西拉普利、氯沙坦对尿酸肾病大鼠肾上皮细胞生长因子(EGF)和成纤维细胞生长因子(bFGF)mRNA表达的影响

目的探讨西拉普利(cilazapril)和氯沙坦(losartan potassium)对尿酸肾病大鼠肾小管上皮细胞生长因子(EGF)和成纤维细胞生长因子(bFGF),受体(EGFR ,FGFR)及胶原Ⅲ mRNA及蛋白质表达的影响.方法 40只腺嘌呤致尿酸肾病大鼠,3周后分组,1组为模型对照组10只;1组为西拉普利治疗组12只(10 mg/kg·d一次性灌胃);另1组为氯沙坦治疗组12只(40 mg/kg·d一次性灌胃);对照组6只;药物治疗4周后麻醉,心脏采血之后处死大鼠;取肾组织固定、包埋、切片后行原位杂交及免疫组化检测EGF,bFGF,EGFR,FGFR 及胶原Ⅲ表达. 结果尿酸肾病模型组肾小管上皮细胞,间质EGFmRNA和bFGF蛋白质广泛表达,同时发现肾小管,肉芽肿内单个核细胞及间质成纤维细胞广泛表达EGFR,FGFR及三型胶原.而西拉普利和氯沙坦治疗组EGFmRNA表达下调,bFGF蛋白表达也下调,并且主要在肾小管上皮细胞有表达.EGFR的表达治疗组同模型组比较稍有减少;而FGFR治疗组同模型组比较差异不明显;三型胶原表达只在氯沙坦组明显下调. 结论实验性尿酸肾病模型中EGF,bFGF在肾内广泛表达,西拉普利和氯沙坦能下调EGF,bFGF,EGFR(轻度),只有氯沙坦组下调三型胶原表达,因此得出EGF,bFGF在尿酸肾病发病过程中发挥重要作用,并且与肾脏间质小管炎症,纤维化过程密切相关;而西拉普利和氯沙坦通过下调EGF,bFGF表达,降低肾脏细胞外基质合成,从而改善间质纤维化.     

过量氟对大鼠肾组织碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

目的检测成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白在氟处理大鼠肾组织表达差异和蛋白定位,并探讨bFGF与氟中毒肾损害的关系。方法经饮水投氟喂养W istar大鼠48只,用免疫组织化学法进行bFGF的组织学检测。结果免疫组织化学结果表明,bFGF蛋白主要定位于肾组织的肾小管上皮细胞细胞质中,常食和偏食对照组肾组织bFGF蛋白只是散在表达,而常食和偏食投氟组的bFGF蛋白表达较相应对照组明显增强。结论在肾组织中肾小管上皮细胞对氟的毒性作用更为敏感,过量氟可促进肾小管上皮细胞bFGF表达,且随着投氟量的增加bFGF伴随着肾损伤加重而表达增强,提示bFGF与氟中毒肾损伤程度密切相关。     

二甲双胍对正常饮食大鼠血清成纤维细胞生长因子19、21及胰腺成纤维细胞生长因子受体1的影响

目的探讨二甲双胍(METF)对血清成纤维细胞生长因子(FGF)19和FGF21及胰腺成纤维细胞生长因子受体(FGFR)1和Akt通路上分子的影响。方法给予8周龄健康雄性Wistar大鼠(40只)标准饮食,随机分为正常对照(Con)组和METF(500 mg·kg~(-1)·d~(-1))。在24 w末检测血清生化学指标及FGF19和FGF21水平。蛋白免疫印迹检测胰腺组织FGFR1,Akt、磷酸化的Akt(p-Akt),FoxO1、磷酸化的FoxO1(p-FoxO1)的表达水平。结果 METF干预可以减轻大鼠的体重,降低大鼠空腹血糖、低密度脂蛋白和胆汁酸水平。METF组大鼠血清FGF21较Con组明显升高(P<0.05),而FGF19较Con组明显减低(P<0.05)。此外,胰腺FGFR1的表达水平及Akt及FoxO1的磷酸化水平在METF干预后明显升高(均P<0.05)。结论 METF可以降低血清FGF19、升高血清FGF21水平,对两者产生相反的作用。此外,METF可能通过增加FGFR1的表达、Akt及FoxO1的磷酸化对胰腺功能产生影响。     

木瓜蛋白酶致大鼠肺气肿中碱性成纤维细胞生长因子mRNA的表达

碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)是一种具有促进细胞生长增殖作用的多肽类生长因子 ,在维持机体的生长发育及促进多种组织的损伤修复中起着十分重要的作用。我们通过对木瓜蛋白酶 (Ｐａｐａｉｎ)致大鼠肺气肿模型肺组织和肺泡巨噬细胞ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达的研究 ,来探讨其在肺气肿形成过程中与肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原增长的关系。材料与方法　 (1)肺气肿动物模型的制备与分组 :健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠 42只 ,体重 2 0 0～ 2 5 0ｇ ,雌雄不拘 (由同济医科大学实验动物中心提供 ) ,随机分为肺气肿模型 1,3 ,5 ,7,15 ,30天组和正常对照组 ,每组 6…     

VEGFsiRNA、bFGFsiRNA对胰腺癌细胞bFGF mRNA、蛋白表达的影响

目的 观察VEGFsiRNA和bFGFsiRNA对胰腺癌sw1990、Panc-1及PCT-3细胞bFGF表达水平的影响.方法 用VEGFsiRNA和bFGFsiRNA处理胰腺癌sw1990、Panc-1及PCT-3细胞,用RT-PCR法检测bFGF mRNA表达变化,用ELISA法检测bFGF蛋白表达变化.结果 EGFsiRNA处理后PCT-3、Panc-1、sw1990细胞bFGF mRNA相对表达量分别为0.50±0.05、0.81 ±0.09、0.46±0.06,bFGFsiRNA处理后分别为0.08±0.01、0.10±0.04、0.15±0.08,对照组分别为0.42±0.02、0.62±0.03、0.22±0.03.VEGFsiRNA处理后Panc-1、sw1990细胞bFGF mRNA表达强于对照组(P均＜0.05),VEGFsiRNA处理后PCT-3细胞bFGFmRNA表达与对照组相比P＞0.05.bFGFsiRNA处理后PCT-3、Panc-1细胞bFGF mRNA表达弱于对照组(P均＜0.05),bFGFsiRNA处理后sw1990细胞bFGF mRNA表达与对照组相比P＞0.05.VEGFsiRNA处理后PCT-3、Panc-1、sw1990细胞培养液上清液bFGF蛋白浓度为(490.57±125.23) pg/mL、(77.49±10.07) pg/mL、(13.35±1.63) pg/mL,bFGFsiRNA处理后分别为(142.78±13.95) pg/mL、(11.41±8.14) pg/mL、( 2.26±0.65) pg/mL,对照组分别为(316.29±57.39) pg/mL、(36.44±12.29) pg/mL、(3.87±0.42) pg/mL.VEGFsiRNA处理后sw1990、Panc-1细胞培养液上清液中bFGF浓度较对照组显著升高(P均＜0.05),PCT-3细胞培养液上清液bFGF浓度与对照组相比P＞0.05.bFGFsiRNA处理后PCT-3、Panc-1、sw1990细胞培养液上清液中bFGF浓度较对照组显著降低(P均＜0.05).结论 bFGFsiRNA抑制胰腺癌细胞bFGF mRNA、蛋白表达;VEGFsiRNA上调胰腺癌细胞bFGF mRNA、蛋白表达.     

氯沙坦对大鼠肺纤维化模型的干预作用及对MCP-1和bFGF表达的影响

目的　研究血管紧张素Ⅱ的 1型受体拮抗剂氯沙坦对大鼠肺纤维化模型的干预作用及可能的机制。方法　Wistar大鼠经气管内灌注博莱霉素诱导肺纤维化 ,随后分别每日口服氯沙坦 1 0mg/kg(L组 )、泼尼松 (强的松 ) 2 0mg/kg(P组 )和生理盐水 (B组 )进行干预。对照组气管内和口服均用生理盐水。各组动物均于气管内灌药后第 3、7、1 4、2 8、56天分别处死 6只。通过苏木素 伊红染色、Masson胶原染色、天狼猩红染色偏光法及测定肺组织羟脯氨酸浓度来评价治疗效果。用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测单核细胞趋化因子 1 (MCP 1 )和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的mRNA在肺内的表达。用免疫组化及酶联免疫吸附测定 (ELISA)法检测MCP 1和bFGF蛋白在大鼠肺组织的表达。结果　L组的肺泡炎和肺纤维化程度及肺组织的羟脯氨酸含量显著地低于B组 ;其MCP 1和bFGF的蛋白表达显著地低于B组。结论　氯沙坦能减轻博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化 ,这种作用有可能部分通过抑制MCP 1和bFGF的表达而实现     

氟对小鼠成纤维细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的 观察氟在单层细胞培养系统即二维(2D)培养体系和成纤维细胞(FB)胶原凝胶系统即三维(3D)培养体系中对小鼠FB血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及蛋白表达的影响,探讨VEGF表达改变对FB成骨功能的作用.方法 在2D、3D培养体系中,FB按染氟剂量不同分为0(对照)、0.0001、0.0010、0.1000、1.0000、10.0000、20.0000mg/L组,染氟培养48h后,应用RT-PCR法、酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫组化方法(IHC)检测VEGF mRNA和蛋白的表达.结果 3D培养体系中,0.1000 mg/L组VEGF mRNA表达(1.08±0.09)高于对照组(0.93 ±0.02,P<0.05).2D培养体系中,0.1000、1.0000、10.0000 mg/L组VEGF蛋白表达(0.19±0.02、0.26±0.01、0.32±0.01)高于对照组(0.14±0.01,P均<0.05);3D培养体系中,0.1000、1.0000 mg/L组VEGF蛋白表达(0.59±0.06、0.52±0.03)高于对照组(0.37±0.05,P均<0.01).2D培养体系中,0.0010mg/L组VEGF蛋白阳性表达细胞数(0.45±0.05)高于对照组(0.36±0.03,P<0.05);3D培养体系中,0.0010、0.1000、1.0000 mg/L组VEGF蛋白阳性表达细胞数(0.62 ±0.04、0.70±0.06、0.65 ±0.07)高于对照组(0.44±0.04,P<0.05或<0.01).结论 2D和3D培养体系中FB VEGF mRNA和蛋白,提示VEGF在氟化物刺激FB成骨功能增强方面具有重要作用.     

文拉法辛对老年抑郁大鼠海马碱性成纤维细胞生长因子及受体表达的影响

目的探讨文拉法辛对老年抑郁大鼠海马碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及成纤维细胞生长因子受体1(FGFR-1)表达的影响。方法老年雄性SD大鼠48只,随机分为4组:对照组、模型组、生理盐水组、文拉法辛组,各组12只。模型组、生理盐水组和文拉法辛组均给予单笼饲养加慢性不可预测的温和多相应激方法处理,共5周。文拉法辛组于应激第3周末开始同时给予文拉法辛5mg/(kg.d)治疗,持续14d,生理盐水组同时给予生理盐水14d。对照组不给予任何处理。采用敞箱实验和蔗糖消耗实验评估大鼠抑郁建模情况。采用Western blot法检测海马bFGF及FGFR-1蛋白表达,RT-PCR法检测bFGF mRNA及FGFR-1mRNA表达。结果与对照组比较,模型组和生理盐水组海马bFGF、FGFR-1蛋白及mRNA表达均下降,差异有统计学意义(P<0.01)。与生理盐水组比较,文拉法辛组bFGF、FGFR-1蛋白及mRNA表达均明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论文拉法辛可提高老年抑郁大鼠bFGF、FGFR-1蛋白及mRNA表达。     

N-乙酰半胱氨酸对糖尿病肾病大鼠肾皮质转化生长因子表达的影响

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾皮质转化生长因子(TGF-β1)表达的影响.方法 制备DN大鼠模型,将动物随机分为正常对照组、DN组和NAC组.8周后测定大鼠尿白蛋白排泄率,免疫组化和RT-PCR方法检测肾皮质TGF-β1的表达水平,观察肾脏标本病理变化.结果 (1)DN组和NAC组尿白蛋白排泄率与正常对照组比较明显增多[(1268.3±297.5)μg/24 h和(315.9±86.8)μg/24 h比(31.2±8.9)μg/24 h,q值分别为29.85、16.76,均P＜0.01];肾皮质TGF-β1表达水平升高,肾小球系膜区免疫组化指数7.35±1.17和3.87±0.71比1.95±0.34(q值分别为l0.75、5.82,均P＜0.01),肾小管间质区免疫组化指数21.21±3.78和10.67±1.86比3.62±0.79(q值分别为15.20、11.36,均P＜0.01),肾皮质mRNA表达量0.72±0.06和0.45±0.05比0.23±0.04(q值分别为9.13、7.45,均P＜0.01),肾脏病理改变明显;(2)与DN组比较,NAC组尿白蛋白排泄率减少(q=8.17,P＜0.01),肾皮质TGF-β1的表达水平降低[肾小球系膜区免疫组化指数(q=4.97,P＜0.01),肾小管间质区免疫组化指数(q=6.86,P＜0.01),肾皮质mRNA表达量(q=3.69,P＜0.05)]和肾脏病理病变轻;(3)NAC组大鼠肾皮质TGF-β1 mRNA的表达量与尿白蛋白排泄率水平正相关(r=0.749,P＜0.05).结论 NAC对DN大鼠肾脏有保护作用,其部分机制与抑制TGF-β1表达有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of N-acetylcysteine (NAC) on the expression of transforming growth factor-β1 (TGF-β1) in renal cortex of diabetic nephropathy rats.Methods A rat model of DN was established.The rats were randomly divided into control group,DN group and NAC group.After 8 weeks treatment,urinary albumin excretion rate (UAER) was determined.The expression of TGF-β1 in renal cortex was detected by immunohistochemistry and RT-PCR analysis.Pathomorphological changes of renal cortex were observed.Results (1)The levels of UA ER were significantly higher in DN group and NAC group [(1268.3±297.5) μg/24 h and (315.9-±86.8) μg/24 h] than in control group [(31.2±8.9) μg/24 h,q-29.85,16.76,both P＜0.01].The groups of DN and NAC versus group of control showed the increased levels of activity of TGF-β1 in renal cortex [immune-histochemistry index of glomerular mesangial area:7.35±1.17 and 3.87 ± 0.71 vs.1.95±0.34,q= 10.75,5.82,both P＜0.01];immune-histochemistry index of renal tubulointerstitium [21.21± 3.78 and 10.67±1.86 vs.3.62±0.79,q=15.20,11.36,both P＜0.01];the expression of mRNA in renal cortex[0.72±0.06 and 0.45±0.05 vs.0.23±0.04,q=9.13,7.45,both P＜0.01].The pathomorphological changes were significant in DN group and NAC group.(2)The NAC group versus DN group showed a decreased levels of UAER (q=8.17,P＜0.01),activity of TGF-β1 in renal cortex [immune-histochemistry index of glomerular mesangial area:q= 4.97,P＜0.01]immune-histochemistry index of renal tubulointerstitium (q = 6.86,P ＜ 0.01 );the expression of mRNA in renal cortex (q= 3.69,P＜0.05) and showed improvement of pathomorphology in renal cortex.(3) There was a significantly positive correlation between expression quantity of TGF-β1 mRNA in renal cortex and UAER level in NAC group(r= 0.749,P＜0.05).Conclusions The protective effects of NAC on the kidney of DN rats may be partly related with inhibition on the expression of TGF-β1.     

一平苏治疗自发性高血压大鼠局灶性脑缺血的实验研究

目的：研究一平苏对自发性高血压大鼠局灶性脑缺血的神经保护作用。方法：线性法栓备自发性高血压大鼠局灶性脑缺血模型,一平苏治疗组造模前先治疗4周,进行行为的取脑作病理切片,用TTC染色,HE染色,尼氏染色,免疫组化的方法,通过图象分析测定脑梗塞面积,缺血区死亡神经细胞数目,尼氏染色阳性细胞以及HSP70与NF－kBP65免疫反应阳性细胞的光密度,分析一平苏的治疗作用及可能机制。结果：一平苏使梗塞面积缩小,行为计分降低,死亡神经细胞数目减少,尼氏染色光密度增高,NF－kBP65阳性细胞光密度降低,对HSP70的表达无影响。结论：一平苏能减轻自发性高血压大鼠局灶性脑缺血的梗塞程度,促进大鼠神经功能恢复,减少神经细胞坏,保护神经细胞的功能,抑制NF－kB表达,一平苏有抑制炎症因子的作用,可能是其脑保护作用机制之一。     

尿酸对认知功能的影响

阿尔茨海默病和帕金森病是老年人常见的神经退行性疾病。认知功能障碍是阿尔茨海默病的主要临床表现,帕金森病在发展过程中,尤其到疾病晚期,可合并有痴呆表现,称帕金森病痴呆。不同的调查研究显示,帕金森病患者中有17％～57％会伴发认知功能障碍。研究影响认知功能的相关因素对于防治阿尔茨海默病,提高帕金森病患者的生活质量具有重要的意义。近年来发现,血尿酸水平与认知功能密切相关。     

氯沙坦与培多普利对高血压患者微量蛋白尿排泄的影响

目的：比较血管紧张素受体拮抗剂Ⅱ（AⅡA）氯沙坦与血管紧张素转换酶抑制剂（A－CEI）培多普利对高血压患者微量蛋白尿排泄的影响。方法：选择60例原发性高血压患者，随机分为氯沙坦组（n=30)和培多普利组（n=30)，分别予以氯沙坦50mg每日一次及培多普利4mg每日一次，治疗4周，治疗前后分别测血压及尿微量蛋白值，并进行比较。结果：两组患者经4周治疗，血压降至正常，微量蛋白尿排泄明显减少（P＜0．01），且氯沙坦组疗效优于培多普利组（P＜0．05）。结论：AⅡA及ACEI可有效减少高血压患者微量蛋白尿排泄，而AⅡA效果优于ACEI。     

伴有颈动脉斑块的高血压患者尿酸检测的意义

目的探讨高血压患者颈动脉斑块与尿酸及肾功能改变的关系。方法回顾分析151例[男81例,女70例;平均年龄(72.28±9.45)岁]2003年住院高血压患者资料,根据颈动脉多普勒检查有无颈动脉斑块划分为颈动脉斑块组及正常组,分析两组同期住院24h动态血压、心脏超声、血脂及尿酸、肌酐、尿素氮、血糖等结果。结果两组尿酸值分别为(374.6±122.8;317.5±93.0)μmol/L。颈动脉斑块组明显高于颈动脉正常组(P=0.002)。斑块组尿素氮、肌酐明显高于正常组(P=0.005,P=0.017)。24h动态血压平均舒张压及白昼舒张压亦有明显差别。直线相关分析显示,颈动脉斑块与尿酸水平呈正相关(r=0.225,P=0.005)。Logistic逐步回归分析,结果显示自变量尿酸、年龄对颈动脉斑块有影响。结论高血压患者尿酸与颈动脉斑块呈正相关,尿酸水平及年龄影响颈动脉斑块形成。     

肝硬化患者血尿酸水平的变化及其意义

目的 :探讨肝硬化患者血尿酸 (UA)水平的变化及其意义。方法 :回顾性分析我院肝硬化住院患者 (摒除患有可能影响UA代谢的疾病或服用影响UA代谢的药物的患者 ) 4 2例作为研究对象。分析其UA水平的变化及UA与多种可能影响因素如年龄、性别、腹水、肝功能分级、血肌酐 (Cr)、血直接胆红素 (D BIL)等的关系。同时按上述标准选取年龄、性别无差异的对照者 42例。结果 :UA值不存在年龄、性别的差异 (P >0 .0 5 )。总UA均值为 2 2 8.2 8± 13 6.83 μmol/L ,明显低于对照组 (P <0 .0 1) ;D BIL均值为 3 1.83± 46.0 1μmol/L ,显著高于对照组 (P <0 .0 1) ;Cr均值为 90 .41±83 .43mmol/L ,与对照组差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;Pugh Child分级分数均值为8.86± 2 .3 1,明显高于对照组 (P <0 .0 1)。UA正常 2 8例 ,降低 12例 ,升高 2例。UA正常组与其余 2组间UA值有显著性差异 (P <0 .0 1) ,UA降低组与正常组间D BILPugh Child分级分数有显著性差异 (P各 <0 .0 5与 <0 .0 1) ,而三组间年龄、Cr均值无显著性差异 (P >0 .0 5 )。Pugh Child分级C级患者的UA值明显低于A级的患者 (P <0 .0 5 ) ;有腹水与无腹水组间的UA值无显著性差异 (P >0 .0 5 )。多因素相关分析表明UA与年龄、D BIL、Cr及Pugh Child分级分数均无     

氯沙坦和依那普利降低血压和尿酸作用的比较

目的:比较氯沙坦和依那普利治疗高血压的疗效,及两者对血尿酸的影响。方法:采用随机、平行对照研究,59例高血压病人分为两组:一组给予氯沙坦50mg,qd;另一组给予依那普利5mg,bid。12周后观察二种药物的降压效果和对血尿酸的影响及不良反应。结果:治疗12周后两组血压均显著下降。氯沙坦组最高血压由(167.45±10.70/100.90±10.47)降为(146.14±14.40/83.24±9.24)mmHg;24h平均收缩压由(148.93±8.91/92.31±10.43)mmHg降为(132.62±14.40/83.24±9.24)mmHg;依那普利组最高血压由(165.17±10.16/100.60±14.49)降为(147.23±14.14/89.2±7.14)mmHg;24h平均压由(149.32±9.29/91.47±12.97)mmHg降为(133.87±13.02/83.17±8.92)mmHg;氯沙坦组血尿酸治疗后由(446.48±118.55)μmol降为(379.52±74.59)μmol,依那普利组血尿酸治疗前后为(441.30±112.15)μmol和(433.77±113.96)μmol。结论:氯沙坦和依普利那降压疗效相似,但氯沙坦有降低尿酸的作用,对于血尿酸增高的高血压病人建议选用氯沙坦。     

何首乌饮对D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺EGF、EGF mRNA表达的影响

目的 观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺表皮生长因子(EGF)及EGF mRNA表达的影响.方法 采用D-半乳糖衰老大鼠模型,何首乌饮干预分为治疗和预防两部分,用免疫组化及原位杂交法检测下颌下腺EGF、EGF mRNA阳性表达的改变.结果 预防性实验部分EGF、EGF mRNA表达以正常组最高,模型组最低,各预防组中预防中剂量组最高,组间比较有高度统计学意义(P＜0.01).治疗性实验部分以正常组最高,自然恢复组最低,各治疗组中以治疗中剂量组最高,组间比较差异显著(P＜0.01).结论 何首乌饮可提高下颌下腺EGF、EGF mRNA的表达而达到抗衰老的作用.