基于网络药理学的金复康口服液治疗非小细胞肺癌机制

目的基于网络药理学分析金复康口服液治疗非小细胞肺癌机制。方法通过建立化学成分、靶点、疾病数据库,进行主要活性成分和靶标筛选,并对其进行多层次复杂网络分析、GO及KEGG通路富集分析。结果金复康口服液中筛选出85个满足类药性评估的主要活性化合物,以及130个复方的主要作用靶标。多层次网络模型分析显示,复方网络与疾病网络具有较好的节点相似性;生物功能的富集分析显示,与疾病显著共关联的信号通路主要有PI3K-Akt信号通路、TNF信号通路、催乳激素信号通路及凋亡信号通路等7条通路。结论网络药理学可从整体上揭示金复康口服液治疗非小细胞肺癌的作用机制,并为该制剂二次开发及基础研究提供依据。     

基于PD-1/PD-L1信号通路中医药改善肿瘤免疫抑制微环境研究进展

抑制性共刺激分子程序性死亡因子(PD-1)/程序性死亡因子配体(PD-L1)是重要的免疫负调节因子,在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。中医药是我国治疗肿瘤的重要手段之一,其主要优势在于增强机体免疫力,重塑肿瘤免疫微环境。本文综述了PD-1/PD-L1信号通路、中医与肿瘤免疫的相关性及中医药干预PD-1/PD-L1信号通路的相关研究,揭示了中医药调节肿瘤免疫多系统、多靶点、多环节、整体性等特点,为中医药防治肿瘤的理论和机制研究提供新的思路。     

金复康口服液抑制Lewis肺癌Sca-1~+干细胞亚群增殖的研究

目的观察金复康口服液抑制肺癌干细胞增殖和成瘤性作用及其对耐药相关蛋白表达的影响。方法采用免疫磁珠法分选Lewis肺癌Sca-1+细胞,体外采用金复康含药血清进行干预,综合应用流式细胞术、免疫组化、免疫印迹法、RT-PCR等实验技术观察金复康口服液抑制Sca-1+干细胞亚群增殖的作用,以及逆转肺癌干细胞耐药性基因ABCG2和蛋白表达的作用。结果体外研究发现,金复康口服液可时间依赖性地抑制肺癌Sca-1+干细胞在体外的增殖(P0.05);诱导肺癌Sca-1+干细胞发生凋亡;金复康口服液单独应用或者与化疗联合均可有效下调ABCG2基因的转录和蛋白的表达(P0.05,P0.01)。结论金复康口服液可显著抑制Lewis肺癌Sca-1+干细胞亚群增殖,其机制可能和抑制耐药相关蛋白的表达有关。     

如意黑白散对白癜风模型小鼠皮损组织PD-1/PD-L1信号通路的影响

目的 探讨如意黑白散治疗白癜风的可能作用机制。方法 将24只C57BL/6小鼠随机分为空白组,模型组及如意黑白散大、小剂量组,每组6只。除空白组外其余各组采用氢醌外涂构建白癜风动物模型。造模后如意黑白散大、小剂量组灌胃如意黑白散7.02、2.34 g/kg,空白组与模型组予10 ml/kg生理盐水灌胃,每日1次,各组均给药36天。给药结束后肉眼观察皮损情况,HE染色观察皮损组织黑色素含量,免疫组化测定皮损组织中CD3⁺、CD8⁺T细胞表达;免疫荧光染色测皮损组织中程序性死亡受体1(PD-1)表达;RT-PCR法检测皮损组织中细胞程序性死亡配体1 (PD-L1) mRNA表达;ELISA法检测血清超氧化物歧酶(SOD)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、酪氨酸酶(TYR)含量。结果 与空白组比较,模型组小鼠皮肤苍白,皮损组织HE染色后镜下可见黑色素含量明显减少,皮损优良率降低,表皮和毛囊周围细胞黑色素颗粒明显减少,皮肤组织中CD3⁺、CD8⁺T细胞表达显著增加,PD-L1 mRNA、PD-1表达下降,TYR...     

金复康对Lewis肺癌小鼠杀伤性T淋巴细胞功能的影响

恶性肿瘤的发生发展与宿主免疫功能低下有着互为因果的关系。杀伤性T淋巴细胞(CTL)是体内抗肿瘤免疫的主要效应细胞,它能够直接识别肿瘤细胞,通过破坏靶细胞的膜和核而起特异杀瘤作用[1]。本文在金复康口服液治疗中晚期肺癌取得疗效的基础上[2],观察该药对Lew is肺癌小鼠的抗瘤     

金复康口服液治疗非小细胞肺癌的临床研究

目的：观察抗癌新药金复康口服液治疗非小细胞肺癌（Non small cell lung cancer,NSCLC)的近期疗效、毒副反应及其对机体免疫功能、生存质量的影响。方法：随机分为治疗组（金复康口服液）及对照组（西药化疗组）。其中治疗组27例，对照组25例。于用药前后分别检测患者外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞活性、血清可溶性白细胞介素－2受体（sIL-2R）及IL－2水平。并且进行临床症状积分及生存质量评定。结果：治疗组 总有效率51．9％，对照组48％，两组之间比较无显著性差异（P＞0．05）。但治疗组无明显毒副反应， 仅出现恶心呕吐I级2例，便秘I度2例、Ⅱ度1例；提高外周血T淋巴细胞亚群CD4、CD4／CD8及NK活性，降低sIL-2R的水平，与对照组比较均有极显著性差异（P＞0．01）。且有改善临床症状、提高生活质量的作用。结论：金康口服液能有效治疗非小细胞肺癌，能明显改善Ⅲ、Ⅳ期NSCLC患者的机体免疫功能和生存质量。     

金复康“扶助正气、清透伏毒”预防肺癌转移的细胞学机制研究

目的 观察金复康冻干粉(JFK)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者的“伏毒”——循环肿瘤细胞(CTC)的清除作用,并验证金复康干预CTC预防转移的假说。方法 从肺癌患者外周血中富集并培养CTC细胞系,然后以金复康干预CTC细胞,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖,并检测克隆形成,以流式细胞术和激光共聚焦技术检测细胞凋亡与周期。结果 金复康能够显著以时间和浓度依赖性抑制CTC细胞增殖(P0.05);金复康可剂量依赖性显著抑制CTC细胞克隆形成(P0.05);金复康能够有效诱导CTC细胞发生凋亡(P0.01);高浓度组的金复康能够显著将CTC细胞增殖阻滞在S期(P0.05)。结论 金复康对NSCLC患者体内CTC具有显著的抑制作用,干预CTC可能是JFK防治NSCLC复发与转移的机制。     

人参皂苷Rg_3调节免疫检查点PD-L1抑制肺癌Lewis细胞增殖的作用及机制研究

目的研究人参皂苷Rg_3对小鼠非小细胞肺癌Lewis细胞(LLC)中免疫检查点程序性死亡分子1配体(PD-L1)的调节作用及其作用机制。方法通过MTT法及细胞长时程动态监测法观察人参皂苷Rg_3对LLC增殖的影响;20 ng/mLγ干扰素(IFN-γ)处理LLC制备PD-L1高表达体外模型,采用人参皂苷Rg_3进行干预,流式细胞术及免疫荧光检测人参皂苷Rg_3对PD-L1表达的影响;采用Western blotting法验证人参皂苷Rg_3对PI3K/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)通路相关蛋白表达的影响。结果人参皂苷Rg_3 16、32、64、128μmol/L能够显著抑制LLC增殖(P0.01)及减少IFN-γ诱导的PD-L1表达(P0.05);人参皂苷Rg_3 32、64μmol/L能够降低PI3K、m TOR蛋白的表达水平(P0.01);人参皂苷Rg_3 16、32、64μmol/L能够抑制Akt蛋白的磷酸化(P0.05)。结论人参皂苷Rg_3能够显著抑制LLC中PD-L1表达,通过抑制PI3K/Akt/m TOR通路,阻断PD-L1介导的肿瘤细胞免疫逃逸,增强T细胞的免疫应答作用,抑制LLC生长。     

金复康口服液治疗非小细胞肺癌的临床观察

针对肺癌以气阴两虚证候为多数,研制了以益气养阴为主的中药制剂——金复康口服液,金复康组96例,治后CR1例,PR8例,NC52例,PR NC为63.5％;金复康加化疗组52例,治后PR11例,NC26例,PR NC为71.2％;单纯化疗组25例,PR4例,NC26例,PR NC为60.0％,显示金复康及金复康加化疗组的疗效均较单纯化疗组为优。治疗后1年及2年生存率,金复康组分别为67.3％及67.3％;金复康加化疗组为66.7％及66.7％;单纯化疗组1年生存率为40.3％,无2年生存率。治疗后临床症状改善,体重增加及健康状况(KPS评分),金复康组及金复康加化疗组均优于单纯化疗组。金复康治后多项免疫指标及血象的改善均较治前显著提高,化疗组则有所降低,金复康加化疗组则无明显变化。     

HIF–1α、PD–L1 表达水平与非小细胞肺癌淋巴结转移风险的相关性研究

〔摘 要〕 目的：探究乏氧诱导因子 –1α（HIF–1α）、程序性死亡配体 1（PD–L1）表达水平与非小细胞肺癌患者淋巴结转移风险的相关性。方法：选取商丘市第一人民医院 2015 年 1 月至 2017 年 10 月期间收治的 100 例非小细胞肺癌患者,所有患者均检测病灶中的 HIF–1α 和 PD–L1 水平,并进行 3 年的追踪随访,观察淋巴结转移情况。结果：HIF–1α 阳性患者的微淋巴管密度（LMVD）高于阴性患者,且 PD–L1 阳性患者的 LMVD 高于阴性患者,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）;随访 3 年,100 例患者的淋巴结转移率为 40.00 %;其中 HIF–1α 阳性患者的淋巴结转移率（75.00 %）高于阴性的淋巴结转移率（16.67 %）,PD–L1 阳性的淋巴结转移率（71.79 %）高于阴性的淋巴结转移率（19.67 %）,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）;且 HIF–1α 表达、PD–L1 表达均与 LMVD 呈正相关（P ＜ 0.05）;转移组与未转移组患者的性别、年龄、病理分型、肿瘤部位、肿瘤分叶比较,差异无统计学意义（P ＞ 0.05）;而 PD–L1 阳性表达、HIF–1α 阳性表达、肿瘤 Ⅱ 期和 LMVD 高水平均与淋巴结转移密切相关（P ＜ 0.05）;经多因素logistic 回归分析,PD–L1 高表达、HIF–1α 高表达和 LMVD 高水平均是淋巴结水平转移的独立危险因素（P ＜ 0.05）。结论：HIF–1α、PD–L1 表达与非小细胞肺癌患者发生淋巴结转移风险关系密切,两者的阳性表达可促进非小细胞肺癌患者淋巴管的新生和淋巴结转移,可作为早期预测和治疗的靶点在临床上应用。     

二陈汤对Lewis肺癌移植瘤生长及Hedgehog通路蛋白表达的影响

目的:观察二陈汤对Lewis肺癌小鼠的抑瘤率、血常规,以及肿瘤组织中Gli-1、SHH、SMO、PTCH-1等蛋白表达的影响.方法:用40只C57BL/6小鼠建立Lewis肺癌小鼠模型,造模成功后随机分为模型组、中药组、联合组以及顺铂组,每组各10只.7 d后中药组、联合组给予二陈汤灌胃,模型组给予同等量0.9％氯化钠...     

消积抑癌方对Lewis肺癌荷瘤小鼠MMP-2的影响

目的:探讨消积抑癌方对Lewis肺癌荷瘤小鼠MMP-2的影响。方法:建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,随机分为空白组、荷瘤组、消积抑癌方内服组、消积抑癌方外敷组、消积抑癌方内服联合外敷组。观察各组Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤体积、癌重、抑癌率,对比各组免疫器官重量及血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、干扰素(IFN)-γ、IL-10、TNF-α、IL-2水平。结果:第7天、第14天、第21天及第30天,联合组Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤体积、癌重、抑癌率均明显低于荷瘤组、内服组、外敷组; 内服组、外敷组Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤体积、癌重、抑癌率均明显低于荷瘤组,差异具有统计学意义(P<0.05); 空白组、联合组脾脏指数、胸腺指数与荷瘤组、内服组、外敷组比较,差异有统计学意义(P<0.05); 空白组、联合组MMP-2、VEGF、HIF-1α、IFN-γ、IL-10、TNF-α、IL-2水平比较,差异有统计学意义(P<0.05); 内服组、外敷组MMP-2、VEGF、HIF-1α、IFN-γ、IL-10、TNF-α、IL-2水平与荷瘤组、空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05); 荷瘤组MMP-2、VEGF、HIF-1α、IFN-γ、IL-10、TNF-α、IL-2水平与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:消积抑癌方内服联合外敷能够有效抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠体内肿瘤,降低MMP-2水平,调节机体免疫功能。     

中药组方对小鼠Lewis肺癌细胞周期蛋白D1表达的影响

目的 :探讨中药组方对小鼠Lewis肺癌细胞周期蛋白D1的表达及肺癌细胞转移的影响。方法 :复制小鼠lewis肺癌 ,用免疫组织化学方法检测中药组方对肿瘤细胞cyclinD1的表达 ,记数小鼠肺组织内肿瘤转移结节数量等数据。结果 :生理盐水组cyclinD1阳性表达率与中药组方组和替加氟组有显著性差异 ,而后两组差异无显著性 ;中药组和替加氟组转移瘤结节数量显著少于生理盐水组。结论 :中药组方能有效降低小鼠Lewis肺癌细胞cyclinD1的表达 ,抑制肿瘤细胞的转移     

活力苏口服液对自然衰老小鼠肝、脑、肾组织p16基因表达的影响

目的观察活力苏口服液对自然衰老小鼠肝、脑、肾组织p16基因的影响,探讨活力苏口服液抗衰老的机制。方法取自然衰老小鼠,给予活力苏口服液治疗,采用实时荧光定量PCR法观察小鼠肝、脑、肾组织p16基因的mRNA表达。结果在肝、脑、肾组织中,活力苏口服液各剂量组均能降低p16基因mRNA表达,与衰老模型对照组比较均有显著性差异(P均<0.01)。结论活力苏能降低自然衰老小鼠肝、脑、肾组织p16基因的表达,发挥抗衰老作用。     

傣药牙帕汤抑制小鼠Lewis肺癌生长转移及小鼠免疫功能的影响

目的：探讨傣药牙帕汤对小鼠Lewis肺癌的抑制作用及其对小鼠免疫功能的影响。方法C57BL/6小鼠右腋皮下注射Lewis肺癌细胞（lewislungcarcinoma,LLC）,采用随机双盲法（随机抽取仅留有一侧开口的密闭黑盒子中的30只雄性小鼠,放入事先备好的6个鼠笼中,雌性小鼠依此法进行分组）,将接种的60只小鼠分为空白对照组、牙帕汤高、中、低剂量组、环磷酰胺组、牙帕汤与环磷酰胺联合组各10只。各组均从接种后第3天给药,空白对照组、牙帕汤高、中、低剂量组按0.4ml/（只·d）分别灌胃,给予0.9%生理盐水、高、中、低浓度的牙帕汤;环磷酰胺组每隔2d腹腔注射环磷酰胺0.2ml/只;牙帕汤与环磷酰胺联合组按0.4ml/（只·d）灌胃给予中剂量牙帕汤、每隔2d按0.2ml/只腹腔注射环磷酰胺。第21天,摘眼球取血,取肿瘤组织、脾、胸腺并称重,计算抑瘤率、脾指数和胸腺指数;采用酶联免疫吸附法检测血清中白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-10（IL-10）含量。结果牙帕汤高剂量组、环磷酰胺组、牙帕汤与环磷酰胺联合组的瘤重分别为（3.46±0.39）g、（2.39±1.04）g、（2.30±0.76）g,均低于空白对照组（5.21±0.50）g,差异均有统计学意义（P＜0.05）,抑瘤率分别为33.69%、54.12%、56.00%;牙帕汤低、中、高各剂量组的胸腺指数分别为（2.16±0.69）、（2.24±0.76）、（2.23±0.63）,脾指数分别为（16.82±3.14）、（15.82±1.72）、（17.08±3.65）,均高于空白对照组（1.94±0.68）、（15.17±3.53）;环磷酰胺组（1.72±0.58）、（14.82±3.78）下降较明显。与空白对照组比较,各给药组的肺转移灶数目均降低,但差异无统计学意义（P＞0.05）。空白对照组IL-2、IL-10分别为（883.54±181.49）ng/L、（1106.86±343.79）ng/L,牙帕汤低、中、高各剂量组的IL-2水平明显提高,分别为（1732.29±100.52）ng/L、（1     

肺瘤平膏联合化疗对肺癌患者细胞免疫功能及相关炎症因子水平的影响

目的研究肺瘤平膏联合化疗对肺癌患者细胞免疫功能及相关炎症因子水平的影响。方法选取2014年5月—2016年12月本院收治的202例非小细胞肺癌患者作为研究对象,按信封法随机分为单化疗组(对照组)和肺瘤平膏与化疗联合治疗组(观察组),每组各101例。观察两组近期治疗疗效、治疗前后细胞免疫功能、炎症因子水平,并记录不良反应发生情况。结果观察组治疗后有效率及稳定率均显著高于对照组(P0.05)。治疗后观察组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK均显著高于对照组(P0.05),而CD8+显著低于对照组(P0.05)。治疗后与对照组相比,观察组血清中IL-6、TNF-α、hs-CPR水平均显著降低(P0.05)。治疗后观察组不良反应情况显著低于对照组(P0.05)。结论肺瘤平膏联合化疗可有效提高肺癌患者临床疗效,调节机体免疫机制,降低炎症因子水平,改善病情,降低不良反应发生,值得推广。     

丹参素对非小细胞肺癌A549细胞内氧化还原状态及相关核转录因子的影响

目的:探讨丹参素(DSS)抗肿瘤作用的分子机制,重点在于是否与其抗氧化作用及改变非小细胞肺癌A549细胞内氧化还原状态及影响相关核转录因子和信号通路有关。方法:通过体外DPPH自由基清除、高铁还原、亚铁螯合实验和DCFH-DA荧光探针标记ROS,检测DSS的抗氧化活性及对A549细胞内ROS水平的影响;采用MTT法测定DSS对A549细胞增殖能力的时效与量效关系;采用Western blot技术检测DSS对A549细胞内缺氧诱导因子HIF-1α及氧化还原调节转录因子Nrf2蛋白表达的影响,以及上游Akt,ERK1/2 MAPK信号磷酸化水平的影响。结果:DSS能够剂量依赖性降低A549细胞内ROS水平,与其较强的自由基清除和抗氧化活性有关;DSS能以时间和剂量依赖性的方式抑制A549细胞生长,进一步机制研究发现,DSS能降低Nrf2表达,与抑制Akt以及ERK1/2的磷酸化水平有关,但对HIF-1α的表达没有影响。结论:DSS具有治疗非小细胞肺癌的作用,机制在于通过清除ROS进而抑制Akt,ERK1/2的磷酸化而下调Nrf2的表达并最终抑制A549细胞的生长。     

大黄虫丸对小鼠Lewis肺癌CD44、VEGF及转移抑制的影响

目的:通过观察大黄虫丸对小鼠Lewis肺癌细胞黏附因子(CD44)、血管内皮生长因子(VEGF)及转移抑制的影响,初步探讨其抗肿瘤转移的机制。方法:造模后次日先随机分成5组,每组10只。根据预试结果确定高(H)、中(M)、低(S)剂量分别为0.18、0.09、0.045g/ml,以每只0.2ml灌胃10d;空白组小鼠以NS0.2ml灌胃10d;化疗组以50mg/kg CTX于第1d予腹腔给药。第11d处死小鼠,肺玻片压片法观察肺表面的转移灶结节并计数。以免疫组化法检测VEGF的表达;以流式细胞仪测定CD44的活性,初步探讨其抗肿瘤的机制及作用靶点。结果:实验组高(H)、中(M)、低(L)剂量组和化疗组肺自发转移抑制率分别为57.44%、55.32%、38.72%、60.00%。CD44值分别为(0.59±0.86)、(0.21±0.28)、(0.33±0.31)、(1.88±1.36)实验组(M)低于空白组(M)及化疗组(P<0.05)。实验组(M)与空白组比,VEGF阳性表达率明显降低,差异有显著性(P<0.05)。结论:大黄虫丸降低C57BL小鼠Lewis肺癌肺转移发生率,实验组(M)作用明显。实验组...     

敏咳清口服液对卵蛋白造模大鼠血液、支气管-肺灌洗液中IL-6,IL-8,ET-1,TXB2的影响

目的:观察敏咳清口服液治疗小儿过敏性咳嗽的疗效、探讨其细胞分子生物学作用机理。方法:将大鼠用卵蛋白吸入法造模、观测敏咳清口服液对模型动物血液、支气管-肺灌洗液中IL-6,IL-8,ET-1,TXB₂的影响。结果:敏咳清口服液能降低模型动物血液、支气管-肺灌洗液中IL-6,IL-8,ET-1,TXB₂的水平。结论:敏咳清口服液具有明显的抑制炎性介质释放的作用。