右美托咪定预处理对缺血再灌注损伤大鼠心肌线粒体功能的影响

目的:观察右美托咪定预处理对心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)大鼠线粒体功能的影响,探讨其对缺血再灌注心肌的保护作用?方法:将30只健康雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(A),MIRI组(B),MIRI+右美托咪定组(C)?采用结扎冠脉左前降支的方法建立心肌缺血再灌注损伤大鼠模型,通过心脏超声检测大鼠心功能的变化,real-time PCR检测线粒体功能相关基因mRNA水平的表达?透射电镜观察心肌线粒体超微结构?结果:与A组相比,B组和C组心肌功能受损,线粒体功能相关基因mRNA表达均降低(P < 0.05);与B组相比,C组心肌功能损伤减轻,线粒体功能相关基因mRNA表达水平明显增加(P < 0.05)?与A组相比,B组线粒体超微结构损伤显著;与B组相比,C组线粒体损伤程度明显减轻?结论:右美托咪定预处理可以减轻缺血再灌注所致心肌线粒体功能损伤,改善心肌功能,发挥保护心肌作用?     

右美托咪定对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的影响及其机制

目的 观察右美托咪定对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的影响,并探讨其可能的机制.方法 96只成年SD大鼠按随机数字表法分为4组(n=24):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血再灌注右美托咪定组(DEX组)和缺血再灌注右美托咪定+育亨宾组(DY组),每组再分为灌注后12、24、48、72 h4个亚组(n=6).采用临床常用的首次负荷量加持续微量泵给药方式予以右美托咪定和育亨宾处理,并通过改良Zivin法阻断双肾间腹主动脉建立脊髓缺血再灌注损伤模型,采用BBB法对大鼠运动功能评分,HE染色观察大鼠脊髓病理学改变(L4 ～L6),免疫组化观察脊髓Bax、Bcl-2表达,采用TUNEL法计数脊髓细胞凋亡率,Western blot检测Caspase3表达.结果 与IR组比较,DEX组和DY组BBB运动评分升高,HE染色病理损伤明显减轻,TUNEL染色细胞凋亡率下降,免疫组化Bcl-2升高,Bax降低(P＜0.05),Western blot显示Caspase3表达减少;与DEX组比较,DY组BBB运动评分降低,HE染色病理损伤加重,TUNEL染色细胞凋亡率升高,免疫组化Bcl-2降低,Bax升高(P＜0.05),Western blot检测结果显示Caspase3表达增加.结论 右美托咪定对大鼠脊髓缺血再灌注损伤具有明显的保护效应,其机制与激动α2肾上腺素受体,增加FAK磷酸化,并上调Bcl-2表达,下调Bax和Caspase3表达的抗细胞凋亡作用有关.     

右美托咪定预处理对大鼠缺血再灌注心律失常的影响及机制研究

目的观察右美托咪定预处理对大鼠缺血再灌注心律失常的影响及机制。方法 2015年3-6月于武汉大学基础医学院选择30只雄性SD大鼠,随机分为假手术组(SO组)、缺血再灌注组(I/R组)、右美托咪定预处理组(DEX组)各10只。I/R组、DEX大鼠先结扎冠状动脉30 min引起心肌缺血,再松开结扎线给予心肌再灌注120min。SO组只带线不结扎,DEX组在缺血前2 h给予右美托咪定100μg/kg腹腔注射,I/R组给予等体积生理盐水。监测记录各组缺血再灌注心律失常的发生情况,以实时定量PCR法检测心肌组织L型钙通道(Cav1.2)、钠钙交换体(NCX)mRNA的水平。结果 SO组心律无明显变化,心律失常评分为0分。DEX组心律失常发生率低于I/R组,缺血30 min和再灌注120 min心律失常评分均低于I/R组(4.5±0.6 vs.2.1±0.4,3.7±0.5 vs.1.1±0.3,P均<0.05)。与SO组比较,I/R组、DEX组心肌组织Cav1.2和NCX的mRNA水平均升高,而DEX组较I/R组明显降低(P均<0.05)。结论右美托咪定预处理可减少缺血再灌注心律失常发生,与减少Cav1.2和NCX的mRNA水平,抑制钙超载有关。     

右美托咪定预处理对大鼠缺血再灌注肝脏TNF-α及ICAM-1表达的影响

目的：通过右美托咪定预处理对大鼠缺血再灌注肝脏TNF-α及ICAM-1表达的影响,探讨其对肝脏缺血再灌注的保护作用。方法：SD成年雄性大鼠30只,体重150~220 g。随机平均分为3组,每组10只,分别为假手术组（S组）,缺血再灌注组（IR组）,右美托咪定组（Dex组）。S组和IR组用1 mL/（kg·h）速度静脉滴注0.9%生理盐水30 min;Dex组用右美托咪定5μg/（kg·h）预处理30 min。间隔2 h后IR组和Dex组建立肝脏缺血再灌注模型,S组开腹后不作缺血再灌注。缺血1 h后行再灌注4 h,然后处死大鼠取材。测定大鼠血清ALT和AST,检测肝组织TNF-α活性和ICAM-1水平,观察大鼠组织学病理改变。结果：与S组比较,IR组和Dex组血清ALT、AST和肝组织TNF-α和ICAM-1表达明显升高。Dex组血清ALT、AST酶升高幅度明显较IR组小,肝组织TNF-α和ICAM-1表达低于IR组,肝细胞损伤程度小于缺血再灌注组。结论：右美托咪定预处理能抑制肝缺血再灌注细胞的TNF-α和ICAM-1表达;TNF-α可能通过调控ICAM-1的表达在缺血再灌注损伤中发挥作用。     

不同剂量右美托咪定预处理对肝缺血再灌注损伤后肝功能的影响

目的:验证不同剂量右美托咪定预处理对肝缺血再灌注损伤时肝功能保护作用的区别。方法:选择择期在全麻下行肝部分切除术的患者60例,随机分为随机分为对照组(C组)、低剂量右美托咪定组(D1组)和高剂量右美托咪定组(D2组),每组20例。于麻醉诱导前15minD1、2组给与初始剂量:两组静脉注射用生理盐水稀释至50ml的右美托咪定1ug/kg,C组静脉注射生理盐20ml,输注时间均为15min。D1组、D2组分别以0.2、0.6μg·kg~(-1)·h~(-1)的速度持续泵注右美托咪定并维持至肝门阻断,C组以相同方法静脉给予等量生理盐水。分别在阻断前(T0),阻断结束时(T1),术后第一天(T2),术后第三天(T3)测定血浆天冬氨酸氨基转移酶AST,丙氨酸氨基转移酶ALT,TNF-α,IL-6的水平,同时记录肝门阻断时间,手术时间,出血量以及尿量,并且记录术中心动过缓及低血压的发生情况。结果:低剂量和高剂量右美托咪定预处理组血浆天冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶ALT,TNF-α,IL-6术后各时间段升高水平均低于对照组,高剂量组冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶ALT,TNF-α,IL-6术后各时间段升高水平更低。结论:低剂量与高剂量右美托咪定持续泵入对肝门阻断后肝缺血再灌注造成的肝功能损伤具有很好的器官保护作用,但高剂量临床应用副作用较大,因此临床应用还是以低剂量为主。     

右美托咪定预处理联合后处理对心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 观察右美托咪定预处理联合后处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法 选取天津医科大学总医院120例心脏瓣膜置换术患者。随机分为3组,右美托咪定预处理组（preD组）、右美托咪定后处理组（posD组）及右美托咪定预处理联合后处理组（pre-posD组）,每组40例。preD组和pre-posD组于阻断主动脉前30?min静脉输注右美托咪定1?μg/kg,posD组输注等容量生理盐水;posD组和pre-posD组于开放主动脉前30?min灌注液中加入右美托咪定0.2～1.0?μg/kg进行心脏灌注,preD组灌注液中加入等容量生理盐水。观察麻醉诱导前5?min（T0）、开放主动脉后15?min（T1）、体外心肺转流（CPB）结束时（T2）、术后4?h（T3）、术后16?h（T4）、术后36?h（T5）、术后72?h（T6）的心率（HR）、平均动脉压（MAP）及术中脑电双频指数（BIS）的变化,记录心脏复跳时间和心脏复跳情况,记录3组前并行循环时间（Tpre）、主动脉阻断时间（Tab）及后并行循环时间（Tpos）。检测各时间点血浆肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、血清心肌肌钙蛋白（cTn?I）浓度及肌酸激酶同工酶（CK-MB）活性。结果 不同时间点3组HR、MAP值差异无统计学意义（P?>0.05）。T1～T6 时pre-posD组血浆TNF-α浓度低于preD和posD组（P?<0.05）。T2～T6时pre-posD组血浆IL-6浓度低于preD组和posD组（P?<0.05）。T1～T6时pre-posD组血浆CK-MB活性弱于preD组和posD组（P?<0.05）。结论 右美托咪定预处理联合后处理较单纯的预处理或单纯的后处理能更有效地抑制炎症因子的产生和释放,具有更好的心肌保护功能。     

高糖状态下右美托咪定预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤影响的机制探讨

目的探讨高糖状态下右美托咪定(Dex)预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤影响的机制。方法 2014年10月—2015年6月于武汉大学人民医院中心实验室进行实验,成年雄性SD大鼠36只随机分为:假手术组(NGSham)、缺血再灌注组(NG-I/R)、右美托咪定预处理组(NG-Dex)、高糖假手术组(HG-Sham)、高糖缺血再灌注组(HGI/R)、高糖右美托咪定预处理组(HG-Dex)各6只。除假手术组外其余各组均制备肾缺血再灌注模型,Dex预处理组于缺血前30 min腹腔注射Dex 50μg/kg。采用原位末端转移酶标记(TUNEL)法测定细胞凋亡,Western blot法检测肾脏Bax、Bcl-2、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)。结果与NG-Sham组比较,NG-I/R组可见到明显的肾小管损害,包括肾小管扩张,肾小管上皮细胞肿胀,固有核,炎性肾小管坏死,凋亡指数、Bax、P-AKT均增高,而Bcl-2降低(F=6.667、469.889、1.200、0.791、0.499,P<0.05);与NG-I/R组比较,NG-Dex组结构较为正常,可见到正常的肾小管结构和肾小管细胞,凋亡指数、Bax降低,而p-AKT,Bcl-2升高(F=59.333、27.667、0.028、0.034、0.024,P<0.05);HG-I/R组、HG-Dex组的细胞破坏程度、凋亡指数、Bax、P-AKT分别高于对应的NG-I/R组、NG-Dex组,而Bcl-2低于对应组(F=66.000、497.556、1.227、0.824、0.523,P<0.05);HG-I/R组、HG-Dex组之间凋亡指数、P-AKT无明显差异(P>0.05)。结论 Dex对正常肾缺血再灌注损伤具有保护作用,但这种作用在高糖环境中被削弱,可能与通过p-AKT、调控Bcl-2及Bax的表达,进而增加肾I/R损伤有关。     

右美托咪定对大鼠离体肺缺血再灌注所致线粒体损伤的影响

目的：探究右美托咪定（dexmedetomidine,Dex）对大鼠离体肺缺血再灌注所致线粒体损伤的影响。方法：将SD大鼠随机分成4组（n=6）：对照组（C组）、缺血再灌注组（IR组）、1 nmol/L Dex组（D1组）、10 nmol/L Dex组（D10组）,制备大鼠离体肺缺血再灌注模型。记录平衡末（T0）、再灌注即刻（T1）、再灌注30 min（T2）和再灌注60 min（T3）时的潮气量（tidal volume,VT）、肺顺应性（compliance,Cdyn）、气道阻力（airway resistance,Raw）和肺静脉氧分压（oxygen partial,PaO2）;测定肺湿/干重比;HE染色观察组织病理学改变;测定灌流末流出液乳酸脱氢酶（LDH）活性和肺组织中活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、三磷酸腺苷（ATP）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）活性。分离肺组织线粒体,检测线粒体肿胀程度和线粒体膜电位（MMP）。结果：与C组相比,IR组、D1组、D10组肺功能不同程度降低,LDH活性升高,ROS、MDA增加,SOD活性下降,ATP生成减少,线粒体肿胀程度升高,MMP下降（P < 0.05）;与IR组相比,D1组、D10组肺功能改善,病理显示肺损伤明显减轻,LDH释放减少,ROS、MDA含量减少,SOD活性升高,ATP生成增加,线粒体肿胀程度减轻,MMP上升（P < 0.05）;与D1组相比,D10组改善肺功能作用更明显,Raw下降,LDH活性降低,SOD活性升高,线粒体肿胀程度减轻（P < 0.05）。结论：右美托咪定减轻了离体肺缺血再灌注损伤,其机制可能与减轻线粒体损伤,减少氧化应激反应有关。     

右美托咪定对大鼠心脏缺血再灌注损伤及小窝蛋白3的影响

目的探讨右美托咪定预处理(Dexmedetomidine,Dex)对大鼠心脏缺血再灌注(Ischemia reperfusion J/R)损伤的作用以及对小窝蛋白3(Cav-3)表达的影响。方法将24只SD大鼠随机分为三组:假手术组(C组)、缺血再灌注组(IR组)和Dex预处理组(D组)。建立心脏缺血再灌注损伤模型,测定心肌梗死面积,观察心脏组织病理变化,检测血清LDH和CK-MB活性以及心脏组织Cav-3表达情况。结果与C组相比JR组心肌梗死面积增大血清LDH和CK-MB活性增加,心脏组织Cav-3表达减少差异均有统计学意义(P<0.05),心脏组织形态学检测显示组织严重受损;与IR组相比,D组心肌梗死面积缩小,LDH和CK-MB活性降低,Cav-3表达增加差异均有统计学意义(P<0.05),组织损伤程度明显减轻。结论 Dex预处理可增加心脏组织Cav-3的表达,减轻心脏I/R损伤。     

盐酸右美托咪定预处理对缺血-再灌注损伤大鼠心肌Bax和Bcl-2表达的影响

目的研究盐酸右美托咪定对大鼠心肌缺血-再灌注损伤时心肌凋亡相关基因Bax和Bcl-2表达的影响。方法将21只健康SD大鼠随机分为3组:假手术组(sham组,n=7)、缺血-再灌注组(I/R组,n=7)、缺血-再灌注+盐酸右美托咪定组(DEX组,n=7)。采用结扎左冠状动脉前降支的方法制备在体大鼠心肌缺血-再灌注损伤模型。采用RT-PCR、免疫组化方法检测Bcl-2和Bax mRNA、蛋白的表达,TUNEL法检测凋亡细胞TTC染色测定心肌梗死面积。结果与sham组比较,I/R组Bcl-2和Bax mRNA和蛋白表达增加(P<0.05);与I/R组比较,DEX组Bcl-2mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),Bax mRNA和蛋白表达下降(P<0.05),凋亡细胞明显减少(P<0.01),心肌梗死面积减小(P<0.05)。结论盐酸右美托咪定预处理可上调心肌缺血-再灌注损伤大鼠心肌Bcl-2mRNA和蛋白表达,下调Bax mRNA和蛋白表达,表明盐酸右美托咪定在心肌缺血-再灌注损伤中有抗凋亡的作用。     

不同剂量右美托咪定预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的：观察不同剂量右美托咪定（dexmedetomidine,DEX）预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。方法：50只健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I/R组）、小剂量右美托咪定组（D1组）、中等剂量右美托咪定组（D2组）、较大剂量右美托咪定组（D3组）。Sham组仅行外科操作而不造成缺血,Sham组、I/R组于外科操作前30 min腹腔注射生理盐水1 mL,D1、D2、D3组分别于缺血操作前30 min腹腔注射DEX 50、100、200 μg/kg。各组分别于术后24、48 h检测S100β蛋白含量,术后48 h测定Bcl?2、Bax含量及脑梗死体积比。结果：与Sham组相比,D1、D2、D3组S100β、Bax蛋白含量及脑梗死体积比均升高（P＜0.05）,Bcl?2含量降低（P＜0.05）;与I/R组相比,D1、D2、D3组S100β、Bax蛋白含量及脑梗死体积比均降低（P＜0.05）,Bcl?2含量升高（P＜0.05）;D1、D2、D3组间相比,D3组Bcl?2含量较D1、D2组降低（P＜0.05）,术后24 h S100β蛋白含量较D1、D2组升高（P＜0.05）,D1、D2组间差异无统计学意义;D1、D2、D3组间术后48 h S100β、Bax蛋白含量及脑梗死体积比差异无统计学意义。结论：右美托咪定预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠有神经保护作用,其机制可能与抑制细胞凋亡有关,此作用在50和100 μg/kg间无明显差异。     

右美托咪定对肝缺血再灌注损伤模型大鼠炎性因子及肾功能的影响

目的探讨右美托咪定对肝缺血再灌注损伤模型大鼠炎性因子及肾功能的影响。方法选择Wistar大鼠36只,分为对照组、缺血再灌注损伤模型组(I/R组)、右美托咪定干预组(Dex组),I/R组和Dex组建立肝脏缺血再灌注损伤模型,给予Dex组右美托咪定干预。再灌注后12 h,采集血清并测定ALT、AST、BUN、Cr的水平,收集肝脏组织并测定炎性因子的水平。结果再灌注后12 h,I/R组大鼠血清中丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的水平高于对照组,Dex组大鼠血清中ALT、AST的水平低于I/R组(均P<0.05);I/R组大鼠肝脏组织中白细胞介素-1 (IL-1)、白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平高于对照组,Dex组大鼠肝脏组织中IL-1、IL-6、TNF-α的水平低于I/R组(均P<0.05);I/R组大鼠血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)的水平高于对照组,Dex组大鼠血清中BUN、Cr的水平低于I/R组(均P<0.05)。结论右美托咪定能够减轻肝缺血再灌注损伤模型大鼠的肝损伤,改善肾功能,其机制与抑制炎性因子释放有关。     

预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的：探讨预处理（ＰＣ）对大鼠肝脏１／Ｒ损伤的影响及其机制。方法：采用原位灌流肝脏Ｉ／Ｒ模型，观察肝脏组织损伤、血管床功能、肝脏５＇－核苷酸酶活性及分布的改变。结果：ＰＣ减少肝组织ＭＤＡ产生及ＬＤＨ漏出的（均Ｐ〈０．０１），并抑制Ｉ／Ｒ引起的５＇－核苷酸酶活性下降。结论：ＰＣ对肝脏Ｉ／Ｒ损伤有保护作用，５＇－核苷酸酶参与了该保护机制。     

预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的：探讨预处理（ＰＣ）对大鼠肝脏Ｉ／Ｒ损伤的影响及其机制。方法：采用原位灌流肝脏Ｉ／Ｒ模型，观察肝脏组织损伤、血管床功能、肝脏５′－核苷酸酶活性及分布的改变。结果：ＰＣ减少肝组织ＭＤＡ产生及ＬＤＨ漏出（均Ｐ＜０．０ｌ），并抑制Ｉ／Ｒ引起的５′－核苷酸酶活性下降。结论：ＰＣ对肝脏Ｉ／Ｒ损伤有保护作用，５′－核苷酸酶参与了该保护机制。     

右美托咪定预处理减轻离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤的线粒体相关机制

目的：研究右美托咪定（dexmedetomidine,Dex）预处理对心肌缺血/再灌注（I/R）损伤的作用及其与线粒体渗透性转换孔（mPTP）和/或线粒体ATP敏感性钾通道（mitoK_ATP）的关系。方法：分离SD雄性大鼠心脏置于Langendorff系统行全心停灌30 min,再灌注120 min建立心肌I/R损伤模型,停灌前15 min给予Dex（10 nmol/L）处理。测定左心室动力学、再灌注期间冠脉流量及再灌注5 min时中乳酸脱氢酶（LDH）含量,实验结束测定心肌组织formazan含量以反映心肌梗死状况。结果：与正常对照组相比,I/R组明显降低了再灌注期间的左室发展压、冠脉流量及再灌注末心肌组织formazan含量,显著升高了再灌注左室舒张末压、心肌LDH渗出;Dex预处理明显改善了I/R心脏功能及心肌组织活性（P<0.01）;mPTP开放剂苍术苷（20 μmol/L,再灌注前给药20 min）及mitoK_ATP抑制剂5-羟基癸酸（100 μmol/L,停灌前给药20 min）可取消Dex预处理产生的抗心脏I/R损伤作用。结论：围手术期常用的辅助麻醉药Dex具有减轻离体大鼠心脏I/R损伤作用,且该心肌保护作用可能与Dex促进缺血前mitoKATP的开放,抑制再灌注早期mPTP的开放有关。