ABO免疫磁珠反定型试剂自动化检测方法的建立

目的建立ABO免疫磁珠反定型试剂自动化检测方法。方法使用自动化血型定型检测系统,摸索ABO免疫磁珠反定型试剂使用浓度、与待检血浆或血清的最适比例,确定操作程序,通过调整自动判读仪的参比值进行血型的自动判读。结果反定型试剂的最佳使用浓度为2%,与待检血浆或血清的最佳比例为1∶2;操作程序为磁场作用时间30s、磁场作用次数为2次、震荡模式为弱震后强震。将自动判读仪参比值选定在0.3~0.4,对640人份样本进行检测,准确率为98.43%。结论ABO免疫磁珠反定型试剂可以用于血型自动化检测。     

免疫磁珠试剂在ABO血型反定型检测中的应用

人ABO血型是由红细胞抗原和血(浆)清中抗体决定的,用抗-A和抗-B试剂检测红细胞抗原称之正定型,用A型和B型红细胞检测血清中抗体称之为反定型.正常健康人的ABO血型正反定型应相符合[1],即A型人红细胞上有A抗原,血清中有抗-B抗体;B型人红细胞上有B抗原,血清中有抗-A抗体;AB型人红细胞上有AB抗原,血清中无ABO血型抗体;O型人红细胞上无A和B抗原,血清中有抗-A,抗-B抗体.对于临床病人ABO血型正反定型结果经常出现不相符合现象,分析追踪其不相符原因,可以正确地判断血型和选择血型相容的血液进行输血.目前,ABO血型正反定型已是临床常规检测项目,卫生部要求每名就医患者都需要进行正反定型.     

长效反定型红细胞试剂的研究

目的：通过研究实验探索最佳的醛化剂浓度及醛化时间对红细胞进行醛化处理,以获得保存效期长、凝集效果佳的反定型红细胞试剂。方法：分别以0.5%、0.1%、0.05%的戊二醛对洗涤后的红细胞进行1分钟、3分钟、5分钟、10分钟的醛化,配制成5-10%的醛化反定型红细胞试剂,分别与购买的商品化反定型红细胞试剂,单克隆抗A、抗B正定型试剂进行对比试验,同时在2-8℃冰箱放置进行稳定性试验。结果：用0.1%的戊二醛醛化红细胞可以获得最佳的稳定性与凝集效果的平衡,在12个月的保存试验期内试剂稳定,与商品化的反定型红细胞试剂及正定型的对比实验中,二者的结果完全相符。结论：0.1%的戊二醛醛化反定型红细胞试剂具有良好的稳定性及凝集效果,可以用于ABO血型的反定型,同时用醛化的方法制备稳定而又凝集效果佳红细胞试剂也是一条值得探索的途径。     

单克隆试剂导致ABO定型异常结果的研究

目的 探讨单克隆试剂导致ABO血型鉴定的异常结果。方法 采用单克隆抗-A(B)试剂和人源抗-A(B)血清平行检测受检者红细胞,同时用反定型试验验证。对出现ABO血型异常结果者,再用吸收放散等试验确证。结果 在常规工作中,单克隆试剂导致ABO血型鉴定结果异常者5例。最后被确定为假阴性3例,假阳性2例。结论 对病人的输血前检查,必须增加ABO反定型试验。     

ABO血型正 反定型不一致时的解决策略探讨

目的研究患者ABO血型正、反定型不一致的原因并对解决策略进行探讨。方法对34例正、反定型不一致标本采用试管法在不同环境温度条件下进行ABO血型正、反定型试验;对红细胞自凝的标本用2-巯基乙醇处理后再行正定型试验;对患者血清进行抗体筛选试验和抗体特异性鉴定试验,根据抗体鉴定结果选用试剂红细胞行反定型试验;经以上处理后正、反定型仍不一致者则对标本红细胞进行吸收放散试验以确定ABO血型。结果 34例正、反定型不一致的结果为:冷凝集9例,抗体丢失或减弱8例,红细胞抗原减弱7例,红细胞自凝4例,ABO血型亚型2例,抗-E抗体2例,非特异性抗体1例,获得性"类B"1例。结论当患者标本出现ABO血型正、反定型不一致时,应根据可能的原因采取科学策略进行相关确认试验,以便快速准确地鉴定出ABO血型,从而保证患者输血安全。     

抗A和抗B血型定型试剂稳定性观察及对亚型检测的影响

目的检测国产单克隆抗A(B)试剂质量,观察对ABO亚型检测的影响。方法测定四个厂家"单抗A、抗B"试剂效价、亲和力等,并检测稀有的ABO亚型红细胞与单克隆试剂反应情况,同时用人源抗A、抗B试剂作对照。结果所有厂商的试剂均符合国家标准,单克隆抗体仍有漏检ABO亚型现象。结论目前市场销售的单克隆抗A、抗B血型定型试剂,质量基本可靠,但应定期测定其效价、亲和力,受检者ABO血型检测必须用ABO反定型试验复核。     

ABO反定型试剂红细胞在Xantus全自动血型仪检测中的应用探讨

目的 探讨反定型RBC血型试剂用于Xantus全自动数字血型分析仪进行血型检测的效果.方法 应用自配红细胞及试剂红细胞,两种试剂分别行手工操作及Xantus双机械臂全自动数字血型仪自动检测.结果 试剂红细胞无论手工还是自动化血型仪检测,一次性判读结果准确率高,无手工改动结果现象,明显优于自配红细胞.结论 反定型成品试剂盒可用于Xantus全自动数字血型分析仪,有较大的使用价值.     

ABO反定型试剂红细胞的质量控制

已知血型的试剂红细胞是ABO血型的血清学鉴定中检测抗体必不可少的试剂。为了提高ABO血型检定结果的准确性，解决自制试剂红细胞无标准和无质控的问题，本研究组建立了ABO反定型试剂红细胞的质控方法，进行了试剂红细胞的特异性和亲和性检测、振荡检测、流式细胞术和原子显微镜观察。通过筛选建立了质控参考品，并在此基础上确定质量检定标准及质控方法，同时对制备的3批次试剂红细胞进行了评价。研究结果表明：制备的反定型试剂红细胞既能保证质量和性能的稳定，又能最大限度地降低批次间的差异。结论：制备的AB0反定型试剂红细胞解决了自制红细胞的质控问题，并能提高血型检定结果的准确性。     

ABO反定型试剂红细胞配制方法的探讨

目的摸索ABO反定型试剂红细胞的配制方法。方法配制20%的洗涤红细胞悬液后放置4±2℃冰箱保存,每周混匀后取样进行红细胞抗原性及特异性测定和反定型试验(微板法)检测凝集能力实验,观察细胞凝集状态,并记录结果。结果自配反定型试剂保存期为35d。在配制后第35天,自配红细胞与相应的抗血清的特异性凝集反应仍有>2+S的凝集强度,具有良好抗原稳定性;与不对应的抗血清均无凝集反应,具有良好的特异性;用自配红细胞做反定型试验,特异性凝集能被酶标仪测出,符合实验要求。结论运用自配反定型试剂,操作简便,原料易得,成本低廉,制成的红细胞具有良好的免疫特异性、抗原稳定性和凝集效能,符合实验要求。     

固相免疫吸附法在ABO血型反定型中的应用

正为了保障输血安全,《输血技术规范》中明确规定要进行ABO血型反定型检测,但由于目前ABO血型反定型试剂为新鲜红细胞,易溶血,保存期短等原因,试剂质量难以保证。为此,最近我们开发出可以用于ABO血型反定型检测的新方法—固相免疫吸附法,应用的抗原为分子化抗原及处理的红细胞进行反定型检测,分子化抗原及处理的红细胞     

IgA类和IgM类单克隆抗体血型定型试剂的比较研究

自从单克隆抗体技术建立以来，发达国家的血型定型试剂大多用抗血型单克隆抗体取代传统的标准血清。我国经过近几年的努力，也基本普及使用单克隆抗体血型定型试剂。以往的人ABO血型定型试剂，无论传统的标准血清，还是动物免疫血清或单克隆抗体，都是IgM类抗体。我们建立了IgA类抗人A和B血型物质单克隆抗体，已获得国家新药证书，并被批准为国家定点生产的血型定型试剂。     

超滤浓缩法制备高效价人源抗-A、抗-B血型定型试剂

目的　探讨超滤浓缩法制备高效价人源ABO血型定型试剂的适用性。方法　采用小型超滤器超滤浓缩血清 ,对浓缩前后的血清测定血型血清学、总蛋白含量等指标的变化。结果　浓缩后血清抗体的效价、亲和力、凝集强度、血清总蛋白浓度等均有所增强。结论　超滤浓缩法可用于标准抗 A、抗 B血清及稀有血清的浓缩制备 ,可提高抗体效价     

保存试剂红细胞在ABO反定型微凝自动扫描上的应用

为便于ABO血型反定微凝自动扫描检测,本室用保存试剂红细胞代替新鲜生理盐水红细胞完成ABO反定型全自动微凝扫描,通过保存试剂红细胞对2418份血样作ABO反定型微凝自动扫描,一次性扫描判读准确率达99.88%,与对照的生理盐水红细胞扫描结果无明显差异,笔者着重就该保存试剂红细胞在ABO反定微凝扫描上的准确度,稳定性及保存有效期作探讨. 1 材料与方法 1.1 血样来源本站的献血者血样2418份. 1.2 实验仪器 Genesis Rsp 100型全自动加样仪,RoTINA35型平板离心机,spectra.THERMO酶标仪(瑞士TECAN公司);96孔"u"型微量板(上海血液中心); 应用软件TECAN Grenesis RSP控制软件logic及Spectra thermo 酶标仪控制软件Soft-2000(TECAN公司)     

献血者ABO血型初筛错误和正 反定型检测不符的原因分析

目的分析影响ABO血型初筛错误和正、反定型检测不符时产生的原因,旨在工作中减少血型错误的发生,保障临床输血安全、有效。方法采用2010～2011年无偿献血53 934人次中ABO血型初筛错误和正、反定型检测不符的统计记录。结果 53 934份无偿献血标本中,ABO血型初筛错误和正、反定型检测不符共134例,总误定率为0.25%,人为因素造成ABO血型错误例数为83例,占总ABO血型差错和正、反定型检测不符率的61.94%(83/134)。结论应对ABO血型初筛检测工作人员不断进行业务培训和技能提高,增强血液质量意识,严格按照国家法律、法规和相关标准操作规程操作,以降低血型差错率。     

1周岁内婴幼儿月龄与ABO血型抗体凝集强度消长的多中心前瞻性研究

目的 多中心前瞻性研究1周岁婴幼儿红细胞ABO血型抗体凝集强度与月龄消长的相关性.方法 1周岁内婴幼儿1564名按月龄分成12组,应用常温试管法、4℃试管法、微柱凝集法检测ABO血型反定型.结果 应用4℃试管法和微柱凝集法进行ABO血型反定型检测时,其凝集强度评分≥4分(凝集≥1+W),月龄≥6个月;其凝集强度评分≥7...     

ABO血型反定型梯形微板法的建立

目的建立梯形微板ABO血型反定型检测方法。方法随机选用常规A、B、O、AB型血样各8份。运用正交设计原理选择血浆稀释度、红细胞浓度、反应温度、静止时间4个参数的最佳条件;采用混合血样倍比稀释,确定凝集与非凝集灰区值。根据已确定的最佳条件和灰区值,进行重复性试验、灵敏度试验、准确性试验、脂血干扰试验、溶血干扰试验,并检测6份ABO亚型血样AM、AX、A2B、A3B、AXB、BM和5份含不规则抗体血样抗-M、抗-N、抗-P1、抗-Leb、抗-HI,以评价对特殊血样的检出能力。结果重复性符合率100%。灵敏度可达到与试管法相同效价的检出能力。准确性达99.99%。47份不同脂血程度血样抗干扰试验一次判读正确率100%。溶血干扰试验在Hb≤20g/L时,对梯形微板法试验结果无明显影响,在严重溶血情况下(Hb>20g/L),对凝集端无影响,对非凝集端有影响。对11份特殊血样均有较好的检出能力。结论梯形微板法不仅能够很好地完成普通血样ABO反定型的检测,还具有提高对弱凝集血样检测灵敏度的优势,进而提高试验的准确性。     

抗-M抗体对ABO血型鉴定的影响

目的探讨抗-M抗体对血型鉴定正反定型不符的影响及临床意义。方法收集2014年10月至2015年9月在该院进行血型鉴定的27 620例标本,其中26例标本ABO血型正反定型不符。经盐水介质法复查,仍有8例标本正反定型不符。对这8例标本进行抗体筛查和鉴定。结果经鉴定,8例标本的血清中检出5例抗-M抗体(62.5%),2例抗-I抗体(25%),1例抗-Lua抗体(12.5%)。经卡方检验,抗-M抗体的百分比明显高于其他两种抗体,差异有统计学意义(P0.05)。结论抗-M抗体干扰ABO血型鉴定,容易引起血型鉴定错误,有重要的临床意义。     

直接抗球蛋白试验阳性对ABO及Rh血型鉴定的干扰

直接抗球蛋白试验（DAT）阳性患者,由于红细胞上存在致敏自身抗体和/或血清中存在游离的自身抗体,干扰血型鉴定、抗体筛查及交叉配血.本文探讨DHA阳性对ABO及Rh血型定型的干扰.     

高效价冷凝集素对ABO血型正反定型和电子交叉配血试验的影响

目的探讨高效价冷凝集素对ABO血型正反定型和电子交叉配血试验的影响。方法选择2015年11月至2016年10月该院因紧急情况输血的500例患者作为研究对象,观察电子交叉与血清交叉主次侧配型结果,不同温度下ABO血型正反定型与电子交叉配血试验的结果,冷凝集素试验红细胞凝集情况及交叉配血结果。结果电子交叉配血与血清学交叉配血相比,主侧结果差异无统计学意义(P0.05),次侧结果差异有统计学意义(P0.05)。电子交叉配血时,20℃时有18例出现凝集,明显多于37℃时(P0.05)。患者血型在正定型A型,反定型B型,O型均有凝集出现,且在20℃时O型与自身对照也有凝集出现。冷凝集素试验结果,当温度低于31℃时会出现红细胞凝集,当低于4℃时,可见明显凝集,但当温度回升到37℃时,凝集消失。结论高效价冷凝集素在低温条件下会促进红细胞凝集,干扰ABO血型正反定型和电子交叉配血试验的结果,从而影响临床输血治疗。     

O型血孕妇血清中IgG抗(A)B抗体效价对ABO新生儿溶血病的诊断意义

目的研究O型血孕妇血清中IgG抗(A)B抗体效价及对ABO新生儿溶血病(HDN)的诊断意义。方法将446例O型孕妇(丈夫血型非O型)接受IgG抗A(B)抗体效价检测,并对孕妇所生的新生儿进行HDN血清学检测,包括新生儿ABO血型检测、Rh(D)血型检测、HDN三项血清试验。结果 446例O型RH(D)阳性孕妇中,IgG抗A(B)抗体效价小于或等于1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、≥1∶512分别有77例(17%)、117例(26%)、92例(21%)、84例(19%)、76例(17%),呈现正态分布。母婴血型O-A组效价大于1∶32者所占比例明显高于O-B组及O-AB组(P<0.05),而O-B组与O-AB组间差异无统计学意义(P>0.05)。HDN发病率随孕妇血清IgG抗A(B)抗体效价增加而升高,高一级效价与低一级效价组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 O型血孕妇的血清IgG抗A(B)抗体效价可作为ABO HDN的诊断指标,产时应尤其密切观察A型血新生儿的临床表现,做到ABO HDN的早期筛查、早期诊断以及早期治疗。