不同种属真皮成纤维细胞在不同血清浓度培养基中生长的比较观察

目的 :探讨作为皮肤组织工程种子细胞的不同种属动物成纤维细胞在不同培养基中的生长状态 ,以获得最佳生长状态的种子细胞。方法 :分别配制体积分数为 10 0、50、2 0ml/L血清和 2 0ml/L血清 牛垂体提取物 (BPE ,0 .0 2 5g/L) 4种培养基来培养人、York猪、SD鼠的真皮成纤维细胞 ,通过MTT比色和BrdU检测观察细胞的生长状态。结果 :成纤维细胞在 4种培养基中的生长状态有所不同 :人成纤维细胞在 10 0、50ml/L血清和 2 0ml/L血清 BPE的培养基中生长良好 ,York猪成纤维细胞在 50ml/L血清和 2 0ml/L血清 BPE的培养基中生长良好 ,SD鼠成纤维细胞只有在 2 0ml/L血清 BPE的培养基中生长状态好 ,增殖快。结论 :不同浓度血清的培养液对真皮成纤维细胞的生长都有影响 ,血清体积分数为 2 0ml/L(含BPE ,0 .0 2 5g/L)的培养液对3种真皮成纤维的生长都适合 ,血清体积分数为 10 0ml/L和 50ml/L的培养液也分别适合于人、York猪真皮成纤维细胞的生长     

纤维蛋白胶复合博莱霉素对兔下肢浅静脉的损伤效应及纤维化研究

目的:探索纤维蛋白胶复合博莱霉素(FG/BLM)对兔下肢浅静脉的损伤效应及纤维化过程.方法:分别将FG、FG/BLM注射到12只成年兔两侧下肢浅静脉内,注射后3、7、14、28 d获取标本(n=3),大体及组织学观察.结果:大体观察发现FG、FG/BLM注射后在静脉内形成呈半透明或暗红色栓子,2周后静脉逐渐变细并纤维化...     

纤维蛋白胶复合平阳霉素栓塞硬化治疗面颈部静脉畸形的远期疗效观察

目的:评价纤维蛋白胶复合平阳霉素栓塞硬化治疗面颈部静脉畸形的临床效果。方法:回顾2005年1月—2012年1月应用纤维蛋白胶复合平阳霉素栓塞硬化技术治疗的78例面颈部静脉畸形患者资料。63例患者接受纤维蛋白胶/平阳霉素栓塞硬化+平阳霉素注射治疗,15例患者除上述治疗外,还接受了无水乙醇硬化、射频消融或手术治疗。治疗后观察患者生命体征及症状,拍摄胸片了解肺部情况。通过临床观察、B超、MRI检查评价治疗效果。随访时间6个月～7 a。结果:78例患者中,男41例,女37例;年龄10岁～66岁(平均26岁)。67例(85.9%)病变消退率大于90%,11例(14.1%)大于50%。6例患者出现高热,未发现过敏反应、肺栓塞或其他并发症。结论:纤维蛋白胶/平阳霉素栓塞硬化技术安全、有效,并发症在可接受范围,适用于治疗大范围、高回流静脉畸形。     

富血小板纤维蛋白对牙龈成纤维细胞生物学功能的影响

目的:探究冷冻干燥富血小板纤维蛋白(freeze-dried platelet-rich fibrin,FD-PRF)对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,hGFs)功能的影响以及其抗菌性能,为口腔黏膜炎的防治提供新思路。方法:采用流式细胞术、CCK-8检测细胞增殖(cell counting kit-8,CCK-8)、细胞划痕和Transwell实验,检测FD-PRF对hGFs细胞周期、增殖和迁移的影响;采用倾注平板法和振荡培养法研究FD-PRF的抗菌作用。结果:CCK-8实验结果表明,随着FD-PRF浓度升高,hGFs的细胞数量显著增加。细胞周期结果显示, S-G2/M期的细胞比例:5%FD-PRF组>1%FD-PRF组>对照组,而G0-G1期细胞则相反。迁移实验结果显示,FD-PRF显著提升了hGFs的迁移速度。抗菌实验结果显示,FD-PRF组相比于对照组的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌数量明显减少。结论:FD-PRF促进hGFs进入细胞分裂期,进而促进细胞增殖。FD-PRF促进hGFs迁移。此外,本研究还证实FD-PRF具有一定的抗菌性。提示FD-PRF可以促进口腔黏膜炎的愈合。     

体外培养人牙周膜成纤维细胞及其成骨表型特征检测

目的　探讨牙周膜成纤维细胞作为牙周组织工程种子细胞的可行性。方法　采用酶消化法体外培养人牙周膜成纤维细胞 ,以人胎儿皮肤成纤维细胞为对照检测细胞碱性磷酸酶表达及矿化能力。结果　体外培养人牙周膜成纤维细胞与人胎儿皮肤成纤维细胞相比表达更高水平的碱性磷酸酶 (P <0 .0 5 ) ,矿化诱导液连续培养 30d均可观察到矿化结节形成。结论　采用酶消化法可快速简便地获取原代人牙周膜成纤维细胞。体外培养牙周膜成纤维细胞具有成骨样细胞表型特征 ,与人胎儿皮肤成纤维细胞相比更具分化潜能 ,可作为牙周组织工程种子细胞来源     

牙周膜成纤维细胞-富血小板胶的合成及其成骨活性表达的研究

目的：体外合成牙周膜成纤维细胞-富血小板胶（Periodontal ligament fibroblasts-Platelet—Rich Plasma gel,PDLFs／PRP—gel）并探讨其在临床应用中最佳植入时间。方法：体外合成PDLFs／PRP—gel;并测定其碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase,ALP）含量;免疫组化法检测基质中骨涎蛋白（Bone sialoprotein,BSP）、骨桥蛋白（Osteopontin,OPN）含量;Von Kossa染色法观察沉积钙盐。结果：PDLFs／PRP—gel基质内第6d时ALP含量明显增高,第8-10d达到峰值,11d后迅速下降,与对照组比较差异有统计学意义。基质内骨桥蛋白在15—16d时表达明显,与其他时间的实验组比较有统计学差异;骨涎蛋白在4～6d和15～18d时表达明显,与其他时间的实验组比较有统计学差异。PRP—gel缓释液培养的人牙周膜成纤维细胞约在第15d时出现钙化结节。结论：临床牙周组织再生术中宜选用在体外培养8—15d的PDLFs／PRP—gel进行植入。     

应用纤维蛋白胶和医用OB胶修复兔面神经损伤的实验研究

目的:探讨用纤维蛋白胶或医用OB胶修复兔面神经的损伤效果。方法:手术制作实验用健康30只新西兰大耳白兔右侧面神经下颊支损伤模型,随机分成3组,分别为显微外科吻合组(Ⅰ组)、纤维蛋白胶粘合组(Ⅱ组)、医用OB胶粘合组(Ⅲ组),分别进行修复。术后16周进行大体观察、神经电生理检测、组织学观察、图像分析,评价神经再生恢复情况。结果:16周时肉眼观察3个组吻合口处均见神经再生,可抵抗一定拉力,Ⅰ组和Ⅲ组修复神经的周围软组织粘连较Ⅱ组严重;与Ⅰ组相比,Ⅱ组轴突再生率和再生轴突恢复比均有提高。结论:纤维蛋白胶和医用OB胶均有较好的生物相容性,可修复神经损伤,纤维蛋白胶对神经损伤的修复效果更佳。     

富血小板纤维蛋白提取液对牙周膜成纤维细胞成骨能力影响的实验研究

目的：探讨富血小板纤维蛋白提取液（Platelet-rich fibrin extract, PRFe）对牙周膜成纤维细胞（Periodon-tal ligament cell PDLC）增殖、成骨分化的影响,以期为富血小板纤维蛋白在临床的应用提供理论基础。方法：实验分为实验组（P组）和对照组（D组）, P组使用含PRFe的α-MEM成骨诱导培养液（10%胎牛血清、青霉素100mg/L、链霉素100mg/L、10-2mol/Lβ-甘油磷酸钠、10-7mol/L地塞米松、5mg/L抗坏血酸）培养细胞, D组则使用不含PRFe的α-MEM成骨诱导培养液。甲基噻唑基四唑（MTT）法测定1d、3d、5d的细胞增殖数;碱性磷酸酶（ALP）活性检测1d、3d、5d的成骨分化情况;荧光实时定量PCR测定Runx2 mRNA和OCN mRNA基因分别在3d、7d的表达。结果： MTT显示：随培养时间延长,细胞数量逐渐增加,在各时间点, P组细胞的吸光度值（1d：0.235±0.012,3d：0.270±0.014,5d：0.686±0.040）均明显高于 D 组（1d：0.201±0.011,3d：0.286±0.020,5d：0.426±0.024）,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）。 ALP活性：随着培养时间延长而增加, P组的增加更为显著,在各时间点, P组的吸光度值（1d：0.124±0.018,3d：0.176±0.013,5d：0.361±0.021）均显著大于D组（1d：0.103±0.011,3d：0.123±0.012,5d：0.162±0.014）,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）。荧光实时定量PCR：随着培养时间延长,两组细胞的基因表达量逐渐增加,将D组3d时基因表达水平定义为1,进行组内标准化, P组细胞的Runx2和OCN基因表达量（3d时分别为1.751±0.136,1.510±0.129;7d时分别为2.287±0.165,2.103±0.042）显著高于D组（3d时两个基因均为1;7d时分别为：1.367±0.121,1.208±0.051）,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）。结论： PRFe能有效地促进牙周膜成纤维细胞的增殖活性及成骨分化。     

恒磁场对牙周膜成纤维细胞表面结构影响的扫描电镜观察

用０．１４Ｔ的直流电磁场处理人牙周膜成纤维细胞，ＳＥＭ观察发现细胞排列、走形无异常，表面微小突起增多，推测可能与细胞合成分泌胶原蛋白功能增强有关．     

人牙周膜成纤维细胞在纯钛表面附着的电镜观察

目的：研究人牙周膜成纤维细胞(PDLF)在纯钛金属表面的结合形式和超微结构。方法：将纯钛试件放在12孔培养板内，取生长良好的第五代人牙周膜成纤维细胞接种在试件表面，培养72h后取出，原位包埋法制作透射电镜标本，透射电镜观察。结果：人牙周膜成纤维细胞在纯钛表面附着形式不同于上皮细胞在金属表面的附着形式，细胞与金属结合界面中未观察到典型半桥粒结构。人牙周膜成纤维细胞胞浆中，细胞器发达，富含与蛋白质合成、代谢及增殖等生物学功能有关的细胞超微结构，如粗面内质网、线粒体、核糖体、细胞核等。结论：人牙周膜成纤维细胞在钛金属表面的附着形式，不同于上皮细胞的附着形式，表现为蛋白合成旺盛，可能为细胞直接附着，其具体附着形式还待进一步研究。     

生物胶联合OK-432和平阳霉素治疗面颈部巨大静脉畸形

目的：评价生物胶联合OK-432和平阳霉素治疗面颈部巨大静脉畸形的临床疗效。方法：26例面颈部巨大静脉畸形患者,男11例,女15例;年龄4～23岁,平均年龄11.8岁。通过注射生物胶联合OK-432和平阳霉素进行治疗。所有病例均只接受1次治疗。结果：除术区2～3周肿胀外,均无严重并发症出现。随诊6～12个月（平均8.4个月）,19例治愈,5例显效,2例有效,无无效病例。结论：生物胶联合OK-432和平阳霉素经皮硬化术治疗面颈部巨大静脉畸形,效果良好,并且简单、安全和可靠。     

纤维蛋白胶/博来霉素栓塞硬化治疗面颈部血管畸形彩色多普勒超声研究

目的:通过多普勒超声探索纤维蛋白胶复合搏来霉素(FG/BLM)栓塞硬化面颈部血管畸形的作用机制.方法:纳入面颈部静脉畸形(VM)、动静脉畸形(AVM)患者各10例.在超声引导下进行FG/BLM栓塞硬化治疗,彩色多普勒超声记录FG/BLM注射到病变瘤(管)腔后的实时二维声像图及彩色血流变化,判断药物注射后的流向及范围.结果:二维声像图可见FG/BLM注射到VM瘤腔后即刻注射物瞬间呈团状或片状强回声,随后漂浮于畸形静脉腔内并弥散到瘤腔各处.后期可见病变区被大量絮状及网状低回声伴斑片状强回声充填,瘤腔体积显著膨胀,彩色血流显示病变区内血流信号明显减少.注射到AVM管腔后注射物瞬间呈团状或片状强回声,随后可见雪花状强回声大部分随血流快速充填或散落到注射血管腔的远端,后期病变区周边被大量蜂窝状中等回声及斑片状强回声充填,病变区彩色血流显著减少.结论:FG/BLM注射到VM瘤腔后对回流静脉有栓塞、阻断作用,对注射到瘤腔的硬化剂有贮存作用.FG/BLM注射不仅能够栓塞硬化局限性AVM的扩张血管,还能够栓塞其毛细血管网.     

Management of massive venous malformations by percutaneous injection of bleomycin combined with fibrin glue in the head and neck

PurposeThe aim of this study was to evaluate the effectiveness of percutaneous injection of bleomycin combined with fibrin glue in treating massive venous malformations (MVMs) in the head and neck region.Materials and methodsA retrospective case series analysis of 22 patients who underwent percutaneous sclerotherapy between June 2015 and December 2018 was performed. All the patients were examined by comparing the size of the venous malformations (VMs) and their responses to treatment including complications in the follow-up.ResultsThe follow-up period ranged from 6 to 24 months. Ten patients (10/22) were completely cured and 10 patients (10/22) exhibited excellent size reduction of their VMs. Two patients (2/22) exhibited reasonable size reduction and were recommended to undergo a second sclerotherapy procedure. However, both patients were satisfied with the outcomes and refused subsequent treatment. Neither systemic nor local complications occurred in this study. All the patients were satisfied with their significant size reductions and symptom improvements without recurrences during follow-up.ConclusionPercutaneous injection of bleomycin combined with fibrin glue is a promising treatment option that yielded excellent size reduction with a low risk of complications on MVMs in the head and neck region.     

纤维蛋白胶复合平阳霉素栓塞硬化治疗面颈部动静脉畸形效果观察

目的: 观察和评价纤维蛋白胶复合平阳霉素栓塞硬化治疗面颈部动静脉畸形的临床效果。方法: 2012年12月—2016年12月,选择22例面颈部动静脉畸形病例,应用纤维蛋白胶复合平阳霉素栓塞硬化技术进行治疗。其中15例患者给予单纯经皮穿刺直接注射治疗,2例患者除原发灶区经皮穿刺直接注射外,同时行面动脉注射治疗,6例患者栓塞硬化治疗完成后,手术切除病变区增厚的纤维结缔组织及残余病变。治疗后观察患者生命体征,体格检查、彩色多普勒超声及CT、CTA评价治疗效果。随访时间6~36个月（平均18个月）。结果: 22例患者中,男17例,女5例;年龄19~74岁（平均28岁）。18例（81.8%）患者病变消退率大于90%,4例（18.2%）病变消退率大于50%。治疗过程中,部分患者出现皮肤发白或青紫色改变,提示组织缺血或回流受阻。1例患者额部出现皮肤浅层坏死,局部形成薄痂;2例患者出现唇黏膜浅溃疡,均自行愈合。随访发现,3例患者病变继续生长。结论: 纤维蛋白胶复合平阳霉素栓塞硬化技术用于治疗面颈部动静脉畸形安全、有效,尤其对局限性扩张型动静脉畸形效果较好。     

纤维蛋白凝胶在组织工程中的应用

具有良好生物相容性和生物活性的支架材料一直是组织工程研究的重点之一。纤维蛋白凝胶主要由天然的细胞外基质成分构成,具有良好的生物相容性、有效的生物活性以及生物可降解性,同时还具有三维多孔结构和良好的可塑性。近年来,纤维蛋白凝胶作为支架材料日益广泛地应用到组织工程研究中,其对肌组织、骨及软骨组织、上皮组织等的形成具有重要作用,但同时却不能为骨及软骨组织工程提供足够的机械强度。