶阳性与阴性的铜绿假单胞菌耐药率相比较,对头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松、头孢哌酮的耐药率差异有统计学意义(P<0.05);而对氨曲南、阿米卡星、左氧氟沙星、庆大霉素呈现的耐药率二者差异无统计学意义(P>0.05)。结论产金属β-内酰胺是铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的主要机制之一,临床应根据药敏结果及产酶情况综合考虑合理用药,以减少耐药菌株的产生。     

耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶相关基因型的分布

目的 研究本地区患者对碳青霉烯类抗生素耐药的铜绿假单胞菌产金属酶检出情况及基因型分布特征.方法 本研究收集2012年2月～2013年2月共151株铜绿假单胞菌,分离出对碳青霉烯类抗生素耐药的铜绿假单胞菌47株.使用IMP/EDTA纸片法筛选产金属酶的耐药表型,PCR技术检测编码金属酶的IMP、VIM、SPM和GIM 4种基因型.PCR反应产物进行纯化后,进行核酸电泳.结果 47株对碳青霉烯类抗生素耐药的铜绿假单胞菌中,IMP/EDTA纸片法检测金属酶表型阳性21株,占44.6％.PCR检测金属酶基因型阳性14株,占29.8％,其中IMP型阳性11株,占78.6％,VIM型阳性3株,占21.4％.未检测出SPM和GIM型金属酶.结论 池州地区产生的金属酶同时存在IMP和VIM两种基因型,其中以IMP亚型为主,少部分为VIM亚型,分布科室主要为ICU,其次为神经外科.产金属酶是本地区对碳青霉烯类抗生素耐药的铜绿假单胞菌的重要耐药机制,对碳青霉烯类耐药的铜绿假单胞菌产金属酶的监测十分重要.     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药性分析及金属β-内酰胺酶的检测

目的调查盐城市第一人民医院住院患者送检标本分离的铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药水平及其产金属β-内酰胺酶(MBLs)的情况。方法临床标本分离的铜绿假单胞菌采用法国生物梅里埃细菌鉴定及药敏检测系统进行细菌鉴定与药物敏感性试验;采用纸片协同实验来检测铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的情况。结果 236株铜绿假单胞菌中有63株对亚胺培南耐药,耐药率为26.69%,耐亚胺培南铜绿假单胞菌对阿米卡星、庆大霉素、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、环丙沙星、氨曲南部分耐药,耐药率分别为45.12%、50.33%、59.74%、61.43%、62.12%和63.16%;对头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林、美罗培南耐药率较高;63株耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶的检出率为38.10%(24/63)。结论金属β-内酰胺酶的产生是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药的重要机制之一,实验室应加强对产酶菌株的监测,为临床合理选用抗生素提供有效依据。     

多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶检测与分析

目的了解本地区多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶产生情况,为临床治疗及控制医院感染提供依据。方法用K-B法进行常规药敏试验,筛选出50株多重耐药铜绿假单胞菌,用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶,同时用2-巯基丙酸抑制试验检测金属酶。结果50株多重耐药铜绿假单胞菌中产ESBLs2株(4%)、产AmpC酶20株(40%),11株同时产ESBLs和AmpC酶(22%),金属酶筛选出8株(16%)阳性。结论本地区多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶以AmpC酶为主,临床应根据药敏试验结果,合理选用抗生素,以减少耐药菌株产生和控制医院感染。     

多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶检测与分析

目的 了解本地区多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶产生情况,为临床治疗及控制医院感染提供依据.方法 用K-B法进行常规药敏试验,筛选出50株多重耐药铜绿假单胞菌,用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶,同时用2-巯基丙酸抑制试验检测金属酶.结果 50株多重耐药铜绿假单胞菌中产ESBLs2株(4%)、产AmpC酶20株(40%),11株同时产ESBLs和AmpC酶(22%),金属酶筛选出8株(16%)阳性.结论 本地区多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶以AmpC酶为主,临床应根据药敏试验结果,合理选用抗生素,以减少耐药菌株产生和控制医院感染.     

VITEK2 Compact全自动微生物分析仪对黏液型和非黏液型铜绿假单胞菌药敏检测评价

目的 评价VITEK2 Compact全自动微生物分析仪对黏液型和非黏液型铜绿假单胞菌药敏检测结果的准确性。方法 对某院分离的29株黏液型铜绿假单胞菌和30株非黏液型铜绿假单胞菌同时以VITEK2 Compact分析仪法及琼脂稀释法进行药物敏感性试验,以琼脂稀释法为参考方法进行统计学分析。结果黏液型铜绿假单胞菌VITEK2 Compact分析仪法药敏结果的标准符合率(CA)为84.69%,严重错误率(VME)为3.20%,重大错误率(ME)为2.13%,一般错误率(MIE)为9.96%; 非黏液型铜绿假单胞菌VITEK2 Compact分析仪法药敏结果的标准符合率(CA)为94.33%,严重错误率(VME)为0.67%,重大错误率(ME)为1.67%,一般错误率(MIE)为3.33%。两种铜绿假单胞菌VITEK2 Compact分析仪法药敏结果的VME,MIE,CA相比较,差异有统计学意义(χ²=5.02,10.44,14.55,P<0.05)。黏液型铜绿假单胞菌VITEK2 Compact分析仪法药敏结果的CA比非黏液型铜绿假单胞菌低,且<90%,而VME,MIE均比非黏液型铜绿假单胞菌高。结论 VITEK2Compact全自动微生物分析仪对非黏液型铜绿假单胞菌药敏检测结果准确可靠,对黏液型铜绿假单胞菌药敏检测结果准确性较低,黏液型铜绿假单胞菌建议用其它方法做药物敏感性试验。     

鱼腥草联合亚胺培南对碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌杀菌效果的体外研究

目的　探究鱼腥草联合亚胺培南对碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌（carbapenem resistant pseudomonas aeruginosa,CRPA）的体外杀菌效果,为合理使用抗生素、预防和控制医院感染提供参考。方法　样本取自上海市某医院收治患者送检的痰、尿、创面等液体标本中分离到的 50 株 CRPA,观察单药使用亚胺培南、鱼腥草及二者联合使用时对铜绿假单胞菌（PA）的最低抑菌浓度（MIC）、分级抑菌浓度（FIC）指数和对浮游菌的时间杀菌曲线。结果　亚胺培南单用的 MIC50(32 mg/L) 和 MIC90(128 mg/L) 均高于鱼腥草单用 (MIC502 mg/L, MIC904 mg/L) 及两者联合使用 (MIC500.25 mg/L,MIC901 mg/L),且鱼腥草单用的 MIC50 和 MIC90 均高于两者联合使用。分级抑菌浓度指数显示 12 株（24.0%）亚胺培南和鱼腥草联用后呈现协同作用,30 株（60.0%）表现相加作用,8 株（16.0%）表现无相关作用,未发现拮抗作用。随机选取 2 株菌株观察浮游菌的时间杀菌曲线,单独使用亚胺培南 6~12h 后,菌株均出现细菌恢复生长的现象;鱼腥草联合亚胺培南使用时,菌株的浮游菌数量降低均＞ 6log CFU/L,且 24h 时均无细菌生长现象。结论　鱼腥草联合亚胺培南优于单药亚胺培南的抗 CRPA 效率。     

708株铜绿假单胞菌的病房分布及药敏分析

目的：了解铜绿假单胞菌的耐药状况。方法：用微量肉汤稀释法鉴定细菌和药敏试验,并对药敏结果进行分析。结果：铜绿假单胞菌是Icu(225／708)、呼吸科(127／708)、胸外科(77／708)等临床科室病员感染的主要病原菌,具多重耐药性,其中对头孢噻肟的耐药率最高,达66．2％,对泰能耐药率为42．9％,对环丙沙星耐药率为37．7％;而对阿米卡星敏感率达83．5％,对哌拉西林／他唑巴坦敏感率达81．1％。结论：铜绿似单胞菌是医院内感染的最常见菌和重要痫原菌,在对其引起的感染进行临床治疗时,第三代头孢菌素和泰能应在连续病原学监测状况下慎用,最好选用含酶抑制剂的药物(如哌拉西林／他唑巴坦,头孢哌酮／舒巴坦)联合氦基糖苷类或氟喹诺酮类药物治疗。这对于抗生素的合理使用及防止耐药菌株的传播都具有重要意义。     

Evaluation of the Carba NP Test for Rapid Detection of Carbapenemase-Producing Enterobacteriaceae and Pseudomonas aeruginosa

The Carba NP test was evaluated against a panel of 244 carbapenemase- and non-carbapenemase-producing Enterobacteriaceae and Pseudomonas aeruginosa isolates. We confirmed the 100% specificity and positive predictive value of the test, but the sensitivity and negative predictive value were 72.5% and 69.2%, respectively, and increased to 80% and 77.3%, respectively, using a more concentrated bacterial extract. False-negative results were associated with mucoid strains or linked to enzymes with low carbapenemase activity, particularly OXA-48-like, which has emerged globally in enterobacteria.     

Relationship of Carbapenem Restriction in 22 University Teaching Hospitals to Carbapenem Use and Carbapenem-Resistant Pseudomonas aeruginosa

Many hospital antimicrobial stewardship programs restrict the availability of selected drugs by requiring prior approval. Carbapenems may be among the restricted drugs, but it is unclear if hospitals that restrict availability actually use fewer carbapenems than hospitals that do not restrict use. Nor is it clear if restriction is related to resistance. We evaluated the relationship between carbapenem restriction and the volume of carbapenem use and both the incidence rate and proportion of carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa isolates from 2002 through 2006 in a retrospective, longitudinal, multicenter analysis among a consortium of academic health centers. Carbapenem use was measured from billing records as days of therapy per 1,000 patient days. Hospital antibiograms were used to determine both the incidence rate and proportion of carbapenem-resistant P. aeruginosa isolates. A survey inquired about restriction policies for antibiotics, including carbapenems. General linear mixed models were used to examine study outcomes. Among 22 hospitals with sufficient data for analysis, overall carbapenem use increased significantly over the 5 years of study (P < 0.0001), although overall carbapenem resistance in P. aeruginosa did not change. Hospitals that restricted carbapenems (n = 8; 36%) used significantly fewer carbapenems (P = 0.04) and reported lower incidence rates of carbapenem-resistant P. aeruginosa (P = 0.01) for all study years. Fluoroquinolone use was a potential confounder of these relationships, but hospitals that restricted carbapenems actually used fewer fluoroquinolones than those that did not. Restriction of carbapenems is associated with both lower use and lower incidence rates of carbapenem resistance in P. aeruginosa.Hospital antimicrobial stewardship programs (ASPs) attempt to improve antibacterial prescribing, commonly using formulary restrictions and by requiring preauthorization (7). Carbapenems are restricted in some hospitals for treatment of gram-negative bacterial infections resistant to first-line drugs, although carbapenem resistance among Pseudomonas aeruginosa and Enterobacteriaceae is increasing (3, 14, 18-20).Individual hospitals have reported improvement in bacterial susceptibilities to carbapenems after implementing ASPs that restricted carbapenem use (1, 11, 22). However, these “before and after” study designs have been criticized, and it is not known if the results are generalizable (6). There are no multihospital investigations that have assessed the effect of carbapenem restriction on carbapenem use and carbapenem-resistant P. aeruginosa over multiple years. In this study we evaluated the association between carbapenem restriction in academic health centers and the volume of carbapenem use and both the incidence rate and proportion of carbapenem-resistant P. aeruginosa from 2002 through 2006.(This study was presented in part at the 47th Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy, Chicago, IL, September 2007.)     

新生儿铜绿假单胞菌肺炎临床分析

目的：探讨新生儿铜绿假单胞菌肺炎的临床特点及药敏特点,为合理治疗提供依据。方法：对我院新生儿科2006年8月到2008年7月收治新生儿肺炎痰标本进行培养分离鉴定,选择培养结果为铜绿假单胞菌者做药敏及临床分析。结果：铜绿假单胞菌对碳青霉烯类,如：亚胺培南,美洛培南敏感率达100%,对近几年在新生儿较少用的或不用的氨基糖甙类,环丙沙星敏感率为85%～100%,而对常用的氨苄西林＋舒巴坦不敏感,对头孢他啶敏感率〉70%,临床根据药敏结果选择敏感抗生素治疗,疗效满意。结论：近年新生儿铜绿假单胞菌肺炎有上升趋势,病死率极高,故应根据药敏试验结果选择敏感抗生素,以控制疾病发展,降低病死率。     

铜绿假单胞菌耐药机制研究进展

铜绿假单胞菌是临床常见的条件致病菌.随着抗生素广泛应用和不合理使用导致细菌抗生素耐药性增加,临床已分离到大量多重耐药菌株,给临床治疗带来极大的困难.铜绿假单胞菌耐药机制十分复杂,该文就外膜通透性障碍、作用靶位改变、产生灭活酶、形成生物膜和主动外排泵系统等耐药机制做一综述.     

病原性铜绿假单胞菌超微结构

本文用扫描电镜和透射电镜对７０株患者痰中分离的铜绿假单胞菌临界点干燥，超薄切片和负染标本进行了超微结构观察。发现菌细胞一端只有单一鞭毛，长约５３０ｎｍ，呈中空管状。有４７／７０的菌细胞壁外层可见一厚度为２３ｎｍ的粘多糖包绕，５８／７０的菌细胞 有菌毛。此外，尚可见到菌组织表面带有直径为７ｎｍ左右的外分泌颗粒。     

VITEK-2 Compact 检测奇异变形杆菌、摩根摩根菌、铜绿假单胞菌的部分药敏结果准确性评价

目的　探讨 VITEK-2 Compact 检测奇异变形杆菌、摩根摩根菌和铜绿假单胞菌的部分药敏结果的准确性。方法收集 2017 年 3 月 ~2020 年 3 月临床分离的 58 株奇异变形杆菌、32 株摩根摩根菌和 280 株铜绿假单胞菌,以纸片扩散法（K-B 法）为参考方法,用 VITEK 2 Compact AST-GN16 药敏卡检测前两种菌对亚胺培南（IPN）的敏感度,用 AST-GN09药敏卡检测铜绿假单胞菌对亚胺培南、美罗培南（MEM）和氨曲南（ATM）的敏感度。结果　仪器法与 K-B 法比较,经58 株奇异变形杆菌药敏结果显示,其标准符合率（CA）、一般错误率（MIE）、严重错误率（ME）和极严重错误率 (VME)分别为 3.45%,6.90%,0% 和 89.66%,两种方法之间的差异有统计学意义（χ 2 =186.66, P<0.05）;32 株摩根摩根菌药敏结果显示,其CA,MIE,ME和VME分别为12.5%,6.25%,81.25%和0%,即两种方法之间的差异有统计学意义（χ 2 =155.56,P<0.05）;280 株铜绿假单胞菌药敏结果显示,其 CA,MIE,ME 和 VME 分别为 88.93%,10.71%,0.36% 和 0%,即 IPN两种方法之间的差异有统计学意义（χ 2 =9.84,P<0.05）。MEM 和 ATM 的两种方法比较,其 CA,MIE,ME 和 VME 分别为 95.00%,5.00%,0 和 0;68.57%,27.86%,1.07% 和 2.5%,即两种方法药敏结果的差异无统计学意义（χ 2 =4.58,0.78,P>0.05）。两种方法检测的分类一致性中,只有 MEM 结果差异无统计学意义（χ 2 =5.12,P>0.05）,其它均有统计学意义（χ 2 =11.72~186.68,均 P<0.05）。结论　用 VITEK-2 Compact AST-GN09 检测铜绿假单胞菌对 MEM 敏感度结果可靠,无需验证,而对 IPN 和 ATM 的敏感度结果不可靠,需验证;VITEK-2 Compact AST-GN16 检测奇异变形杆菌和摩根摩根菌的 IPN 敏感度结果也存在不同程度的差异,在工作中需采用 K-B 法进行补充修正,以便更加准确的指导临床用药。     

探讨铜绿假单胞菌医院感染现状及耐药趋势

目的分析铜绿假单胞菌医院感染的现状及对常用药物的耐药性。方法搜集我院自2014年6月～2017年12月分离鉴别出的80株铜绿假单胞菌,菌株均来源于不同患者的标本,分析该病原菌的标本来源、科室来源和对常用药物的耐药性。结果铜绿假单胞菌的标本来源以痰液为主,比例为56.25%(45株),其次为脓液15.00%;科室来源以呼吸内科为主,比例为25.00%(20株),其次为重症监护室22.50%;在耐药性上,对氨苄西林、头孢噻肟、头孢西丁、头孢唑啉、头孢曲松的耐药性较高,均高于90%,而对阿卡米星、亚胺培南的耐药性较低;多重耐药菌株和泛耐药菌株的科室来源以重症监护室为主,比例为72.22%(13/18株),其次为呼吸内科11.76%。结论铜绿假单胞菌多来源于呼吸内科,多重耐药菌株和泛耐药菌株多来源于重症监护室,其耐药性较高,临床需加强控制和监测。