Xpert MTB/RIF技术对结核分枝杆菌的诊断价值

目的 对Xpert MTB/RIF技术检测结核分枝杆菌（MTB）的结果进行分析并评估其价值。方法 采集2017年10月~2018年10月本院就诊疑为结核分枝杆菌感染的患者共580例,利用Xpert MTB/RIF技术对其痰液（或体液）标本进行DNA检测,同时将标本进行固体培养及涂片抗酸染色并对检测结果进行比较。结果 Xpert MTB/RIF技术检测MTB的阳性率为18.97%（110/580）,和固体培养法的阳性率18.62%（108/580）相比差异无统计学意义（P＞0.05）;和抗酸染色法的阳性率15.00%（87/580）相比则更为敏感,差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论 Xpert MTB/RIF检测技术和固体培养法不相上下,且由于抗酸染色法,可以用于MTB的快速筛选。     

结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因突变的序列分析

目的探讨结核分枝杆菌耐药基因rpoB突变与利福平耐药性的关系。方法采集81例临床标本,分离结核分枝杆菌菌株,PCR扩增rpoB基因及测序,并与利福平药物敏感试验结果比较。结果27例耐利福平菌株中,20株发生rpoB基因突变(74.1%),突变位点包括531和526在内的7个位点10种突变类型,并发现新的突变位点和突变形式;54株敏感株中,1株发生突变(1.9%)。结论利福平耐药rpoB基因突变有一定区域性,为发展快速的基因诊断技术检测耐多药结核病奠定了基础。     

耐多药结核病快速诊断技术对耐二线药结核菌诊断价值的Meta分析

目的:Meta分析耐多药结核病快速诊断技术(Genotype MTBDRsl)对耐二线药结核菌研究中的临床诊断效能。方法:检索Pubmed、Embase和Cochrane图书馆等数据库从建库至2015-01有关Genotype MTBDRsl技术对耐二线药结核菌应用诊断的研究文献,采用QUADAS-2条目进行质量评估,符合纳入标准的研究应用Meta-Disc软件进行异质性检验,计算其合并灵敏度、特异度、阳性似然比、阴性似然比、诊断比值比及95%可信区间,建立受检者工作特征曲线(SROC),通过曲线下面积(AUC)评估Genotype MTBDRsl技术在诊断耐二线药结核菌中的价值,比较其对临床样本和培养株样本耐二线药的敏感度和特异度,并评价文献发表偏倚。结果:共纳入22篇文献,其整体研究的异质性较高,病例选择偏倚风险较高;耐氟喹诺酮类合并灵敏度、特异度和AUC分别为0.87、0.97和0.9690;耐阿米卡星分别为0.87、1.00和0.9944;耐卷曲霉素分别为0.88、0.97和0.9791;耐卡那霉素分别为0.50、0.99和0.9814;耐乙胺丁醇分别为0.69、0.87和0.7349,除耐阿米卡星特异度分布差异无统计学意义外(P0.05),其它均有统计学意义(P0.01)。Genotype MTBDRsl技术检测不同样本耐二线药的敏感度和特异度无统计学差异(P0.05)。各研究不存在发表偏倚。结论:Genotype MTBDRsl技术在耐氟喹诺酮类,阿米卡星与卷曲霉素研究中具有较高诊断价值,但对耐卡那霉素和乙胺丁醇的诊断效能有待进一步提高。     

噬菌体生物扩增法测定痰标本结核分枝杆菌利福平耐药性

目的建立快速测定痰标本中结核分枝杆菌利福平（RFP）耐药性的噬菌体生物扩增法，探讨其在临床应用的可行性。方法噬菌体生物扩增法测定362份涂阳痰标本结核分枝杆菌对RFP的耐药性，并与罗氏绝对浓度法结果进行比较，对不符合的样本，用基因芯片的方法分析rpoB基因的突变情况。结果362份涂阳痰标本，培养阳性360份，菌种初步鉴定有17份样本为非结核分枝杆菌，噬菌体生物扩增法RFP耐药为123份，敏感的196份，两法结果一致的为88．6％，如以绝对浓度法药敏结果为标准，则噬菌体生物扩增法测定利福平耐药的敏感性为93-3％，特异性为87．9％，阴性预测值为96．4％，阳性预测值为78．9％，准确性为89．7％，涂阳等级（1＋～3＋）与实验的有效性相关。结论噬菌体生物扩增法测定痰标本利福平的耐药性只需2d，可作为快速筛诜方法府用千临床．     

Xpert MTB/RIF系统在盆腔结核诊断中的应用价值分析

目的探讨Xpert MTB/RIF系统检测盆腔积液中结核分枝杆菌对于盆腔结核的诊断价值。方法采集30例临床确诊为盆腔结核患者及30例盆腔恶性肿瘤患者(对照组)的盆腔积液,对积液同时采用离心涂片法、荧光定量PCR法和Xpert MTB/RIF系统进行结核分枝杆菌检测,比较三种方法的敏感性及特异性。结果离心涂片法、荧光定量PCR法和Xpert MTB/RIF系统检测结核分枝杆菌的敏感性分别为6.67%(2/30)、53.33%(16/30)和73.33%(22/30),三种方法间差异均有统计学意义(P均<0.05)。三种方法特异度分别为100.0%,96.7%,100.0%,差异无统计学意义。结论采用Xpert MTB/RIF系统对盆腔积液进行结核分枝杆菌检测敏感性高,特异度好,具有较高的临床应用价值。     

Xpert Mtb/RIF检测与BACTEC MGIT960结核培养药敏联合检测在结核病诊治中的应用分析

目的评估Xpert Mtb/RIF检测与BACTEC MGIT 960结核培养药敏联合检测在结核病诊治中的应用价值。方法对临床结核病患者的标本进行Xpert Mtb/RIF检测,同时进行BACTEC MGIT 960结核培养、鉴定、药敏试验。以BACTEC MGIT 960结核培养及药敏试验为金标准,分析Xpert Mtb/RIF检测的敏感性和特异性。结果以BACTEC MGIT 960结核培养及药敏试验为金标准,Xpert Mtb/RIF检测结核分枝杆菌的敏感性为87.7%(100/114),Xpert Mtb/RIF检测利福平耐药的敏感性为90%(45/50)、特异性为91.3%(53/58)。结论 Xpert Mtb/RIF检测敏感性及特异性高, BACTEC MGIT 960结核培养及药敏试验联合应用有助于及早进行有效诊治。     

两种分子生物学方法在结核分枝杆菌及其耐药基因检测中的比较分析

目的探讨Xpert MTB/RIF和荧光PCR熔解曲线两种方法检测痰液中的结核分枝杆菌和利福平耐药基因的情况,同时分析两种方法间的符合程度。方法收集痰液标本272例,其中肺结核患者组129例,其他呼吸道疾病患者组143例,对两组患者的痰液标本同时进行Xpert MTB/RIF和荧光PCR熔解曲线检测,分析结核分枝杆菌和利福平耐药基因的检出情况,并将其结果进行比较。结果129例肺结核组患者痰标本两种方法检测结核分枝杆菌阳性者共有123例,总阳性率为95.3%,其中Xpert MTB/RIF法检测阳性者121例,阳性率为93.8%;荧光PCR熔解曲线法检测阳性者121例,阳性率93.8%;两种方法检测均为阳性者119例,检测均为阴性者6例,总符合率为96.9%,二者比较无统计学差异(P>0.05)。两种方法检测结核分枝杆菌同时阳性标本中,利福平耐药12例,耐药率为10.1%,二者检测利福平耐药基因结果符合率高达100%。结论Xpert MTB/RIF法与荧光PCR熔解曲线法均可快速、有效、准确地检测结核分枝杆菌及利福平耐药基因,荧光PCR熔解曲线法可检测包括利福平在内的多种抗结核药的耐药基因,可作为耐多药结核早期筛查的方法,对结核病的防治有重要意义。     

结核分枝杆菌多抗原蛋白芯片对儿童结核病的诊断价值

目的探讨结核分枝杆菌（MTB）多抗原蛋白芯片对儿童结核病的诊断价值。方法选取2005年4月至2006年4月在首都医科大学附属北京儿童医院诊断为结核病的住院患儿作为结核病组。选取同期住院，患感染性疾病，同时除外结核病的患儿作为非结核病组；选取体检纯化蛋白衍生物（PPD）试验阳性，既往无结核病史，无明显结核中毒症状，胸部影像学及腹部B超检查未见结核病灶的儿童作为结核感染组；选取同期行健康体检，卡疤试验阳性，无基础疾病，无结核接触史的儿童为健康对照组。各组留取血清标本。计算结核病组PPD试验阳性率及细菌学检查阳性率。应用MTB多抗原蛋白芯片同时检测标本中脂阿拉伯甘露糖（LAM）、相对分子质量16000和38000蛋白IgG抗体，通过蛋白芯片阅读仪判断结果，其中任意1种或1种以上抗体检测阳性，即判为蛋白芯片检测阳性。分别计算各组抗体检测阳性率，并计算该方法检测儿童结核病的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值等指标。应用Logistic回归及，检验分析蛋白芯片检测阳性率与患儿年龄、病程、抗结核治疗时间、激素使用以及结核病类型的关系。结果研究期间共纳入结核病组79例，非结核病组33例，结核感染组15例，健康对照组30例。蛋白芯片检测结核病组的阳性率为34．2％（27／79），低于PPD试验阳性率（84．8％，67／79），高于细菌学检查阳性率（12．7％，10／79）。在非结核病组阳性率为6．1％（2／33），结核感染组和健康对照组阳性率为0。蛋白芯片检测结核病组的灵敏度为34．2％，特异度为97．4％。阳性预测值93．1％，阴性预测值58．5％。Logistic回归发现蛋白芯片检测阳性率仅与病程相关，且随病程延长而阳性率升高。病程〈1个月，蛋白芯片检测阳性率为18．8％（6／32），病程在～3个月，蛋?     

结核分枝杆菌抗原分析及免疫交叉反应研究

目的：筛选和鉴定结核分枝杆菌特异性和保护性抗原，研究结核杆菌的免疫反应特点，以探索结核病诊断和治疗的新途径。方法：采用超声破碎和滤膜抽滤的方法分别得到菌体蛋白和滤液蛋白，通过Western blot试验用结核杆菌的单克隆抗体及结核病人血清来检测蛋白样品，把发生阳性反应的蛋白在BECKMAN LF3200／多肽氨基酸序列测定仪上进行N末端序列分析，并用结核杆菌的单抗对自身抗原组蛋白进行了检测。结果：结核杆菌的31kD和30kD蛋白与结核杆菌的单抗及病人血清反应均呈阳性，但与正常小鼠血清和健康人血清反应呈阴性。31kD和30kD蛋白的N末端序列分别为：Ala Glu Val Asp Trp Leu Val Phe Ala Val和Phe Ser Arg Pro Gly Leu Pro Val Glu Tyr。结核分枝杆菌的单抗与自身抗原组蛋白能发生免疫交叉反应。结论：结核杆菌的31kD和30kD蛋白是免疫保护性抗原，对免疫交叉反应分子基础的进一步研究必将增加对结核免疫机理的了解。     

Xpert MTB/RIF、AFB与IGRA对结核病诊断价值的比较

目的 分析结核分枝杆菌rpoB基因和突变检测(Xpert MTB/RIF)、涂片抗酸染色镜检(ACID-fast bacilli smear microscopy, AFB)与γ干扰素释放实验(interferon-gamma release assay, IGRA)3种实验方法诊断结核病的价值及差异。方法收集北京同仁医院2019年1月至2021年3月同时检测Xpert MTB/RIF、AFB以及IGRA的患者1 400例,以中国国家行业标准WS288-2017作为结核病诊断标准,评价3种检测方法及差异。结果 1 400例患者中确诊结核病132例,其中肺结核116例,肺外结核16例。Xpert MTB/RIF阳性107例,灵敏度72.7%,特异性为100%;AFB阳性55例,灵敏度为33.3%,特异性为99.1%;IGRA阳性316例,灵敏度为89.4%,特异性为45.3%。结论 Xpert MTB/RIF特异性最高,灵敏度较高;IGRA灵敏度最高,特异性较低;AFB灵敏度较低,特异性较高,3种方法各有特点,联合使用有助于临床结核病的诊断。     

快速检测结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药相关基因mPCR-SSCP建立及应用

目的 建立快速检测结核分枝杆菌异烟肼(INH)和利福平(RFP)耐药相关基因katG、inhA和rpoB突变的多重聚合酶链反应-单链构象多态性(multi PCR-single strand conformational polymorphism analysis,mPCR-SSCP)方法.方法 药敏试验检测134株结核分枝杆菌临床菌株对INH和RFP的耐药性.设计结核分枝杆菌INH和RFP耐药相关katG、inhA和rpoB基因PCR引物,建立mPCR-SSCP技术检测上述菌株katG、inhA和rpoB基因的突变,同时采用PCR直接测序技术(PCR-DS)检测上述基因片段突变情况,并对上述3种方法检测结果进行分析和比较.结果 134株临床菌株均含有katG、inhA和rpoB基因,其中42株(31.3％)对INH耐药、45株(33.6％)对RFP耐药.mPCR-SSCP和PCR-DS检测结果显示,92株INH敏感菌株katG和inhA基因均未发生突变,检测特异性均为100％;89株RFP敏感菌株中rpoB基因分别有2株和1株检测出突变,检测特异性分别为97.8％和98.9％;42株INH耐药菌株中分别有33株和36株katG和/或inhA基因突变,检测灵敏度分别为78.6％和85.7％;45株RFP耐药菌株中rpoB基因分别有41株和43株发生突变,检测灵敏度分别为91.1％和95.6％.结论 本研究建立的mPCR-SSCP能快速、简便、特异,并有一定的敏感性检测结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药相关基因katG、inhA和rpoB突变,具有临床应用前景.     

肺结核患者痰中结核分枝杆菌检验的临床价值分析

目的探讨分析肺结核患者痰中结核分枝杆菌检验的临床价值遥方法选取该院近期收治的肺结核患者82 例,根据患 病性质将其分为活动组（58 例）与非活动组（24 例）,对比两组患者晨痰痰液中结核分枝杆菌培养阳性率遥结果活动组结核分 枝杆菌培养阳性率（63.79%）较非活动组高（20.83%),两组比对差异存在统计学意义（约0.05）遥结论结核分枝杆菌培养可提升 结核分枝杆菌阳性检测率,对肺结核患者早期检出以及治疗意义重大,值得推广与借鉴遥     

蛋白芯片检测结核分枝杆菌对肺结核病的临床诊断价值

肺结核病是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病,是我国重点控制的重大疾病之一。目前结核病的诊断方法有：痰涂片、结核菌培养、结核菌基因检测、胸部X线和CT等,但这些方法存在特异性差或需要时间长、敏感性低等缺点。因此,敏感、特异、快速的检测方法对肺结核病的诊断与鉴别十分重要。     

MDR-TB诊断试剂盒鉴定广东结核分枝杆菌复合群及RIF和INH药敏效果分析

目的评价耐多药结核病（MDR-TB）快速诊断试剂盒对广东地区结核分枝杆菌复合群的鉴定效果及利福平（RIF）和异烟肼（INH）的药敏检测效果。方法选取151份痰标本和150份细菌培养物,采用MDR-TB快速诊断试剂盒对其进行菌群鉴定及RIF和INH药敏检测,结果分别与常规法进行比较。结果与常规生化菌种鉴定结果相比,两者鉴定结果一致率为96.7%（291/301）;与常规比例法药敏试验结果相比,诊断试剂盒检测单耐RIF的灵敏度为94.1%（64/68）,检测单耐INH的灵敏度为87.7%（57/65）,检测RIF和INH皆耐药株的灵敏度为79.3%（46/58）,检测RIF和INH皆敏感株的特异性为100%。结论该试剂盒能简单快速地鉴定结核分枝杆菌复合群,检测RIF和INF的敏感性高、特异性好,在广东地区应用前景较好。     

结核分枝杆菌相关IFN-γ释放试验在结核病诊断及疗效监测中的应用

目的：目的：探讨结核分枝杆菌相关γ-干扰素释放试验（TB-IGRA）在结核病诊断及临床抗结核治疗效果评价中的应用价值。方法：对196例临床确诊结核患者进行相关病史收集,同时进行TB-IGRA、结核菌素皮肤试验、结核杆菌培养、涂片镜检、结核抗体检测,结核患者的治疗过程中按用药疗程（初治患者第2、5、6个月,复治患者第2、5、8个月）对其进行随访,在治疗结束后6个月和1年后各随访一次,比较TB-IGRA与结核菌素皮肤试验在治疗过程中的变化。结果：确诊结核病例196例,其中肺结核158例,肺外结核38例,TB-IGRA在结核诊断中灵敏度为82．1％,特异性为91．7％,阳性预测值为93．1％,阴性预测值为79．3％,与传统实验室检查方法相比有显著性差异（P〈0．01）。在结核患者的抗结核治疗过程中,TB-IGRA阳性率及浓度水平治疗前与治疗后2、6月以及复治后2、5、8月比较显著下降（P〈0．01）,TB—IGRA水平与结核分枝杆菌数量存在较好相关性,与传统的TST方法评估疗效相比有显著性差异（P〈0．01）。结论：TB-IGRA在结核诊断中敏感性和阳性预测值较高,可作为较好的结核诊断的依据,同时TB-IGRA对肺外结核的灵敏度较高,为肺外结核患者的诊断提供了较为可靠的依据,通过治疗过程TB—IGRA检测分析,外周血TB-IGRA的变化随着抗结核治疗的进程下降的趋势明显,与结核涂片镜检结果符合率较高,是临床疗效评估较为理想的指标。     

γ-干扰素释放试验在淋巴结结核病中的诊断价值

目的对213例淋巴结病变患者进行γ-干扰素释放酶联免疫试验(TB-IGRA),探讨其在淋巴结结核病诊断中的临床价值。方法收集2015年10月至2016年4月就诊的淋巴结病变患者213例,其中确诊为淋巴结结核132例,非结核病的对照组81例,均进行TB-IGRA试验,并与传统的血清腺苷脱氨酶(ADA)和结核抗体相比较,分析其对淋巴结结核病诊断的灵敏度和特异性。结果TB-IGRA的敏感度87.8%、特异性70.4%,结核抗体检测的灵敏度68.2%、特异性66.7%,血清ADA的灵敏度5.3%、特异性76.5%。结论TB-IGRA试验在淋巴结结核病的诊断中具有相对较高的敏感度,可用于临床上淋巴结结核病的筛查。     

结核分枝杆菌实验室诊断技术的概述

近年来,结核病日益严重,已成为传染病的首位杀手。建立快速、准确、敏感、特异以及简便的诊断方法是全球控制结核蔓延的关键。为了建立更好的结核诊断方法,现从病原学、免疫学、分子生物学检测等3个方面对结核分枝杆菌实验室诊断技术的现状作一简要综述。     

含左氧氟沙星化疗方案治疗耐利福平结核病的预后分析

目的 探讨含左氧氟沙星化疗方案治疗对耐利福平结核病患者疗效、耐多药结核病（MDR-TB）发生率、不良反应的影响。方法 选取我院2016年1月~2017年1月收治的80例单耐利福平肺结核病患者作为观察对象,按照随机数表法分为对照组与研究组,每组40例。对照组给予常规化疗方案,研究组加用含左氧氟沙星化疗方案,对比两组疗效、MDR-TB发生情况、不良反应。结果 研究组总有效率为87.50%,高于对照组的67.50%（P＜0.05）;研究组痰菌转阴率、MDR-TB发生率为90.00%、10.00%,对照组分     

PNB/TCH生长试验和DNA微阵列基因芯片鉴定非结核分枝杆菌的价值比较

目的 比较对硝基苯甲酸/噻吩-2-羧酸肼生长（PNB/TCH）和DNA微阵列基因芯片鉴定非结核分枝杆菌（NTM）临床分离株菌种的价值。方法 收集2013年1月~2018年6月我院住院患者的痰分枝杆菌培阳分离菌2175株,分别采用PNB/TCH生长试验和DNA微阵列基因芯片鉴别NTM,比较两种方法的鉴定结果。结果 PNB/TCH生长试验初步鉴定NTM 93株,占4.28%,DNA微阵列基因芯片鉴定NTM 79株,占3.63%,PNB/TCH生长试验初步鉴定的93株NTM中,有14例为假NTM（15.05%）;PNB/TCH生长试验鉴定NTM的阳性检出率低于DNA微阵列基因芯片;79株NTM中,占比前3位的依次为胞内分枝杆菌株（37.97%）、堪萨斯分枝杆菌（21.52%）、鸟分枝杆菌（16.46%）。结论 传统对硝基苯甲酸/噻吩-2-羧酸肼生长试验鉴定NTM特异性较低,采用DNA微阵列基因芯片技术鉴定NTM准确,临床参考价值较大。