TMPRSS2-ERG基因融合在前列腺癌中研究新进展

TMPRSS2-ERG基因融合是前列腺癌中最常出现的基因融合类型。TMPRSS2-ERG融合基因通过与雄激素受体、多聚ADP-核糖聚合酶1和DNA-PKcs、核因子κB和富含半胱氨酸分泌蛋白3的相互作用介导前列腺癌的发生。利用荧光原位杂交技术和免疫组织化学技术检测前列腺癌标本中融合基因发生及其蛋白表达,具有较高的阳性率;尿液TMPRSS2-ERG融合基因检测有较高的特异度和阳性预测值。     

前列腺癌起因新发现

美国密歇根大学医学院教授Chinnaiyan等发现,前列腺癌细胞内数个基因重排对前列腺癌的发生和发展有重要作用。研究人员发现了2个新融合基因（TMPRSS2-ERG和TMPRSS2～EVT1）,这2个基因是由TMPRSS2基因与ERG基因或EVT1基因融合生成的,ETV1基因和ERG基因是前列腺癌的重要致癌基因,TMPRSS2基因与前列腺特异相关。该研究10月28日发表在Science[2005,310（5748）：644]上。     

肿瘤标记物与前列腺癌的早期诊断

目前最常用的筛选前列腺癌的肿瘤标记物是前列腺特异性抗原（PSA）,但PSA特异性及对前列腺癌的早期诊断价值仍然存在争议,因此大量研究转向寻找新的前列腺癌标志物,已取得不少成果.目前认为前列腺癌抗原3基因、α-甲基酰基辅酶A消旋酶、TMPRSS2-ERG融合基因和微精原蛋白-β等肿瘤标记物对前列腺癌的早期诊断有较高的临床意义.本文将对前列腺特异性抗原（PSA）及其亚型、尿液中的生物学标记物（前列腺癌抗原3基因,α-甲基酰基辅酶A消旋酶,TMPRSS2-ERG融合基因和微精原蛋白-β）和其他新型的血清和尿液中的标志物研究现状作简要概述.     

前列腺癌组织中TMPRSS2基因与ETS家族基因的多种融合亚型及其意义

目的 了解前列腺癌组织标本中跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)基因与ETS转录因子家族成员ETS相关基因(ERG)、ETS变异体1(ETV1)及ETS变异体4(ETV4)基因之间的融合情况及意义.方法 采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)琼脂糖凝胶电泳法检测32例前列腺癌患者及34例前列腺良性增生患者前列腺组织中TMPRSS2基因与ETS家族基因融合的TMPRSS2/ERG、TMPRSS2/ETV1、TMPRSS2/ETV4转录体;琼脂糖凝胶电泳阳性者,纯化PCR产物进行直接测序,用BLAST在线软件比对确定融合位点;分析融合基因与Gleason分级关系.结果 在32例前列腺癌患者组织标本中,检测到TMPRSS2/ERG融合基因17例(53.1%),含5种不同融合基因亚型,其中1种为新发现融合基因亚型(GenBank登录号:EU090248),单一标本中可检测到1种以上TMPRSS2/ERG融合基因亚型;检测到TMPRSS2/ETV1融合基因2例(6.3%),为新发现融合基因亚型(GenBank 登录号:EU090249);未检到TMPRSS2/ETV4融合基因型.34例前列腺良性增生组织标本中均未检测到TMPRSS2/ERG、TMPRSS2/ETV1和TMPRSS2/ETV4融合基因型.按Gleason评分值分为中分化与低分化的两组前列腺癌组织标本之间融合基因阳性率差异无统计学意义(P=0.169).结论 前列腺癌组织中存在TMPRSS2/ERG和TMPRSS2/ETV1融合基因及多种亚型;前列腺癌融合基因的发现有望为前列腺癌的发病机制研究提供新的思路.     

荧光原位杂交技术检测融合基因对前列腺癌的诊断价值

目的：探讨荧光原位杂交技术（ FISH）检测跨膜丝氨酸蛋白酶2基因（ TMPRSS2）和成红细胞特异性转化基因（ETS）家族[ETS相关基因（ERG）、ETS变异体1（ETV1）及ETS变异体4（ETV4）]的融合基因对前列腺癌的诊断价值。方法收集前列腺癌44例及良性前列腺疾病20例的病理标本,应用3组FISH探针分别检测TMPRSS2/ERG、TMPRSS2/ETV1及TMPRSS2/ETV4融合基因,并与病理诊断结果比较。结果前列腺癌组患者TMPRSS2/ERG、TMPRSS2/ETV1、TMPRSS2/ETV4融合基因阳性率分别为59．1％、9．1％、2．3％,总体阳性率为70．5％（31/44）。与病理诊断相比,FISH诊断前列腺癌敏感度为70．5％（31/44）,特异度为100．0％（20/20）。前列腺特异性抗原（PSA）＜10 ng/ml、PSA 10～20 ng/ml、PSA＞20 ng/ml患者TMPRSS2/ERG探针阳性率比较,差异无统计学意义（P＞0．05）。 TMPRSS2/ERG 融合基因阳性与血清PSA 水平无明显相关性（P ＞0．05）。结论 FISH 检测TMPRSS2/ETS（ ERG、ETV1、ETV4）融合基因诊断前列腺癌具有较高价值。     

TMPRSS2-ERG融合基因在前列腺癌中的研究进展

在前列腺癌中,跨膜丝氨酸蛋白酶2(transmembrane serine protease 2,TMPRSS2)-E26转化特异性相关基因[E26 transformation-specific(ETS)-related gene,ERG]融合基因由雄激素调控基因TMPRSS2(染色体21q22.2)与ERG(染色体21q22.3)融合形成。TMPRSS2-ERG可导致ERG过表达,过表达的ERG在多种因素协同作用下可引起相关靶基因表达并激活下游信号通路,从而参与前列腺癌的发生、发展过程。TMPRSS2-ERG有望成为前列腺癌的有效治疗靶点。本文对TMPRSS2-ERG在前列腺癌中的作用机制及其在前列腺癌诊疗中的研究进展进行综述。     

TMPRSS2-ERG 融合基因检测应用于前列腺癌诊断价值评价

目的:探究TMPRSS2-ERG融合基因用于前列腺癌诊断的效果。方法:将我院泌尿科在2017年5月—2018年11月期间收治的良性前列腺增生(BPH)患者15例作为对照组,15例前列腺癌患者作为实验组。对比两组患者的T-E融合基因以及ERG蛋白表达情况差异。结果:实验组患者T-E融合基因阳性率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),且T-E融合基因在患者年龄、Gleason评分、PSA以及癌细胞远处转移方面差异无统计学意义(P>0.05)。ERG蛋白表达阳性仅出现在前列腺癌患者中,且在患者年龄、Gleason评分以及远处转移方面差异无统计学意义(P>0.05),仅与患者术前PSA水平有关,PSA水平≤10ng/ml的前列腺癌患者其阳性率低于PSA水平>10ng/ml患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TMPRSS2-ERG融合基因检测结果可作为前列腺癌确诊的参照之一。     

尿液中PCA3 mRNA和融合基因TMPRSS2:ERG mRNA的检测在前列腺癌早期临床诊断中的应用

目的研究前列腺按摩后尿液中PCA3 mRNA联合融合基因TMPRSS2:ERG亚型T1E4 mRNA的定量检测在早期前列腺癌临床诊断中的应用价值。方法收集前列腺癌(PCa)患者53例和前列腺增生(BPH)患者37例,收集前列腺按摩后尿液,离心取细胞沉淀物,提取总RNA,用实时荧光定量RT-PCR的方法检测PSA mRNA、PCA3 mRNA和T1E4 mRNA的含量,以PSA mRNA来校正尿液中的前列腺癌细胞。以PCA3 mRNA/PSA mRNA表示PCA3 mRNA的含量,以T1E4 mRNA/PSA mRNA表示融合基因T1E4 mRNA的含量。用ROC曲线对T1E4 mRNA及PCA3 mRNA诊断PCa的性能进行分析。结果尿T1E4 mR-NA/PSA mRNA比值诊断PCa的ROC曲线下面积(AUC)为0.802(95%CI:0.709～0.895),以0.007为截断值时,其诊断前列腺癌的敏感度和特异度分别为56.6%和94.6%。尿PCA3 mRNA/PSA mRNA比值诊断PCa的ROC曲线下面积(AUC)为0.646(95%CI:0.533～0.758),以0.001为截断值时,其诊断前列腺癌的敏感度和特异度为47.2%和73.0%。PCa组PCA3 mRNA(P=0.009)及T1E4 mRNA(P=0.000)的含量均高于BPH组,T1E4 mRNA联合PCA3 mRNA定量检测的敏感度为81.1%,比单独应用PCA3 mRNA和T1E4 mRNA检测的敏感度分别提高了33.9%和24.5%。结论前列腺癌按摩后尿沉渣中可以检测到TMPRSS2:ERG亚型T1E4 mRNA,联合PCA3 mRNA和T1E4 mRNA两个指标定量检测,可以显著提高检出前列腺癌的敏感度。此联合检测方法可以用于早期的前列腺癌诊断。     

18 F-脱氧葡萄糖PET-CT显像在前列腺癌诊断中的临床应用

前列腺癌是老年男性生殖系统中最为常见的恶性肿瘤，在欧美等国家，前列腺癌的发生率极高，位居所有男性癌症发病率第1位和死亡率第2位。在我国前列腺癌的发病率也在逐渐上升，据上海市近期流行病学统计，目前前列腺癌发病率比20世纪60年代增加了50％以上，且有迅速增加趋势。因此，如何早期发现前列腺癌及确定是否发生转移已成为目前研究的主要课题。     

急性白血病M4Eo型患者ETV6基因重排及其意义

目的探讨在急性髓细胞白血病（AML）M4Eo型患者中检测到ETV6基因重排的临床意义。方法对3例AML-M4Eo患者骨髓标本进行细胞培养，制备染色体，分析核型，Split-signal FISH技术分析12p13染色体易位，RT-PCR检测ETV6/ARG融合基因产物。结果核型分析显示3例患者均有inv(16)，Split-signal FISH检出12p13染色体易位1例，RT-PCR证实患者ETV6/ARG融合基因产物阳性。这是国际上第2例报道ETV6/ARG融合基因在AML-M4Eo中表达。结论伴有ETV6/ARG融合基因的患者对化疗不敏感，预后较ETV6/ARG融合基因阴性者差。Split-signal FISH是检测ETV6基因重排准确可靠的手段。     

前列腺癌基因诊断芯片的临床应用

目的应用基因芯片诊断前列腺癌.方法提取前列腺癌及正常前列腺组织总DNA并纯化mRNA,以包含了9个前列腺癌相关的特异基因和1个参照基因的xy检测系统cDNA临床芯片,对前列腺癌及正常前列腺组织的基因表达谱进行分析.结果9个前列腺癌相关基因检测中癌与正常组织存在显著差异,其中显著上调的有7条;显著下调有2条.结论前列腺癌临床基因诊断芯片作为前列腺癌分子水平的诊断的方法,有望提高前列腺癌的检出率.     

PAK6基因的克隆、抗体制备及在前列腺癌中的表达

目的 在克隆P21相关激酶6(PAK6)全长cDNA的基础上,进一步克隆PAK6-N端基因并使其在大肠杆菌中高效表达,纯化基因产物并进行多克隆抗体制备,为研究PAK6与疾病的关系奠定基础.同时研究PAK6在前列腺癌中的表达.方法 根据人全长PAK6 cDNA序列,设计PCR引物,以人前列腺癌cDNA文库为模板利用PCR技术克隆PAK6全长cDNA.在此基础上,以PAK6全长cDNA为模板克隆PAK6-N端基因,将扩增产物克隆至大肠杆菌表达载体pGEX-4T-1中,经EcoRI/XhoI双酶切鉴定后,进行DAN序列测定.GST-PAK6-N融合蛋白在硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下在大肠杆菌BL21中得到表达.利用G1utothione亲和层析纯化融合蛋白,用纯化的GST-PAK6-N融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,并用纯化的抗PAK6多克隆抗体在3例前列腺癌病人标本中进行了免疫组化表达的初步研究.结果 成功克隆了PAK6全长cDNA和PAK6-N端基因片断,在E.coli中表达了PAK6-NT,纯化了GST-PAK6-N融合蛋白,并制备了PAK6特异性抗体.免疫组织化学研究表明:3例前列腺癌患者石蜡包埋病理组织切片免疫组化染色全部表现为间质阳性,PAK6在前列腺癌间质中呈现表达,而前列腺癌细胞则不染色.结论 首次克隆了PAK6全长cDNA和PAK6-N端基因片断并成功制备了PAK6特异性抗体,为深入探讨PAK6在前列腺癌中的作用奠定了基础.初步揭示PAK6在前列腺癌的表达     

前列腺经直肠和经会阴穿刺活检术对前列腺癌的诊断价值对比

目的分析前列腺经直肠和经会阴穿刺活检术对前列腺癌的诊断价值。方法选取2016年12月至2020年7月本院泌尿外科收治的65例可疑前列腺癌患者作为研究对象,按照穿刺方法进行分组,经会阴穿刺为会阴穿刺组(n=26),经直肠穿刺为直肠穿刺组(n=39),比较两种穿刺方法的穿刺阳性率和并发症发生率。结果病理结果显示,两组患者前列腺癌、前列腺增生、前列腺结核及慢性前列腺炎检测率比较差异无统计学意义。两组前列腺癌检出率比较差异无统计学意义。两组患者术后均出现疼痛、发热、血尿、血便和尿潴留,会阴穿刺组患者术后发热发生率均低于直肠穿刺组(P<0.05),两组术后并发疼痛、血尿发生率比较差异无统计学意义。结论两种穿刺方法的穿刺前列腺癌检出率差异不明显,但经会阴前列腺穿刺术并发症优于经直肠前列腺穿刺术。     

Prostate Cancer - What's New?

Research has shown that prostate specific antigen (PSA) is a tumour marker for diagnosis of cancer prostate with significant prognostic value. Screening studies in North America and Europe have revealed that carcinoma prostate is common. Early detection and treatment improves the quality of life besides preventing deaths due to metastatic prostate cancer. Radical prostatectomy and laparoscopic radical prostatectomy has become the standard treatment for localized prostate cancer in all major uro-oncological centres resulting in reduced mortality. Magnetic resonance imaging and positron emission tomography have helped in detecting local and distant spread of cancer prostate. Revised approach to reduce occurrence of prostate cancer by the use of 5 alpha reductase inhibitors like finasteride and dietary supplements has been instituted. The World Health Organisation (WHO) has recommended lifestyle changes to promote men's health and reduce the incidence of prostate cancer.     

CD-TK融合自杀基因对前列腺癌细胞的杀伤作用

目的：探讨CD-TK融合自杀基因体系对前列腺癌PC-3m细胞的杀伤作用。方法：应用逆转录病毒载体将CD-TK融合基因转染PC-3m细胞，经RT-PCR鉴定后，用MTT法检测丙氧鸟苷(GCV)、5-胞嘧啶(5-FC)前体药物单一或联合应用对转染PC-3m细胞的杀伤作用，以未转染PC-3m细胞为对照。同时应用流式细胞仪、电镜等检测药物作用前后的变化。结果：GCV对转染PC-3m细胞有较强的直接细胞毒作用，而5-FC治疗有显著旁观者效应；联合用药具有协同作用。结论：CD-TK融合基因治疗对前列腺癌细胞具有显著杀伤作用，明显优于单一自杀基因治疗，深入研究意义较大。     

Prostate Cancer - What's New?

Research has shown that prostate specific antigen (PSA) is a tumour marker for diagnosis of cancer prostate with significant prognostic value. Screening studies in North America and Europe have revealed that carcinoma prostate is common. Early detection and treatment improves the quality of life besides preventing deaths due to metastatic prostate cancer. Radical prostatectomy and laparoscopic radical prostatectomy has become the standard treatment for localized prostate cancer in all major uro-oncological centres resulting in reduced mortality. Magnetic resonance imaging and positron emission tomography have helped in detecting local and distant spread of cancer prostate. Revised approach to reduce occurrence of prostate cancer by the use of 5 alpha reductase inhibitors like finasteride and dietary supplements has been instituted. The World Health Organisation (WHO) has recommended lifestyle changes to promote men''s health and reduce the incidence of prostate cancer.Key Words: Prostate cancer, Prostate specific antigen, Radical prostatectomy, Watchful waiting