保存人红细胞的新策略一抗氧化剂保养液保存效果的研究

塑料血袋盛义务献血员的静脉血（含适量保养液）并置4℃冰箱保存。在保存前、后不同时间检查各项指标,旨在研究抗氧化剂保养液延长人血红细胞在4℃条件下的保存时间,以缓解血液保存供应的压力,为输血抢救创造有利条件。实验分3组：ACD组,GMA组和抗氧化剂（SOD）组）。研究结果表明,在4℃条件下保存75天后SOD组红细胞血红蛋白回收率为87．2％,血浆血红蛋白（mg/L)为193．2,P50（mmHg)为34．0（正常值为33．1）,最大变形指数（DImax）为0．2413,即为正常值的74．3％,外观检查无明显溶血、变色、气泡和凝块。结论提示,用抗氧化剂保养液保存红细胞在4℃条件下可延长75天,其红细胞血红蛋白和血浆血红蛋白回收率附合国家《血站基本标准》规定要求。     

保存人红细胞的新策略-抗氧化剂保养液保存效果的研究

塑料血袋盛义务献血员的静脉血(合适量保养液)并置4℃冰箱保存.在保存前、后不同时间检查各项指标,旨在研究抗氧化剂保养液延长人血红细胞在4℃条件下的保存时间,以缓解血液保存供应的压力,为输血抢救创造有利条件.实验分3组:ACD组,GMA组和抗氧化剂(SOD)组.研究结果表明,在4℃条件下保存75天后SOD组红细胞血红蛋白回收率为87.2%,血浆血红蛋白(mg/L)为193.2,P50(mmHg)为34.0(正常值为33.1),最大变形指数(DImax)为0.2413,即为正常值的74.3%,外观检查无明显溶血、变色、气泡和凝块.结论提示,用抗氧化剂保养液保存红细胞在4℃条件下可延长到75天,其红细胞血红蛋白和血浆血红蛋白回收率附合国家<血站基本标准>规定要求.     

去白悬浮红细胞4℃储存不同时间的质量评价

目的检测去白悬浮红细胞在4 ℃储存不同时间下的红细胞溶血率、细菌生长、生化指标、能量代谢、膜损伤及氧化应激等指标,评价其质量随储存时间的变化。方法 10份志愿者全血于采集当天留取50 mL,用一次性白细胞过滤器滤白,尽可能去掉血浆层,根据200 mL全血对应红细胞保存液量等比例加入红细胞保存液,置4 ℃冰箱冷藏保存至终末期。于第0、7、14、21、28、35和42天检测溶血率、ATP/2,3-DPG、Na~+/K~+/GLU/LDH/pH、PS/CD47、MDA/SOD等指标,第0、14、28和42天检测细菌生长情况。结果随储存时间延长,溶血率增加,从0天到42天由0.03%增加到0.4%左右,与0天相比差异有统计学意义(P0.001),但均未超过国标要求。无细菌生长。上清中Na~+和GLU浓度降低,K~+和LDH含量增高,pH下降。ATP在储存第14天开始下降,第21天降至初始值的36.4%,储存终末期下降至13.2%,与第0天相比均具显著性差异(P0.001)。2,3-DPG在储存第一周内升高而后开始下降,第28天降至初始值的57.5%,42天降至初始值的44.0%。储存终末期,PS外翻率增加至0.83%,红细胞膜CD47分子平均荧光强度降低至初始值的60.8%。MDA含量无明显改变,第28天时SOD活力下降,与新鲜红细胞相比具统计学差异(P0.001)。结论通过对4 ℃储存去白悬浮红细胞进行质量评价,因两周内生化指标、能量代谢指标及携氧能力基本维持,推荐去白悬浮红的最佳使用期限在两周内。     

使用GMA及PAS-Ⅲ2种添加液冷藏保存血小板的体外研究

目的比较2种不同添加液对4℃冷藏血小板的体外形态、活力和活化程度等指标的差异,分析特定的添加液对4℃冷藏血小板的保护作用。方法取8份单采血小板,将其一分为二,各保留35%血浆,分别添加葡萄糖甘露醇腺嘌呤血细胞保存添加液(GMA)和血小板保存添加液Ⅲ(PAS-Ⅲ)2种不同保存添加液,置4℃条件下保存,于5d后取样测定有关指标。结果在保存5d期间,GMA-PCs的低渗休克反应明显高于PAS-Ⅲ-PCs;而P-选择素的表达则显著低于后者;另外,前者IL-6的产生亦显著低于后者;2组PCs的血小板形变能力、GPⅠbα表达、乳酸生成无显著性差异。结论在4℃冷藏条件下采用血小板保存添加液替代血浆保存单采血小板,对保持血小板体外质量,GMA优于PAS-Ⅲ。     

维生素E对红细胞保存液保存效果改善的研究

目的 探索生物试验用红细胞体外保存时间延长的方法.方法 将健康成人的新鲜血液保存在已成熟应用的血液保存液CPDA和Alserve's中,并在两种保存液中均添加维生素E.在56天实验期间,每7天检测一次红细胞SOD、红细胞ATP、游离血红蛋白.结果 添加了维生素E10 mg/ml的红细胞保存液CPDA和Alserve's对红细胞的保护作用增强.在4"C保存条件下,准备应用于生物试验的红细胞的保存期限由28天提高到42天(CPDA)和由7天提高到21天(Alserve's).在最初7天保存期内两种保存液的效果近似.结论维生素E可以明显增强已成熟应用的血液保存液CPDA和Alserve's对红细胞的保护作用.珍贵血液样本在短期内使用建议选用配方简单的Alserve's+维生素E保存液.珍贵血液样本长期保存建议选用配方全面均衡的CPDA+维生素E保存液.     

改良血小板添加液低温液态保存血小板的形态及功能研究

本研究探讨使用改良的血小板添加液替代70％自体血浆在低温（10℃）液态条件下对血小板的保存效果。采集6名供者单采血小板,每一名供者单采血小板平均分为3组,A组（常规保存组）加入100％血浆、22℃保存：B组（添加液10℃保存组）加入70％PAS—ⅢM／30％血浆、10℃保存;C组（冰冻保存组）加入100％血浆和海藻糖、-85℃保存;另设D组（血浆4℃保存组）加入100％血浆、4℃保存,作为扫描电子显微镜对照组。A、B组在第1、5、7、9天取样,C组在20天后复苏取样,分别检测CD62p、HSR、PAgT、LDH的变化。血浆常温组、添加液低温组于保存后第3、9天取样扫描电镜观察,血浆低温组于保存后第3天取样观察．冰冻组在20天后复苏取样观察,同时使用新鲜血小板作为对照。结果表明,保存期内随保存时间延长,A组和B组CD62p表达增加,HSR和最大聚集率降低;A组的LDH释放、CD62p表达、HSR、血小板最大聚集率与B组比较有显著统计学差异（P〈0．05）。C组LDH释放明显较其他两组增多,但CD62p表达较少（P〈0．05）。A、B组血小板形态保持较好,C组血小板形态保持差。结论：改良的PAS—ⅢM保存液能够替代血浆用于血小板的保存,在低温条件下能够很好地保护血小板的功能,保存效果优于血浆常温保存。     

0℃液态保存红细胞获得成功

为确定液态保存红细胞的最低适宜温度,作者采集400ml 全血与56ml CPD 保存液混合并分装到4个含DEHP 增塑剂的聚氯乙烯(DEHP-PVC)袋(50ml)和4个玻璃瓶(50ml)中,分别于5±1℃、0±1℃、—2±1℃及—5±1℃保存。分别于保存的第0、7、21、35和42天轻轻混匀塑料袋和玻璃瓶内的血液,并取样检测。结果:血液用DEHP-PVC 袋于5、0、—2和—5℃保存21和35天,当保存温度低时,其pH、2,3-DPG 水     

预冻温度和冻干机搁板温度对冷冻干燥红细胞的影响

为研究预冻温度和冷冻干燥机 (冻干机 )搁板温度对红细胞冻干保存后回收率的影响 ,采用主要成分为7%二甲亚砜和 4 0 %聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)的缓冲液作为保护液 ,在不同预冻温度或搁板温度下进行红细胞的冻干保存。首先将新鲜血液离心、洗涤和平衡以制备浓集红细胞 ,然后将浓集红细胞和保护液按 1∶3混匀制备红细胞悬液 ,在不同温度 (- 2 0 ,- 35 ,- 4 5 ,- 80或 - 196℃ )下预冻后移入冻干机 (搁板温度设为 - 35℃ ,抽真空压力为2 0 0mbar)内进行真空干燥。为研究冻干机搁板温度对冻干红细胞的影响 ,将上述红细胞悬液先在 - 80℃下预冻后移入冻干机 ,在不同的搁板温度 (- 2 0 ,- 2 5 ,- 30 ,- 35 ,- 4 0或 - 4 5℃ )下抽真空干燥 ,冻干结束后用 37℃的再水化液快速水化。结果表明 :在不同预冻温度下 ,冻干后红细胞和血红蛋白的回收率均在 85 %和 75 %以上 ,各组之间差异不显著。但 - 196℃组上清游离血红蛋白浓度显著高于其他各组 (P <0 .0 1) ;当搁板温度等于或高于- 2 5℃时 ,样品无法冻干 ;当搁板温度等于或低于 - 30℃时 ,随着搁板温度的降低 ,冻干时间相应延长。再水化后红细胞和血红蛋白回收率均在 90 %以上 ,各组之间差异不显著 ;但当洗涤至等渗时 ,4组血红蛋白回收率之间差异不显著。结论 :本冻     

野战运输对红细胞保存的影响

为了研究野战运输条件对几种血液成份的影响，为战时伤病员救治的血液保障提供依据，将红细胞悬液、少白细胞的红细胞悬液和洗涤红细胞经过模拟野战公路（三级公路）运输（震荡）4小时，然后在4℃条件下继续保存15天；取震荡前、后及保存15天的3个时间点的血样，分别进行上清游离血红蛋白、血常规和血生化分析。结果表明：红细胞悬液和少白细胞的红细胞悬液组游离血红蛋白、乳酸脱氢酶和钾离子浓度在震荡前、后及保存15天后的改变没有明显差异，而洗涤红细胞在震荡后上述三项指标显著增加，继续保存15天后，进一步增高。3个组中其它一些血液学指标没有明显的改变。结论：野战运输条件下（三级公路），采取合理的保温和减震措施后，运输4小时内红细胞悬液和少白细胞的红细胞悬液仍然可以继续保存15天并应用于临床，而洗涤红细胞则不能。     

虾青素对红细胞氧化应激及胞膜过氧化损伤的影响

目的:探讨抗氧化剂虾青素(Astaxanthin,ASTA)对储存悬浮红细胞内外氧化应激水平的影响和对胞膜的保护作用。方法:采集志愿者血液,制备去白悬浮红细胞,将其随机分为4组:A组、B组、C组、D组。在B、C、D3组悬浮红细胞的MAP保存液内加入抗氧化剂ASTA,使其终浓度分别为5、10和20μmol/L,A组作为对照组只加入ASTA的溶解液DMSO。悬浮红细胞于2℃-6℃冰箱内保存。于保存第7、14、28、42天,采用荧光酶标仪测定红细胞内活性氧族(ROS)含量;硫代巴比妥酸比色法测定红细胞内丙二醛(MDA)含量;分光光度法测定细胞外过氧化氢(H2O2)含量,全自动血细胞分析仪测定平均红细胞体积(MCV);化学比色法测定细胞外游离血红蛋白含量(FHb)。结果:在红细胞储存期间B、C、D组悬浮红细胞内ROS、MDA含量、细胞外FHb和H2O2含量均低于对照组;保存第7天和14天时B、C、D组的MCV与对照组无统计学差异;保存第28天和42天时B、C、D组的MCV低于对照组。结论:ASTA可以降低储存悬浮红细胞内外的氧化应激水平,减轻细胞膜的过氧化损伤。     

一种新型试剂红细胞保养液的制备和应用

目的　研制用于微量板法等血清学试验的一种通用的试剂红细胞保养液。方法　采用试管法、微量板法、纸片法等作红细胞血型血清学试验 ,观察所研制的新保养液配制的试剂红细胞在试验中应用效果和保存期间的变化。结果　该保养液可于 4℃保存试剂红细胞 3个月 ,它在ABO反定型试验中敏感性高、特异性强、无抗原抗体免疫反应导致的溶血和弱凝集现象。结论　该保养液所配制的红细胞贮存时间长 ,可用于微量板等方法的ABO反定型等试验 ,适合手工和自动化仪器检测     

磁场对4 ℃保存血液保护作用的实验研究

目的　探索磁场对4℃保存血液的保护作用。方法　采集10例健康献血者的血液以枸橼酸-枸橼酸钠-葡萄糖(ACD)溶液防凝并于4℃保存。磁场组每隔12h放置于40mT的磁场中处理12h,在血液保存的35d期间,于当天及每7d测定红细胞ATP,红细胞超氧化物歧化酶(SOD)和血浆游离血红蛋白。结果　磁场组的ATP浓度和SOD活力在第7d至第35d明显高于相应的对照组(P<0.05或P<0.001);磁场组的游离血红蛋白浓度在第14d至第35d明显低于相应的对照组(P<0.01或P<0.001)。结论　用磁场处理4℃保存的血液,能改善贮存红细胞活力,减轻红细胞膜损伤和功能改变,并将ACD溶液保存血液的有效期限延长2周时间。     

全血、去白细胞和经短时加热的红细胞浓缩液中产生的细胞因子

背景与目的 一般认为,诸如白介素IL-1、IL-6、α肿瘤坏死因子(α-TNF)之类的炎性细胞因子可能与输注血成分,尤其是血小板浓缩液(PCs)而发生的许多非抗体介导的不良反应有关。本研究目的在于比较在几种条件下的保存过程中,诸如去白膜压积红细胞(RBCs)、经过滤的RBCs和全血(册)等含红细胞的不同血液成分中炎性细胞因子的水平。材料与方法 WB以(CPD—A1、n=6)于2～6℃保存35天,在开始保存日、保存的第21、35天采集标本。将含添加液PAGGS-M(n=16)的去白膜RBCs一分为二,一份在开始保存日用滤器过滤以除去白细胞(WBC),这两份均于2～6℃下保存49天(标本:第0、21、49天)。去白膜未经过滤的SAG—MRBCs(n=16)制备之后即分成两份,2～6℃保存42天,(取标本时间为,0天、21天、42天)。其中一半在第3天于室温下保持24小时。用商品化的     

不同保养液对血2,3-二磷酸甘油酸与ATP的保存效果

目的　研究不同保养液对血中 2 ,3 二磷酸甘油酸 ( 2 ,3 DPG)和三磷酸腺苷 (ATP)的保存能力。寻找适宜 2 ,3 DPG和ATP保存的保养液。方法　同一血源于采血的当日及 4d、7d、1 0d、1 4d、2 1d、2 8d、35d、4 2d分别测定 2 ,3 DPG、ATP、Hb和 pH值 ,观察不同保养液对血中 2 ,3 DPG和ATP的保存效果。 结果　ACD保养液保存血第 1 4d、CPD及CPD AI保存血第2 1d就检测不到 2 ,3 DPG ,CPD AI DHA类保养液中 2 ,3 DPG到 4 2d维持在初始水平的 6 0 % ,CPD AI DHA Vit .C保养液中2 ,3 DPG的含量至 4 2d仍然保持在初始水平。CPD AI类保存血对ATP的保存效果较好 ,ACD与CPD保养液对ATP保存效果较差。结论　CPD AI DHA Vit .C保养液对血中 2 ,3 DPG和ATP的保存效果最好     

滤除白细胞对红细胞溶血的观察

目的:了解过滤白细胞造成红细胞溶血的程度。方法:取4℃保存第5天的40袋2U悬浮红细胞随机分为A、B两组,A组与白细胞滤器连接进行过滤,留取检测样品,分别于过滤后第0、7、14、21天分别采用离子选择电极法测定血浆中钾离子浓度、邻甲联苯胺法测定游离血红蛋白浓度。B组不做过滤处理,其他处理同A组。结果:去白细胞滤器滤过的血液中钾离子浓度、游离血红蛋白浓度随保存时间的延长而增高。结论:过滤后的红细胞悬液最好在7d内用完。     

红细胞保存的研究:Ⅱ、在AS-1及CPDA-1中保存的红细胞的囊泡形成、形态学及膜脂质比较

作者对保存于AS-1和CPDA-1保养液中42及56天红细胞的形态学变化、膜脂质含量变化及囊泡脱落情况进行了比较。方法将8名符合FDA和AABB标准的献血者的血液分别采入含有CPDA-1及AS-1的聚氯乙烯四联袋中。供者至少4个月内未献血。每单位     

不同配方保存液对2型糖尿病患者贮存式自体红细胞保护作用的对比研究

目的 本研究旨在探讨不同配方保存液对体外贮存期红细胞损伤的影响,以提供2型糖尿病(T2DM)患者红细胞适宜贮存条件。方法 收集2021年6月—2022年1月择期手术的糖尿病患者和非糖尿病患者各20例。糖尿病患者红细胞分别储存于不同配方保存液中(保存液a、保存液b和保存液c)以筛选出适宜保存液(DO-o),观测非糖尿病患者常规保存液组(NC组)、糖尿病患者常规保存液组(DO-c组)和糖尿病患者新型保存液组(DO-o组)中,红细胞的形态结构和功能代谢的变化。结果 在T0(红细胞分离后即刻)、T1(贮存7天)、T2(贮存14天)、T3(贮存21天)和T4(贮存28天)时,各组内红细胞计数、血红蛋白(Hemoglobin,Hb)、Na⁺和pH值逐渐降低(P <0.05),K⁺浓度逐渐增高(P <0.05)。保存液b中红细胞计数明显多于a和c组(P <0.05),T2、T3和T4时,保存液a和b组Hb量高于c组(P <0.05);T3和T4时,保存液b组中Na⁺浓度高于另外两组(P <0.05);T2...     

亚甲兰光化学法红细胞病毒灭活的初步探讨

目的　探讨择定条件下亚甲兰光化学方法对红细胞悬液的病毒灭活效果及其对红细胞质量指标的影响。　方法　在国产 PVC储血袋内的 GMA红细胞悬液中预置 VSV和 Sindbis病毒 ,加入终浓度为 5μmol/L的亚甲兰后用380 0 0 lx荧光照射 60分钟 ,测定处理后红细胞悬液及其匀浆中的病毒滴度及保存 2 1天内各时间段的红细胞 ATP、2 ,3-DPG、上清 K+ 和游离血红蛋白等质量指标。　结果　经上述方法处理后 ,红细胞悬液上清和红细胞匀浆中的 VSV病毒滴度分别降低 8.87± 0 .4 2 lg TCID50 和 7.79± 0 .90 lg TCID50 ;Sindbis病毒滴度则分别降低 6.5 8± 1 .67lg TCID50 和 5 .0 8±1 .4 2 lg TCID50 :处理后保存 2 1天内的各时间段红细胞主要质量指标未发生明显不良变化。　结论　亚甲兰光化学方法能有效灭活红细胞悬液及红细胞匀浆中与细胞相关的脂质包膜模型病毒 ,对红细胞体外质量指标无明显不良影响     

AS-3红细胞4℃保存42天后复壮和低温保存的影响

背景 FDA已批准NUTRICEL(AS-3)4℃保存红细胞浓缩物(RBC)42天。在RBC保存末期,携氧功能降低和ATP水平下降。作者研究了低温保存后复壮对AS-3红细胞的存活能力及功能的影响。方法 研究在两个血液中心进行。每个中心22个健康的无偿献血者每人捐献1单位血液。RBC浓缩物在4℃在AS-3中保存42天。10单位用Rejuvesol~R(enCyte systems,     

添加丙氨酰谷氨酰胺血液保存液对储存血液红细胞影响的实验研究

目的 探讨添加丙氨酰谷氨酰胺的血液保存液对储存血液红细胞的影响。方法 选取无菌试管20只均分为试验组(A)和对照组(B),A组1～10管中分别加入丙氨酰谷氨酰胺稀释液0.756 ml及血液保存液Ⅲ0.42 ml,B组1～10管分别加入血液保存液Ⅲ0. 42 ml; 选取同性别无偿献血人员10例,采集未抗凝静脉血,分别对应加入A,B两组1～10试管中各3 ml,4～6℃冰箱保存; 采血后第10,21,35天分别检测A,B两组血浆游离血红蛋白(FHB)含量,并予以统计分析。结果 不同检测时间A组FHB分别为13.687±3.490,24.677±11.510,48.081±16.412mg/L,B组FHB分别为31.319±13.949,47.753±22.231,71.346±23.342 mg/L,各检测时间之间FHB含量差异均有统计学显著性意义(P<0.05); 相同检测时间A,B两组间FHB含量差异均有统计学显著性意义(P<0.05),A组均显著低于B组。结论储存血液随保存时间延长,血浆FHB含量显著升高,添加丙氨酰谷氨酰胺血液保存液Ⅲ对储存红细胞具有显著保护作用,对红细胞膜保护作用优于血液保存液Ⅲ,可显著降低红细胞溶血及血浆FHB含量,提高储存血液质量及输注效果。