应用ERIC-PCR对多重耐药大肠埃希菌进行基因分型

目的研究ERIC-PCR用于大肠埃希菌基因分型的可靠性。方法102株多重耐药大肠埃希菌采用双纸片扩散法检测ESBLs,用ERIC-PCR进行基因分型。结果102株多重耐药大肠埃希菌可分为六个基因型,主要为I和II型,分别为40株和24株。结论ERIC-PCR可用于大肠埃希菌的基因分型。     

应用ERIC-PCR对多重耐药大肠埃希菌进行基因分型

目的研究ERIC-PCR用于大肠埃希菌基因分型的可靠性.方法102株多重耐药大肠埃希菌采用双纸片扩散法检测ESBLs,用ERIC-PCR进行基因分型.结果102株多重耐药大肠埃希菌可分为六个基因型,主要为I和Ⅱ型,分别为40株和24株.结论ERIC-PCR可用于大肠埃希菌的基因分型.     

泌尿系统溶血性大肠埃希菌耐药趋势及耐药基因

目的：研究致泌尿系统感染溶血性大肠埃希菌的耐药特性及耐药基因类型。方法：分离我院1999年－2000年泌尿科感染溶血性大肠埃希菌患者标本54份共54株菌,检测分离菌对16种抗生素的耐药性和超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）,并用PCR分别检测TEM、SHV、OXA 、IMP和CTX－M耐药基因,结果：16种抗生素敏感率最高的药物为安培南（96．3％）和阿米卡星（92．6％）;头孢他定,头孢噻肟和头孢三嗪的敏感率分别为81．5％、77．8％、77．8％;氨苄西林及喹诺酮类敏感率最低。ESBLs阳性8株（8／54,14．8％）,ESBLs阳性菌的基因为TEM型。结论：本地区致泌尿系统感染的溶血性大肠埃希菌对碳青霉烯类和部分氨基糖甙类（阿米卡星）药物治疗的敏感性高,对青霉素类及喹诺酮类药物敏感性较差,感染泌尿系统的溶血性大肠埃希菌ESBLs基因主要为TEM型,并可能与其他类型的耐药基因一同形成多重耐药的特性。     

多重耐药大肠埃希菌菌株氯霉素耐药相关基因研究

目的 了解多重耐药大肠埃希菌(ECO)对氯霉素的耐药机制.方法 采用PCR法检测20株多重耐药ECO菌氯霉素耐药基因(catB,cmlA).结果 catB基因阳性3株(阳性率15%),cmlA基因阳性7株(阳性率35%).一株catB基因PCR产物经DNA测序并翻译为氨基酸序列与已在美国国立生物信息中心[NCBI]登录的catB基因序列比对,结果为与大肠埃希菌CATB3[登录号:ABP35557]序列98%(88/89)相同,能判断为新亚型.结论 该组多重耐药ECO菌对氯霉素耐药与携带catB,cmlA基因相关.     

大肠埃希菌(EHEC/EPEC)紧密黏附素基因的分型分析

目的 了解大肠埃希菌分离株eaeA基因的多态性。 方法 对不同来源的60株大肠埃希菌分离株的eaeA基因进行聚合酶链反应扩增后直接测序,测序结果在NCBI中进行BLASTn比对,根据比对相似性判定eaeA基因的型别。将获得型别的序列与GenBank中肠致病性大肠埃希菌(Enteropathogenic Escherichia coli, EPEC)和肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli, EHEC)代表性菌株型别的序列用Neighbor-joining法构建系统发生树,分析其进化关系。 结果 所有EHEC分离株的eaeA基因均为γ型,且序列完全一致。EPEC分离株的eaeA基因型以β1型为主,同时存在ε, κ, ι2, θ型。 结论 EHEC分离株的eaeA基因相对保守,型别单一,而EPEC分离株的eaeA基因表现出较大的多态性。     

456株大肠埃希菌的鉴定及耐药分析

目的对大肠埃希菌对抗菌药物的耐药趋势进行调查分析,了解大肠埃希菌的耐药特点,探讨耐药性产生的原因。方法常规细菌培养、分离,应用纸片扩散法对分离的456株大肠埃希菌进行药敏测试与分析。结果对20种抗菌药物的耐药检测结果显示,大肠埃希菌对青霉素类和喹诺酮类抗生素菌药物耐药率达73.6%～86.4%,对第1、2代头孢菌素(头孢拉啶,头孢唑啉)耐药率为44.0%,对第3代头孢中的头孢他啶耐药率最低,为10.1%,对哌拉西林、头孢哌酮和氨卞西林的耐药率为84.5%、76.3%和83.0%。在12种抗菌药物中对5种以上耐药的菌株有316株。结论大肠埃希菌为泌尿系统感染的首位细菌,对于治疗大肠埃希菌引起的泌尿生殖感染应根据实验室的药敏检测结果合理用药,以提高治疗效果。     

致尿路感染的大肠埃希菌耐喹诺酮类抗菌药的相关耐药基因及耐药机制

目的:调查分析致尿路感染的大肠埃希菌喹诺酮类抗菌药相关耐药基因的流行状况,并探讨其耐药机制.方法:收集丽水市中心医院2008年3月至2010年3月从临床分离的导致尿路感染的大肠埃希菌无重复菌株52株,K-B法检测其耐药性,利用PCR扩增法检测并分析大肠埃希菌质粒介导喹诺酮耐药相关的qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrR、qnrS、aac(6’)-Ib基因以及DNA解旋酶GyrA与拓扑异构酶Ⅳ基因的喹诺酮决定区域ParC,扩增产物测序后经GenBank比对确认.结果:未检测到qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrR及qnrS基因,aac(6')-Ib检出率为26.9％(14/52),经比对未发现aac(6')-Ib-cr阳性菌株;耐药菌gyrA基因喹诺酮耐药决定区氨基酸序列存在两个位点突变;36株耐药菌拓扑异构酶ⅣParC基因测序与敏感菌相比相似性89％～ 95％.结论:致尿路感染大肠埃希菌中未检测到qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrR、qnrS基因及aac(6')-Ib-cr阳性株,DNA解旋酶gyrA和ParC基因变异可能是导致我院尿路感染大肠埃希菌对喹诺酮类抗菌药耐药的主要原因.     

多重耐药大肠埃希菌复方新诺明耐药相关基因研究

目的了解多重耐药大肠埃希菌（ECO）对复方新诺明耐药机制。方法采用PCR检测20株多重耐药ECO菌复方新诺明耐药基因（sull，dfrAl，dfrA5，dfrAl2，dfrAl7）。结果sull，dfrAl，dfrAl2，dfrAl7基因阳性率分别为90％（18／20），10％（2／20），5％（1／20），75％（15／20），未栓出dfrA5基因。共有18株检出sul和／或dfrA基因（90％）。结论本组多重耐药ECO菌复方新诺明耐药与携带sull，dfrA基因相关，复方新诺明耐药表型与基因型相符。     

大肠埃希菌临床分离株耐药性分析

目的：监测近5年来大肠埃希菌临床分离株的耐药性变迁，指导临床合理使用抗生素。方法：常规方法进行菌株分离，采用VITEK-32全自动微生物分析仪进行菌株鉴定及药敏试验，超广谱β内酰胺酶采用双纸片确认试验和仪器检测相结合的方法，对近5年来我院大肠埃希菌的耐药谱进行回顾性调查分析。结果：近5年从各种临床标本中共分离到大肠埃希菌488株，大肠埃希菌对青霉素类及第一代头孢菌素耐药率最高。2002年，对氨苄西林、替卡西林和头孢噻吩耐药率均高达98％，对亚胺培南耐药率最低，5年耐药率均为零。对培氟沙星和替卡西林耐药率上升最快，分别上升了28和26个百分点，对呋喃妥因耐药率有所下降，对庆大霉素和妥布霉素耐药率趋于稳定。产ESBLs菌株有明显上升趋势，从1998年的17％上升到2002年的36％。结论：大肠埃希菌在临床标本中的检出率、耐药性及多重耐药性均有逐年上升的趋势。     

大肠埃希菌感染的临床分布及耐药特性研究

目的 通过对浙江省温州医学院附属第一医院近5年临床分离大肠埃希菌的临床分布和耐药特性分析,为临床合理利用抗菌药物和减少ESBLs的产生提供依据.方法 回顾性调查2006 -2010年该院住院患者标本分离的657株大肠埃希菌,使用VITEK - 60全自动微生物分析仪专用药敏检测卡及K-B琼脂扩散法做药敏实验,对其临...     

大肠埃希菌感染的临床分布与耐药性分析

目的分析大肠埃希菌在临床感染中的分布与耐药情况,为其在院内、外感染控制以及临床合理用药方面提供科学依据。方法分析2010年1月至2014年12月5年间该院临床各类标本中大肠埃希菌的分离情况并分析大肠埃希菌的科室分布及其耐药情况。结果分离的2 405株大肠埃希菌主要来源于尿液1 049株(43.60%)及痰液562株(23.4%);其中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的检出率为57.92%;大肠埃希菌对青霉素类、头孢菌素类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类和磺胺类等的大多数抗菌药物的耐药率大于50%;耐药率小于10%的抗菌药物有亚胺培南(0)、美罗培南(0)、哌拉西林/他唑巴坦(4.6%)、头孢哌酮/舒巴坦(6.4%)和头孢西丁(7.7%),对头孢曲松、头孢噻肟、头孢吡肟等部分第3、4代头孢菌素的耐药性有明显增加趋势。结论大肠埃希菌在医院获得性感染中存在比较严重的耐药情况,临床应加强对病原菌的分布及耐药性检测,避免产生更多的耐药菌株,以降低细菌的耐药性及医院的感染率。     

大肠埃希菌毒力因子检测及其与耐药相关性研究

目的探讨不同来源大肠埃希菌毒力因子的分布及其与耐药性的关系。方法对2003-2008年温州医学院附属第一医院的住院患者不同标本中分离的188株大肠埃希菌用PCR方法扩增毒力因子papC、sfa/foc、afa/dra、hly、cnf1、iutA、aer、fimH、kpsMTⅡ、fyuA。采用VITEK-60自动化微生物分析仪检测大肠埃希菌对常用抗菌药物的敏感性。结果毒力因子iutA、fyuA在不同标本来源的大肠埃希菌中的检出率较高,均50%,毒力因子aer、fimH在不同标本来源的大肠埃希菌中的检出率差异无统计学意义(P0.05)。氨苄西林的耐药性与毒力因子aer有关(P0.05),喹诺酮类抗菌药物环丙沙星,左旋氧氟沙星的耐药性与毒力因子iutA有关,头孢唑啉的耐药性与afa/dra有关,庆大霉素的耐药性与aer有关,复方新诺明的耐药性与sfa/foc、iutA、aer有关,头孢他啶的耐药性与sfa/foc、iutA有关,氨苄西林/舒巴坦的耐药性与aer有关(P0.05)。结论毒力因子在不同来源大肠埃希菌中的分布有差异,某些毒力因子与大肠埃希菌耐药性相关,应引起临床重视。     

大肠埃希菌临床分离株的耐药性分析

目的分析大肠埃希菌临床分离株的耐药水平的变化趋势,为临床合理使用抗菌药物,延缓该菌耐药水平的升高提供依据。方法回顾性分析该院2012年1月至2016年11月各类临床标本大肠埃希菌分离株的耐药情况。结果从各类临床标本中分离出大肠埃希菌3 458株,其中产超广谱β-内酰胺酶菌的检出率为57.92%,大肠埃希菌对氟喹诺酮类、青霉素类、头孢菌素类、磺胺类和氨基糖苷类等的耐药率均超过50.00%;对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦和头孢西丁的耐药率低于10.00%,对部分第3、4代头孢菌素的耐药性呈增加趋势。经Wilcoxon检验发现痰液中分离出的大肠埃希菌的耐药率显著高于血液、尿液、分泌物,差异有统计学意义(P0.05)。结论该院大肠埃希菌的耐药水平逐年升高,对此,临床医师应予以足够地重视。     

大肠埃希菌临床感染分布特征及耐药性分析

目的了解川北地区大肠埃希菌的临床分布特征及耐药情况。方法收集临床分离的大肠埃希菌180株,用双纸片表型确证试验检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株,琼脂稀释法进行药物敏感试验,敏感、中介、耐药及ESBLs阳性菌株的判定采用美国临床实验室标准化协会(CSLI)2006年公布的标准。结果在180株大肠埃希菌中,来自尿液、痰液、伤口分泌物和急诊病房标本的比率较高。180株大肠埃希菌对氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星、庆大霉素、复方新诺明、头孢唑林、妥布霉素、氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松的耐药率高达32.9%～92.3%。ESBLs阳性大肠埃希菌对氨苄西林/舒巴坦、头孢唑林、头孢曲松的耐药率显著高于ESBLs阴性菌株,ES-BLs阳性大肠埃希菌除增强了对β-内酰胺类抗菌药物耐药外,还表现出对喹诺酮类药物环丙沙星、左氧氟沙星以及氨基糖苷类抗菌药物庆大霉素更高的耐药率。结论川北地区大肠埃希菌主要分布在急诊病房以及尿液、痰液、伤口分泌物标本中,且对临床常用抗菌药物耐药突出,提示临床医生必须加强对该菌感染治疗的合理用药。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的临床特点及耐药监测

目的监测广州医科大学附属第三医院2014年和2015年大肠埃希菌的分离情况及其对抗菌药物的耐药状况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法常规方法培养分离患者感染的病原菌,并采用全自动细菌鉴定分析仪鉴定到种,药敏试验方法按CLSI规定的标准进行,采用WHONET5.6软件进行数据统计分析。结果 2014年和2015年共分离到大肠埃希菌1 202株,标本分布前5位分别为尿液、血液、痰液、分泌物和组织,本次分离得到的大肠埃希菌对替加环素敏感率为99.9%,对亚胺培南敏感率为99.2%,对阿米卡星敏感率为97.7%,对哌拉西林/他唑巴坦敏感率为97.2%,对呋喃妥因敏感率为85.2%。2014年和2015年分离得到的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌阳性菌共643株,占53.5%。2年分离得到的ESBLs阳性的大肠埃希菌对头孢曲松、氨苄西林、头孢唑啉耐药率达99.0%;而对亚胺培南、替加环素、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、呋喃妥因敏感率达80.0%以上。结论大肠埃希菌对多种抗菌药物的耐药趋势相对稳定,临床微生物实验室应加强对多重耐药菌株的监测,为临床合理使用抗菌药物提供依据。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药机制研究

目的了解贵阳地区医院内检出的大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的耐药性及基因型,为指导临床合理用药提供依据。方法由贵州医科大学附属白云医院ATB系统完成菌株鉴定及药敏试验检测,采用纸片扩散法进行ESBLs表型确证试验,采用碱裂解法提取产ESBLs菌的质粒DNA,采用聚合酶链反应扩增TEM型、SHV型、CTX-M-1组和CTX-M-9组基因。结果产ESBLs大肠埃希菌阳性率为66.7%(279/418);对阿米卡星耐药率为4.3%;对青霉素类,头孢菌素第1、2代药物耐药率均为100.0%;庆大霉素、妥布霉素、喹诺酮类、磺胺类药物耐药率在60.6%~84.9%;对亚胺培南和美罗培南仍保持较高的敏感度。116株产ESBLs大肠埃希菌基因型有113株(97.4%)为CTX-M型,其中CTX-M-9亚型68株(58.6%),CTX-M-1亚型67株(57.8%);TEM型有86株(74.1%);未检出SHV型。结论产ESBLs阳性的大肠埃希菌的耐药率明显高于产ESBLs阴性的大肠埃希菌,且具有多重耐药性。贵州医科大学附属白云医院产ESBLs大肠埃希菌的基因型以CTX-M型为主;碳青霉烯类为最敏感的药物,但本研究中发现亚胺培南耐药菌株,需引起临床重视。     

95株致泌尿道感染大肠埃希菌耐药性及耐药基因表型分析

目的了解广东医科大学附属医院泌尿系感染患者大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶型(ESBLs)基因型特征和临床耐药情况。方法收集2015年1~10月该院住院或门诊患者的泌尿系感染患者尿液标本中分离培养获得的大肠埃希菌菌株,双纸片协同试验确定产ESBLs大肠埃希菌,PCR扩增技术进行基因分型。结果 95株大肠埃希菌以CTX-M-14型46例最多;TEM型32例;SHV型30例;CTX-M-1型26例;OXA-1型7例;OXA-2型4例;OXA-10型3例。ESBLs阴性菌株TEM型仅5例阳性,其余基因型别为阴性。ESBLs阳性株对多种抗菌药物的耐药率(碳青霉烯类除外)明显高于ESBLs阴性株,而CTX-M-14、CTX-M-1、TEM、SHV四种基因型别大肠埃希菌对18种抗菌药物的耐药性之间差异无统计学意义(P0.05)。结论广东医科大学附属医院泌尿系感染患者产ESBLs大肠埃希菌以CTXM型为主,对常用抗菌药物耐药率高于ESBLs阴性菌株。不同基因型别产ESBLs大肠埃希菌对抗菌药物耐药率没有明显差异。     

2014-2015年ESBLs阳性和ESBLs阴性大肠埃希菌临床分布及其耐药性的分析

目的 分析2014-2015年产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和ESBLs阴性大肠埃希菌的临床分布和耐药性.方法 收集2014年1月至2015年12月临床送检的4 721份标本,采用VITEK 2-Compact全自动细菌鉴定及药敏分析仪对大肠埃希菌进行分离和鉴定.结果 4 721份标本中检出大肠埃希菌1 181株,检出率为25.02%,2014、2015年大肠埃希菌的检出率分别为17.38%、19.24%,其中ESBLs阳性大肠埃希菌的检出率分别为44.46%、51.71%,增长7.25%.ESBLs阳性大肠埃希菌主要来源为尿液、痰液、血液、阑尾内容物、脓液和分泌物标本,主要感染科室是普外科、呼吸科、泌尿外科和神经外科等.ESBLs阴性大肠埃希菌的主要来源为尿液、血液、痰液、阑尾内容物、脓液和分泌物标本.2014-2015年大肠埃希菌的耐药率呈明显上升趋势,对阿米卡星、亚胺培南和美罗培南的敏感率较高.结论 大肠埃希菌的检出率2015年有所增加,其耐药性逐渐增强,需结合实际的药物敏感分析情况,选择合适的抗菌药物,降低耐药率,规范临床抗菌药物的使用.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌检出率及耐药性分析

目的了解2007～2009年产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的检出率及对抗菌药物的耐药情况。方法细菌培养分离采用常规方法,细菌鉴定应用VTECK-2全自动细菌鉴定分析仪。ESBLs菌株采用双纸片确认法检测,药敏试验采用纸片扩散(K-B)法,按美国临床实验室标准化协会(CLSI)规定标准进行。结果 3年内从临床感染标本中共分离获得1510株大肠埃希菌,产ESBLs百分率为57.5%;各年度产ESBLs检出率分别为54.4%、55.5%和63.0%。产酶菌对头孢呋辛、头孢曲松、头孢他啶几乎全部耐药,对氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦耐药率分别为40.0%、10.0%和1.0%左右,对环丙沙星和阿米卡星耐药率分别为70.0%以上和20.0%左右,对亚胺培南和美罗培南全部敏感。结论 2007～2009年产ESBLs大肠埃希菌检出率呈上升趋势,产酶菌对含酶抑制剂复合抗菌药物的耐药性也呈上升趋势,这与近几年来头孢类抗菌药物在临床广泛、大量应用有关,应引起临床医生高度重视。对产酶菌引起的重度感染应首选碳青霉烯类抗菌药物治疗。