一种新的百日咳无细胞菌苗在健康成人志愿者中的试验

本文作者用一种新的百日咳无细胞菌苗(PV)在54名健康成人志愿者(男42人,女12人)中进行免疫原性和反应原性试验。这种新菌苗含丝状血凝素(FHA)、百日咳毒素(BT)和菌毛凝集原2和3(AGG 2+3)3种成份。PT和FHA是从百日咳杆菌培养物上清中纯化,AGG 2+3是从菌体中纯化。PT、FHA和AGG 2+3用甲醛脱毒。每份菌苗含有脱毒后的PT、FHA和AGG 2+3各10μg和1份佐剂。佐剂分氢氧化铝(A)和磷酸铝(B)两种。在54名志愿者中,15人接种PVA,20     

基因脱毒的PT与FHA、69KDa联合的百日咳无细胞菌苗Ⅰ期临床试验

脱毒的百日咳毒素(PT)在全菌体菌苗中是主要成份,对儿童具有保护性,PT菌苗用化学处理灭活,此过程既降低分子的免疫原性,而且不可能完全排除毒性逆转的危险性,为避免这些问题,作者系用基因诱变,得到自然脱毒的PT,并将其与丝状血凝素(FHA)、69KDa蛋白制成一种新的菌苗,并进行Ⅰ期临床试验。新菌苗基因脱毒PT-9K/129G和FHA由     

含遗传脱毒的百日咳毒素的百日咳无细胞菌苗能在成人中诱导长期的体液和细胞免疫

作者对成人接种单组分和三组分百日咳无细胞菌苗后的长期免疫应答进行了随访研究,检测了由百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)和69kDa蛋白诱生的抗体水平,及抗PT中和抗体滴度和细胞免疫应答。     

百日咳患者和接种全细胞百日咳菌苗的婴儿血清中各类免疫球蛋白的水平

作者使用纯化的百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)和凝集原2和3(Agg2/3),在ELISA试验中,测定了114名百日咳患者,49名与百日咳患者密切接触者和139名接种DTP(其中含百日咳全细胞菌苗)菌苗婴儿血清中PT、FHA和Agg2/3的IgG、IgA和IgM的应答。     

改良的百日咳菌苗

改良百日咳菌苗的研究是尽可能地去除或减少内毒素等与副反应相关的成分,提取在防御感染上有用的成分。从百日咳杆菌培养上清中回收百日咳毒素(PT)以及丝状血凝素(FHA)组分,去除内毒素,用福尔马林处理清除PT的毒性,加少量铝佐剂,制定沉淀精制百日咳菌苗,与白喉和破伤风类毒素一起组成新的DTP。实验室和临床试验结果表明,新型DTP保持了国际公认的免疫效力,与全菌体菌苗相比,其发热以及接种部位红肿和硬结等局部反应轻得多。这种改     

DTaP-IPV∥PRP-T与乙型肝炎疫苗同时在2、3和4月龄接种的免疫原性研究

此项研究评价了用百日咳无细胞菌苗DTP-脊髓灰质炎灭活疫苗联合疫苗、b型流感杆菌多糖破伤风类毒素结合菌苗 (DTa P-IPV∥ PRP- T)与乙型肝炎疫苗 (HBV)同时初免婴儿的免疫原性。　　 1 6 2名 8～ 1 0周龄的健康婴儿分别在 2、3和 4月龄于左右三角肌同时接种 DTa P-IPV∥ PRP- T和 HBV。在接种第 1针前和第3针后 4周采血。每针接种后观察即时反应1 5分钟 ,并由父母每日记录不良反应 ,至少 7天。分别用中国仓鼠卵巢细胞血清中和试验和 EL ISA检测抗百日咳毒素 (PT)和丝状血凝素 (FHA)抗体 ,用 ELISA检测白喉和破伤风抗毒素…     

在菌苗效果现场试验中对用血清学和鼻咽培养法诊断百日咳的评价

用鼻咽涂抹接种对百日咳诊断有高特异性,但敏感度低,作为补充的血清学法可增加敏感性。本文根据鼻咽分离及测定血清中抗丝状血凝素(FHA)、抗百日咳毒素(PT)抗体,用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞法测PT中和抗体等试验对接种和未接种菌苗的儿童血清进行分析,并对假阳性结果及患者早期抗体的变化作了研究。     

健康成人接种百日咳无细胞菌苗的安全性和免疫原性

近期资料表明 ,百日咳杆菌是造成青少年和成人呼吸道疾病的重要原因 ,但由于百日咳全菌体菌苗 (w P)在青少年和成人中的接种反应较多 ,因此不推荐 7岁以上人群进行常规接种 ,目前已研制出高纯度的百日咳无细胞菌苗 (a P) ,为此作者就成人接种 a P的安全性、耐受性和免疫原性进行研究。　　作者采用双盲法将 40 0名 1 8岁以上的健康成人随机分组 ,分别接种含灭活百日咳毒素 (PT)、丝状血凝素 (FHA)和 6 9k Da蛋白 (PRN)的 a P或安慰剂。接种后 30分钟 ,观察局部症状 (接种部位的疼痛、发热、红斑和硬结 )及全身反应 (发热、寒战、恶心…     

提纯的百日咳杆菌组分在小鼠增重试验中的作用

小鼠增重试验(MWGT)是广泛应用的百日咳菌苗毒性试验。在MWGT过程中,小鼠体重在不同时间的变化与菌苗中不同组分有关,如注射菌苗后24小时的体重减轻与脂多糖(LPS)的含量有关;试验后期的体重减轻与百日咳毒素(PT)的含量有关。过去的研究都是用部分提纯的组分进行的。本文将高度提纯的PT、LPS和丝状血凝素(FHA)单独和联合进行试验,以确定各组分在MWGT中的作用。在实验中,以白细胞数作为PT的活性指标。所有实验皆以磷酸盐缓冲液(PBS)和英     

百日咳无细胞菌苗的纯化和特性

作者研究了Biken百日咳无细胞菌苗的纯度、效力和毒性。菌苗提纯程序为:将Ⅰ相百日咳杆菌在S-S液体培养基中,36℃培养5天。经离心并过滤取上清,浓缩后,用1/3饱和硫酸铵在冷室中盐析,沉淀物溶于含1M氯化钠的pH8.0的磷酸盐缓冲液中,高速离心,上清经蔗糖密度梯度离心,用福尔马林脱毒。将此制剂稀释至特定浓度,加吸附剂氢氧化铝,制成Biken菌苗。作者用ELISA和聚丙烯酰胺凝胶电泳测定了减毒前原液中百日咳毒素(PT)和丝状血凝素(FHA)的含量,发现PT与FHA比率接近1∶1时,纯度为97～99%。日本对百日咳无细胞菌苗的要求比全菌     

在瑞典进行的两种百日咳无细胞菌苗第Ⅲ期效果评价

1986～1987年,在瑞典,对日本国立卫生研究所(JNIH)制备的两种百日咳无细胞菌苗进行了接种后第Ⅲ期效果评价。批号为JNIH-6菌苗内含百日咳类毒素(PT)和丝状血凝素(FHA),共接种了1389名儿童;批号为JNIH-7菌苗仅含有单一的PT,共接种了1406名儿童,另有929名儿童注射安慰剂,作为对照。经连续观察发现,接种JNIH-7菌苗的儿童通过血清学和细菌培养后证实,有84名感染了百日咳杆菌,而接种JNIH-6菌苗的仅有     

百日咳全菌体菌苗中百日咳毒素、丝状血凝素、69KDa外膜蛋白、凝集原2和3及脂多糖含量的测定

百日咳全菌体菌苗可诱导对多种抗原[如百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)、69KDa外膜蛋白(69KDa OMP)、凝集原2和3(AGG 2和3)以及其他外膜蛋白]的抗体应答。在百日咳菌苗中,这些抗原成分的含量影响其免疫应答。 作者测定了丹麦当地4种百日咳菌株等量混合的百日咳全菌体菌苗中相应抗原成分的含量。菌苗经甲醛和硫柳汞灭活制成。每剂菌苗含16浊度单位(菌体数约为16×10~9)。从菌苗中提取各种抗原,用ELISA测定菌苗中各种抗原和脂多糖(LPS)含量。 应用2M尿素,在60℃加热30分钟,随后超声处理45秒是提取FHA、69KDa OMP、AGG2和3的最有效方法。提取PT的最佳方法是1M NaCl 4℃过夜,随后超声处理。     

减量DTPa加强免疫后的反应原性和免疫原性

为了研究百日咳无细胞菌苗 DTP(DT-Pa)的反应原性和免疫原性 ,作者将 2 2 6名 2岁前接种过 4剂百日咳全细胞菌苗 DTP(DTPw)的 4～ 7岁儿童分成 3组 (第 1组 79名 ,第 2组 81名 ,第 3组 6 6名 ) ,分别用市售DTPa、小剂量 DTPa(dtpa)或实验性小剂量配方 (dtpa- exp)加强 1次。这 3种菌苗均含有 3种百日咳杆菌成分〔百日咳毒素 (PT)、丝状血凝素 (FHA)、6 9k Da蛋白 (PRN)〕。接种后 30分钟开始观察临床反应 ,共观察 1 5天。在加强免疫前及加强免疫后 30天分别取血样 ,用 EL ISA测定抗白喉和抗破伤风抗体 ,规定抗体滴度 >0 .0 1 …     

婴儿接种百日咳无细胞菌苗:单组分和双组分制品的评估

为评估2种百日咳无细胞菌苗,作者对婴儿接种反应与血清学效果进行了观察,并与百日咳全细胞菌苗(DTP-WC)作比较.2种百日咳无细胞菌苗,每剂0.5ml各含15Lf白喉类毒素和破伤风毒素及0.5mg铝吸附剂.其中单组分苗苗(DT-LPF),含淋巴细胞增多促进因子(LPF)类毒素25μg,双组分菌苗(DT-LPF/FHA)含LPF和丝状血     

15～24月龄婴儿与4～6岁儿童对百日咳无细胞菌苗与全细胞菌苗免疫后应答的比较

作者在使用过全细胞百白破菌苗免疫的65名15～24月龄婴儿和56名4～6岁儿童中,使用双盲法对含百日咳毒素(PT)和丝状血凝素(FHA)的百日咳无细胞菌苗(AC-12.5与AC-25)与普通全细胞菌苗(WC-DTP)进行比较,以评价其效果。所用百日咳无细胞菌苗由法国Merieux研究所提供,每0.5ml含PT和FHA各12.5μg(AC-12.5)或25μg(AC-25)及含10Lf破伤风类毒素和30Lf白喉类毒素的氢氧化铝吸附菌苗。普通百白破全细胞菌苗由美国的Lederle研究所提供。每0.5ml含4个单位小鼠保护力百日咳抗原,5Lf破伤风类毒素,12.5Lf白喉类毒素的磷酸铝吸附菌苗。     

初免DTwP或DTaP对15～21月龄儿童加强接种DTaP的安全性和免疫原性的影响

作者对初免百日咳无细胞菌苗DTP(DTaP)或百日咳全细胞菌苗DTP(DTwP)的儿童15～21月龄时加强接种重组DTaP的安全性和免疫原性进行比较,并对6月龄儿童完成第3剂初免DTaP或DTwP约1年后血清抗体浓度的持久性作了评价。 350名15～21月龄儿童加强接种重组DTaP,其中173名初免用DTaP,177名用DTwP。DTaP 0.5ml含25絮状反应单位(Lf)白喉类毒素(DT)、10Lf破伤风类毒素(TT)、5μg重组百日咳毒素、2.5μg丝状血凝素(FHA)、2.5μg69kDa外膜蛋白和0.05mg硫柳汞。菌苗以1mg氢氧化铝吸附     

免疫程序对百日咳无细胞及全细胞菌苗的反应原性及抗体持久性的影响

百日咳无细胞菌苗DTP(DTaP)比百日咳全细胞菌苗DTP(DTWP)具有更好的免疫原性和更低的反应原性.为了达到根据实验室检测就可预测菌苗特性的目的,同时也为观察不同免疫程度对菌苗特性的影响,作者对Porton、Merieux、Lederle及Connaught4家菌苗制造厂的含2～5种百日咳组分的DTaP的免疫原性和反应原性进行了实验室检测和临床研究.作者通过体外中国仓鼠卵巢(CHO)细胞测定、小鼠体内白细胞增多促进测定、高胰岛素血症诱导测定以及组织胺致敏测定检测残余百日咳毒素(PT)活性;用家兔测温法检     

百日咳杆菌感染和百日咳菌苗接种后的人体血清抗体应答

作者采用免疫印迹技术比较了百日咳感染和百日咳全菌体菌苗免疫后抗百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)、69千道尔顿(kDa)的腺苷酸环化酶相关蛋白(69kDa蛋白)和百日咳杆菌外膜蛋白(OMP)的血清抗体应答.试验血清样品取自1985年7月～1987年2月百日咳流行期的8例百日咳患者、4名百日咳家庭接触者和4名经吸附DTP全程免疫的儿童.百日咳杆菌抗原的SDS-PAGE表明,     

遗传修饰的毒素用于疫苗和佐剂

迄今 ,疫苗的研制仍以传统的方法进行 ,例如 ,细菌毒素用传统的化学方法脱毒。生物技术和分子生物学的发展使人们对几种细菌毒素的结构 -功能关系有了很好的认识。有赖于此 ,细菌毒素的遗传减毒成为可能。依此方法 ,已产生了遗传脱毒的百日咳毒素 ( PT)。这种分子在婴儿中有高度的免疫原性和效力 ,现已成为百日咳无细胞菌苗 ( Pa)的组分。相同的细菌毒素分子脱毒策略已应用于霍乱毒素 ( CT)和大肠杆菌不耐热肠毒素 ( L T)。当去除毒性的毒素突变体与几种抗原结合接种于粘膜部位时 ,突变体表现出高度的免疫原性和强烈的佐剂性。这些成功的结果表明 ,研制更强有力、更安全的疫苗是可行的     

学龄儿童加强免疫新的百日咳无细胞菌苗后的免疫应答[英]

235名10～12岁健康的学龄儿童,随机加强免疫百日咳无细胞菌苗DTP（DTaP）或白喉-破伤风类毒素（dT）,所有儿童均于3、4、5和24月龄接种过百日咳全细胞菌苗DTP（DTwP）。加强免疫的菌苗是专为学龄儿童和成人设计的,每0.5mlDTaP含1.5Lf白喉类毒素（DT）、5Lf破伤风类毒素（TT）、8μg百日咳毒素（PT）、8μg丝状血凝素（FHA）和2.5μg 69kDa蛋白（PRN）;每0.5ml dT含2Lf DT和5Lf TT。分别用酶免疫吸附法（EIA）和外周血单个核细胞（PBMC）体外增殖试验检测抗PT、FHA、PRN、DT和TT IgG抗体和细胞介导免疫（CMI）应答。