MGMT基因甲基化水平与恶性胶质瘤细胞对烷化剂耐药性的相关性

目的探讨DNA修复蛋白6-O-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因甲基化状态与恶性胶质瘤细胞对烷化剂抗肿瘤药物耐药性的相关性。方法选择36例经手术后病理学检查确诊的恶性胶质瘤患者作为研究组,选取同期脑卒中患者10例作为对照组,比较两组患者术前、术后脑组织中的MGMT蛋白表达水平、MGMT甲基化状态差异,并分析MGMT甲基化与治疗效果的关系。结果研究组的MGMT蛋白表达阳性率显著高于对照组,去甲基化水平显著高于对照组(P<0.05)。有效组16例患者,无效组20例患者,有效组MGMT蛋白表达阳性率显著低于无效组,甲基化水平显著高于无效组(P<0.05)。Ⅲ级患者17例,Ⅳ级19例,两种不同病理分级患者的MGMT蛋白、MGMT启动子基因表达率上无差异(P>0.05)。MGMT蛋白表达阳性的20例患者中仅有3例甲基化表达(15%),MGMT蛋白表达阴性的16例患者中有14例甲基化表达(87.5%),MGMT蛋白表达与MGMT启动子基因甲基化状态具有关联性(χ2=18.747,P=0.000)。结论 MGMT蛋白表达与MGMT启动子基因甲基化状态呈负相关性,MGMT基因去甲基化状态会增加恶性胶质瘤细胞的耐药性。     

DNA-PKcs蛋白和MGMT蛋白在肝癌组织中的表达及意义

目的探讨DNA依赖蛋白激酶催化亚单位（DNA—PKcs）和O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）在肝癌发生、发展中的作用及临床应用价值。方法应用免疫组化方法检测DNA—PKcs蛋白和MGMT蛋白在68份肝癌组织（肝癌组）和10份正常肝脏组织（对照组）中的表达情况,采用X^2检验及Spearman秩和相关检验分析结果。结果肝癌组及对照组DNA—PKcs蛋白表达阳性率分别为85％和10％,MGMT蛋白表达阳性率分别为40％和90％（P均〈0．05）;两者表达具有负相关性（r=-0．475,P〈0．05）。结论DNA-PKcs和MGMT在肝癌发生、发展中起重要作用：有望作为肿瘤标记物、基因靶点等用于肝癌的诊治。     

MGMT和ERCC1在胃癌及癌前病变中的表达及意义

目的探讨DNA损伤修复基因产物O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）与切除修复交叉互补基因1（ERCC1）的表达,及其与胃癌发生及生物学行为的关系。方法采用免疫组化SP法检测MGMT和ER-CC1的表达情况,并与临床病理特征相比较。结果 MGMT蛋白在轻度异型增生胃黏膜的表达率高于早期胃癌及进展期胃癌,ERCC1在正常胃黏膜的表达率高于早期胃癌及进展期胃癌。MGMT表达与胃癌分化程度、淋巴结转移有关,ERCC1与分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关。胃癌中MGMT表达与ERCC1表达呈正相关。结论 MGMT、ERCC1可能在胃癌发生中起重要作用,有可能成为判断胃癌生物学行为的有用指标。     

MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化状态对脑胶质瘤预后的影响

目的探讨脑胶质瘤DNA修复基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）和错配修复基因（MMR）（hMLH1、hMSH2）启动子甲基化状态及其对患者预后和烷化剂化疗敏感性的影响。方法采用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测39例脑胶质瘤和6例正常脑组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区的甲基化状态,免疫组化方法测定其蛋白表达。绘制Kaplan-merier生存曲线。结果脑胶质瘤组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化发生率分别为46.2%、10.3%和20.5%,而正常脑组织相应基因启动子区未发生甲基化;三种基因启动子未甲基化模式与其对应蛋白表达模式相似。MGMT基因甲基化的脑胶质瘤患者存活率显著高于未甲基化者（P〈0.05）;MMR基因甲基化患者中MGMT基因甲基化与未甲基化者的生存期无统计学差异（P〉0.05）。结论hMLH1、hMSH2及MGMT甲基化是脑胶质瘤发生过程中常见的分子事件;联合检测MGMT、hMLH1和hM-SH2基因启动子甲基化状态可判断脑胶质瘤患者的预后及其对烷化剂化疗的敏感性。     

老年性大肠癌中MGMT的表达及临床意义

目的探讨MGMT在老年性大肠癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化方法（SABC法）检测13例正常大肠黏膜、28例大肠腺瘤和86例大肠癌标本中MGMT的表达情况。结果在正常黏膜组、腺瘤组和肠癌组中MGMT阳性率分别为7．69％、21．43％和54．65％，其中肠癌组和正常黏膜组、腺瘤组比较均有显著性差异（P〈0．05）；MGMT在有淋巴结转移组与无淋巴结转移组中阳性率比较差异显著（P〈0．05），在癌组织浸润深度达浆膜组和深肌层组比较也有显著性差异（P〈0．05），但MGMT在大肠癌中的表达与性别、部位和病理类型相关性不明显。结论MGMT在老年性大肠癌的发生中可能起重要作用，检测大肠癌组织中MGMT蛋白对指导治疗及评价预后有重要的临床意义。     

非小细胞肺癌DNA甲基转移酶及基因p53表达与预后的关系

目的 探讨DNA修复酶O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)及抑癌基因p53在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与预后的关系. 方法 采用免疫组织化学SP法检测110例NSCLC患者及20例肺部良性病变患者术后肺组织中MGMT及p53的表达,并观察110例NSCLC根治术后患者的生存期. 结果 110例NSCLC患者及20例肺良性病变患者组织中MGMT蛋白阳性表达率分别为41.8%(46/110)和80%(16/20),p.53蛋白的阳性表达率分别为56.4%(62/110)和0%(0/20)例,MGMT蛋白表达与淋巴结转移及吸烟史相关(x2值为12.107和6.512,均P<0.05),p53蛋白表达亦与淋巴结转移及吸烟史相关(X2值为6.330和7.909,均P<0.05),MGMT和p53蛋白表达呈负相关(Rs=-0.592,P<0.05).110例患者的5年生存率为10.9%(12/110),中位生存期为(30.4±0.6)个月;46例MGMT表达阳性的患者5年生存率为0%(0/110),中位生存期为(25.9±0.4)个月,均低于64例MGMT表达阴性患者的5年生存率(18.8%,12/64)和中位生存期[(32.4±0.7)个月],差异有统计学意义(x2=23.569,P<0.05).62例053表达阳性患者的5年生存率为4.8%(3/62),中位生存期为(30.4±1.2)个月,均低于48例p53表达阴性患者的5年生存率(18.8%,9/48)和中位生存期[(30.5±1.1)个月],差异有统计学意义(x2=5.521,P<0.05). 结论 NSCLC患者体内MGMT表达缺失可能与突变型p53的表达水平有关,且与肺癌的发生、发展及预后相关.     

非小细胞肺癌DNA甲基转移酶及基因p53表达与预后的关系

Objective To investigate the expression and role of O~6-methylguanine DNA methyltransferas(MGMT) and p53 in non-small cell lung cancer(NSCLc)and the association with prognosis. Methods Immunohistochemical method was used to investigate the expression of MGMT and p53 in NSCLC specimens from 110 cases and in 20 cages of benign lung diseases as the control.The association of their expression with the prognosis of the 110 patients was evaluated. Results The positive expression of MGMT in NSCLC and benign lung diseases was 41.8%(46/110)and 80%(16/20)(x2=9.89,P<0.05),respectively.The positive expression of p53 in NSCLC and benign lung diseases were 56.4%(62/110)and 0%(0/20)(x2=21.551,P<0.05),respectively.There was a significant association between expression of MGMT with smoking,and lymph node metastasis (x2=12.107,P<0.05;x2=6.512P<0.05).There was also a significant association between expression of p53 with smoking and lymph node metastasis(x2=6.330,P<0.05;x2=7.909,P<0.05).A negative correlation was observed between the expression of MGMT and that of p53 protein in NSCLC(R_S=-0.592,P<0.05).The 5-year survival rate and median survival time of 110 cages was 10.9%(12/110),and(30.4±0.6)months.In 46 cases with positive expression of MGMT the 5-year survival rate was 0%(0/110)and median survival was(25.9±0.4)months,which were lower than those in the 64 patients with negative expression of MGMT [18.8%(12/64),(32.4 ±0.7)months],Log rank test x2=23.569,P<0.05.in the 62 patients with positive expression of p53.the 5-year survival rate and modian survival were 4.8%(3/62)and(30.4±1.2)months,which were lower than those in the 48 cases with negative expression of p53[18.8%(9/48),(30. 5± 1.1 ) months], Log rank test X2 =5. 521, P <0. 05. Conclusion The loss of expression of MGMT may lead to activation of the wild-type p53. They may participate in lung carcinomatosis, and may predict prognosis in patients with NSCLC.     

非小细胞肺癌DNA甲基转移酶及基因p53表达与预后的关系

Objective To investigate the expression and role of O~6-methylguanine DNA methyltransferas(MGMT) and p53 in non-small cell lung cancer(NSCLc)and the association with prognosis. Methods Immunohistochemical method was used to investigate the expression of MGMT and p53 in NSCLC specimens from 110 cases and in 20 cages of benign lung diseases as the control.The association of their expression with the prognosis of the 110 patients was evaluated. Results The positive expression of MGMT in NSCLC and benign lung diseases was 41.8%(46/110)and 80%(16/20)(x2=9.89,P<0.05),respectively.The positive expression of p53 in NSCLC and benign lung diseases were 56.4%(62/110)and 0%(0/20)(x2=21.551,P<0.05),respectively.There was a significant association between expression of MGMT with smoking,and lymph node metastasis (x2=12.107,P<0.05;x2=6.512P<0.05).There was also a significant association between expression of p53 with smoking and lymph node metastasis(x2=6.330,P<0.05;x2=7.909,P<0.05).A negative correlation was observed between the expression of MGMT and that of p53 protein in NSCLC(R_S=-0.592,P<0.05).The 5-year survival rate and median survival time of 110 cages was 10.9%(12/110),and(30.4±0.6)months.In 46 cases with positive expression of MGMT the 5-year survival rate was 0%(0/110)and median survival was(25.9±0.4)months,which were lower than those in the 64 patients with negative expression of MGMT [18.8%(12/64),(32.4 ±0.7)months],Log rank test x2=23.569,P<0.05.in the 62 patients with positive expression of p53.the 5-year survival rate and modian survival were 4.8%(3/62)and(30.4±1.2)months,which were lower than those in the 48 cases with negative expression of p53[18.8%(9/48),(30. 5± 1.1 ) months], Log rank test X2 =5. 521, P <0. 05. Conclusion The loss of expression of MGMT may lead to activation of the wild-type p53. They may participate in lung carcinomatosis, and may predict prognosis in patients with NSCLC.     

亚砷酸钠对HaCaT细胞MGMT基因启动子区甲基化CpG结合蛋白-2、DNA甲基转移酶1、组蛋白去乙酰化酶1结合的影响

目的 观察亚砷酸钠(NaAsO2)对人肤角质形成细胞株(HaCaT细胞)MGMT基因启动子区甲基化CpG结合蛋白-2(MeCP2)、DNA甲基转移酶1(DNMT1)及组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)结合情况的影响,为深化阐释砷毒作用机制提供依据.方法 分别以0.00(空白对照)、3.13、6.25、12.50、25.00 μmol/L NaAsO2重复间隔处理HaCaT细胞72 h(NaAsO2处理24h,隔天再次相同处理,重复3次),以人表皮鳞癌细胞株(A431)作为阳性对照,定量染色质免疫共沉淀技术(Q-ChIP)检测MGMT基因转录调控区ChIP1、ChIP2区域及MGMT基因编码区ChIP3区域MeCP2、DNMT1、HDAC1结合情况.结果 各组HaCaT细胞MGMT基因转录调控区ChIP1、ChIP2区域MeCP2、DNMT1、HDAC1蛋白结合水平比较,差异有统计学意义(F值分别为7.387、84.634、78.442和19.263、69.649、26.546,P均＜0.05);其中各NaAsO2处理组ChIP1、ChIP2区域MeCP2、DNMT1、HDAC1蛋白结合水平[3.13 μmol/L NaAsO2处理组:(136.00±16.97)％、(145.00±2.83)％、(88.50±19.09)％和(106.50±37.48)％、(112.34±8.73)％、(59.71±8.49)％;6.25 μmol/L NaAsO2处理组:(130.00±42.43)％、(154.50±4.95)％、(101.00±1.27)％和(88.50±3.54)％、(134.32±2.82)％、(102.75±19.91)％;12.50 μmol/LNaAsO2处理组:(141.50±23.33)％、(161.50±7.78)％、(125.00±11.31)％和(119.50±24.75)％、(171.59±3.54)％、(167.61±10.61)％;25.00 μmol/NaAsO处理组:(134.50±43.13)％、(472.50±50.20)％、(383.50±30.41)％和(180.09±12.73)％、(348.50±27.58)％、(158.45±12.02)％]均高于空白对照组[(51.50±9.19)％、(82.00±12.73)％、(25.03±2.91)％和(37.02±4.24)％、(91.56±26.16)％、(19.09±2.90)％,P均＜0.05].各组HaCaT细胞MGMT基因编码区ChIP3区域MeCP2蛋白结合水平比较,差异无统计学意义(F=1.670,P＞0.05),而DNMT1、HDAC1蛋白结合水平比较,差异有统计学意义(F值分别为4.404、9.863,P均＜0.05),其中25.00 μmol/L NaAsO2处理组DNMT1、HDAC1蛋白结合水平[(615.85±29.63)％、(306.09±59.40)％]与空白对照组[(99.70±12.02)％、(92.45±48.79)％]比较,差异有统计学意义(P均＜0.05).结论 MeCP2可结合于砷所致高甲基化MGMT基因转录调控区,通过招募DNMT1及HDAC1使组蛋白去乙酰化,同时DNMT1可结合于MGMT基因编码区,以非甲基化DNA结合蛋白(MBD)依赖的方式招募HDAC1,通过染色质重塑方式导致MGMT基因沉默,可能是砷毒性表现的早期分子事件.     

粪便DNA甲基化分析在结直肠癌早期诊断中的价值

近年来,研究表明DNA甲基化改变与肿瘤的发生发展关系密切,有望用于恶性肿瘤的分子诊断。由于结直肠癌(CRC)组织持续脱落细胞到粪便中,因此检测粪便中CRC相关基因的甲基化状态有可能成为一条无创诊断CRC的新途径。增生性息肉蛋白基因(HPPI)是在结肠增生性息肉中     

人脑胶质瘤组织中耐药相关基因蛋白MGMT、Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp的表达变化及意义

目的观察人脑胶质瘤组织中耐药相关基因蛋白O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶（MGMT）、拓扑异构酶（Topo-Ⅱ）、谷胱甘肽转移酶（GST-π）、P-糖蛋白（P-gp）的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测330例人脑胶质瘤组织及20例正常脑组织中的MGMT、Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp蛋白。结果正常脑组织中MGMT、Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp均无表达,人脑胶质瘤组织中MGMT、Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp的阳性表达率分别为43.9%、24.3%、49.8%、48.2%;MGMT的表达与胶质瘤病理分级无关（P〉0.05）,Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp的表达与胶质瘤病理分级有关（P均〈0.05）。结论人脑胶质瘤组织中不同程度地表达耐药相关基因蛋白MGMT、Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp,可据此制订个体化的胶质瘤化疗方案。     

脑胶质瘤MGMT基因表达及启动子甲基化与患者临床预后关系的观察．

目的 探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）基因表达及启动子甲基化与脑胶质瘤患者临床预后的关系。方法 选取郑州大学人民医院神经外科2007年4月至2009年4月收治的同意接受脑胶质瘤个体化综合治疗且有完整病历资料的患者78例,根据脑胶质瘤MGMT基因表达及启动子甲基化情况分组,术后均采用同步放化疗,观察患者近期疗效、无进展生存时间及安全性,比较各组间疗效。两组间均数比较采用独立样本t检验,计数资料采用R×C表χ2检验,采用Kaplan-Meier方法绘制生存曲线,并采用Log-rank检验对其生存曲线进行分析。结果 MGMT基因启动子甲基化状态与MGMT蛋白表达呈负相关（r=-0.514,P〈0.05）。MGMT基因启动子甲基化组近期客观疗效明显优于MGMT基因启动子非甲基化组（χ2=47.890,P=0.000）;MGMT蛋白低表达组近期客观疗效明显优于MGMT蛋白高表达组（χ2=30.032,P=0.000）。MGMT基因启动子甲基化患者生存期明显长于非甲基化组（χ2=21.405,P〈0.05）,MGMT蛋白低表达患者生存期明显长于MGMT蛋白高表达组（χ2=18.643,P〈0.05）;MGMT基因启动子甲基化组客观有效率81.0%（34/42）优于MGMT蛋白低表达组74.4%（29/39）。患者均未出现明显不良反应。结论 脑胶质瘤MGMT基因表达及启动子甲基化与患者应用尼莫司汀＋替莫唑胺会师化疗同步适行放疗治疗预后密切相关,且MGMT甲基化对判断恶性胶质瘤患者预后吻合性更高,为临床制订有效的个体化疗方案提供参考。     

胶质瘤组织中多药耐药性相关蛋白的表达变化及意义

目的观察胶质瘤组织中耐药蛋白谷胱甘肽S转移酶π（GST-π）、O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）在胶质瘤组织中的表达变化,为临床制订个体化化疗方案提供依据。方法选取69例胶质瘤病理切片,采用免疫组化SP法检测GST-π、MGMT,分析其与胶质瘤病理级别的关系及两者表达的相关性。结果 69例胶质瘤组织中GST-π阳性表达率为72.46%（50/69）,其表达强度与病理分级呈正相关（r=0.374,P〈0.05）;MGMT阳性率为63.77%（44/69）,其表达强度与胶质瘤病理分级无关（P〉0.05）。GST-π与MGMT的表达无相关性（P〉0.05）。结论 GST-π的表达与胶质瘤恶性程度有关,MGMT与恶性程度无关。检测胶质瘤组织中GST-π、MGMT有利于指导临床进行个体化化疗。     

替莫唑胺应用于脑恶性胶质瘤的研究现状

替莫唑胺(TMZ)是一种新型的烷化剂,于1999年获美国FDA批准上市。随后,欧洲癌症治疗研究组织与加拿大国际癌症研究院(EORTC-NCIC)发布一项Ⅰ期研究显示,对于恶性脑胶质瘤患者,TMZ可提高其中位生存期。TMZ于2008年进入我国,     

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在食管癌患者的表达及临床意义

目的 探讨DNA修复蛋白O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)在老年食管癌患者的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学方法检测57例食管癌标本和20例正常食管组织中MGMT的表达,并分析其与临床病理特征之间的关系.结果 MGMT在食管癌表达的阳性率(49.1%)明显低于正常组织(85.0%,P＜0.01).侵及外膜层、有淋巴结转移、Ⅲ+Ⅳ期的食管癌患者MGMT阳性率明显低于未侵及外膜层、无淋巴结转移、Ⅰ+Ⅱ期患者(P＜0.05).MGMT在食管癌表达的阳性率在年龄、性别、分化程度、肿瘤部位组间无明显差异(P＞0.05).结论 MGMT在食管癌的表达与浸润深度、淋巴结转移和临床分期有关,可作为判断食管癌预后的指标.     

非小细胞肺癌患者血清O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶基因异常甲基化检测及其临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者血清中O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA-methyhransferase,MGMT)基因启动子区域甲基化的改变状况及其临床意义.方法 基因测序法检测62例NSCLC患者、30例肺部良性疾病患者和16例健康体检者血清中MGMT基因启动子区域甲基化状况,并分析其与临床特征的关系.结果 NSCLC患者血清MGMT基因甲基化检出率为27.42%(17/62),而肺部良性疾病患者和健康体检者血清未检出MGMT基因甲基化(Fisher精确概率法,P＜0.01).MGMT基因甲基化检出率与NSCLC患者年龄、性别、病理类型、分化程度无明显相关,但在晚期患者中检出率较高(P＜0.05).MGMT基因甲基化患者吸烟指数(年·支)明显高于非甲基化患者(P＜0.01).结论 MGMT基因异常甲基化可能在NSCLC发生、发展中起重要作用,有望成为NSCLC辅助诊断的分子标记.     

Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤组织中MGMT、TopoⅡα、P-gp的表达变化及意义

目的 观察Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤组织中O6甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)、拓扑异构酶Ⅱα (TopoⅡα)和P-糖蛋白(P-gp)的表达变化,并探讨其意义.方法 采用免疫组织化学法检测36例Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤、24例Ⅰ～Ⅱ级胶质瘤及10例正常脑组织中的MGMT、TopoⅡα及P-gp.结果 高级别胶质瘤组织中MGMT、TopoⅡα、P-gp阳性率分别为72.2%、50.0%、66.7%,Ⅰ～Ⅱ级胶质瘤中分别为29.2%、33.3%、25.0%,正常脑组织中分别为10%、0、0,三者两两比较,P均＜0.01.相关分析表明,Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤组织中MGMT与P-gp、TopoⅡα与P-gp有关,r分别为0.444、0.478.结论 高级别胶质瘤中MGMT、TopoⅡα、P-gp表达增高,可根据其表达情况制定个体化的化疗方案.     

Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤组织中MGMT、TopoIIa、P—gP的表达变化及意义

目的观察III～Ⅳ级胶质瘤组织中O 6甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）、拓扑异构酶Ⅱ仪（Topo11d）和P-糖蛋白（P-gp）的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组织化学法检测36例Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤、24例I～Ⅱ级胶质瘤及10例正常脑组织中的MGMT、Topo IIa及P—gp。结果高级别胶质瘤组织中MGMT、TopoIIa、P—gp阳性率分别为72．2％、50．0％、66．7％,I～Ⅱ级胶质瘤中分别为29．2％、33．3％、25．0％,正常脑组织中分别为10％、0、0,三者两两比较,P均〈0．01。相关分析表明,Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤组织中MGMT与P—gp、TopIIa与P—gp有关,r分别为0．444、0．478。结论高级别胶质瘤中MGMT、TopoIId、P—gp表达增高,可根据其表达情况制定个体化的化疗方案。