鼠疫菌荚膜抗原和重组rV270抗原免疫小鼠后保护效果观察

目的 对小鼠血清抗体滴度检测和对小鼠的保护力观察,评价鼠疫菌荚膜抗原(F1抗原)和重组rV270抗原对鼠疫的免疫保护效果.方法 40只6～8周雌性Balb/c小鼠,按体质量随机分成4个实验组(F1-10 μg+铝佐剂、F1-20μg+铝佐剂、rV-10 μg+铝佐剂、rV-20 μg+铝佐剂)和1个对照组,每组8只.将天然F1抗原和重组rV270抗原分别吸附到25％铝佐剂中免疫实验组小鼠,对照组小鼠以免疫等量的铝佐剂.每只动物每次后腿肌肉免疫100 μ1,初次免疫后,第21天加强免疫1次.所有动物分别于第1次免疫后第8周采血,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定抗体滴度.同时用2000倍半数致死量(LD50)的鼠疫菌141强毒株皮下攻毒,观察14d,以观察免疫后保护效果.结果 对照组未产生抗体,F1-10 μg+铝佐剂组、F1-20 μg+铝佐剂组的抗体几何平均滴度(GMT)分别为1∶30443.9、1∶21527.8,组间比较差异无统计学意义(t=1.1282,P＞0.05);rV-10 μg+铝佐剂组和rV-20μg+铝佐剂组的GMT分别为1∶13957.3、1∶18100.9,组间比较差异无统计学意义(t=0.9408,P＞0.05).用141强毒株皮下攻毒后,实验组小鼠全部存活,对照组8只小鼠全部死亡.结论 实验用天然F1抗原及重组rV270抗原具有较高的免疫活性,可作为鼠疫亚单位疫苗的主要组分用于鼠疫亚单位疫苗的研究.     

复合鼠疫疫苗F1+ rV的免疫学研究

目的通过由提取的鼠疫F1抗原和重组鼠疫V抗原免疫小鼠,评价鼠疫亚单位疫苗的免疫效果,为鼠疫疫苗研制奠定基础。方法将60只小鼠随机分为3组实验组,免疫后不同时间点进行血清ELISA检测、ELISPOT、MTT 细胞增殖以及流式细胞分析。结果ELISA检测结果显示F1+rV+Al(OH)3组有较强的体液免疫应答;ELISPOT、MTT 细胞增殖结果显示F1+rV+Al(OH)3组在不同时间点经F1、rV抗原刺激后分泌IFN γ的脾脏淋巴细胞数均高于其余各组。结论鼠疫双组分疫苗能引起小鼠明显的体液免疫和细胞免疫,Al(OH)3佐剂能够显著提高其应答水平。     

鼠疫活菌苗新菌株的选育研究

从青海、吉林分离的148株强毒和中等毒力的鼠疫菌株中,用氯化血红素法选育了一株弱毒鼠疫菌061株。其生物学特性、残余毒力、遗传稳定性、对实验动物的组织病理改变及免疫力等均达到作为活菌苗的技术要求。最小免疫剂量的保护效果与通用的EV株相似;最大攻击剂量的保护效果明显优于EV株,可保护毒菌141株10亿活菌的攻击;免疫持续时间可维持3～6个月;加强免疫后,可保护毒株50亿活菌的攻击。用061菌株和EV株按常规免疫豚鼠,其抗体水平前者明显高于后者。其菌悬液的F1抗原含量061株为18.55ug/ml,比EV株11.29μg/ml高30%以上。作者认为可作为鼠疫活菌苗,用于人类鼠疫的预防。     

鼠疫耶尔森菌小肽基因sORF34缺失株毒力及短期免疫保护效果评价

目的 探索小肽基因34(sORF34)缺失对鼠疫耶尔森菌毒力影响,并评价sORF34缺失株免疫保护活性。方法 基于鼠疫耶尔森菌201株和鼠疫耶尔森菌EV76疫苗株利用λ-Red一步法构建小肽基因缺失株。比较鼠疫小肽基因缺失株和亲本株之间的毒力差别,并采用皮下免疫方式对小鼠进行免疫,与EV76疫苗株比较,评价体液免疫、保护率等方面的差异。结果 PCR扩增结果证实,小肽基因缺失株构建成功。通过皮下LD₅₀测定、生存曲线测定,表明小肽基因缺失株较亲本株毒力下降。鼠疫201ΔsORF34和EV76ΔsORF34皮下免疫后可刺激机体产生抗F1-IgG,其中鼠疫201ΔsORF34免疫组抗体滴度与EV76疫苗株免疫组差异无统计学意义(P>0.05),EV76ΔsORF34免疫组较EV76疫苗株免疫组抗体滴度低;鼠疫EV76ΔsORF34株可刺激机体产生低滴度抗LcrV-IgG,而EV76和201ΔsORF34株不能刺激机体产生抗LcrV-IgG。初免后42 d使用致死剂量鼠疫201株进行皮下攻毒和滴鼻攻毒,3组保护率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 小肽基因缺失株经皮下途径感染BALB/c小鼠的毒力下降,鼠疫EV76ΔsORF34株较EV76疫苗株残存毒力进一步下降,但保护率差异无统计学意义(P>0.05),EV76ΔsORF34株有作为鼠疫减毒活疫苗候选株的潜力。     

鼠疫F1单克隆抗体建株过程中的动物免疫

目的探讨在建立抗鼠疫F1抗原的单克隆抗体杂交瘤株的过程中抗原免疫的剂量及免疫方法.方法采用F1抗原常规免疫、改良的F1抗原脾内注射免疫以及EV菌免疫3种方法免疫6～8周龄,体重为10～20g,健康的雌性BALB/c小鼠,并用间接ELISA法检测尾血中的抗体. 结果在常规免疫中,200μg 组和100μg组免疫效果优于50μg组,而200μg组和100μg组免疫效果基本一致;改良的F1抗原脾内注射免疫,血中抗体效价较高;EV菌免疫的效果不理想. 结论用F1抗原常规免疫小鼠,免疫剂量用100μg/只较为合适;若要缩短免疫时间,采用改良的脾内注射免疫法是理想的选择.     

鼠疫FI单克隆抗体杂交瘤株的建立

先后两次分别用鼠疫EV活菌和FI抗原免疫BALB/C小鼠的脾细胞与SP2/0瘤细胞混合,大容量40％PEG处理后离心法杂交,用IHA和PPA-ELISA检测McAb,建立了21株分泌抗鼠疫FI抗原的McAb的杂交瘤株,初步鉴定了其中5株。观测了1株杂交瘤分泌的McAb用于RIHA的特异性和敏感性。     

鼠疫菌感染兔血清抗体谱分析

目的分析鼠疫耶尔森菌感染的兔血清(鼠疫菌感染兔血清)中抗体产生的种类与规律,为了解鼠疫菌的致病机制及筛选新的疫苗亚单位提供实验依据。方法利用含有145个鼠疫菌毒力相关蛋白的蛋白质芯片检测鼠疫菌感染兔血清抗体谱,并与鼠疫菌活疫苗EV76株免疫兔血清(免疫兔血清)抗体谱比较。结果在鼠疫菌感染兔血清中共检测到41个蛋白相应的抗体,其中28个抗体在免疫兔血清中也检测到,有6个蛋白抗体只在鼠疫菌感染兔血清中检测到。结论鼠疫菌感染兔血清的抗体谱与免疫兔血清的抗体谱不完全一致,通过对鼠疫菌感染兔血清抗体谱的研究,可为深入了解细菌的致病机制及筛选新的疫苗亚单位奠定基础。     

酶标鼠疫F1McAb在酶免疫染色法快速鉴定鼠疫菌中的应用

目的观察酶标鼠疫F1McAb在酶免疫染色法快速鉴定鼠疫菌中的应用效果.方法实验感染鼠疫强毒菌的病死小鼠和处死健康小鼠尸体,20℃以上室温放置,用鼠疫F1McAb酶免疫染色法检测,同时用细菌学检验方法分离鼠疫菌和反向血凝试验(RIHA)检测鼠疫F1抗原.结果直接培养仅从5d内的鼠尸分离检出鼠疫菌,阳性率为53.3%;动物实验检出鼠疫菌的最长时间为8d,阳性率为71.6%.存放13d内,酶免疫染色阳性率为99.1%,RIHA阳性率98.2%,用酶免疫染色法和RIHA检测健康动物腐败脏器全部阴性.以上方法检查鼠疫疫区自毙动物标本12份,酶免疫染色法阳性7份,RIHA阳性6份,动物实验阳性5份,直接培养未获得阳性结果.结论酶免疫染色法检查动物腐败脏器中的鼠疫菌具有较高的敏感性和特异性.     

鼠疫菌苗研究进展

自80年代以来,全世界鼠间鼠疫十分活跃,人间鼠疫在局部地区时有暴发流行。我国个别地区动物鼠疫处于活跃状态,人间鼠疫呈抬头趋势。预防和控制人间鼠疫是我国鼠防工作的重点。寻求有效的疫苗暴露于鼠疫自然疫源地的人群进行保护,是当务之急。1 国内外研究概况 当今世界研究过的鼠疫菌苗大体上分为死菌苗、活菌苗及提纯菌苗三大类。由于死菌苗的免疫效果不及活菌苗,目前除美国及其影响下的国家多使用USP菌苗外,其它国家已不再用Keppie等(1958)、Stalev和Smith(1967)等对破碎后的鼠疫     

实验性豚鼠鼠疫病理形态学改变

目前,国内外在鼠疫防治和科研方面做了大量工作,取得了一定成绩,但从病理学的角度研究报道甚少。本文对实验性豚鼠进行了病理组织学观察,以便为鼠疫临床诊断和防治工作提供理论依据。1 材料与方法1.1 实验组 用鼠疫菌610株攻毒豚鼠。豚鼠体重250g,雌性5只,雄性6只,分为3组。分别为100个菌、1000个菌、10000个菌,皮下接种。     

表观扩散系数值与肝细胞癌分级的相关性以及相关性与肿瘤大小关系的分析

[摘要]　目的　探讨表观扩散系数（apparent diffusion coefficient, ADC）值与肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）组织学分级的相关性以及不同直径肿瘤的ADC值与HCC的相关性。方法?回顾性分析2017年—2020年180例病理证实为HCC的病例资料,按肿瘤直径大小分为＜2 cm、≥2 cm且＜3 cm、≥3 cm且＜5 cm、≥5 cm 4组,标为I、II、III、IV组。分析ADC值与HCC组织学分级的相关性,并分析在不同直径肿瘤ADC值与HCC的相关性。结果?高、中和低分化HCC的ADC值分别为（1.159±0.302）×10-3、（0.951±0.213）×10-3和（0.811±0.239）×10-3 mm2/s,逐级降低（P＜0.05）。ADC值与总体HCC的组织学分级呈负相关（r=-0.474）,与I～III组HCC的组织学分级均呈负相关（r值分别为-0.663、-0.527、-0.364）,而与IV组HCC的组织学分级无相关性。结论?ADC值可以作为非侵入性预测HCC组织学分级的指标,预测结果受肿瘤大小影响,更适用于小肝细胞癌。     

Research and Evaluation of the Influence of the Construction of the Gate and the Influence of the Piston Velocity on the Distribution of Gases into the Volume of the Casting

Distribution of gasses to the cast volume and volume of pores can be maintained within the acceptable limits by means of correct setting of technological parameters of casting and by selection of suitable structure and gating system arrangement. The main idea of this paper solves the issue of suitability of die casting adjustment—i.e., change of technological parameters or change of structural solution of the gating system—with regards to inner soundness of casts produced in die casting process. Parameters which were compared included height of a gate and velocity of a piston. The melt velocity in the gate was used as a correlating factor between the gate height and piston velocity. The evaluated parameter was gas entrapment in the cast at the end of the filling phase of die casting cycle and at the same time percentage of porosity in the samples taken from the main runner. On the basis of the performed experiments it was proved that the change of technological parameters, particularly of pressing velocity of the piston, directly influences distribution of gasses to the cast volume.     

缺锌对孕鼠生长发育及其肝脏、胎盘中谷胱甘肽过氧化物酶及过氧化氢酶活性的影响

为观察喂养缺锌饲料对孕鼠生长发育及其肝脏、胎盘中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及过氧化氢酶(CAT)活性的影响。将16只受孕Wistar鼠随机分为缺锌组(ZD组)、加锌组(ZS组)和正常对照组(ZC组),分别喂饲缺锌饲料、加锌饲料和基础饲料,记录每只孕鼠每日体重变化。于妊娠21日将孕鼠处死,取其肝脏、胎盘作GSH-PX和CAT活性测定。结果为ZD组孕鼠体重未见增加,SC组和ZS组孕鼠体重增加明显;与ZC组和ZS组相比,ZD组孕鼠肝脏和胎盘中GSH-PX活性显著降低(P<0.05),孕鼠肝脏和胎盘中CAT活性显著升高(P<0.05)。故认为缺锌可影响孕鼠肝脏、胎盘中谷胱甘肽过氧化物酶及过氧化氢酶活性,并影响其生长发育。