血管抑素基因治疗人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的实验研究

目的:研究血管抑素(Angiostatin)基因转染治疗人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的作用及其相关机理。方法:使用人卵巢癌细胞株SKOV3建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型。随机将荷瘤裸鼠分为基因治疗组、空质粒组和空白对照组,分别于瘤体注射Angiosta-tin/PCDNA3、空质粒PCDNA3和无菌生理盐水,质粒用脂质体DOTAP介导转染细胞。观察各组动物的肿瘤生长曲线,检测各组肿瘤Angiostatin、VEGF的表达和微血管密度(MVD),利用TUNEL染色法行原位细胞凋亡分析,计算细胞凋亡指数(AI)。结果:基因治疗组裸鼠的肿瘤生长在早期受到明显抑制,大约1周后生长速度有所加快,肿瘤组织中Angiostatin蛋白局部高表达,VEGF的表达高于空质粒组和空白对照组,AI(4.21±0.49)高于空质粒组和空白对照组,MVD(19.3±3.2)低于空质粒组。结论:Angiostatin基因可以通过抑制血管生成而在一定程度上抑制肿瘤生长,其作用的发挥是独立于VEGF的。     

人参皂甙Rg3对荷卵巢癌的严重联合免疫缺陷鼠的抗肿瘤血管生成作用的研究

目的　研究人参皂甙Rg3体内抗卵巢癌血管生成的作用。方法　建立荷卵巢癌的严重联合免疫缺陷 (SCID)鼠腹腔移植瘤模型 ,分为 3组。空白组 :SCID鼠荷瘤后不干预 ;对照组 :荷瘤SCID鼠予磷酸盐缓冲液 (PBS)灌胃 ;实验组 :荷瘤SCID鼠予人参皂甙Rg3和PBS混悬液灌胃。分别采用逆转录聚合酶链反应技术、酶联免疫吸附法、免疫组织化学法检测 3组荷瘤SCID鼠的血管内皮生长因子 (VEGF)mRNA、蛋白及微血管密度 (MVD)。结果　 (1)人参皂甙Rg3处理后 ,荷瘤SCID鼠体内无腹水形成 ,腹腔中肿块播散减少。 (2 )实验组肿瘤组织VEGFmRNA表达的相对量为 119± 16 ,显著低于空白组、对照组 (分别为 2 5 4± 4和 2 73± 4 4 ,P均 <0 0 5 )。 (3)实验组血中VEGF蛋白的表达量为(14 6± 0 7)pg/ml,显著低于空白组和对照组 [分别为 (18 5± 2 1)和 (2 0 5± 1 7)pg/ml,P均 <0 0 5 ]。(4)实验组肿瘤组织中MVD为 (43± 7)个 /mm3 ,显著低于空白组和对照组 [分别为 (6 5± 12 )个 /mm3 和(73± 10 )个 /mm3 ,P均 <0 0 5 ]。结论　人参皂甙Rg3通过下调肿瘤VEGFmRNA及蛋白的表达量 ,阻滞肿瘤血管生成从而抑制肿瘤生长和转移     

TRAIL对3AO裸鼠移植瘤治疗作用的实验研究

目的 :探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)对 3AO裸鼠皮下及腹腔移植瘤的治疗作用。方法 :将 5× 10 6 和 2× 10 7对数生长期的 3AO分别接种于BALB/C裸鼠右下肢皮下和腹腔内 ;待皮下组移植瘤长至 0 .2 5cm3,腹腔移植瘤组移植后 96h ,随机分为 5组。裸鼠皮下和腹腔移植瘤A、B组为TRAIL组 ,剂量分别为 0 .5 μg/ml和 1μg/ml;C组为TRAIL0 .5 μg/ml加cDDP 1.5mg/kg ,D组为cDDP 3mg/kg ;E组为对照组 (将生理盐水分别注射于瘤周和腹腔 ) ,观察移植瘤成瘤率、裸鼠生存期和生存期延长率。同时观察停药后 1d、1周、2周裸鼠移植瘤细胞的细胞凋亡率及CD95、Apo2 .7、P5 3、Bcl 2基因表达的变化。结果 :(1)A、B、C和D组裸鼠皮下移植瘤的抑制率分别为 2 3%、4 9.1%、6 2 .3%和 5 2 .6 % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;(2 )腹腔移植瘤组 :A、B、C、D组裸鼠移植瘤的成瘤率分别为 89.1%、72 .3%、5 1.7%和 6 1.5 % ;差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;(3)TRAIL作用裸鼠移植瘤后CD95与Apo2 .7的表达均升高 ,P5 3基因表达稍升高 ,Bcl 2基因表达降低。结论 :(1)TRAIL对人卵巢癌裸鼠移植瘤有明显的抑制作用 ,TRAIL能明显降低裸鼠的成瘤率及死亡率 ,延长生存期 ;(2 )其机制可能与基因CD95、Apo2 .7、Bcl 2的调节有关     

人上皮性卵巢癌细胞系SKOV3-luc裸鼠皮下及原位移植瘤模型的建立与研究

目的:建立整体可视化人卵巢癌皮下和原位移植瘤模型,用于实时观察和分析人卵巢癌移植瘤发展和转移的规律,并比较两者的成瘤情况及生物学特性。方法:使用带有荧光素酶报告基因(Luciferase)的人上皮性卵巢癌细胞系SKOV3-luc分别接种于裸鼠右侧腋窝皮下和左侧卵巢内,建立人上皮性卵巢癌裸鼠皮下和原位移植瘤模型。实时观察卵巢癌细胞SKOV3-luc在裸鼠皮下和原位的生长情况,并切取肿瘤组织,应用病理组织学方法对裸鼠皮下移植瘤和原位移植瘤进行检测和评价。结果:人卵巢癌细胞系SKOV3-luc裸鼠皮下和原位移植瘤模型建立的成功率均较高。裸鼠皮下和左侧卵巢接种肿瘤细胞后,可通过活体成像实时观察肿瘤的生长情况,并且行定量分析肿瘤形成时间等。皮下移植瘤(皮下组)成瘤率为100%,左侧卵巢原位移植瘤(原位组)成功率为100%。注射后第7天,皮下组的肿瘤总荧光强度比值为(3.38±2.50)(Fold),原位组为(1.43±1.32)(Fold);第14天,皮下组为(15.73±11.70)(Fold),原位组为(6.44±7.26)(Fold),皮下组第7天和第14天的肿瘤总荧光强度比值均大于原位组(P<0.05)。结论:人上皮性卵巢癌裸鼠皮下移植瘤和卵巢原位移植瘤建模成功率高,并能很好地反应肿瘤的生物学行为,实时荧光成像便于观察肿瘤体内生长情况,为研究卵巢癌发展和转移提供了可靠的观察模型。     

血管形成抑制剂TNP-470对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的 观察血管形成抑制剂TNP－470（简称TNP）对人卵巢癌裸鼠皮上移植瘤生长的影响。方法 对30例裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型,共分为5组：对照组（皮内及腹腔注射无菌生理盐水）,溶剂组（皮内注射1％乙醇及5％阿拉伯糖混合液）,TNP组（皮内注射TNP）,环磷酰胺（CTX）组（腹腔注射CTX）,TNP＋CTX组（皮内注射TNP,同时腹腔注射CTX）。观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况,裸鼠体重的变化,计算抑瘤率,并进行病理学检查。结果 溶剂组抑瘤率为7．9％,对照组为0％,两组比较,差异无显著性（P＞0．05）;TNP组抑瘤率为26．1％,CTX组为33．9％,两组比较,差异无显著性（P＞0．05）;TNP＋CTX组抑瘤率高达70．5％,有极明显的抑瘤效应,与对照组比较,差异有极显著性（P＜0．005）。TNP＋CTX组移植瘤镜下可见肿瘤细胞核浆比例明显小于对照组,核异形性明显少于对照组。结论 TNP对卵巢癌有一定的治疗作用;TNP与化学药物联合应用,抑瘤作用增强。     

GnRHa和避孕药保护化疗所致卵巢损伤的比较研究

目的:探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)和口服避孕药(OC,达英-35)对注射环磷酰胺(CTX)大鼠卵巢功能的保护作用。方法:实验分为6组:空白对照组、CTX组、OC组、GnRHa组、OC保护组、GnRHa保护组,每组15只,分别接受生理盐水、CTX、达英-35、GnRHa、达英-35+CTX、GnRHa+CTX注射或灌胃。阴道涂片观察大鼠动情周期,以放射免疫法检测血清雌二醇(E2)和卵泡刺激素(FSH)浓度,每组在停药当天、15天及30天分别处死5只大鼠,观察卵巢重量、卵巢结构及各级卵泡数目。结果:停药后30天,OC保护组和GnRHa保护组的E2浓度分别为51.33±2.00pg/ml、44.38±5.98pg/ml,FSH浓度分别为3.69±0.28mIU/ml、3.35±0.22mIU/ml,两组比较及与空白对照组(51.76±2.57pg/ml、3.44±0.20mIU/ml)相比,差异均无统计学意义;与CTX组(21.78±2.11pg/ml、6.24±0.22mIU/ml)比较,差异有统计学意义。OC保护组和GnRHa保护组的卵巢重量、卵泡数量与空白对照组相比,差异无统计学意义,明显高于CTX组,两组间比较差异亦无统计学意义。结论:GnRHa和口服避孕药均能减轻化疗药物对卵巢功能的损伤,从而保护卵巢储备功能。     

胞嘧啶脱氨酶基因联合5-氟胞嘧啶对卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的　了解胞嘧啶脱氨酶 (CD)基因联合 5 氟胞嘧啶 (5 FC)对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法　应用胚肾 2 93细胞扩增整合有CD基因的复制缺陷的腺病毒 ,并将其分离、提纯。以卵巢癌裸鼠模型作为研究对象。实验组 (5只 ) :将整合有CD基因的复制缺陷的腺病毒 0 1ml[1×10 10 菌斑形成单位 (pfu) /ml]注入瘤体内 ,隔日 1次 ,共 3次 ;同时将 5 FC按每次 4 0 0mg/kg注入裸鼠腹腔内 ,每日 2次 ,共 7d。对照组 (5只 ) :以同样方法将同体积生理盐水注入裸鼠体内。观察两组裸鼠的肿瘤生长速度及倍增时间。结果　 (1)整合有CD基因的腺病毒滴度为 1 0 7× 10 10 pfu/ml。 (2 )实验组裸鼠肿瘤生长明显受抑制 ,肿瘤体积由 9mm3 增加到 85 5mm3 ,而对照组肿瘤体积由 7mm3 增加到 2 0 14mm3 ,两组比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,这种显著性差异在用药结束后约 2 0d才表现出来 ,并维持约 30d。(3)实验组与对照组肿瘤倍增时间分别为 (8 1± 0 7)d和 (6 4± 0 7)d ,两组比较 ,差异有显著性 (P<0 0 5 )。结论　应用CD基因联合 5 FC对卵巢癌裸鼠移植瘤具有良好的抑制作用     

内皮抑素真核表达载体对移植性卵巢癌的抑制作用

目的探讨脂质体介导的内皮抑素真核表达载体对裸鼠移植性卵巢癌的抑制作用。方法利用已构建的内皮抑素真核表达载体pVAX1sEn,在脂质体介导下转染卵巢癌细胞系3AO细胞,RTPCR技术检测3AO细胞中内皮抑素mRNA的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测3AO细胞上清液中内皮抑素的水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测3AO细胞上清液中的内皮抑素对脐静脉内皮细胞系ECV204细胞的抑制作用。将荷卵巢癌移植瘤裸鼠分为3组,pVAX1sEn治疗组、pVAX1对照组和生理盐水对照组,分别观察3组卵巢癌的生长情况。结果RTPCR技术检测结果显示,在610bp处有一内皮抑素mRNA的特异性条带;ELISA法检测结果显示,pVAX1sEn转染3AO细胞后其上清液中内皮抑素水平为(201±8)ng/ml;MTT法检测结果显示,pVAX1sEn转染3AO细胞后其上清液中的内皮抑素可有效抑制ECV204细胞的生长,最高抑制率为42%。pVAX1sEn治疗组肿瘤体积为(0.85±0.18)cm3,显著小于生理盐水对照组的(1.90±0.28)cm3和pVAX1对照组的(1.78±0.32)cm3(P<0.05)。肿瘤组织HE染色显示,pVAX1sEn治疗组肿瘤细胞坏死明显,而生理盐水对照组及pVAX1对照组肿瘤细胞生长旺盛。结论脂质体介导的pVAX1sEn瘤内注射可有效抑制卵巢癌移植瘤的生长。     

VP22增强慢病毒介导的自杀基因治疗抑制人卵巢癌裸鼠腹腔种植瘤生长的研究

目的:探讨单纯疱疹病毒壳膜蛋白VP22的细胞间传递作用促进HSV-TK/GCV(单纯疱疹病毒胸苷激酶/更昔洛韦)系统对卵巢癌腹腔移植瘤的杀伤效应。方法:将慢病毒包装质粒、包膜质粒、转移载体质粒采用磷酸钙沉淀法共转染包装细胞293T,收集病毒上清,并建立人上皮性卵巢癌(3AO)细胞株腹腔移植瘤模型。单药组分为TK+生理盐水(NS)组、VP22-TK+NS组、NS+NS组,分别腹腔注射慢病毒TK、VP22-TK或NS1ml,继而腹腔注射NS;联合用药组分为TK+GCV组、VP22-TK+GCV组、NS+GCV组分别腹腔注射慢病毒TK、VP22-TK及NS,24h后腹腔注射GCV治疗。每组裸小鼠均为5只。观察各组裸鼠的生存时间及慢病毒的毒性作用。结果:平均生存时间TK+NS组、VP2-TK+NS组、NS+NS组、NS+GCV组、TK+GCV组、VP2-TK+GCV组分别为18.3±2.7d、18.4±1.9d,17.2±1.3d、18.7±1.9d、21±4d和46±22d,6组差异有显著性(χ2=24.81,P=0.002);并且VP2-TK+GCV组平均生存时间较TK+GCV组裸鼠明显延长(χ2=7.42,P=0.006)。结论:VP22介导的自杀基因产物的细胞间扩散作用可明显加强对体内肿瘤细胞的杀伤效应。     

白细胞介素-15治疗3AO裸鼠移植瘤的实验研究

目的:探讨白细胞介素-15(IL-15)治疗3AO裸鼠皮下移植瘤的效果及其机制。方法:建立3AO裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为5组,每组12只。I组为顺铂(cD-DP)3mg/kg;Ⅱ组、Ⅲ组分别为IL-1550μg/kg,100μg/kg;Ⅳ组为cDDP1.5mg/kg加IL-1550μg/kg;Ⅴ组为对照组,注射生理盐水(各组药物均腹腔注射,按每只裸鼠0.2ml配制),1次/d,连用1周。观察移植瘤成瘤率、裸鼠生存期、生存延长率及肿瘤生长曲线。停药1天,1周,2周后,观察移植瘤细胞凋亡率及细胞周期,NK细胞群计数;测定裸鼠脾脏重量;对移植瘤及裸鼠肝、脾、肾行常规病理学检查。结果:实验组与对照组相比荷瘤裸鼠生存延长率,脾脏重量,移植瘤细胞凋亡率,NK细胞群计数均有明显差异。病理学检查示各治疗组均见肿瘤坏死,肿瘤细胞周围及肿瘤内淋巴细胞明显浸润。IL-15治疗组脾脏有充血增生表现,肝脏肝细胞嗜酸性变性,肝细胞水肿,周围有浊肿;cDDP治疗组肾脏近曲小管和远曲小管细胞水肿,管腔变小;对照组裸鼠肝、脾、肾未见明显病理改变。结论:IL-15对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤有明显的抑制作用,其机制可能与IL-15增强NK细胞的细胞毒活性,诱导NK细胞及细胞因子产生有关。     

Relationship of hypoxia-inducible factor-1alpha expression and vascular endothelial growth factor in SKOV-3 ovarian cancer model

OBJECTIVE: To investigate the correlation of hypoxia-inducible factor (HIF)-1alpha and vascular endothelial growth factor (VEGF) or micro-vessel density (MVD). METHODS: The ovarian cancer cell line SKOV3 was transplanted into nude mice to form xenogeneic tumor. Mice were treated with rapamycin 4 mg/kg, sulindac 100 mg/(kg.d) and saline 200 microl respectively. Expression of HIF-1alpha and VEGF proteins and MVD were determined by immunohistochemistry. The mRNA of Glut1 and VEGF was studied by RT-PCR. RESULTS: The positive expression of HIF-1alpha and VEGF was moderate to strong, and MVD was high (31 +/- 8) in control group. In rapamycin treated group, the expression of HIF-1alpha was inhibited to weak positive or negative (P < 0.05), the VEGF protein and mRNA expression decreased (P < 0.05), MVD was also suppressed to a low level (13 +/- 5). There was a significant correlation between HIF-1alpha expression and VEGF expression (by Spearman's coefficient r = 0.8264, P < 0.01), and MVD (r = 0.4842, P < 0.05). CONCLUSIONS: HIF-1alpha protein can regulate VEGF protein and its mRNA expressions. It correlates with MVD in ovarian tumor tissue.     

酞胺哌啶酮对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长及血管生成的作用

目的 :观察酞胺哌啶酮对人卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤生长及血管生成的抑制作用。方法 :于裸鼠背部右侧皮下接种SKOV3 瘤源 ,随机分为 4组 :治疗组 - 1和对照组 - 1,皮下移植后次日开始分别给予酞胺哌啶酮 2 0 0mg kg .d-1、等体积 0 .5%羧甲基纤维素钠腹腔内注射 ,共 4周。治疗组 - 2和对照组 - 2 ,皮下移植第 15天开始分别给予酞胺哌啶酮 2 0 0mg kg .d-1和等体积 0 .5%羧甲基纤维素钠 ,共 2周。定期检测皮下瘤体积和裸鼠体重。用免疫组化方法检测肿瘤组织微血管内皮细胞的表达情况 ,在光学显微镜高倍视野下 (2 0 0× )分别计数肿瘤组织的微血管密度 (MVD)。结果 :治疗组裸鼠皮下瘤体积较对照组明显减小 :治疗结束时 ,治疗组 - 1抑瘤率为 4 0 .2 % (P <0 .0 1) ;治疗组 - 2抑瘤率为 2 8.5% (P <0 .0 5)。治疗组裸鼠体重与对照组无明显差异 (P >0 .0 5)。两治疗组皮下瘤的MVD明显降低 ,治疗组 - 1的抑制率为 4 3.7% (P <0 .0 1) ,治疗组 - 2的抑制率为4 2 .1% (P <0 .0 5)。结论 :酞胺哌啶酮能抑制人卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤生长及微血管生成 ,其生长抑制作用以早期应用效果显著 ,且其副作用不明显     

促性腺激素释放激素类似物对化疗大鼠卵巢功能损害的干预作用

目的 探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)和拮抗剂(GnRH-ant)对环磷酰胺(CTX)诱导的大鼠卵巢功能损害的干预作用.方法 将72只雌性SD大鼠随机分为6组,即对照组[腹腔注射生理盐水(NS)0.1 ml/d×11 d]、CTX组(第1天腹腔注射CTX 50 mg/kg,第2天起腹腔注射CTX 5 mg/d×10 d)、GnRH-a+NS组[GnRH-a 0.375 mg 1次深部肌内注射(估计释放量为12.5μg/d,持续28～30 d),于用药第14天左右(连续5 d观察阴道涂片均处于动情间期)开始注射NS,用药方法同对照组]、GnRH-a+CTX组(同GnRH-a+NS组注射GnRH-a后,于用药第14天左右的动情间期开始注射CTX,用药方法同CTX组)、GnRH-ant+NS组[GnRH-ant 0.3 mg皮下注射,以后每隔2天注射1次,共4次(估计释放量为100μg/d,共12 d),于第1次GnRH-ant皮下注射后第2天开始注射NS,用药方法同对照组]及GnRH-ant+CTX组(同GnRH-ant+NS组注射GnRH-ant后,于第1次GnRH-ant皮下注射后第2天开始注射CTX,用药方法同CTX组];每组12只.用药前后采用酶联免疫吸附法动态检测各组大鼠卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及雌二醇水平的变化,并于结束用药后的第1周内和第4～5周内(动情间期),各组分别处死6只大鼠,观察卵泡数量、卵巢重量的变化.结果 (1)血清内分泌激素水平:用药前后,对照组的血清LH、FSH、雌二醇水平无明显变化,CTX组的血清内分泌激素水平呈上升趋势.用药中,血清LH、FSH水平GnRH-a+CTX组为(42±8)、(124±45)μg/L,GnRH-a+NS组为(47±7)、(136±32)μg/L;GnRH-ant+CTX组为(31±5)、(178±54)μg/L,GnRH-ant+NS组为(36±7)、(198±27)μg/L;对照组为(118±16)、(350±35)μg/L;CTX组为(113±15)、(289±42)μg/L;分别比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05).血清雌二醇水平GnRH-ant+CTX组为(3.98±0.74)ng/L,GnRH-ant+NS组为(3.58±0.43)ng/L,GnRH-a+CTX组为(1.46±0.22)ng/L,GnRH-a+NS组为(0.98±0.18)ng/L分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).停药后,GnRH-a+CTX组、GnRH-a+NS组及GnRH-ant+NS组的血清LH、FSH、雌二醇水平逐渐接近对照组水平.但停药第4～5周时,GnRH-ant+CTX组LH、FSH水平[(156±12)、(520±44)μg/L]与CTX组[(178±18)、(546±36)μg/L]比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)卵巢重量:停药第1周,GnRH-a+CTX组大鼠双侧卵巢重量为(18±8)mg/100 g,GnRH-a+NS组为(12±5)mg/100 g,均明显低于其他各组[(30±9)～(37±8)mg/100 g],差异均有统计学意义(P＜0.05);停药第4～5周,GnRH-ant+CTX组大鼠双侧卵巢重量为(22±6)mg/100 g,CTX组为(20±4)mg/100 g,均明显低于其他各组,差异均有统计学意义(P＜0.05).(3)卵泡数量:停药第1周,GnRH-a+CTX组大鼠卵巢原始卵泡数为(689±39)个,GnRH-a+NS组为(824±45)个,明显高于GnRH-ant+CTX组[(255±24)个]和CTX组[(343±29)个];生长卵泡数GnRH-a+CTX组为(21±3)个,GnRH-a+NS组为(15±1)个,明显低于GnRH-ant+CTX组[(110±21)个]和CTX组[(87±17)个];分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).停药第4～5周,GnRH-a+CTX组和GnRH-a+NS组的生长卵泡数[(56±16)、(58±11)个]接近对照组水平[(57±9)个];GnRH-ant+CTX组及CTX组的原始卵泡数和生长卵泡数均少于其他4组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 GnRH-a对CTX诱导的大鼠卵巢功能损害具有保护作用,GnRH-ant对CTX诱导的大鼠卵巢功能损害没有明显的保护作用.     

bFGF单克隆抗体对卵巢癌移植瘤血管生成的抑制作用

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在卵巢上皮性肿瘤中的表达强度与肿瘤血管生成之间的关系,及其单克隆抗体bFGFMAb对人卵巢癌移植瘤血管生成和肿瘤生长的影响。方法:(1)应用免疫组化法和图像分析系统研究bFGF在正常卵巢组织,良性、交界性和恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达部位和强度;以及bFGF的表达强度与肿瘤新生血管的关系;(2)利用卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,每周2次将不同浓度的bFGFMAb注射于瘤体周围,连续8周,每周测量肿瘤体积,绘制移植瘤生长曲线;对移植瘤组织行Ⅷ因子的免疫组化染色,测定肿瘤内微血管密度(MVD)。结果:(1)bFGF主要在卵巢上皮性肿瘤细胞浆内表达,在交界性和恶性肿瘤中,部分细胞同时存在核表达;bFGF在正常卵巢组织,良性、交界性和恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达强度逐步增强,同时MVD逐步增高,二者呈正相关(P<0.001);(2)30、20、10μgbFGFMAb组移植瘤体积分别是对照组的31.34%、49.20%和71.25%,MVD分别是对照组的27.80%、52.37%和81.86%(P<0.05),其作用呈浓度依赖性。结论:bFGFMAb能明显抑制卵巢癌的血管生成和肿瘤生长,有望成为卵巢癌生物治疗的新方法。     

c-erbB-2与c-raf-1反义寡核苷酸联合转染对裸鼠人卵巢癌皮下移植瘤形成的抑制作用

目的 探讨c-erbB-2与c-raf-1反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)联合转染,对人卵巢癌细胞株SKOV3,在裸鼠皮下移植瘤形成过程中的抑制作用。方法 共分7组：Ⅰ组(正常对照)、Ⅱ组[c-erbB-2正义寡核苷酸(SODN)]、Ⅲ组(c-raf-1 SODN)、Ⅳ组(c-erbB-2 ASODN)、V组(c-raf-1 ASODN)、Ⅵ组(全剂量联合)、Ⅶ组(半剂量联合)。根据不同分组条件将相应寡核苷酸导入SKOV3细胞株内,然后接种于裸鼠皮下,观察肿瘤出现的时间和肿瘤体积的变化,并计算抑瘤率。结果 Ⅱ、Ⅲ组与对照组成瘤能力比较,差异无显著性,Ⅳ、V组的成瘤能力明显降低,Ⅵ组与Ⅶ组的成瘤能力最低,Ⅵ组与Ⅶ第1次出现肉眼可见肿瘤的时间分别为13．7d和15．2d,最大抑瘤率分别为61．1％和71．3％。结论 反义寡核苷酸联合转染,对卵巢癌细胞的成瘤能力和肿瘤生长抑制作用更明显。     

Cytosol vascular endothelial growth factor in endometrial carcinoma: correlation with disease-free survival

OBJECTIVE: The aim of this study was to evaluate whether vascular endothelial growth factor (VEGF) could be a marker for disease-free survival in endometrial carcinoma patients. METHODS: Fifty-three patients with endometrial carcinoma undergoing surgery were enrolled. Clinical and pathologic items were recorded. Cytosol VEGF was quantified by enzyme immunoassay. The microvessel density (MVD) of the excised tumors was immunohistochemically assessed. The relationship among MVD, cytosol VEGF concentration of the tumor tissues, and clinicopathologic parameters was analyzed. The risk factors influencing clinical outcome were tested. RESULTS: Higher cytosol VEGF concentrations and MVD values were noted in tumors with advanced stage (more than stage I) (917 versus 125 pg/mg, P = 0.03; 94.1 +/- 37.8 versus 60.8 +/- 38.9, P = 0.008), lymphovascular emboli (917 versus 102 pg/mg, P = 0.001; 94.4 +/- 33.2 versus 62.4 +/- 40.7, P = 0.009), and lymph node metastasis (1032 versus 95 pg/mg, P < 0.001; 116.5 +/- 30.8 versus 56.7 +/- 33.3, P < 0.001). The cytosol VEGF and MVD showed a positive linear correlation (VEGF versus MVD, r = 0.41, P = 0.003). Grade 3 tumor and overexpressed cytosol VEGF (> 800 pg/mg) are independent risk factors for recurrence. There was a trend that patients with grade 1 or 2 tumors and normal-expressed VEGF had the highest probability of disease-free survival, and patients with grade 3 tumors and overexpressed cytosol VEGF had the poorest probability of disease-free survival. CONCLUSIONS: Cytosol VEGF had a good correlation with the disease progression and metastasis in endometrial carcinoma, and it might also be an independent prognostic factor for disease-free survival of endometrial carcinoma patients.     

放置宫内节育器对子宫内膜血管内皮生长因子及其激酶受体表达及微血管密度变化的影响

目的探讨放置固定式带铜宫内节育器(FCu-IUD)和含吲哚美辛FCu-IUD(FICu-IUD),对子宫内膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)及其激酶受体(KDR)表达以及微血管密度(MVD)变化的影响及意义.方法采用免疫组化法及原位杂交法,检测放置FCu-IUD妇女(10例,FCu-IUD组)及放置FICu-IUD妇女(10例,FICu-IUD组)放置IUD前后子宫内膜VEGF、VEGF mRNA及KDR的表达,并计数子宫内膜MVD.结果 FCu-IUD组放置IUD后,VEGF及KDR蛋白为0.568±0.027,0.244±0.022,均高于放置IUD前的0.357±0.032,0.215±0.029,放置IUD前后比较,差异有显著性(P<0.05).FCu-IUD组放置IUD前VEGF mRNA表达为0.359±0.022,低于放置IUD后的0.425±0.019,放置IUD前后比较,差异有显著性(P<0.05).FICu-IUD组放置IUD前后VEGF、KDR蛋白及VEGF mRNA表达比较,差异无显著性(P>0.05). FCu-IUD组放置IUD后MVD为19.8±4.8,明显高于放置IUD前的15.4±2.8,且与VEGF蛋白的表达呈正相关关系(r=0.847,P<0.01).FICu-IUD组放置IUD前后MVD比较,差异无明显性(P>0.05).结论放置FCu-IUD可促进子宫内膜VEGF及KDR的表达,FICu-IUD可抑制子宫内膜VEGF及KDR的生成.VEGF及KDR可能参与了FCu-IUD 及FICu-IUD所引起的子宫内膜微血管结构和功能的改变.     

单纯疱疹病毒胞腺嘧啶核苷激酶基因羟甲基无环岛苷系对人卵 …

观察单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激素酶基因羟甲基无环鸟苷系统对人卵巢癌的体内治疗作用。方法先将人卵巢癌细胞ＡＯ及携有ＨＳＶ１－ｔｋ基因的ＡＯ注射于裸鼠皮下,形成肿瘤后再移植于裸鼠网膜,并以病毒生物细胞的培养液对ＡＯ网膜移植瘤进行体风转染,然后以ＧＣＶ对体外ＡＯ／ＨＳＶ１－ｔｋｃ转移的肿瘤及经体内转染的ＡＯ肿瘤进行治疗。