γ-聚谷氨酸-柠檬酸-顺铂复合物中顺铂含量测定方法的建立

目的建立γ-聚谷氨酸-柠檬酸-顺铂复合物中顺铂含量测定的方法。方法采用高效液相色谱法测定γ-聚谷氨酸-柠檬酸-顺铂复合物中顺铂含量,色谱柱为C18柱(4.6 mm×300 mm,5μm),流动相为含150mmol·L-1氯化钠的磷酸盐缓冲溶液(pH 7.4),流速为0.65 mL·min-1,检测波长为210 nm。结果顺铂质量浓度在4²00μg·mL-1范围内,其色谱峰面积与质量浓度的线性关系良好(r=0.999 7)。顺铂含量测定的加样回收率平均值为99.78%,RSD小于2%。测得γ-聚谷氨酸-柠檬酸-顺铂复合物中顺铂含量约为26%200μg·mL-1范围内,其色谱峰面积与质量浓度的线性关系良好(r=0.999 7)。顺铂含量测定的加样回收率平均值为99.78%,RSD小于2%。测得γ-聚谷氨酸-柠檬酸-顺铂复合物中顺铂含量约为26%²8%。结论该法灵敏度高、专属性强、可用于γ-聚谷氨酸-柠檬酸-顺铂复合物中顺铂的含量测定。     

脂多糖通过调节iNOS表达影响人卵巢癌SKOV3/DDP细胞顺铂耐药性的研究

目的观察脂多糖诱导的SKOV3/DDP细胞内分泌型一氧化氮合酶(iNOS)表达变化对人卵巢癌SKOV3/DDP细胞株顺铂耐药性的影响,并初步探讨机制。方法体外培养SKOV3/DDP细胞,分为对照组、顺铂组、脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)组和联合用药组共4组,对照组给予常规不加血清培养基,顺铂组给予10μg/ml顺铂,LPS组给予浓度为1μg/ml的LPS,联合用药组给予10μg/ml顺铂和1μg/ml LPS,均作用24 h。MTT法检测各组细胞活力;蛋白免疫印迹法观察各组iNOS表达;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;间接免疫荧光法观察各组细胞激活型Caspase-3表达。结果联合用药组细胞活力明显低于顺铂组(P0.05);顺铂组与对照组iNOS表达差异无统计学意义(P0.05),LPS组和联合用药组iNOS表达水平明显高于对照组(P0.05),且联合用药组高于LPS组(P0.05);流式细胞术结果显示联合用药组细胞凋亡率明显高于顺铂组(P0.05),且通过间接免疫荧光法显示联合用药组细胞激活型Caspase-3表达高于顺铂组(P0.05)。结论 LPS能够降低人卵巢癌SKOV3/DDP细胞顺铂耐药性,这可能与其提高SKOV3/DDP细胞内iNOS表达水平有关。     

米非司酮配伍顺铂对卵巢癌耐药细胞株CAOV3/DDP细胞凋亡和性激素受体的影响

目的 探讨米非司酮配伍顺铂对卵巢癌耐药细胞株CAOV3/DDP增敏作用以及凋亡率、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的影响.方法 采用RPMIl640培养液时CAOV3/DDP细胞株进行培养,将CAOU3/DDP细胞株分5组:对照组(不加任何药物)、顺铂组(2μg/ml)、高剂量米非司酮加顺铂组(15μg/ml米非司酮和2μg/ml顺铂)、中剂量米非司酮加顺铂组(10μg/ml米非司酮和2μg/ml顺铂)、低剂量米非司酮加顺铂组(5μg/ml米非司酮和2μg/ml顺铂).培养结束后采用MTT法观察不同浓度的米非司酮配伍顺铂对CAOV3/DDP细胞株增殖活力的影响;采用流式细胞术观察不同浓度的米非司酮配伍顺铂对CAOV3/DDP细胞株凋亡率、ER、PR的影响.结果 与对照组比较,顺铂组对细胞增殖活力、细胞凋亡率以及ER、PR阳性率的影响,差异均无统计学意义(P>0.05);与顺铂组比较,各剂量米非司酮加顺铂组对细胞增殖活力、生存率以及细胞凋亡率、PR阳性率的影响,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),且随着米非司酮浓度的升高,对CAOV3/DDP细胞抑制作用逐渐增强,细胞凋亡率显著上升,PR阳性率下降(P<0.05,P<0.01),各组ER阳性率无统计学意义(P>0.05).结论 米非司酮联合顺铂对CAOV3/DDP细胞增殖活力均具有显著抑制作用,且与米非司酮的浓度呈剂量依赖关系,米非司酮可提高顺铂化疗的敏感性,其增敏作用与抑制孕激素分泌,促进卵巢癌细胞凋亡有关     

高效液相色谱法测定顺铂注射液的含量

目的采用高效液相色谱法测定顺铂注射液中顺铂的含量。方法以Hypersil NH2 色谱柱 ,0 .1%NaCl溶液为流动相 ,流速为 0 .8ml/min ,顺铂和反铂的保留时间分别为 3.37和 5 .5 1min ,检测波长为 2 10nm、最低检测限为 6ng。结果标准曲线的线性范围为 10 0 .0 4～ 30 0 .12 μg/ml(r=0 .9997) ,方法回收率为 99.0 7% ,RSD为 0 .5 4 %。结论此法可用于直接测定顺铂注射液中顺铂的含量     

反相高效液相色谱法测定奥沙利铂的含量

目的:建立奥沙利铂反相高效液相色谱(RP-HPLC)含量测定方法。方法:采用RP-HPLC测定奥沙利铂的含量,色谱柱:kromasil C18柱(150mm×4.6mm),检测波长250nm。流动相:甲醇-水(5:95),流速:1.0ml/min。结果:本法线性范围为20μg/ml-100μg/ml,r=0.9999。日内和日间精密度RSD分别为0.71％和0.97％(n=5)。平均回收率为99.82％,RSD为0.89％。结论:该测定方法专属性强,操作简便,准确度高,精密度高,可作为奥沙利铂的含量测定方法,以控制其原料及制剂的质量。     

复合应用紫杉醇和顺铂对胃癌细胞SGC放疗的增敏作用

目的观察紫杉醇、顺铂及两者联合应用加放疗对胃癌细胞株SGC的细胞增殖与细胞周期的影响。方法将体外培养的胃癌细胞株SGC种于96孔板。实验分为P1组(紫杉醇0.1μg/ml)、P2组(紫杉醇0.01μg/ml)、C1组(顺铂0.1μg/ml)、C2组(顺铂0.01μg/ml)、PC1组(紫杉醇0.1μg/ml+顺铂0.1μg/ml)、PC2组(紫杉醇0.01μg/ml+顺铂0.01μg/ml)。无菌环境下实施4Gy照射。采用MTT法观察SGC细胞增殖抑制率;以流式细胞技术检测细胞凋亡及周期变化。结果 PC1组和PC2组胃癌SGC细胞抑制率分别为(76.6±7.7)%和(68.3±2.6)%,明显高于P1组的(46.7±4.5)%、P2组的(39.2±5.3)%、C1组的(41.4±0.2)%和C2组的(25.6±1.3)%(P<0.01)。联合应用紫杉醇和顺铂加放疗组的胃癌SGC细胞主要阻滞在G2/M期;而对照组的多数细胞处于G1期(P<0.05)。结论紫杉醇复合顺铂密集化疗对离体胃癌细胞放疗有明显增敏作用。     

高效液相色谱法测定人血清中马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ的含量

目的建立以高效液相色谱法测定人血清中马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ含量的方法。方法色谱柱为C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(72∶27∶1),检测波长为250nm,流速为1.0ml/min。结果马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ检测浓度线性范围分别为0.84~13.50μg/ml(r=0.9997,n=5)、2.03~32.50μg/ml(r=0.9994,n=5),最低检测浓度分别为0.3、0.1μg/ml。结论本方法简便、易行,可为临床诊治马兜铃酸肾病提供依据。     

顺铂氯化钠注射液有关物质检查方法研究

目的:建立顺铂氯化钠注射液中有关物质的检查方法.方法:采用高效液相色谱法(HPLC法),色谱柱为NH2柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(75:25),流速为1.2 mL/min;检测波长为210 nm.结果:最低检出量为2 ng,RSD=0.25%.结论:HPLC法操作简便、结果准确,可用于顺铂氯化钠注射液中有关物质的检测.     

反相HPLC法测定血清中卡波铂浓度

建立了人血清中卡波铂的反相 HPLC 测定法。固定相为 Shim-pack CLC-ODS 柱,重蒸馏水作流动相,检测波长229 nm。卡波铂平均绝对回收率为99.61%,日内和日间平均变异系数分别为4.18%和5.23%。最低检出浓度0.05μg/ml,线性范围0.1～100μg/ml(r=0.9999)。     

阿司匹林双嘧达莫片中有效成分含量及游离水杨酸限量研究

目的 建立同时测定阿司匹林双嘧达莫片中有效成分含量及游离水杨酸限量的方法。方法 采用HPLC法,色谱柱为Waters XBridge C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.2%磷酸水溶液-乙腈（79∶21）,流速1.0 ml/min,检测波长288 nm,柱温30℃。结果 双嘧达莫的线性范围为10～160μg/ml (r=0.999 8),平均回收率为100.59%(n=6);阿司匹林的线性范围为25～400μg/ml(r=0.999 9),平均回收率为99.92%(n=6);水杨酸的线性范围为10～80μg/ml(r=0.999 5),平均回收率为99.69%(n=6)。结论 所建方法简便、准确、可同时测定阿司匹林双嘧达莫片中有效成分含量及游离水杨酸限量。     

高效液相色谱法测定人血浆中加替沙星浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血浆中加替沙星浓度的方法。方法:色谱柱为C18,流动相为乙腈-30mmol/L醋酸铵-三乙胺-磷酸(20∶80∶1.0∶0.7),流速为1.0ml/min,检测波长为294nm。结果:加替沙星检测浓度在0.1～10.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9992),最低检测浓度为0.05μg/ml;高、中、低系列浓度的日内RSD<8%,日间RSD<10%;平均回收率为(101.67±3.06)%。结论:本方法操作简便、灵敏、准确,适用于加替沙星的血药浓度监测及其药动学研究。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中二甲胺四环素浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法测定人血浆中二甲胺四环素浓度的方法。方法:色谱柱为C18,流动相为乙腈-水-三氟乙酸(15∶85∶0.1),内标为土霉素,检测波长为350nm,血样在pH=6.5缓冲液条件下用乙酸乙酯提取,以二甲胺四环素与内标的峰面积比进行定量。结果:二甲胺四环素检测浓度线性范围为0.05～8μg/ml(r=0.9999),最低检测浓度为0.02μg/ml,平均回收率为101.89%,日内、日间相对标准差均小于5%。结论:本方法简便、快速、灵敏,可用于二甲胺四环素药动学研究。     

高效液相色谱法同时测定复方对乙酰氨基酚片中3组分的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定复方对乙酰氨基酚片中对乙酰氨基酚、咖啡因、阿司匹林含量的方法。方法:色谱柱为ODS,流动相为甲醇-4.2%的冰醋酸溶液(3∶7),流速为1.0ml/min,检测波长为275nm,进样量为20μl,柱温为25℃。结果:对乙酰氨基酚、咖啡因、阿司匹林的线性范围分别为16.08～428.80μg/ml(r=0.9981)、3.42～91.20μg/ml(r=0.9988)、23.87～769.92μg/ml(r=0.9999),平均回收率分别为99.2%(RSD=0.23%)、100.4%(RSD=0.63%)、99.3%(RSD=0.11%)。结论:本方法简便、快速、准确,可用于复方对乙酰氨基酚片的含量测定。     

高效液相色谱法测定妇血康颗粒中原儿茶酸的含量

目的建立以高效液相色谱法测定妇血康颗粒中原儿茶酸含量的方法。方法色谱柱为HypersilC18,流动相为甲醇-水(10∶90),流速为1.0ml/min,柱温为室温,检测波长为256nm,进样量为20μl。结果原儿茶酸检测浓度在10.2~306.0μg/ml范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为99.6%(RSD=1.7%)。结论本方法准确、重现性好,可用于本品的含量测定与质量控制。     

高效液相色谱法测定人血浆中头孢克肟浓度

目的 :建立以高效液相色谱法测定头孢克肟血药浓度的方法。方法 :以DiscoveryC18(250mm×4 6mm ,5μm )为分析柱 ,甲醇 -醋酸盐缓冲液 -三乙胺 (28∶72∶0 5)为流动相 ,检测波长为286nm ,流速为1 0ml/min ,头孢拉定为内标物 ,测定头孢克肟血药浓度。结果 :头孢克肟在0 1～5 0μg/ml检测浓度范围内呈良好线性关系 (r=0 9995) ;高、中、低3种浓度的日间RSD≤6 69 %、日内RSD≤6 10 % ;相对回收率为 (96 63±3 17) %。结论 :该方法操作简便、灵敏、准确 ,适用于临床头孢克肟的血药浓度测定及药动学研究     

高效液相色谱法测定血浆及尿中氯霉素的含量

采用高效液相色谱法,以非那西汀为内标物在λ_(max)=278nm下,研究了血浆及尿中氯霉素的含量。本法测定结果:保留时间:氯霉素7 min,非那西汀11min;最低检测浓度:血样为52.3%μg/ml,尿样为37μg/ml;平均回收率:血样为100.5%,尿样为99.7%;线性范围:血样及尿样均为5～50μg/ml;日内变异系数:血样在1.10%以下,尿样在1.19%以下;日间变异系数:血样在5.3%以下,尿样在5.9%以下;新诺明等药物对测定无干扰。     

高效液相色谱法测定人体5-氟尿嘧啶血药浓度

目的 :以高效液相色谱法测定人血浆中5 -氟尿嘧啶的浓度。方法 :用硫酸铵作为蛋白沉淀剂 ,血浆样品用乙酸乙酯 -异丙醇(85∶15 ,V/V )提取 ,氮气吹干 ,残留物用流动相溶解后进样。色谱柱为DiamonsilC18 柱 (4 6mm×150mm ,5μm ) ,流动相为0 01mol/LKH2PO4(pH5 5) ,流速1 5ml/min ,紫外检测波长267nm ,5 -溴尿嘧啶为内标。结果 :本法最低检测浓度为0 025μg/ml ,线性范围为0 3～10μg/ml ,日内RSD≤5 0 % (n=5) ,日间RSD≤11 5 % (n=5)。结论 :本法简便、灵敏、经济 ,可作为5 -氟尿嘧啶药代动力学研究时血药浓度的测定方法。     

高效液相色谱法同时测定复方氯霉素滴耳液中2组分的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定复方氯霉素滴耳液中氯霉素和呋喃西林含量的方法。方法:色谱柱为TianheKromasil C18,流动相为甲醇-水(60∶40),流速为1·0ml/min,内标为地塞米松,检测波长为278nm,柱温为25℃,进样量为20μl。结果:氯霉素、呋喃西林检测浓度分别在31·75~127、26·25~105μg/ml范围内与峰面积积分值线性关系良好,平均加样回收率分别为100·4%(RSD=0·89%)、100·7%(RSD=1·20%)。结论:本方法操作简便,结果准确、可靠,可用于本品质量控制。     

高效液相色谱法测定人血浆中氟脲脱氧核苷的浓度

目的建立高效液相色谱 (HPLC)法测定血浆样品中氟脲脱氧核苷 (FUDR)的方法。方法采用Nova pakC18色谱柱 ,0 .0 5mol/L磷酸二氢钠 甲醇 水 (0 .5∶7∶92 .5 )为流动相 ,检测波长 2 6 0nm ;用乙酸乙酯提取。结果在 0 .0 99～ 2 0 .0 μg/ml血药浓度范围内线性关系良好 ,r =0 .9994,三种浓度 (0 .2 3、1.6 7、2 0 .0 μg/ml)的回收率分别为 96 .4%、96 .5 %、97.8% (n =5 ) ;日内、日间RSD分别为 1.6 1%、1.98%、3 .17%和 3.5 6 %、1.90 %、2 .6 3 %。结论此法灵敏、准确 ,可用于FUDR的血药浓度监测