鸡胚成纤维细胞培养抗肿瘤NDV疫苗的实验研究

目的用细胞培养法研制高效价人用抗肿瘤NDV。方法采用鸡胚成纤维细胞低血清培养法,在接种NDV之前的细胞培养中,少量使用优质小牛血清（2%）,让单层细胞基本铺满培养瓶底时,用无血清培养液多次洗涤单层细胞,以尽量降低残余牛血清含量。接种NDV之后,以人白蛋白代替小牛血清继续滋养细胞,培养病毒。结果NDV收获液LogPFU≥5.5,血凝效价1：640,经反向间接血凝试验检测,残余牛血清蛋白含量≤50ng/ml。结论NDV效价和活性符合人用疫苗要求。     

新城疫病毒在鸡胚中增殖影响因素探讨

目的探讨新城疫病毒(NDV)Ⅱ系弱毒株在鸡胚内增殖产生血凝素的最佳条件。方法将NDV按一定浓度稀释接种到鸡胚内孵育48～72h,收获鸡胚尿囊液,测定血凝效价。结果选择9～11日龄鸡胚,种子病毒稀释10^-2～10^-3、接种剂量为0.2～0．3ml;在36℃培养48～72h时,其鸡胚尿囊液量多且血凝效价高。弱毒系产生的NDV血凝效价高于强毒系和C30克隆系病毒。鸡胚培养较鸡成纤维细胞培养产生的NDV血凝效价高。结论鸡胚的病毒接种量和孵育温度对NDV的血凝效价的影响很大,在研究NDV的血凝能力时应注意到这些问题。     

紫外线灭活新城疫病毒体外抗肿瘤作用的研究

目的比较新城疫病毒（NDV）和紫外线灭活的新城疫病毒（NDV-UV）在体外对肿瘤细胞的直接杀伤作用。方法用NDV和NDV-UV作用于喉癌细胞株Hep一2细胞，用MTT法测定病毒的杀瘤活性并测定培养上清液病毒的血凝效价。结果NDV和NDV-Uv对Hep一2细胞均有杀伤作用，且随着病毒与肿瘤细胞作用时间的延长，二者杀瘤率逐渐增强，病毒与细胞作用48h后。NDV对Hep一2细胞的杀伤作用较NDV-UV组强，NDV组可测出血凝效价，且随着病毒与细胞作用时间的延长，NDV组血凝效价逐渐升高，而NDV-UV组血凝效价始终未测出。结论NDV和NDV-UV能直接杀伤肿瘤细胞，NDV能在肿瘤细胞内复制并杀伤肿瘤细胞，而NDV-UV不能在肿瘤细胞内复制亦能杀伤肿瘤细胞，提示NDV的杀瘤作用并不完全依赖于病毒的复制，NDV-UV可作为安全有效的生物调节剂用于肿瘤的生物治疗。     

MTT法测定新城疫病毒对人肝癌细胞的抑制杀伤作用

目的 :研究新城疫病毒 (NDV)对人肝癌细胞株的作用。方法 :利用 MTT方法检测 NDV对人肝癌细胞株的杀伤性。结果 :NDV作用后的人肝癌细胞株的细胞活性比对照的细胞活性有显著下降 ,且 NDV血凝效价显著升高 ,表明 NDV能杀死肿瘤细胞。结论 :NDV能够直接杀死肿瘤细胞 ,可作为治疗肿瘤的一种新生物制剂。     

一种兔圆小囊抗菌肽对新城疫病毒抑制作用

目的观察兔圆小囊抗菌肽对鸡新城疫病毒强毒株有无抑制作用。方法将NDV用圆小囊抗菌肽处理后再接种9日龄鸡胚，测定鸡胚尿囊液中的NDV血凝效价，并观察鸡胚病变。结果与对照组比较，兔圆小囊抗菌肽使鸡胚尿囊液中新城疫病毒的血凝效价降低，同时还能抑制因以上新城疫病毒所引起的鸡胚病变。结论兔圆小囊抗菌肽在体外对鸡新城疫病毒强毒株具有抑制作用。     

流感病毒在MDCK细胞中分离与培养的影响因素

目的探求流感病毒在MDCK（狗肾细胞）中培养的影响因素。方法将流感病毒吸附接种于MDCK细胞,对一些因素（样本处理情况、吸咐和培养时间、血清浓度、胰酶浓度、接种量和传代次数等）进行比较。结果样本反复挤压,最佳收获病毒时间为72h;加牛血清白蛋白组分V和维持液中终浓度为2．5μg/ml的胰酶可明显提高细胞增殖病毒的血凝效价。结论通过对MDCK细胞培养与增毒的影响因素分析,明显提高流感病毒分离与增毒的效价。     

单纯疱疹病毒Ⅰ型在单层细胞培养中的增殖特征

目的：通过对HSV-1在BHK-2l单层细胞培养中的增殖特征的研究，得出获得较高病毒含量的条件，从而对基础研究以及今后即将开展的临床病毒培养进行指导。方法：使用不同滴度的HSV-1毒株接种不同浓度培养的BHK-2l单层细胞，病毒感染后用免疫荧光法及ELISA法检测病毒滴度，并绘制曲线。结果：在细胞传代时，较大浓度的细胞在长成单层细胞后对病毒敏感性较高，并随细胞浓度减少而逐渐下降，但如将病毒滴度控制在适当范围内，仍可得到较高的病毒含量。结论：如需获得较高滴度的病毒悬液，应将培养用单层细胞以较大浓度传代或使接种病毒滴度处于适当范围。     

人早孕蜕膜单层细胞与鼠胚共培养系统的建立

目的　获得鼠胚与人早孕蜕膜单层细胞的共培养系统。方法　经过细胞培养、传代获得蜕膜单层细胞 ;冻融后接种获得冻融蜕膜单层细胞 ;对单层细胞作免疫组织化学检查其雌、孕激素受体的表达。结果　人早孕蜕膜细胞有良好的体外培养活力 ,易于获得培养及传代。将获得的冻融蜕膜单层细胞进行雌、孕激素受体检查 ,见阳性表达。获得昆明白小鼠超促排卵后的单细胞受精卵 ,分别与传代及冻融的蜕膜细胞共培养获得囊胚孵出。结论　人早孕蜕膜单层细胞与鼠胚共培养系统的建立为人胚胎与其冻融的自体子宫内膜单层细胞共培养的研究提供了可行性分析。     

小牛血去蛋白提取物取代小牛血清培养K562细胞的研究

目的 评价小牛血去蛋白提取物（DECB）取代小牛血清培养K562的生长情况,从而分析DECB对白血病细胞生长方面的意义及其可能的作用机制.方法应用形态学、MTT分析法、流式细胞术对在低血清以及无血清条件下的白血病细胞进行检测和观察.结果人白血病K562细胞在DECB取代小牛血清的培养基中,细胞发生一系列形态学改变,DECB在一定范围内（0.2%～1%）对K562的增殖率有剂量和时间的依赖关系.结论DECB在一定范围内能够代替小牛血清在细胞培养过程中起作用,有利于细胞的生长与增殖.     

人芽囊原虫在RPMI1640培养基中培养条件的优化

目的优化人芽囊原虫(Blastocystishominis)在RPMI1640培养基中的培养条件。方法将B.hominis接种至RPMI1640培养基中,观察酸碱度、接种量、血清种类、浓度、温度、空气中氧与粪便标本的选择对B.hominis生长的影响。结果在RPMI1640培养基中,pH7.5、接种量200000细胞/管、20%小牛血清,37℃,加入青霉素、链霉素为最佳培养条件。结论在RPMI1640中,接种以B.hominis阳性(颗粒型为主)的血粘液便,加入20%小牛血清,青霉素、链霉素,在pH7.5于37℃条件下厌氧培养,每6d转种一次,可达到长期培养B.hominis的目的。