新型抗溃疡及促进伤口愈合药--重组人角质细胞生长因子-2

重组人角质细胞生长因子-2(rhKGF-2)能与人体上皮细胞内的成纤维细胞生长因子受体(FGFR)结合而发挥生理作用。研究显示，rhKGF-2可特异性地刺激上皮细胞增殖，促进表皮细胞生长和肉芽组织形成，可用于治疗因上皮细胞损伤引起的溃疡，加速伤口的愈合，耐受性好，值得临床推广。     

重组人角质细胞生长因子-1突变体表达载体的构建

目的构建重组人角质细胞生长因子-1突变体的表达载体。方法采用PCR突变方法,将rhKGF cDNA第40位的Cys密码子突变为Ser密码子,所得的突变片断插入表达载体的表达框架中。结果 DNA测序分别证实合成的基因序列克隆入pET-22b中。结论构建重组人角质细胞生长因子-1突变体的表达载体,得到突变体蛋白40位丝氨酸突变截短型角质细胞生长因子[Ser40]rhKGFdest-23。     

重组人角质细胞生长因子对放射治疗模型小鼠消化道损伤的影响

目的 观察重组人角质细胞生长因子（KGF-2）对放疗模型小鼠消化道损伤的治疗作用.方法 将50只C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、照射对照组、KGF-2低、中、高剂量组5组各10只,空白对照组给予假照射,其他4组给予全身一次性137CS-γ射线7.2Gy照射,低、中、高剂量组分别给予KGF-2 1、2、4mg/kg;通过观察小鼠体质量,检测小鼠肠组织蛋白浓度,NO含量和肠组织病理分析,分析KGF-2对小鼠肠损伤的保护作用.结果 照射前,各组小鼠体质量平均值差异＜0.6g.照射后,空白对照组保持体质量增长趋势,其他4组均于照射后第1天开始出现体质量的明显下降,3个给药组于照射后第4天出现体质量最低值,后逐渐恢复,照射对照组体质量下降明显于第7天达到最低值,后恢复不明显.小鼠接受γ射线一次性全身7.2Gy照射后,照射对照组与空白对照组相比蛋白浓度明显降低、NO含量明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.各给药组与照射对照组比较,蛋白浓度均明显升高,其中仅高剂量给药组蛋白浓度高于照射对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）;中、高剂量给药组NO含量明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.空白对照组小肠绒毛、隐窝完整,无明显组织学改变.照射对照组小肠组织病变较重,小肠黏膜结构发生破坏,可见多处片状出血,黏膜水肿,部分绒毛变性、脱落,病变处隐窝破坏.低剂量给药组小肠组织黏膜水肿,绒毛、隐窝完整,无出血坏死等其他改变.中剂量给药组小肠组织黏膜轻度水肿,绒毛、隐窝完整,无出血坏死等其他改变.高剂量给药组小肠组织绒毛整齐、完整,隐窝完整,未见明显改变.结论 KGF-2对小鼠放射性肠损伤有明显的治疗作用.     

重组人角质细胞生长因子-2对兔眼的长期毒性作用

目的观察重组人角质细胞生长因子-2(recombination human keratinocyte growth factor-2,rhKGF-2)对兔眼的长期毒性。方法 32只新西兰白兔,随机分为对照组及高(2 000 mg·L-1)、中(500 mg·L-1)、低(125 mg·L-1)剂量组,每组8只,连续滴眼给药重组人角质细胞生长因子-2,每天6次,每2 h给药1次,单眼给药0.1 m L,给药4周,停药后恢复2周。观察一般药物反应及眼部症状,检测动物血液学、血液生化学和组织病理学等指标。结果除了中高剂量组分别有7例和8例眼部有少量类似眼屎的黏性分泌物及高剂量组有3例出现睑结膜充血呈鲜红色外,其他动物眼部未见与给药相关的明显异常变化;体质量、进食量、体温、心电图、尿液、血液学、凝血、血液生化学、骨髓细胞、脏器质量、脏器系数和病理学检查均未见明显与给药相关的异常变化。结论本试验选用3个剂量分别为有效剂量浓度的5、20和80倍,并未对新西兰白兔产生明显毒性,说明该剂量对新西兰白兔眼部用药是安全的。     

重组人角质细胞生长因子-2涂膜剂促进大鼠皮肤伤口愈合

目的研究重组人角质细胞生长因子-2(Recom binant human keratinocyte growth factor-2,rhKGF-2)涂膜剂对大鼠皮肤伤口愈合速度的影响。方法(1)用预热100℃的100g砝码在大鼠背部脱毛部位烫8s,形成4个直径约2.5cm的深II度烫伤口;(2)手术方法切除大鼠背部部分皮肤,形成2个1.5cm×4cm的皮肤全层缺损伤口。造模后第2天开始每天局部给药1次,连续15d,每4d测量伤口面积并计算愈合率,第16天取伤口及其周围皮肤组织,石蜡切片,Masson’s三色法染色,MOTICAdvanced 3.2形态分析软件分析新生上皮面积、厚度和上皮细胞迁移距离。结果rhKGF-2涂膜剂对大鼠皮肤深II度烫伤和皮肤全层切除伤口的愈合均有明显的促进作用,使新生上皮面积、平均厚度和上皮细胞移行距离等明显增加。作用强度比同剂量的单纯的rhKGF-2溶液剂好。结论rhKGF-2涂膜剂能明显加快大鼠皮肤烫伤和皮肤全层切除伤口周围上皮细胞的增生与迁移,加快创面愈合过程。     

重组人角质细胞生长因子-2涂膜剂促进大鼠皮肤伤口愈合

目的研究重组人角质细胞生长因子-2(Recombinanthumankeratinocytegrowthfactor-2,rhKGF-2)涂膜剂对大鼠皮肤伤口愈合速度的影响。方法(1)用预热100℃的100g砝码在大鼠背部脱毛部位烫8s,形成4个直径约2.5cm的深II度烫伤口;(2)手术方法切除大鼠背部部分皮肤,形成2个1.5cm×4cm的皮肤全层缺损伤口。造模后第2天开始每天局部给药1次,连续15d,每4d测量伤口面积并计算愈合率,第16天取伤口及其周围皮肤组织,石蜡切片,Masson’s三色法染色,MOTICAdvanced3.2形态分析软件分析新生上皮面积、厚度和上皮细胞迁移距离。结果rhKGF-2涂膜剂对大鼠皮肤深II度烫伤和皮肤全层切除伤口的愈合均有明显的促进作用,使新生上皮面积、平均厚度和上皮细胞移行距离等明显增加。作用强度比同剂量的单纯的rhKGF-2溶液剂好。结论rhKGF-2涂膜剂能明显加快大鼠皮肤烫伤和皮肤全层切除伤口周围上皮细胞的增生与迁移,加快创面愈合过程。     

流体膜中重组人角质细胞生长因子-2含量测定

目的以甲壳素为主要基质制成以重组人角质细胞生长因子-2(rhKGF-2)为主要活性成分的新型制剂流体膜用于治疗烧烫伤促愈合,为该新制剂的质量标准制定可行的活性成分定量测定方法。方法利用rh-KGF-2的特异性抗体性质,采用酶联免疫法(间接ELISA法)测定其在该制剂中的含量,并进行了方法学验证。结果制剂中其它成分不干扰rhKGF-2的测定;线性范围为0~9μg.mL-1,回归系数为0.97,检测限度为0.56μg.mL-1;批内和批间精密度均较高,CV%分别为2.0%,1.01%;回收率为99.1%。测定了3批试制品,平均含量为1.62μg.mL-1。结论本方法简便,准确,可用于该制剂中rhKGF-2的含量测定。     

重组人角质细胞生长因子冻干粉针剂中β-巯基乙醇残留量的考察

目的考察重组人角质细胞生长因子（rh-KGF）冻干粉针剂中β-巯基乙醇的残留量,确定其临床应用安全性。方法采用气相色谱法,考察β-巯基乙醇对照品的检测限、标准曲线、加样回收率及稳定性,并对不同批号的rh-KGF冻干针剂中β-巯基乙醇残留量进行考察。结果β-巯基乙醇的检测限为0.235μg/ml,在0～52.08μg/ml浓度范围内,β-巯基乙醇与其浓度有良好线性关系（r=0.9999）。加样回收率及稳定性均符合要求;且不同批号的rh-KGF冻干粉针剂中β-巯基乙醇基本无残留。结论 rh-KGF冻干粉针剂安全,无β-巯基乙醇残留,可应用于临床。     

阿柏西普对小鼠角膜碱烧伤后新生血管的抑制效果及机制探讨

目的 探讨阿柏西普对小鼠角膜碱烧伤后新生血管的抑制作用及机制.方法 制作小鼠角膜碱烧伤模型,分为阿柏西普组(A组)和生理盐水组(B组),观察两组新生血管生长情况,对比新生血管面积.两组小鼠于造模后第14天,用Western blot检测血管内皮生长因子A(VEGFA)和血管内皮生长因子B(VEG-FB)在角膜组织中的表...     

Topical Application of Keratinocyte Growth Factor Conjugated Gold Nanoparticles Accelerate Wound Healing

Keratinocyte growth factor (KGF) has been demonstrated to specifically stimulate the multiplication and migration of keratinocytes. However, due to rapid degradation, the results of topical application of growth factors on wounds are unsatisfactory. In this study, we cross-linked KGF to the surface of gold nanoparticles (GNPs) and explored their effects on wound healing. The as-synthesized nanocomposite (KGF-GNPs) displayed good colloidal stability, decent biocompatibility as well as negligible cellular cytotoxicity. The in vitro cellular experimental results demonstrated that KGF-GNPs could effectively promote the proliferation of keratinocytes in contrast to bare GNPs or KGF. Furthermore, in animal full-thickness wound model, KGF-GNPs are more conducive to wound healing than bare GNPs or KGF. KGF-GNPs enhanced wound healing by promoting wound re-epithelialization rather than granulation. The superior biocompatibility, colloidal depressiveness and biological activity of this nanocomposite indicate that it could be utilized as a promising wound healing drug for clinical application in the future.     

重组人酸性成纤维细胞生长因子促进烧伤与创伤愈合作用研究

目的观察重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对小型猪创伤修复和家兔烫伤创面修复的促进作用。方法建立小型猪创伤模型，其中3组分别按90，60，30 AU·(cm2) 1的剂量给予人碱性成纤维细胞生长因子（haFGF），阳性对照组按60 AU·(cm2) 1的剂量给予rhbFGF，阴性对照组给予等量基质，空白对照组不给予任何药物，采用创面照像和透明膜描记称量法记录伤后第4，8，14天创面面积，用注水法测量伤腔容积。观察伤后第8天和第14天创面肉芽组织生长与再上皮化变化，评价修复效果。另建立家兔烫伤创面模型，分组与给药方法同上。观察伤后3，7，14，21 d创面面积，以及伤后14，21 d创面肉芽组织生长与再上皮化变化情况，评价修复效果。结果各组小猪创面面积随伤后时间的延长逐渐缩小，其中rhaFGF 90 AU·(cm2)^-1组和hbFGF 60 AU·(cm2)^-1组小猪的疗效更显著。各组小猪创面伤腔容积随伤后时间的延长而逐渐缩小，其中rhaFGF 90 AU·(cm2)^-1组和hbFGF 60 AU·(cm2)^-1组更为明显（P＜0.05）。组织学检查，可见经rhaFGF和rhbFGF治疗8 d后小猪的创面成纤维细胞生长活跃，数量多，毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于对照组。伤后第14天，各组家兔创面均已愈合，但各rhaFGF治疗组和阳性对照组家兔的创面表皮层较厚。各组家兔烫伤创面面积随伤后时间的延长而逐渐缩小，其中以rhaFGF 90 AU·(cm2)^-1组和hbFGF 60 AU·(cm2)^-1组的效果更明显。组织学检查，可见rhaFGF 90 AU·(cm2)^-1组家兔的创面在伤后14 d大部分已被新生表皮覆盖，表面附着少量坏死组织，创面基本愈合。结论rhaFGF对小型猪背部刀伤创面有促修复作用，可促进创面肉芽组织生长、毛细血管胚芽形成与再上皮化。rhaFGF对家兔背部烫伤创面有促修复作用，可促进创面肉芽组织生长，还可以促进坏死组织脱落与再上皮化。     

重组人酸性成纤维细胞生长因子促进儿童创面愈合的多中心、开放性随机对照试验

目的:观察重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-a FGF)对儿童手术或意外创面愈合的促进作用。方法:206例患儿随机分作2组,观察组给予rh-a FGF、对照组给予重组人碱性成纤维细胞生长因子(b FGF),分别进行创面治疗,观察治疗7 d后两组伤口愈合、患儿感染、脂肪液化等疗效情况,及治疗6个月后的瘢痕、色素沉着及不良反应等情况。结果:rh-a FGF、b FGF治疗7 d的愈合率分别为88.4%、74.2%,剩余创面面积分别为(2.2±1.1)cm2、(3.9±2.4)cm2;6个月后rh-a FGF组与b FGF组疤痕发生率分别为27.2%、67.5%,色素沉着发生率分别为30.1%、69.9%,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:rh-a FGF对儿童手术或意外创伤创面的促修复作用较b FGF更强,可有效促进创面愈合、缩短愈合时间、降低疤痕发生率及色素沉着发生率、有效减少疤痕面积及色素沉着面积。     

壳聚糖对大鼠Ⅲ度烧伤创面表皮生长因子的影响研究

目的:研究壳聚糖对大鼠Ⅲ度烧伤创面表皮生长因子(EGF)和EGFmRNA表达的影响及意义。方法:105只Wistar大鼠除5只作为正常对照组外,其余建立烧伤模型后分为壳聚糖低、中、高浓度(1%、2%、4%)组及贝复济组(阳性对照组)和自然愈合组(模型组),每日2次连续21d于受伤处喷以相应药物,采用免疫组织化学法、核酸分子杂交法及图象分析法检测烧伤后3、7、14、21d时大鼠Ⅲ度烧伤创面EGF和EGFmRNA的表达。结果:与模型组比较,壳聚糖各浓度组均可增强EGF和EGFmRNA的表达,并呈浓度依赖性,尤以4%壳聚糖组作用更强(P<0.01或P<0.05)。结论:壳聚糖对大鼠Ⅲ度烧伤创面有促愈合作用,其促愈合机制与增强创面EGF和EGFmRNA表达有关。     

重组人酸性成纤维细胞生长因子治疗肛瘘术后创面的随机对照试验

目的：观察重组人酸性成纤维细胞生长因子（rh-aFGF）对肛瘘术后的创面促愈合作用.方法：237例肛瘘术后患者随机分为2组,观察组（n=125）给予rh-aFGF,对照组（n=112）给予重组人碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）进行创面治疗.观察治疗3周后两组剩余创面大小、愈合率、创面祛腐时间、创面平均愈合时间、创面愈合率、肉芽生长开始时间等情况,及治疗后第7、14、21天肉芽组织生长、创面疼痛情况.结果：治疗3周后,观察组在减少创面面积,增强创面愈合率,缩短愈合时间、祛腐时间,以及肉芽组织开始生长时间等方面均优于对照组（P＜0.05或0.01）;治疗后第7天两组肉芽组织生长情况及疼痛情况差异无统计学意义（P＞0.05）,治疗第14天及第21天,两组肉芽组织生长及疼痛差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论：rh-aFGF对肛瘘术后的促修复作用较bFGF更强,有效促进创面缩小、缩短祛腐时间与愈合时间、缩短肉芽生长开始时间、提高创面愈合率、有效提高肉芽组织生长、缓解创面疼痛等方面的作用.     

重组鼠源角质细胞生长因子的发酵表达优化及纯化

通过正交实验优化了融合型小鼠角质细胞生长因子(rm-KGF)重组大肠杆菌的发酵和诱导表达条件。优化后的发酵培养基为:葡萄糖6g/L,酵母提取物10g/L,NH4Cl1.3g/L,磷酸盐1mol/L,MgSO4·7H2O0.6g/L。诱导表达条件为:以1mmol/LIPTG于菌体密度(A600)为1时诱导5h。在此条件下,分别经CM-SephadexG-50和HeparinSepharoseCL-6B两步纯化,所得融合rm-KGF经HPLC检测纯度约96%,每升发酵液可得约82mg纯化产品。     

酸性成纤维细胞生长因子治疗深Ⅱ度烧伤的多中心随机对照临床试验

目的:评价重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-a FGF)与重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-b FGF)治疗深Ⅱ度烧伤的临床疗效与安全性。方法:采用多中心、随机、平行对照临床试验方法,入选5个研究中心216例深Ⅱ度烧伤患者,两组患者均给予相应抗感染、营养补充治疗。观察组(108例)入院时首先根据创面大小给予rh-a FGF1瓶/5 cm2进行冲洗,然后每日3~4喷/cm2喷雾治疗,6~8次/d,对照组(108例)给予rh-b FGF治疗,给药方法同观察组。随访30 d后,评价两组患者创面愈合情况。结果:观察组完全愈合时间、溶痂时间、12 d完全愈合率、15 d完全愈合率等指标均明显优于对照组(P<0.05)。治疗7 d后,观察组白细胞水平、渗出评分均明显低于对照组(P<0.01)。两组总评分中度构成比比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:rh-a FGF治疗深Ⅱ度烧伤创面临床疗效优于rh-b FGF,安全性相似。     

碱性成纤维细胞因子促进创面修复的临床疗效

目的:观察碱性成纤维细胞因子(bFGF)对创面修复的疗效及毒副作用.方法:173例患者分为治疗组89例,其中急性创面55例,慢性难愈合创面34例,采用bFGF局部外用,每平方厘米150活性单位,qd,7 d为1个疗程;对照组84例,其中急性创面50例,慢性难愈合创面34例,除未用bFGF外,其他疗法同治疗组.结果:治疗组较对照组创面修复质量显著提高,创面愈合时间缩短,且无明显毒副作用.结论:bFGF具有促进创面修复作用,有很大临床应用价值.     

外用冻干重组人酸性成纤维细胞生长因子对剖宫产术后腹部切口愈合的疗效观察

目的:研究外用冻干重组人酸性成纤维细胞生长因子(商品名:艾夫吉夫,rhaFGF)对剖宫产术后切口愈合的影响,并初步探寻外用冻干重组人酸性成纤维细胞生长因子最佳的给药方式。方法:本研究采用开放性临床随机、对照试验设计,将2011年8月—2013年7月451例行剖宫产术并符合纳入标准的患者,根据住院病历号随机分为3组(安慰剂组、喷雾治疗组和冲洗治疗组),冲洗治疗组于皮肤缝合前采用溶于0.9%氯化钠注射液的外用冻干重组人酸性成纤维细胞生长因子冲洗创面,缝合后再将外用冻干重组人酸性成纤维细胞生长因子喷于创面或纱布;喷雾治疗组于切口缝合后同冲洗治疗组进行喷雾治疗;安慰剂组于缝合前用0.9%氯化钠注射液冲洗创面。随访并记录患者住院时间,观察患者切口愈合情况、应用TDP神灯护理情况等。结果:冲洗治疗组患者疗效与安慰剂组比较,各指标具有显著性差异;与喷雾治疗组比较,冲洗治疗组患者在切口愈合甲级(82.98%vs.52.52%,P=0.027)、乙级(16.31%vs.43.17%,P=0.033)、手术切口满意率(91.49%vs.74.82%,P=0.038)、瘢痕直径[(7.84±2.85)cm vs.(10.08±3.17)cm]方面均具有显著性差异。结论:外用冻干重组人酸性成纤维细胞生长因子可缩短患者术后切口愈合时间和住院时间,减少瘢痕面积,并且疼痛和瘙痒发生率较低,最佳的给药方式为术中冲洗联合术后喷雾。     

重组人酸性成纤维细胞生长因子促进家兔体表溃疡愈合作用研究

目的 观察重组人酸性成纤维细胞生长因子( rhaFGF)对家兔体表溃疡愈合的促进作用.方法 建立家兔的体表溃疡模型,其中2组分别按90, 60 AU&#8226;(cm2)-1的剂量给予rhaFGF,阳性对照组按60 AU&#8226;(cm2)-1的剂量给予重组牛碱性成纤维细胞生长因子（rb bFGF）,阴性对照组给予与第二组等量的溶媒.采用创面照相、透明膜描记称量法记录溃疡形成后第1,4,8天溃疡面面积,比较面积收缩量;用注水法测量伤腔容积,比较容积缩小量.溃疡形成后第8和第14天取创面组织,经10%甲醛溶液固定后制片,常规染色,重点观察创面肉芽组织生长情况,包括毛细血管生长、胶原沉积与再上皮化变化,以评价修复效果.结果 各组家兔溃疡面面积随时间的延长而逐渐缩小,其中rhaFGF 60 AU&#8226;(cm2)-1组和rb bFGF 60 AU&#8226;(cm2)-1组疗效更显著(均P＜0.05).各组家兔伤腔容积随伤后时间的延长而逐渐缩小,其中rhaFGF 60 AU&#8226;(cm2)－1组和rb bFGF 60 AU&#8226;(cm2)－1组更为明显(均P＜0. 01).组织学检查,可见rhaFGF60 AU&#8226; (cm2) 1组和rb bFGF60 AU&#8226; (cm2) 1组治疗8 d后家兔的溃疡面成纤维细胞生长活跃,数量多,毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于阴性对照组;第14天,rhaFGF60 AU&#8226; (cm2) 1组和rb bFGF60 AU&#8226; (cm2) 1组家兔溃疡面创面收缩和再上皮化明显,且优于阴性对照组.结论 rhaFGF对家兔体表溃疡有促进愈合作用,可促进创面肉芽组织生长、毛细血管胚芽形成与再上皮化.