迷迭香酸对大鼠肾小球系膜细胞增殖中氧化应激及炎症介质分泌的影响

目的：观察PDGF—BB诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖过程中氧化与抗氧化系统的改变及炎症介质的分泌变化，并探讨迷迭香酸的干预作用。方法：培养大鼠系膜细胞，以PDGF刺激系膜细胞增殖及迷迭香酸干预。实验设正常对照组、增殖组、单纯迷迭香酸组和迷迭香酸干预组，利用分光法分别测定细胞上清液中超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量。应用双抗体夹心ELISA法检测培养上清液中TGF～β1，MCP～1及纤维连结蛋白的蛋白分泌量。结果：经PDGF—BB刺激系膜细胞后超氧化物歧化酶活性降低，丙二醛含量升高；而迷迭香酸干预能促进超氧化物歧化酶活性升高而降低丙二醛的产生。PDGF—BB（20ng／mL）同样刺激肾小球系膜细胞分泌TGF—β1与MCP-1，刺激GMC合成FN蛋白。RA则呈浓度依赖性地抑制肾小球系膜细胞中TGF-β1，MCP-1，FN蛋白分泌。结论：氧自由基、脂质过氧化及炎症介质参与了系膜细胞的增生，而迷迭香酸则能抑制系膜细胞的上述改变，具有抗氧化活性。同时在PDGF—BB诱导的肾小球系膜细胞增殖中，抑制肾球系膜细胞分泌TGF-β与MCP-1，并能抑制肾小球系膜细胞合成纤维连结蛋白。     

筋骨草总黄酮治疗系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾组织NF-κB变化的实验研究

目的：探讨筋骨草总黄酮（TFA）治疗系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）大鼠后核转录因子-κB（NF-κB）及下游转化生长因子-β1（TGF-β1）的变化。方法采用改良慢性血清病MsPGN大鼠模型,于造模第5周末检测尿蛋白,将尿蛋白阳性者随机分为模型组、雷公藤多甙（TWP）组、不同剂量TFA组。于造模第6周开始给药,6周后,测定各组大鼠的24 h尿蛋白定量、血生化和肾组织病理变化,MaxVisionTM即用型快速免疫组化一步法检测大鼠肾组织中NF-κB p65的表达,双抗体夹心法检测血清中TGF-β1的变化。结果 TFA可显著降低尿蛋白,明显减小系膜区面积占毛细血管丛面积的百分比（P＜0.05或P＜0.01）;高、中剂量的TFA治疗效果与TWP相近（P＞0.05）。模型对照组大鼠肾组织NF-κB p65、血清TGF-β1的表达明显高于正常对照组[NF-κB p65：28.93±4.45 vs.4.51±0.96,P＜0.01;TGF-β1：（247.63±51.55）pg/ml vs.（127.52±27.84）pg/ml,P＜0.01];干预性治疗后,TFA高、中剂量组、TWP组大鼠血清中NF-κB p65、TGF-β1的表达[NF-κB p65：10.35±2.81,15.21±4.71,11.70±3.97,P＜0.01;TGF-β1：（181.96±52.93） pg/ml,（204.33±38.30）pg/ml,（188.07±42.92）pg/ml,P＜0.05]较模型对照组明显降低。结论 TFA降低NF-κB并进而降低TGF-β1可能是治疗MsPGN大鼠的作用机制之一。     

leflunomide对IgA肾病大鼠肾脏保护作用的机制研究

目的 观察leflunomide对实验性IgA肾病(IgAN)大鼠肾脏病理及肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)表达的影响.方法 建立IgAN大鼠模型,随机分成模型组、泼尼松组、leflunomide组,同时设立正常对照组.用免疫荧光和光镜观察免疫复合物在肾脏的沉积及系膜区基质增生程度;用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别检测肾组织TGF-β1、MCP-1的蛋白和基因表达水平.结果 与模型组比较,leflunomide组免疫复合物在肾脏的沉积明显减少,系膜区基质增生程度显著减轻(P均＜0.01);leflunomide在基因和蛋白水平均能够有效抑制TGF-β1和MCP-1在肾组织中的表达(P＜0.05或P＜0.01).结论 leflunomide能减少免疫复合物在肾脏的沉积,并且下调TGF-β1、MCP-1在肾脏的表达,减少局部炎症反应,减轻系膜区基质增生,延缓肾脏纤维化的进程,保护肾脏.     

藻黄胶囊Ⅱ号延缓慢性肾功能衰竭进展的实验研究

目的 囊Ⅱ号液对人肾小球系膜细胞(GMC)、增殖及分泌纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子β1(TGF-β1)的影响.方法 体外人GMC培养,细胞成熟后进行药物孵育,观察细胞增殖情况,检测藻黄胶囊Ⅱ号液对人GMC分泌的FN、TGF-β1的影响.结果 实验研究显示藻黄胶囊Ⅱ号液可明显抑制人GMC的增殖,明显抑制人GMC分泌FN、TGF-β1.结论 藻黄胶囊Ⅱ号液可抑制人GMC的增殖及FN、TGF-β1分泌,提示其可减少肾小球和肾间质细胞外基质的堆积.     

转化生长因子β1,及其Ⅰ、Ⅱ型受体在人类肾小球疾病中的表达及促使肾组织硬化的机理

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)及其Ⅰ、Ⅱ型受体(TGF-βRⅠ、Ⅱ)在人类肾小球疾病中的肾内表达位点及其与各肾小球疾病的关系。方法采用免疫组化SABC法检测系膜增生性肾炎(MsPGN)22例,系膜毛细血管性肾炎(MPGN)6例,局灶节段性肾小球硬化(FGS)9例,膜性肾病(MN)4例中TGF-β1、TGF-βRⅠ、Ⅱ的表达。结果TGF-β1、TGF-βRⅠ、Ⅱ在各肾小球疾病中均有不同程度的阳性表达。各组中MPGN表达均呈强阳性,差异显著(P<0.05);各组球-管染色强度存在显著差异(P<0.05)。结论TGF-β1、TGF-βRⅠ、Ⅱ的过度表达参与肾小球疾病的进展;其在肾小球、小管及间质细胞均有表达位点,但在肾小管-间质表达呈强阳性,而肾小球呈弱表达。     

转化生长因子β1及其Ⅰ、Ⅱ型受体与凝血纤溶因子的相关研究及其促使肾小球硬化的机制探讨

目的探讨TGF-β1(transforming growth factorβ1、TGF-β1)、TGF-βR Ⅰ、Ⅱ(TGF-βR Type Ⅰ,Ⅱ receptor,TGF-βR Ⅰ、Ⅱ)在人类各种肾小球疾病中的作用及与凝血纤溶因子(FRA、FN、α2-PI、PLG)之间的相互关系及其促使肾小球硬化的作用机理,从而寻找影响肾小球疾病发生发展的主要因素.方法采用免疫组化SABC法检测系膜增生性肾炎(MsPGN)、系膜毛细血管性肾炎(MPGN)、局灶节段性肾小球硬化(FGS)、膜性肾病(MN)共41例中TGF-β1、TGF-βR Ⅰ、Ⅱ的表达;直接免疫荧光法检测FN和FRA;间接免疫荧光法检测α2-PI和PLG;共65例.全部数据采用Ridit分析、Spearman's等级相关.结果 (1)TGF-β1、TGF-βRⅠ、Ⅱ与FRA、RN、α2-PI、PLG之间存在显著正相关,随肾组织炎症程度及纤维化程度加重,其表达增强.(2)肾小球纤维化是多因素共同作用的结果.其中TGF-β1、TGF-βRⅠ、Ⅱ与FRA、FN起着非常重要的主因素作用.结论 TGF-β1、TGF-βRⅠ、Ⅱ与FRA、FN、α2-PⅠ、PLG在肾组织内的共同表达及协同作用,是促进肾脏纤维化或硬化进行性发展的重要因素.     

普伐他汀对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质积聚的影响

摘要 目的：探讨普伐他汀对高糖培养的肾小球系膜细胞(MC)增殖和细胞外基质（ECM）积聚的影响。方法：大鼠MC分别培养在低糖组, 高糖组及普伐他汀组。CCK-8测定MC增殖，ELISA法检测细胞培养上清液Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子-β1 (TGF-β1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1 (TIMP-1)的分泌情况；明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的活性，RT-PCR 法检测结缔组织生长因子(CTGF)mRNA的表达。结果：与低糖组相比，高糖能促进Col-Ⅳ、FN合成，抑制MMP-2 、MMP-9活性，增加TIMP-1、TGF-β1、CTGF的分泌，而普伐他汀能一定程度上逆转上述现象。结论：普伐他汀能抑制高糖环境下的MC增殖，并通过抑制 ECM 的合成、促进ECM的降解减少ECM积聚，机制可能与抑制TGF-β1、CTGF有关。     

系膜增生性肾炎肾组织E2F-1的表达及临床意义

目的：探讨核转录因子-1（E2F-1）在系膜增生性肾炎（MsPGN）肾组织中的表达及其与肾固有细胞增生和临床的关系。方法：采用免疫组织化学法检测36例MsPGN患者（MsPGN组）肾活检组织E2F-1的表达，并将其与临床作相关性分析。肾外伤切除的正常肾组织6例作为正常对照组。结果：正常对照组肾小球未见E2F-1表达，肾小管间质见少许表达。MsPGN组肾小球和肾小管间质均有E2F-1表达，两组比较，具有显著统计学差异（P〈0．01），轻、中、重度系膜增生组随系膜增生加剧E2F-1表达逐渐增强（P〈0．05或P〈0．01）。肾小球、肾小管间质E2F—1表达与未使用类固醇激素／免疫抑制剂、未使用血管紧张素转移酶抑制剂（ACEI）／血管紧张素受体拮抗剂（ARB）呈正相关：肾小球E2F-1表达与BP、24h尿蛋白（TMP）水平呈正相关，与内生肌酐清除率（Ccr）呈负相关；肾小管间质E2F—1表达与临床无相关性。肾小球与肾小管间质E2F-1表达无相关性。结论：E2F-1表达水平可反映MsPGN患者系膜细胞及小管间质的增生程度．也可间接反映BP、TMP及肾功能水平．药物可干预E2F—1的表达。     

慢肾蛋白停对MsPGN大鼠TGF-β1及IL-10的调节作用

目的:研究慢肾蛋白停对系膜增生性肾炎(MsPGN)血清转化生长因子-β1(TGF-β<,1>)和白介紊一10(IL-10)的调节作用,探讨慢肾蛋白停对MsPGN的疗效机制.方法:采用手术摘除一侧肾脏加腹腔多次注射BSA与LPS及皮下多次注射完全弗氏佐剂,复制MsPGN动物模型.分慢肾蛋白停、肾炎四味片予以防治性治疗,实验结束测定TGF-β1、IL一10变化.结果:模型组TGF-β1、IL-10含量增高;2个治疗组TGF-β1、IL-10水平均下降,慢肾蛋白停优于肾炎四味片(P<0.05).结论:慢肾蛋白停能降低血清TGF-β1水平,并能调节机体IL-10的异常分泌,减轻肾脏组织的病理损害,作用优于肾炎四味片.     

火把花根对系膜增殖性肾炎大鼠TGF-β1和Smad3表达的影响

目的探讨火把花根对MsPGN大鼠TGF-β1和Smad3表达的影响。方法将Wistar大鼠随机分为正常对照组、MsPGN肾炎非治疗组(模型组)和MsPGN肾炎火把花根治疗组。用抗胸腺细胞血清诱发造模。于给药14d后,测量24h尿蛋白,处死大鼠,用PAS染色观察肾脏病理变化;RT-PCR检测肾组织中TGP-β1和Smad3的mRNA表达。采用Western blot检测TGF-β1和Smad3蛋白定量的表达。结果与正常组相比,MsPGN肾炎大鼠24h尿蛋白排出增加;肾小球ECM明显增多、系膜区扩大(PAS染色);TGF-β1和Smad3 mRNA表达上调;TGF-β1和Smad3蛋白的表达明显增加。火把花根治疗后上述指标明显减轻。结论TGF-β/Smad通路在MsPGN肾炎时是激活的,火把花根治疗可延缓肾脏损害。