间二硝基苯对肝细胞DNA的损伤及胆红素的抑制作用研究

为了解间二硝基苯（ｍＤＮＢ）对肝细胞是否有遗传毒性，以及胆红素对此是否有保护作用，本研究在体外用单细胞凝胶电泳技术测定了ｍＤＮＢ对肝细胞ＤＮＡ的损伤作用及胆红素的保护作用。结果表明，ｍＤＮＢ可导致肝细胞ＤＮＡ链断裂，且有明显的剂量反应关系，同时加入胆红素可部分抑制ｍＤＮＢ所致的ＤＮＡ损伤，提示ｍＤＮＢ是一种遗传毒物，而胆红素可有效地抑制ｍＤＮＢ的遗传毒性     

间二硝基苯对大鼠肝脏氧化损伤的研究

目的研究间二硝基苯（ｍ－ＤＮＢ）对肝脏的损伤并探讨其中毒机制。方法采用整体与离体实验相结合的方式对大鼠进行ｍ－ＤＮＢ染毒，观察大鼠肝脏脂质过氧化情况。结果随染毒剂量的增加和染毒时间的延长，染毒组大鼠肝脏丙二醛（ＭＤＡ）含量明显增加，呈良好的剂量－效应关系和时间－效应关系；低剂量、短时间染毒时，谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量增加，大剂量、长时间染毒时，其含量降低；氧化型谷胱甘肽（ＧＳＳＧ）及ＧＳＳＧ／ＧＳＨ比值均随染毒剂量和时间的增加而增加；肝细胞的超氧阴离子自由基（Ｏ－２·）、羟自由基（·ＯＨ）的产生量明显增加。结论诱发脂质过氧化及产生自由基是ｍ－ＤＮＢ的主要中毒机制之一。     

肝癌高发区饮用塘水对鼠原代肝细胞UDS的影响

采用大鼠原代肝细胞ＵＤＳ试验研究了广西某肝癌高发区饮用塘水对肝细胞ＤＮＡ修复合成的影响，以探讨塘水的基因毒性。结果：①该地区饮用糖水浓缩物对大鼠原代肝细胞ＵＤＳ试验呈阳性反应，且在一定剂量范围内（０．１￣０．５ｍｇ／ｍｌ）显示良好的剂量－－效应关系；②塘水浓缩物剂量较高（０．５ｍｇ／ｍｌ）时，其ＵＤＳ试验ｃｐｍ值与强致癌物ＡＦＢ１（０．０１ｕｇ／ｍｌ）组相近；③当塘水浓缩物剂量高达１．０ｍｇ／ｍｌ     

间二硝基苯染毒对大鼠血清生化指标的影响

目的探讨间二硝基苯（ｍ－ＤＮＢ）染毒对肝、肾及代谢方向的影响。方法用ＨＩＴＡＣＨＩ７１５０型全自动生化分析仪分析ｍ－ＤＮＢ染毒大鼠血清常规生化指标。结果ｍ－ＤＮＢ染毒大鼠血清胆红毒和肾功能指标的改变相对比较突出,而多数血清酶、脂质和载脂蛋白等指标的影响均较小。结论血清胆红素、肌酐（ＣＲＥ）和尿酸（ＵＡ）可能是ｍ－ＤＮＢ所致的肝脏和肾脏毒性的敏感指标     

硝基苯对小鼠睾丸细胞酶的作用

以剂量为１００ｍｇ／ｋｇ体重、５００ｍｇ／ｋｇ体重的硝基苯（ＮＢ）分别给雄性小白鼠经口染毒。染毒２天后，各染毒组的睾丸组织中Ｇ－６－ＰＤ、ＬＤＨ－ｘ、ＳＤＨ的活性均明显低于对照组。染毒４天后，染毒组Ｇ－６－ＰＤ活性恢复到对照水平；ＬＤＨ－ｘ的１００ｍｇ／ｋｇ体重组恢复到对照水平，而５００ｍｇ／ｋｇ组仍明显低于对照组；ＳＤＨ活性染毒组仍低于对照组。ＬＰＯ值在染毒２天、４天后与对照组相比均无显著差异。     

胆红素抗间二硝基苯所致氧化作用的研究

目的研究胆红素的抗氧化作用。方法在间二硝基苯（ｍ－ＤＮＢ）诱导大鼠氧化损伤模型的基础上，采用正交试验设计方差分析，观察不同时间、不同浓度的胆红素的抗氧化作用。结果经胆红素预处理后，大鼠肝细胞丙二醛（ＭＤＡ）含量降低，Ｏ－２·、·ＯＨ的产生量减少，差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论胆红素有可能通过抑制脂质过氧化、清除自由基和ＧＳＨ发生联合抗氧化作用。     

柴油机排出颗粒物不同组分对哺乳动物遗传毒性的研究

采用大鼠原代肝细胞ＵＤＳ试验，对国产东风柴油机排出颗粒物不同分离组分进行研究，评价各组分对ＤＮＡ的损伤作用。结果表明：各种不同组分（有机酸Ｆ１组分除外）均可诱导ＤＮＡ的损伤，导致ｃｐｍ值的升高，且在一定范围内存在剂量－反应关系，其中以有机碱Ｆ２和多环芳烃Ｆ４组分的毒性较高。     

边缘型维生素A缺乏对大鼠红系细胞膜N糖链的影响

为研究边缘型维生素Ａ缺乏（ＭＶＡＤ）对大鼠红系细胞膜Ｎ连接型糖链（Ｎ糖链）的影响，采用系列凝集素柱层析法，并配合外切糖苷酶，研究ＭＶＡＤ对红系细胞分化过程中细胞膜Ｎ糖链的影响，结果显示，ＭＶＡＤ引起大鼠红系细胞膜Ｎ糖链合成减少，复杂型糖链下降，高甘露糖型及杂合型糖链上升；天线数无变化；复杂型糖链中不含分叉型Ｎ乙酰氨基葡萄糖（Ｂ－Ｇｎ）及核心岩藻糖（Ｃ－Ｆｕｃ）组分下降，含Ｂ－Ｇｎ或Ｃ－Ｆｕｃ或同时含Ｂ－Ｇｎ和Ｃ－Ｆｕｃ组分增加，提示ＭＶＡＤ减少Ｎ糖链合成，阻碍糖链向成熟方向转化，使Ｎ糖链趋于较不成熟和分化较差，是细胞分化障碍的标志，它可能与细胞受体功能有关。     

氟、砷及氟砷联合经口染毒对大鼠肝UDS细胞影响的研究

本文用程序外ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）试验方法检测氟、砷及氟砷联合染毒对大鼠肝脏ＤＮＡ的损伤及修复的影响。将雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为四组：氟组、砷组，氟砷联合组及对照组。分别饮用含氟化钠１２５ｐｐｍ、三氧化二砷７５ｐｐｍ、氟化钠１２５ｐｐｍ加三氧化二砷７５ｐｐｍ的水及蒸馏水。结果染毒３个月的大鼠肝脏，在氟组其ｃＰｍ均值为１５８０．７±１９６，明显高于对照组３７７±３４。砷组的ｃＰｍ均值为２３９．３±１０４，低于对照组。氟砷联合组的ｃＰｍ均值为３０９．３±５３，接近于但略低于对照组。染毒６个月脾大鼠肝脏，氟、砷及氟砷联合组的ｃＰｍ均值均低于对照组，其掺入百分率分别为对照组的４８．３％（氟组）、３８％（砷组）、８７％（氟砷联合组）。此结果说明慢性氟、砷及氟砷联合中毒可以引起大鼠肝细胞的ＤＮＡ损伤，并影响其修复损伤的能力。另外，本实验的结果还表明氟与砷有拮抗作用。     

原油蒸气吸入引起大鼠肺脂质过氧化损伤的研究

给予大鼠吸入原油蒸气１５ｇ／ｍ３×８ｈ（急性染毒Ⅰ组）、３０ｇ／ｍ３×８ｈ（急性染毒Ⅱ组）、３ｇ／ｍ３×８ｈ／ｄ×３０ｄ（亚急性染毒组），观察血液和肺组织ＧＳＨ、ＭＤＡ含量和ＧＳＨ－Ｐｘ活性变化。结果３个染毒组大鼠血ＧＳＨ含量均明显减少；肺ＧＳＨ－Ｐｘ活性均有所下降，尤以２个急性染毒组酶活性下降显著（Ｐ＜０．０１），急性染毒Ⅱ组大鼠肺ＧＳＨ－Ｐｘ活性仅约为对照组的１／３；急性染毒Ⅱ组大鼠肺ＭＤＡ含量轻度增高，血ＭＤＡ含量显著增高（Ｐ＜０．０５）。本研究提示原油蒸气吸入，可削弱机体氧自由基清除系统的抗脂质过氧化损伤的活性，并引起一定程度的生物膜脂质过氧化损伤。表明脂质过氧化损伤反应可能是原油蒸气吸入引起肺损伤的机理之一。     

胆红素拮抗间二硝基苯致大鼠肝细胞DNA氧化损伤作用

[目的]探讨胆红素拮抗间二硝基苯(m-DNB)诱导大鼠肝细胞DNA氧化损伤作用。[方法]原代培养大鼠肝细胞与不同剂量m-DNB孵育,细胞色素C还原法和电子顺磁自旋捕获法观察m-DNB染毒大鼠肝细胞超氧阴离子自由基()和羟自由基(OH?)生成;以单细胞凝胶电泳和氚胸腺嘧啶(3H-TdR)掺入法分别观察m-DNB对大鼠肝细胞DNA损伤和合成抑制情况,分析胆红素干预对以上情况的影响。[结果]随m-DNB剂量增加,大鼠肝细胞和OH?水平、DNA受损细胞数和细胞DNA断裂程度增加,3H-TdR掺入量下降,具有较明显的剂量-反应关系(P<0.01)。10μmol/L胆红素干预可明显减低m-DNB致大鼠肝细胞和OH?水平、降低DNA受损细胞数和细胞DNA断裂程度、拮抗m-DNB对大鼠肝细胞DNA合成的抑制(P<0.01)。[结论]胆红素可拮抗m-DNB诱导大鼠肝细胞活性氧导致的DNA氧化损伤、减轻m-DNB对大鼠肝细胞DNA合成的抑制作用。     

硒拮抗氟对人肝细胞DNA损伤及凋亡的影响

目的　研究氟、硒对离体人肝细胞DNA损伤及凋亡的作用。方法　体外培养的人肝细胞分别接触一定剂量的氟和 /或硒 12h后 ,检测肝细胞DNA的损伤率、凋亡率和细胞周期构成比。结果　氟组肝细胞DNA损伤率、凋亡率和S期细胞数均明显高于对照组和氟 硒组 (P <0 0 5) ,硒组DNA损伤率和凋亡小体育分率均高于对照组 ,但无显著性差异 (P >0 0 5)。结论　一定剂量的硒可拮抗氟对离体人肝细胞DNA损伤及诱导的肝细胞凋亡作用     

Radaway抗辐射胶囊对小鼠辐射损伤的保护作用

目的 观察Radaway抗辐射胶囊对小鼠γ射线辐射损伤的保护作用。方法 将120只雄性昆明小鼠随机分为I(外周血白细胞计数)、Ⅱ(骨髓细胞微核检测)、Ⅲ(骨髓DNA含量测定)3大组,每大组又随机分为高、中、低剂量组和辐射对照组。各组根据不同指标选择不同的照射时间均以同一剂量γ射线全身照射1次。结果 以3Gy剂量照射后第14天各剂量组的外周血白细胞计数均显著高于辐射对照组(P < 0.01);照射后第3天,中、低剂量组的骨髓细胞微核率显著低于辐射对照组(P < 0.01),低剂量组的骨髓DNA含量显著高于辐射对照组(P < 0.01)。结论 Radaway抗辐射胶囊对小鼠γ射线辐射损伤具有显著的保护作用。     

镰刀菌毒素与黄曲霉毒素的联合毒性研究--AFB1和DON的RDS实验

为了解黄曲霉毒素（ＡＦＢ１）与镰刀菌毒素的脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ＤＯＮ）对ＤＮＡ损伤修复的影响,用化学物质诱导的细胞增殖的变化实验,（ｒｅｐｌｉｃａｔｉｖｅ ＤＮＡ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ,ＲＤＳ）实验进行研究。结果表明：ＡＦＢ１和ＤＯＮ均可诱导细胞分化的Ｓ期ＤＡＮ的合成,并且二者间存在交互作用。结果提示：ＡＦＢ１与ＤＯＮ在肿瘤的发生中既以遗传毒性物质的形式发挥作用,又以非遗传毒性物质的形式共同发挥作用     

甲基叔丁基醚致DNA损伤的体内和体外研究

目的 探讨甲基叔丁基醚（MTBE）对动物致癌的机制.方法 小鼠经呼吸道染毒MTBE 20 d后,取肝、肾、肺细胞进行单细胞凝胶电泳（SCGE）、DNA交联试验及肺和肾组织中丙二醛（MDA）含量测定.对体外培养的大鼠肺Ⅱ型细胞、肝细胞进行SCGE、DNA交联试验和程序外DNA合成试验（LDS）.结果 MTBE 1 440、4 968 mg/m^3组染毒小鼠肝细胞、各剂量组肾细胞、4 968 mg/m^3组肺细胞DNA迁移距离均大于阴性对照组;肝细胞DNA迁移距离与MTBE浓度有剂量-反应关系（r=0.997,P=0.003）.MTBE1 440、4 968 mg/m^3组雌性小鼠及4 968 mg/m3组雄性小鼠肾MDA含量高于阴性对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.MTBE浓度＞0.050mmol/L时,大鼠肺Ⅱ型细胞、肝细胞DNA迁移距离较阴性对照组增加,差异有统计学意义（P＜0.05）,且DNA迁移距离与MTBE浓度有剂量-反应关系（r肺=0.967,T肝=0.963,均P＜0.05）;5.0、10.0 mmol/L MTBE组大鼠肺Ⅱ型细胞、肝细胞的3H-TrR掺入量每分钟脉冲数（CPM）均高于阴性对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;各剂量组小鼠肝细胞、大鼠肺Ⅱ型细胞和肝细胞的DNA交联率与阴性对照组的差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 MTBE对DNA有损伤作用,细胞DNA断裂和脂质过氧化是其引起动物肝、肾肿瘤的可能机制之一.     

N-乙酰半胱氨酸在有或无caspase抑制条件下对Cr(Ⅵ)诱导的肝细胞凋亡的拮抗作用

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)在有或无caspase抑制条件下,对Cr(Ⅵ)诱导的肝细胞线粒体依赖性凋亡的拮抗作用。方法将L-02肝细胞随机分成对照组、Cr(Ⅵ)处理组、Z-VAD-fmk预处理组[Z-VAD-fmk预处理细胞1h,加入Cr(Ⅵ)]、NAC预处理组[NAC预处理细胞1h,加入Cr(Ⅵ)]、联合预处理组[Z-VAD-fmk和NAC分别预处理细胞1h,加入Cr(Ⅵ)],Cr(Ⅵ)终浓度为20μmol/L,处理6h。流式细胞仪检测细胞凋亡率,荧光分光光度法检测线粒体膜电位(△ψm)和通透性转运孔(PTP)的改变,单细胞凝胶电泳法观察细胞凋亡形态及细胞DNA损伤情况。结果终浓度20μmol/L的Cr(Ⅵ),处理6h,可诱导细胞凋亡,在有或无caspase抑制条件下,NAC均明显减轻了Cr(Ⅵ)引起的肝细胞线粒体膜电位下降及PTP孔开放(P<0.05),使细胞DNA损伤程度减轻(P<0.05),从而对细胞凋亡有明显拮抗作用(P<0.05),但与非caspase抑制条件下相比,caspase抑制条件下NAC的保护效果有明显降低(P<0.05)。结论在有或无caspase抑制条件下,NAC对Cr(Ⅵ)诱导的L-02肝细胞凋亡具有重要拮抗作用,caspase在该凋亡过程中不起决定性作用。