热休克蛋白在良恶性嗜铬细胞瘤中的表达及其意义

目的通过检测热休克蛋白90（HSP90）在良、恶性嗜铬细胞瘤（PC）组织中的表达情况,探讨HSP90能否成为一项用于评估嗜铬细胞瘤潜在恶性程度的有效分子标记物。方法选取1986年10月～2006年8月在我院泌尿外科行手术治疗、且有完整的临床、病理和随访资料的嗜铬细胞瘤患者存档石蜡标本38例,其中良性嗜铬细胞瘤（BP）21例,恶性嗜铬细胞瘤（MP）17例。采用免疫组化技术Envision二步法,检测良、恶性嗜铬细胞瘤中HSP90的表达情况。恶性组经首次手术确诊后随访28～179月,良性组经首次手术确诊后随访93～264月。结果在MP组中HSP90的阳性表达率为70.59%,明显高于BP组中阳性表达率28.57%,两组热休克蛋白的表达具有显著的统计学差异（P〈0.05）。结论 HSP90有望成为区分嗜铬细胞瘤良恶性的一项指标。     

膀胱嗜铬细胞瘤1例

患者,女,2 8岁。因血压增高伴排尿时头晕、头疼、心悸4年入院,无尿频、尿急、尿痛和肉眼血尿。体检:血压1 85 /1 30mmHg( 1mmHg =0 .1 33kPa) ,脉搏90次/min ,无满月脸、向心性肥胖。触压膀胱区后血压明显升高。余无阳性体征。B超示:膀胱左侧壁可见一6.9cm×4.9cm回声团块,双侧肾上腺未见异常。2 4h尿3 甲氧4 羟基杏仁酸(VMA) 1 9.36mg/2 4h。诊断为膀胱嗜铬细胞瘤。术前准备:口服酚苄明1 0mg ,3次/d ,2周;心得安1 0mg ,3次/d ,1周。血压稳定在1 2 0 /80mmHg左右后,术前2d常规扩容。于全麻下行膀胱嗜铬细胞瘤切除术。术中见肿瘤位于膀胱…     

17-丙烯胺-17-去甲氧格尔德霉素对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤的抑制作用

目的通过观察热休克蛋白90(HSP90)抑制剂17-丙烯胺-17-去甲氧格尔德霉素(17-AAG)对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤生长的影响,探讨17-AAG对大鼠嗜铬细胞瘤肿瘤生长和血管生成的抑制作用。方法用大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12接种于裸鼠皮下,建立移植瘤模型,15d后将荷瘤裸鼠随机分为2组,每组12只,分别为实验组(腹腔注射17-AAG 40mg/kg)和对照组(腹腔注射生理盐水10mL/kg),用药3周。第4周后测量裸鼠移植瘤的体积变化以及裸鼠的生存时间。采用免疫组化方法检测肿瘤组织中HSP90、血管内皮生长因子(VEGF)的表达,采用Western blotting法检测肿瘤组织中HSP90、VEGF的表达。结果第4周时,移植瘤体积的对照组和实验组分别为(5 070.13±630.42)mm3和(2 218.80±336.29)mm3,两组移植瘤体积存在显著性差异(P0.05);平均生存时间对照组和实验组分别为(26.0±5.1)、(42.7±7.5)d,用Kaplan-Meier、Log-Rank方法分析两组的生存函数的差异有统计学意义(P0.05)。免疫组化显示HSP90在对照组中呈高表达(10/12,83.3%),在实验组中呈低表达(4/12,33.3%);VEGF在对照组中呈高表达(11/12,91.7%),在实验组中呈低表达(4/12,33.3%);实验组肿瘤组织的HSP90、VEGF表达明显低于对照组(P0.05)。Western blotting法也显示两种蛋白在实验组上的表达明显低于对照组(P0.01)。结论 17-AAG对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤有明显抑制作用,并可降低肿瘤组织中HSP90和VEGF的表达。     

复发性嗜铬细胞瘤

目的提高复发性嗜铬细胞瘤的诊断水平。方法总结１９７０～１９９６年术后复发的嗜铬细胞瘤１１例，占同期嗜铬细胞瘤的９．３％。经手术及病理证实复发原因是恶性肿瘤的转移及良性肿瘤的多发。结果肾上腺外嗜铬细胞瘤易多发或转移，转移部位多在无嗜铬组织的部位，而多发部位常在肾上腺外。结论复发肿瘤是良性还是恶性应结合诸多因素综合判断。复发嗜铬细胞瘤不都是恶性肿瘤，但因恶性倾向较大应密切观察，定期复查。尤其对原发或复发在肾上腺外的肿瘤更应如此。作者还就复发嗜铬细胞瘤诊断进行讨论。     

特殊类型嗜铬细胞瘤

特殊类型嗜铬细胞瘤表现特殊,患病人群特殊,涉及科室面较广。本文侧重介绍了它们特殊的临床表现以及诊断处理方法。     

膀胱嗜铬细胞瘤1例

患者,女,51岁。因上呼吸道感染伴发热在我院门诊作B超检查时发现“膀胱占位”收入院。入院体检及实验室检查未见异常,心电图示:窦性心律,ST段轻度改变。KUB加IVP未见明显异常。B超:膀胱右壁一占位。于腰麻下行TURBT术,术中见膀胱右侧壁一类圆形占位,直径约1cm,表面光滑,肿块距输尿管开口约2cm。手术切除肿块达深肌层,并切除肿块周围范围1cm黏膜及固有层,止血后留置导尿管,术中术后无特殊。术后病理诊断:膀胱嗜铬细胞瘤。5天后出院电话随访至2006年1月患者无自觉不适、无血尿、尿频尿急,术后未再复查膀胱镜。讨论嗜铬细胞瘤的病因目前…     

复发性嗜铬细胞瘤的诊治体会

我院从１９５８～１９９２年共手术治疗２１６例嗜铬细胞瘤，其中１０例（４。６％）在手术后１～２１年内复发。１０例中５例行肿瘤切除。经１～４年随访情况良好。另５例确诊为恶性嗜铬细胞瘤，其中２例死于广泛转移，１例右盆腔复发合并胸椎转移者用Ｄｉｂｅｎｚｙｌｉｎｅ治疗达９年，另２例正接受＾１３１Ｉ－ＭＩＢＧ治疗。为预防或降低复发率，术中应避免肿瘤穿刺活检和肿瘤包膜破裂，应尽早结扎肿瘤周围静脉，完全切除肿瘤。     

嗜铬细胞瘤病人的麻醉处理

笔工作15年间，遇到嗜铬细胞瘤病人6例，现总结报道如下：     

联合信号转导和转录激活因子3与热休克蛋白90鉴别良恶性嗜铬细胞瘤的探讨

目的:通过检测热休克蛋白90(HSP90)与信号转导和转录激活因子3(STAT3)在良恶性肾上腺嗜铬细胞瘤中的表达情况,探讨HSP90和STAT3在早期诊断恶性嗜铬细胞瘤中的价值。方法:采用免疫组织化学技术检测94例良恶性肾上腺嗜铬细胞瘤组织标本中HSP90和STAT3的表达差异,同时用蛋白免疫印迹法检测24例手术标本中HSP90和STAT3的表达差异,并分析两者联合诊断恶性嗜铬细胞瘤的效用。结果:HSP90和STAT3在恶性嗜铬细胞瘤中阳性表达率分别为66.67%和83.33%,在良性嗜铬细胞瘤中的阳性表达率分别为22.37%和26.32%,在正常肾上腺髓质组织中无表达,恶性嗜铬细胞瘤组与良性嗜铬细胞瘤组之间HSP90和STAT3的表达均存在显著性差异(P=0.001,P0.001);Western Blot分析结果显示HSP90和STAT3在恶性嗜铬细胞瘤中的蛋白表达水平远高于良性嗜铬细胞瘤。联合HSP90和STAT3诊断恶性嗜铬细胞瘤时阳性预测值为0.70。结论:HSP90和STAT3在恶性嗜铬细胞瘤中的表达高于良性嗜铬细胞瘤组织,且联合HSP90和STAT3可有效诊断恶性嗜铬细胞瘤。     

Localization of 90-kDa heat shock protein in the kidney

Antibody against 90-kDa heat shock protein (HSP 90) was produced in rabbits. The obtained antibody was highly specific to the antigen. Using the antibody, the intrarenal distribution of HSP 90 was studied in frozen sections of normal rat kidneys by fluorescent and enzymic immunohistochemistry. HSP 90 was predominantly present in the region from the distal convoluted tubule to the medullary collecting duct at a high intensity, and in glomerular podocytes and Bowman epithelial cells at a much lower intensity. Other segments of the nephron were stained little, even at a lower dilution of the antibody. Blood vessels and interstitial tissues were not stained. HSP 90 was localized in the cytoplasm and not in the nucleus. Moreover, immunohistochemical staining of HSP 90 showed greater intensity at the luminal side of the cells. These observations suggest that HSP 90 might play important roles in the kidney.     

后腹腔镜下肾上腺嗜铬细胞瘤切除术37例疗效观察

目的探讨后腹腔镜下肾上腺嗜铬细胞瘤切除术的安全性及治疗效果。方法行后腹腔镜肾上腺嗜铬细胞瘤切除术37例病例资料。肿瘤位于左侧14例,右侧22例,双侧1例。肿瘤直径0.8-8.9cm,平均4.1±2.2cm。4例（13.2％）血压正常,33例（86.8％）血压升高,以头晕、头痛、心悸、恶心、呕吐、腹痛等为主要临床表现,典型三征症患者5例。术前将红细胞比容控制在45％以下,心率90次/min,血压在正常范围后,连续监测3d血压无明显波动后在全身麻醉下行后腹腔镜下肾上腺嗜铬细胞瘤切除术。结果36例手术成功,1例中转开放手术。手术时间143±16min,术中估计出血量96±34ml。术后住院时间5±2d。术中术后未发生重大并发症,肿瘤局部无复发。结论后腹腔镜下肾上腺嗜铬细胞瘤手术具有微创、出血少、恢复快等优点,充分的术前准备、正确的术中操作是取得手术成功、减少术后并发症的关键。     

嗜铬细胞瘤患者围手术期处理的改进

目的：探讨提高嗜铬细胞瘤患者围手术期安全性的措施。方法：对15例嗜铬细胞瘤患者、术前采用选择性α1受体阻滞剂多沙唑嗪控释片(可多华)控制高血压；11例患者采用3D DCEMRA进行肿瘤定位；术中均采用联合高容量血液稀释(AHH)和术中患者自体血回输纠正血容量。结果：除1例持续性高血压患者需联合钙离子拮抗剂和ACEI药物降压外．其余患者血压控制均为满意；根据3D DCEMRA定位选择手术径路者均顺利完成手术；AHH联合术中自体血回输使14例患者避免了异体输血。结论：本文围手术期处理改进．可多华可明显减少药物的不良反应；采用3D DCEMRA进行肿瘤定位，可增加手术安全性；AHH联合术中自体血回输可减少医疗成本和异体输血，以及由此而引起的并发症。     

HSP90的生物学特性研究进展

热休克蛋白(Heat Shock Protein,HSP)是1962年由遗传学家Ritossa发现的,这是一类在生物进化过程中高度保守并广泛存在于原核及真核生物中的蛋白质。热休克蛋白是生物受到环境中的物理、化学、生物、精神等刺激时发生应激反应而合成的蛋白质,能够维持信号转导蛋白的功能,在细胞突变过程中是一个重要的缓冲因子,调控着多种细胞生理、生化变化过程中重要蛋白的空间结构和突变。     

热休克蛋白抑制剂格尔德霉素衍生物在机械通气肺损伤中的作用研究

目的探讨热休克蛋白（heat shock protein，HSP）90抑制剂格尔德霉素衍生物（17-dimethvlaminoethvlamino-17-demethoxygeldanamycin，17-DMAG）对机械通气肺损伤的保护作用及其作用机制。方法28只7周-9周的清洁级ICR雄性小鼠，按完全随机分组方法随机分为4组（每组7只）：对照组（CON组）、机械通气组（VEN组）、17-DMAG组和17-DMAG＋机械通气组（17-DMAG＋VEN组）。机械通气4h后或CON组与17-DMAG组麻醉插管后检测支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中蛋白浓度、细胞数量变化以及肺组织湿／干重比（wet-to-dry weight ratio，W／D），观察肺组织病理改变，并用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测肺组织白细胞介素（interleukin,IL）-1β、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）以及高迁移率族蛋白1（high mobility groupbox1，HMGB1）的含量。结果BALF中蛋白浓度和细胞数量：VEN组分别为（0．29±0．05）g／L和（2．84±0．55）个／ml，与CON组比较明显升高（P〈0．01）；17-DMAG＋VEN组分别为（0．22±0．03）g／L和（1．99±0．44）个／ml，与VEN组比较显著下降（P〈0．01）。VEN组肺组织W／D（5．14±0．19）与CON组（4．65±0．15）比较，差异有统计学意义（P〈0．01），17-DMAG＋VEN组肺组织W／D（4．79±0．14）与VEN组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。17-DMAG预处理能显著减轻通气诱导的肺组织病理损伤。机械通气4h可诱导肺组织中IL-1β、TNF-α、HMGB1蛋白表达显著升高，17-DMAG预处理可显著减轻机械通气诱导的HMGB1表达：17-DMAG＋VEN组（15．4±3．0）ms／g与VEN组（18．9±2．5）mg／s比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论17-DMAG可能通过抑制炎症因子HMGB1的蛋白表达，减轻肺水肿，而在机械通气肺损伤中发挥保护作用。     

肾上腺外嗜铬细胞瘤的诊断与治疗

目的 探讨肾上腺外嗜铬细胞瘤(EAP)的诊断和治疗经验.方法 回顾性分析2003年4月至2010年4月收治的37例EAP患者的资料.临床表现为高血压31例,典型的头痛、心悸、多汗"三联征"12例.血浆游离变肾上腺素类物质(MNs)和24 h尿儿茶酚胺(CA)定性诊断的阳性率分别为96.8%(30/31)和86.5%(32/37).超声、CT、MRI和131I-间碘苄胍扫描(131I-MIBG)定位诊断的准确率分别为91.7%(33/36)、97.0%(32/33)、90.0%(9/10)和82.6%(19/23).35例行手术治疗,2例行放射治疗.结果 单发肿瘤32例,其中腹主动脉旁14例、膀胱内7例、下腔静脉旁4例、肾门附近4例、髂血管旁2例、肾上极1例;多发肿瘤5例.完整切除肿瘤30例,行肿瘤切除+右肾切除3例,行膀胱部分切除2例.病理诊断良性24例,恶性11例.术前31例高血压患者中,术后23例血压恢复正常,6例血压降低但仍高于正常,2例血压无明显变化.术后34例随访5个月～7年,肿瘤复发5例,死亡5例.结论 EAP少见,血浆游离MNs和24 h尿CA是重要的定性诊断方法.定位诊断较困难,超声、CT、MRI和131I-MIBG是重要的定位诊断方法.经腹途径切除肿瘤是首选的治疗方法,充分术前准备,术中避免过度挤压肿瘤.对于恶性者术后可辅以131I-MIBG治疗.

Abstract：

Objective To investigate the diagnosis and treatment of extra-adrenal pheochromocytoma(EAP). Methods The clinicsl data of 37 cases of EAP from April 2003 to April 2010 were retrospectively analyzed.Hypertension was observed in 31 cases.The typical triad of headache,palpitation and sweating was observed in 12 cases.The positive rate of plasma-free MNs and 24-hour urinary CA in diagnosing EAP was 96.8%(30/31) and 86.5% (32/37) respectively.The main localization diagnosis included ultrasonography,CT,MRI and 131I-MIBG,with positive rates of 91.7% (33/36),97.0%(32/33),90%(9/10) and 82.6%(19/23) respectively.Two patients underwent radiotherapy, and the remaining 35 cases underwent surgical treatment. Results Among the total of 37 cases,32 cases were single tumor,and five were multiple tumors.The anatomic locations of the single tumors were as follows: 14 wre adjacent to the abdominal aorta,seven in the bladder,four adjacent to the inferior vena cava,four adjacent to the renal hilum,two adjacent to the lilac blood vessel and one in the upper pole of the right kidney.Thirty cases underwent complete tumor resection,three cases underwent tumor resection plus right nephrectomy and two cases underwent partial cystectomy.Twenty-four cases were diagnosed benign and 11 cases were diagnosed malignant by pathological examination.Among 31 cases with preoperative hypertension,postoperative blood pressure returned to normal in 23 patients,blood pressure descended mildly in six cases and blood pressure was still hypertensive in two cases.Thirty-four patients were followed up for five months to seven years,during which five cases had tumor recurrence or metastases and five cases died postoperatively. Conclusions EAP is a rare neuroendocrine tumor and its accurate diagnosis is rather difficult.Plasma-free MNs and 24-hour urinary CA are important qualitative examinations.Ultrasonography,CT,MRI and 131I-MIBG scintigraphy are important methods for the localization of the tumor.Transperitoneal resection of the tumor is the preferred choice of management and adequate perioperative preparation is the key to a successful operation,including bringing down blood pressure,expanding blood volume and correcting arrhythmia.Patients with malignant EAP may be treated with 131I-MIBG after surgical therapy.     

17-DMAG体外对结肠癌HT-29细胞增生和凋亡的影响

目的 观察17-二甲胺乙胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-dimethylaminoethylamino-17-demethoxygeldanamyein,17-DMAG)对人结肠癌HT-29细胞增生抑制及诱导其凋亡的作用.方法 用CCK-8检测17-DMAG对结肠癌HT-29细胞增生的影响;DAPI染色在倒置荧光显微镜下观察17-DMAG作用于HT-29细胞24 h后细胞核的形态;AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞检测细胞凋亡率;免疫印迹实验分析Caspase-3蛋白表达水平变化.结果 17-DMAG呈时间-剂量-依赖性抑制HT-29细胞增生.0.1μmol/L、0.25μmol/L 、0.5μmol/L、1.0μmol/L、2.5μmol/L和0.5μmol/L作用于HT-29细胞24 h后,细胞增生抑制率分别为(14.36±0.95)％、(22.17±1.15)％、(28.45±1.16)％、(35.04±1.58)％、(46.85±2.44)％和(57.19±2.06)％;作用48h后,细胞增生抑制率分别为(20.80±1.17)％、(27.55±0.65)％、(33.33±1.23)％、(46.20±4.76)％、(55.45±4.47)％和(61.75±2.72)％;作用72h,细胞增生抑制率分别为(29.62±2.27)％、(39.19±1.74)％、(44.29±2.00)％、(50.66±2.17)％、(58.84±3.18)％和(70.74±2.65)％.DAPI染色倒置荧光显微镜观察0.25μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L与2.5μmol/L的17-DMAG作用HT-29细胞24h,均可见到细胞凋亡的改变.AnnexinV-FITC双染法检测结果显示,正常对照组HT-29细胞24h的自然总凋亡率(早期+晚期)为(2.72±0.57)％,0.25μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L和2.5μmol/L 17-DMAG干预24 h后细胞总凋亡率分别为(5.38±0.46)％、(6.88±0.52)％、(10.44±0.32)％与(17.87±4.66)％,不同浓度组的细胞凋亡率比较差异有统计学意义(P＜0.05).17-DMAG药物作用HT-29细胞24h,随着药物剂量的增加,cleaved Caspase-3的表达有增加趋势.结论 17-DMAG体外呈时间-剂量依赖性抑制HT-29细胞增生,诱导其通过Caspase-3途径凋亡.     

嗜铬细胞瘤手术切口的选择（附１０３例报告）

目的：提高嗜铬细胞瘤手术治疗水平,方法：回顾性分析１０３例嗜铬细胞瘤患者手术切口的选择方法及选择原则。结果：４９例行１１肋间切口,１８例行１０肋间切口,１５例行腹剖正中切口,９例行胸腹联合切口,5例行腹部肋下切口,３例行下腹正中切口,３例后外侧切口,１例行腹腔镜手术,结论：（１）大部分肾上腺嗜铬细胞瘤宜用１１肋间切口１０肋间切口,(2) 大嗜铬细胞瘤或与大血管关系紧密的嗜铬细胞宜用腹剖正中切口,甚至胸腹联合切口,（３）多发性嗜铬细胞瘤肾上腺外嗜铬细胞瘤以腹部正中切口较为适用。