人血管能抑素抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤生长、转移及血管新生

目的:探讨人血管能抑素(canstatin)对小鼠Lewis肺癌移植瘤生长、转移和血管新生的影响.方法:将pCMV-Script/canstatin及空载体pCMV-Script通过电穿孔的方法转染A549细胞,G418筛选获得阳性克隆.RT-PCR检测转染后细胞中canstatin mRNA的表达,Western blotting检测转染后细胞中canstatin蛋白的表达.建立Lewis肺癌小鼠移植瘤模型,观察pCMV-Script/canstatin组A549细胞培养上清对小鼠Lewis肺癌移植瘤的治疗作用,免疫组化检测各治疗组荷瘤小鼠移植瘤的微血管密度.结果:pCMV-Script/canstatin转染A549细胞在G418筛选后成功形成克隆,转染的A549细胞能有效表达canstatin mRNA和蛋白.pCMV - Script/canstatin治疗组小鼠肿瘤体积明显小于pCMV-Script组和NS组[(1.47 ±0.21)cm3 vs(2.43 ±0.15) cm3、(2.53 ±0.18) cm3,P ＜0.01);pCMV-Script/canstatin组、pCMV - Script组和NS组的肺转移结节数分别为(3.00±1.00)、(7.80±1.48)、(7.60 ±2.41)个,pCMV-Script/canstatin组肿瘤转移受到显著的抑制(P＜0.01);pCMV-Script/canstatin组小鼠的肿瘤组织微血管数明显少于pCMV-Script组和NS组[(84.40 ±8.83) vs (188.68 ±11.15)、(190.24±12.91)个,P＜0.01].结论:pCMV-Script/canstatin能在A549细胞中表达并分泌至细胞外,canstatin可明显抑制Lewis肺癌移植瘤的生长、转移和血管新生.     

血管抑素与肿瘤的抗血管生成治疗

血管抑制是一种新发现的特异的血管内皮细胞增殖抑制剂，对肿瘤血管形成具有强烈的抑制作用，是非常有效的抗肿瘤血管形成抑制因子，可能在血管生成调控中起重要的作用。     

血管抑素、内皮抑素与肺癌关系的研究进展

为了解癌症发生和转移的机理 ,近一个世纪以来 ,人们进行了多方面的研究。早在 1945年 ,Ａｌｇｉｒｅ就提出了肿瘤血管形成的概念 ,实体肿瘤形成后即进入无血管的浸润前期 ,此时肿瘤结节很少能长到 2～ 3ｍｍ3 ,细胞数亦在 10 7以内。但一旦肿瘤出现血管形成 ,即迅速生长[1] 。在 70年代早期 ,Ｆｏｌｋｍａｎ又提出一种假说 ,即肿瘤生长和转移依赖于肿瘤血管形成 ,抑制其血管形成能够控制其生长和转移。但这一假说直到 90年代才由许多实验研究所证实[2 ] 。长时间以来 ,晚期恶性肿瘤患者的治疗主要依靠传统的化学药物治疗方法 ,并主要针对的…     

重组人血管内皮抑素联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌

目的　观察重组人血管内皮抑素（恩度）联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）的疗效及安全性。方法　１１例复治的晚期ＮＳＣＬＣ患者,接受恩度联合化疗治疗。恩度１５ｍｇ／天,连续１４天给药,间歇７天重复;同时,联合既往未使用或既往治疗病灶稳定的化疗药物。２１天为１周期,２周期评价疗效。结果　本组１１例患者均可评价客观疗效和毒副反应。有效率（ＲＲ）为１８.１８％,疾病控制率（ＤＣＲ）为８１.８２％;生活质量（ＱＯＬ）改善者４例（３６.４％）,稳定者５例（４５.４％）,下降２例（１８.２％）。主要毒副反应与化疗药物有关,包括白细胞减少２例（１８.１８％）,恶心呕吐２例（１８.１８％）。与恩度有关的心脏毒副反应１例（９％）,主要表现为疲乏感。出现皮肤一过性斑丘疹１例（９％）。结论　恩度联合化疗治疗晚期ＮＳＣＬＣ可以改善和稳定患者的生活质量,恩度与部分化疗药物有协同作用,安全性好。     

血管能抑素的应用及研究进展

血管能抑素是继血管生成抑制素、内皮抑素之后新发现的一种血管生成和肿瘤生长抑制因子。动物实验研究结果显示,血管能抑素通过抑制血管生成、阻断肿瘤生长的营养供应,从而抑制了多种肿瘤细胞的生长和转移。近年来因其具有良好的抗肿瘤血管生成活性而倍受关注,成为抗肿瘤治疗研究的新热点之一。本文就其作用机制尤其是在肿瘤治疗中的应用现状及研究进展进行综述和展望。     

血管内皮抑素的研究进展

研究表明肿瘤的形成、生长、浸润和转移的关键是肿瘤的血管化.肿瘤生长到一定体积时必然伴随着肿瘤血管新生,如果没有血管新生,大部分肿瘤则处于休眠状态.1971年,Folkman[1]最早提出肿瘤生长是血管依赖性的,他认为肿瘤血管生成是肿瘤生长和转移的形态学基础.     

动态增强磁共振评价重组人血管内皮抑素抑制人肺癌裸鼠皮下移植瘤的血管生成

目的　探讨动态增强磁共振（ＤＣＥ-ＭＲＩ）评价重组人血管内皮抑素（恩度）抑制人ＮＣＩ-Ｈ４６０肺癌裸鼠皮下移植瘤血管生成的可行性。方法　１０只人ＮＣＩ-Ｈ４６０肺癌荷瘤裸鼠,随机分为对照组和实验组,每组各５只。肿瘤接种第１０天开始给药,实验组每日腹腔注射恩度０.２ｍｌ,对照组每日腹腔注射生理盐水０.２ｍｌ。连续给药７天后行ＤＣＥ-ＭＲＩ扫描,扫描结束后剖取肿瘤组织行ＣＤ３４免疫组化染色。结果　实验组肿瘤体积为（０.２４９±０.１３８）ｃｍ^３,小于对照组的（０.４４８±０.０９６）ｃｍ^３,差异有统计学意义（Ｐ＝０.０３２）。实验组Ｋｔｒａｎｓ、Ｋｅｐ、Ｖｅ及ｉＡＵＣ均值分别为（０.０５２±０.０１５）／ｍｉｎ、（０.３３４±０.１１１）／ｍｉｎ、０.２８０±０.１９１和１１.９１２±７.７３８,均小于对照组（０.１４９±０.０２６）／ｍｉｎ、（０.４７８±０.２９４）／ｍｉｎ、０.５５８±０.０５２和３６.４６３±１２.５３４,其中Ｋｔｒａｎｓ、Ｖｅ和ｉＡＵＣ两组差异有统计学意义（Ｐ＜００５）。实验组微血管密度（ＭＶＤ）计数为（１１.３６±４.５７）条／高倍视野,明显低于对照组的（２０.４４±３.４６）条／高倍视野（Ｐ＜０.０５）。结论　抗肿瘤血管生成药物恩度对裸鼠肺癌皮下移植瘤具有良好的抑瘤作用,ＤＣＥ-ＭＲＩ是评价肿瘤血管生成及抗血管生成药物疗效的一种有效手段。     

重组人血管内皮抑素靶向治疗晚期非小细胞肺癌的临床研究

背景与目的 晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)化疗处于瓶颈,抗血管靶向治疗逐渐显示优势.本文研究重组人血管内皮抑素(rh-Endostin,恩度YH-16)联合化疗靶向治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效、毒性反应和对生活质量的影响.方法 62例晚期非小细胞肺癌患者随机分为2组:血管内皮抑素组32例采用重组人血管内皮抑素加一线化疗方案,对照组30例仅选用一线化疗方案.2个周期后评价近期临床有效率、临床受益率以及生活质量的改善程度,同时观察毒副作用.结果 血管内皮抑素组临床有效率为46.87%,临床受益率为81.25%,而对照组分别为26.66%和53.33%.两组有效率尚不具有统计学意义(χ2=1.912,P=0.166),但两组受益率差异明显,具有统计学意义(χ2=4.3185,P=0.0377).对照组和血管内皮抑素组进行治疗后生活质最(QoL)均有所改善,血管内皮抑素组则更为明显,二者相比差异具有统计学意义(χ2=11.233,P=0.008).治疗后患者所发生的毒性反应为恶心、呕吐,骨髓抑制,周围神经毒性,主要为化疗所致的副反应,两组在这些方面差异尤统计学意义(P>0.05).血管内皮抑素组有3例感觉心前胸不适,出现心电图改变,表现为ST-T轻微下移,给予对症.冶疗后消失,但两组比较差异无统计学意义(χ2=1.2701,P=0.2597).结论 血管内皮抑素未增加化疗的毒副作用,临床应用安全,耐受性良好;血管内皮抑素联合化疗药物对晚期NSCLC具有较好的疗效,尤其在改善病人生存质量方面具有优势.     

重组人血管内皮抑素联合化疗治疗非小细胞肺癌的观察与护理

内皮抑素（endostatin,ES）为内源性抗血管生成因子,特异性地作用于内皮细胞,尤其是微血管的内皮细胞,抑制其迁移,诱导其凋亡,从而抑制血管生成和肿瘤生长,近年来已成为肿瘤治疗的新策略。2006年7月我国国家食品药品监督管理局正式批准重组人血管内皮抑制素（商品名：恩度）上市,成为世界上第一个血管内皮抑制素抗肿瘤新药。我院自2006年9月至今对36例非小细胞肺癌患者使用重组人血管内皮抑制素注射液联合化疗治疗,     

重组人血管内皮抑素治疗非小细胞肺癌的研究进展

重组人血管内皮抑素(恩度)作为一种新型靶向治疗药物,既可以诱导血管内皮细胞凋亡,破坏肿瘤血管结构,又可以促进细胞周期阻滞,抑制肿瘤生长.鉴于这一特点,恩度已经被广泛应用于非小细胞肺癌的治疗.本文主要针对恩度治疗非小细胞肺癌的作用机制、临床效果、疗效评价等作一综述.     

Canstatin分泌增强体系的建立及其抗肺癌作用

目的:评估canstatin分泌增强体系在不同氧条件下的生物学效应,观察其对裸鼠肺癌模型的抗肿瘤作用。方法:基因重组技术构建canstatin分泌型载体,将其转染肿瘤细胞观察其在不同氧条件下的canstatin mRNA表达量,稳定转染的肺癌细胞与人脐静脉内皮细胞混合培养,观察混合培养对内皮细胞增殖、凋亡的效应。建立裸鼠肺癌移植瘤模型,将此体系转染荷瘤裸鼠,观察其对裸鼠移植瘤血管生成的作用,及肿瘤体积重量等指标,评估其抗肺癌效果。结果:成功构建canstatin缺氧增强分泌体系。缺氧条件下其转染的肺腺癌A549细胞canstatin mR-NA的表达显著增加。其稳定转染的A549细胞与人脐静脉内皮细胞HUVEC混合培养可使HUVEC生长增殖缓慢并大量凋亡,此体系转染的裸鼠移植瘤生长缓慢,瘤重、瘤体积及血管生成均显著低于对照组。(P<0.01)。结论:canstatin分泌增强体系在缺氧条件下能显著增加目的基因表达量及其生物学效应,并具有显著抑制肺癌生长和血管生成的作用。     

溶瘤性腺病毒携带canstatin基因对肺癌A549细胞小鼠移植瘤的抑制作用

目的:研究溶瘤性腺病毒介导的canstatin基因表达对A549细胞的抑制作用。方法:将构建的溶瘤性腺病毒载体CRAd-canstatin感染A549细胞。Western blot方法鉴定canstatin基因在A549细胞中的表达;结晶紫染色法和MTT法检测重组病毒体外对细胞的生长抑制作用;将腺病毒注射入荷瘤的裸鼠体内,通过测量肿瘤体积,形态学观察等方法验证CRAd-canstatin对肿瘤的抑制效果。结果:体外结果显示腺病毒介导的canstatin基因在A549细胞中有效表达。体内结果显示相比对照组而言,肿瘤体积明显缩小。结论:初步的实验表明溶瘤性腺病毒介导的CRAd-canstatin基因有望用于肺癌细胞的治疗。     

Canstatin与tumstatin抑制甲状腺癌细胞SW579迁移的机制研究

目的:研究canstatin与tumstatin对甲状腺癌SW579细胞迁移的影响及其机制.方法:利用MTT实验和划痕实验检测SW579细胞增殖和迁移.Western blot技术检测运动相关蛋白的变化.结果:Canstatin与tumstatin可以明显抑制SW579细胞增殖和迁移.Canstatin与tumstatin处理后细胞的MMP 3、9和12蛋白水平明显下降.在canstatin作用下Wave2蛋白含量下降,而tumstatin没有类似作用.结论:Canstatin与tumstatin通过抑制MMP 3、9和12蛋白水平导致SW579细胞运动减弱.     

腺病毒介导多基因在肺癌细胞中的表达及致凋亡效应

目的:观察重组腺病毒介导入野生型p53,B7-1和GM-CSF基因在肺癌细胞中的表达及致调亡效应.方法:以复制缺陷型重组腺病毒为载体,将入野生型P53,B7-1和GM-CSF基因导入肺癌细胞,分别以免疫组织化学法、流式细胞分析法和ELJSA法检测了外源基因在肺癌细胞中的表达,通过苔盼蓝染色后计数活细胞数绘制细胞生长曲线,末端标记法检出细胞凋亡.结果:观察到重组腺病毒分导的多种外源基因均可在肺癌细胞中高效表达,并可明显抑制肺癌细胞增殖并诱导其凋亡.结论:以上工作为进一步开展肺癌的多基因治疗打下了基础.     

Studies on Lung Cancer Angiogenesis-Application of Interventional Therapy （A Report of 56 Cases）

OBJECTIVE To investigate the significance of angiogenesis of lung cancer, in order to provide a scientific basis for interventional therapy. METHODS Double-phase enhancement-scanning spiral CT and DSA were performed in 56 pathologically confirmed lung cancer cases, in order to evaluate angiogenesis of the tumors. The patients included 36 males and 20 females, with ages ranging from 33 to 76 years （average of 53）. Assessments and indexes for SCT and DSA examinations were as follows： a） Peak value （PV） of the cancerous focus was the difference between the maximum CT value after enhancement and the CT value of a plain scan; b） The abnormally distorted and expanded new vessels of the cancerous focus which could be macroscopically discriminated; c） DSA staining of the focus of cancer was sparse, grid-like and dense. Chemotherapy and embolotherapy via the bronchial artery （interventional therapy） were conducted. Radiotherapy was added for some of the solid tumors with a diameter exceeding 4 cm. RESULTS a） There were 25 cases with a central-type lesion, among which 4 were small cell lung cancers （SCLC） and 21 non-small cell lung cancers （NSCLC）. The cases with a peripheral location accounted for 31 of the total, with a maximum diameter of 1.5 to 13.5 cm and a median of 4.2 cm, including 5 small cell lung cancers and 26 NSCLC cases, b） The reinforced PVs of the cancerous foci were as follows： The PV ranged from 45 to 70 Hu in 34 cases, 25 to 45 Hu in 19, and 10 to 25 Hu in 3. Sparse DSA staining occurred in 3 cases, there was uneven grid-like staining in 22 and dense staining in 31; c） The interventional therapy via the bronchial artery was conducted twice in 5 cases with the SCLC, and three times in 4 SCLC cases. For 3 of the latter cases, a dose of 5,000 to 7,000 cGy radiation therapy was added during the interventional treatment. Complete remissions （CR） were seen in 88.9% of the cases （8/9） and partial remission （PR） in 11.1% （1/9）. Interventional therapy was conducted twice in 8 cases with NSCLC and three times in 30 with NSCLC and four times in 9 cases. Among the total cases, 13 received radiotherapy during interventional therapy, with a radiation dose of 5,000-7,000 cGy; The CR rate was 78.7% （37/47）, PR was 14.9% （7/47） and the rate of non-remission was 6.4% （3/47）. CONCLUSION Using imaging technology, analysis of angiogenesis of lung cancers was employed to accurately detect and quantify angiogenesis. This analysis was combined for interventional therapy, using embolizing agents and large doses of the anti-tumor drugs and angiogenesis inhibitors. The agents were selectively delivered into the tumor vessels to eliminate the primary tumor, in order to depress distant metastases and thus enhance the curative effect of the therapy.     

亚硒酸钠抗氧化作用与抑瘤效应的实验观察

人ｐ１６基因是最近发现的一种肿瘤抑制基因。ｐ１６蛋白作为一种细胞增殖的负调控因子，在恶性肿瘤发生发展中起重要作用。为了进一步探讨ｐ１６基因的抗肿瘤特性，我们通过运用分子克隆技术构建重组人ｐ１６基因表达载体（ｐｃＤＮＡ３－ｐ１６），并通过电穿孔方法将ｐ１６基因导入到人肺腺癌ＮＣＩ－Ｈ４６０细胞中，经Ｃ４１８筛选获得可稳定表达ｐ１６的人肺腺癌细胞，观察ｐ１６基因对人肺腺癌细胞周期的影响和细胞增殖的作用     

CANSTATIN, A ENDOGENOUS INHIBITOR OF ANGIOGENESIS AND TUMOR GROWTH

Canstatin is a novel inhibitor of angiogenesis and tumor growth, derived from the C-terminal globular non-collageneous (NCI) domain of the α2 chain of type Ⅳ collagen. It inhibits endothelial cell proliferation and migration in a dose-dependent manner, and induces endothelial cell apoptosis. In vivo experiments show that canstatin significantly inhibits solid tumor growth. The canstatin mediated inhibition of tumor is related to apoptosis. Canstatin- induced apoptosis is associated with phosphatidylinositol 3-kinase/Akt inhibition and is dependend upon signaling events transduced trough membrane death receptor.     

尿多酸肽对晚期非小细胞肺癌化疗患者免疫功能的影响

[目的]探讨尿多酸肽对晚期非小细胞肺癌患者的细胞免疫功能的影响.[方法]45例晚期非小细胞肺癌患者.单纯化疗组26例,采用NP(NVB DDP)方案化疗.尿多酸肽联合化疗组19例,NP方案化疗联合应用尿多酸肽静脉滴注4～8周.两组均于化疗前及化疗2周期后,采用流式细胞仪检测T细胞亚群.[结果]单纯化疗组化疗前、后CD3 、CD 4、CD 8以及CD 4/CD 8差异显著(P＜0.05),化疗后免疫功能明显下降.尿多酸肽联合化疗组治疗前、后CD 3、CD 4/CD8 无显著性差异(P＞0.05),免疫功能无明显变化.两组化疗后CD 3、CD 4以及CD 4/CD8 比较差异显著(P＜0.01),联合尿多酸肽组化疗后免疫功能明显高于单纯化疗组.[结论]晚期非小细胞肺癌患者普遍存在免疫功能紊乱和低下,化疗使细胞免疫功能进一步降低,尿多酸肽能促进化疗患者细胞免疫功能的恢复.     

非小细胞肺癌患者化疗对血清肿瘤标记物和一氧化氮的影响

[目的]观察MVP化疗方案治疗非小细胞肺癌 (NSCLC)对血清肿瘤标记物 (TM)癌胚抗原 (CEA)、CYFRA21_1、神经烯醇酶(NSE)和血清一氧化氮 (NO)的影响。[方法]84例诊断明确的NSCLC患者采用MVP(MMC、VDS、DDP)联合化疗 ,化疗前后测定血清TM(CEA、CYFRA21_1、NSE)和NO。[结果]CR0,PR36例 (42.9 % )、SD38例 (45.2% ),PD10例 (11.9% )。PR和SD组患者血清NO均较化疗前明显增高 (P<0.05～0.01) ,PD组有降低趋势 ,但统计学上无明显差异 (P>0.05)。PR和SD组患者血清CEA和CYFRA21_1均较化疗前明显降低 (P<0.05～0.01) ,PD组有增高趋势 ,但统计学上无明显差异 (P>0.05)。血清NSE则无明显改变 (P>0.05)。[结论]MVP化疗后有效者TM指标明显下降 ,血清NO则明显上升。血清TM和NO的变化有助于对肺癌患者疗效的评价。