ras、p53基因突变和蛋白表达与尿路上皮肿瘤预后的关系

目的　研究ｒａｓ、ｐ５３ 基因突变和蛋白表达及ＤＮＡ 倍体异常与尿路上皮肿瘤预后关系。　方法　应用ＰＣＲＳＳＣＰ和流式免疫荧光法检测５２ 例尿路上皮肿瘤Ｋｒａｓ 和ｐ５３ 基因突变及蛋白表达和ＤＮＡ 含量变化。　结果　Ｋｒａｓ、ｐ５３ 基因突变分别为５ 例（９ ．６ ％ ） 和２２ 例（４２ ．３ ％ ） ;ｒａｓ ｐ２１ 、ｐ５３ 蛋白阳性表达分别为３６ 例（６９ ．２ ％ ） 和３３ 例（６３ ．５ ％ ） ;异倍体和二倍体肿瘤分别为２２ 例（４２ ．３ ％ ） 和３０ 例（５７ ．７ ％ ） ;ＤＮＡ 倍体异常、ｐ５３ 基因突变及ｒａｓ ｐ２１ 和ｐ５３ 蛋白表达与肿瘤病理分级、分期及预后密切相关（ Ｐ＜ ０ ．０１） ;异倍体肿瘤其ｐ５３ 基因突变、ｒａｓ ｐ２１ 和ｐ５３ 蛋白表达率均明显高于二倍体肿瘤（ Ｐ＜ ０ ．０１） 。　结论　ＤＮＡ 倍体异常、ｐ５３ 基因突变及ｒａｓ ｐ２１ 和ｐ５３ 蛋白表达对尿路上皮肿瘤预后判断有重要意义。     

结直肠癌p21ras的计量分析与预后

应用ｒａｓ癌基因产物ｐ２１￣ｒａｓ免疫组化染色的图象分析技术、流式细胞分析技术分别测定８３例结直肠癌的ｐ２１￣ｒａｓ平均光密度值（ｐ２１Ｄ）和ＤＮＡ指数（ＤＩ），结合临床随访和病理学资料探讨其预后价值。结果提示：结直肠癌的ｐ２１Ｄ明显高于正常粘膜（Ｐ＜０．００１），术后生存≥５年组的ｐ２１Ｄ明显低于＜５年组（Ｐ＜０．００１）。高ｐ２１Ｄ组患者预后较低ｐ２１Ｄ组差。二倍体肿瘤及低ｐ２１Ｄ异倍体肿瘤患者预后较高异倍体肿瘤患者明显好。Ｄｕｋｅｓ′ｃ期的ｐ２１Ｄ高于Ｂ和Ａ期。表明ｒａｓ癌基因表达与结直肠癌病程进展及转归有关，测定结直肠癌的ｐ２１￣ｒａｓ的表达和ＤＮＡ倍体将有助于预后判断。     

胃肠道平滑肌肿瘤突变型p53基因产物的表达及其与临床病理的关系

应用细胞免疫荧光染色技术及流式细胞术，对５５例胃肠道平滑肌肿瘤石蜡组织块的ｐ５３表达进行定量分析。结果表明，正常胃肠道平滑肌组织ｐ５３表达均为阴性。１４例平滑肌瘤，仅有２例出现过度表达（１４％）；潜在恶性平滑肌肿瘤１２例，多数为过度表达（７５％）：平滑肌肉瘤２９例中，则有２６例（９０％）出现过度表达（Ｐ＜０．００５）。从平滑肌瘤、潜在恶性平滑肌肿瘤到平滑肌肉瘤Ⅰ、Ⅱ级，ｎ５３表达量显著递增（Ｐ＜０．００５）。ｐ５３表达量随肿瘤细胞分裂相、异形性、密度的增高也有明显增高（Ｐ＜０．００５）。ｐ５３低表达者５年生存率为８５％，而过度表达者为４８．５％。提示，胃肠道平滑肌肿瘤一旦出现ｐ５３过度表达应考虑为恶性；ｐ５３表达可能和平滑肌瘤向平滑肌肉瘤的转化密切相关；ｐ５３表达可作为判断病人预后的一项客观指标。     

大肠癌ras p21表达和DNA含量定量分析

应用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术，对４６例大肠肿瘤细胞ｒａｓ ｐ２１表达和ＤＮＡ含量进行了宣分析。结果：大肠部的ｒａｓ ｐ２１表达阳性率为６５．７％，ＤＮＡ异倍体率为７４．３％，大肠部细胞ｒａｓ ｐ２１表达明显高于腺癌和正常粘膜；ＤＮＡ倍体和细胞增殖指数值与ｒａｓ ｐ２１表达量密切相关。本实验结果提示：测定大肠癌的ｒａｓ ｐ２１表达和ＤＮＡ含量将有助于其预后判断。     

胰腺肿瘤DNA含量检测及生存分析

作者对本院１９７９～１９９１年手术和病理证实的３２例胰腺癌、１０例邻近癌的胰腺组织、８例胰腺炎以及１６例胰岛细胞瘤石蜡包埋组织，用流式细胞仪（ＦＣＭ）检测其细胞核ＤＮＡ含量。结果发现：胰腺癌的异倍体率及ＤＮＡ指数明显高于胰腺非肿瘤病变者（Ｐ＜０．０１）；ＤＮＡ异倍体胰腺癌的Ｓ期比例亦明显高于二倍体胰腺癌（Ｐ＜０．０５）；胰腺癌细胞核ＤＮＡ含量的变化是一个相对独立的反映胰腺癌生物学行为的指标。ＤＮＡ二倍体胰腺癌患者的手术可切除率明显高于异倍体肿瘤患者（Ｐ＜０．０５）。采用Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ生存分析法显示，ＤＮＡ异倍体胰腺癌较二倍体者生存时间短，预后差（Ｐ＜０．０５％）。     

流式细胞术和银染核仁区在乳癌诊治中的应用

作者对４３例乳腺肿物进行ＤＮＡ流式细胞术和ＡｇＮＯＲ检测。大多数ＤＮＡ异倍体为恶性病变（２３／２４），良性病变的ＳＰＦ和ＰＩ与二倍体癌相近，但低于异倍体癌（Ｐ＞０．０５）；二倍体癌ＳＰＦ和ＰＩ低于异倍体癌（Ｐ＜０．００１）。异倍体多见于腋淋巴结转移和年轻患者（Ｐ＜０．０５）。半数左右乳腺癌的ｍＡｇＮＯＲ高于良性病变的最高值。本研究表明ＤＮＡＦＣＭ和ＡｇＮＯＲ检测可作为良恶性病变鉴别的参考，异倍体癌临床进程较快，ＤＮＡ异倍体和高Ｓ１／Ｓ２，ｍＡｇＮＯＲ肿瘤有较强的浸润性，但对化疗也较敏感，应考虑行辅助化疗。     

P21、P185、P53蛋白表达及ras、P53基因突变与膀胱癌的关系

为探讨癌基因及抑癌基因改变与膀胱癌生物学行为的关系，采用免疫组织化学方法及分子生物学技术，检测了８２例膀胱移行细胞癌Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达及３８例ｒａｓ、Ｐ５３基因突变。结果表明：Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达阳性分别为５１例（６２．２％）、４８例（５８．５％）、２６例（３１．７％）。Ｐ２１、Ｐ５３蛋白表达阳性率与膀胱移行细胞癌病理分级及临床分期呈正相关（Ｐ＜０．０１）；Ｐ１８５蛋白阳性率与膀胱移行细胞癌分级、分期呈负相关（Ｐ＜０．０５）。膀胱移行细胞癌组织中１５例（３９．５％）有Ｈａｒａｓ癌基因第１２位密码子突变；１２例（３１．６％）有Ｐ５３抑癌基因突变，其中全部有第２８０位密码子ＧＣ突变；３例合并有２４８密码子突变；１例有２４９密码子点突变。Ｈａｒａｓ癌基因及Ｐ５３抑癌基因点突变与膀胱癌病理分级和临床分期呈显著正相关（Ｐ＜０．０５）；与预后显著相关（Ｐ＜０．０５）；且死亡率高于点突变阴性者。６例既有Ｈａｒａｓ基因突变，又有Ｐ５３基因突变的病例中４例死亡。     

rasP21和P53在膀胱癌表达的临床意义

采用免疫组化方法（ＬＳＡＢ法）对５８例膀胱癌和６例非癌膀胱粘膜标本进行ｒａｓＰ２１及ｐ５３蛋白产物检测。结果：５８例膀胱癌标本中３７例Ｐ２１检测阳性（６３．８％），３３例Ｐ５３检测阳性（５６．９％），对照组６例膀胱粘膜均未见阳性着色。Ｐ２１阳性率在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级肿瘤中分别为２８．６％、４６．７％和７７．８％，在Ｔｉｓ～Ｔ１期和Ｔ２～Ｔ４期肿瘤中分别为４５．０％和７３．７％。Ｐ５３阳性率在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级肿瘤中分别为１４．３％、４０．０％和７２．２％，在Ｔｉｓ～Ｔ１期和Ｔ２～Ｔ４期肿瘤中分别为３０．０％和７１．１％，显示Ｐ２１和Ｐ５３表达阳性率均随着膀胱癌病理分级、临床分期上升而升高，表达强度也随之增强。Ｐ２１和Ｐ５３阳性者的复发率和死亡率均明显高于阴性表达者。认为Ｐ２１和Ｐ５３可作为膀胱癌的生物学瘤标。     

睾丸肿瘤DNA倍体及HLA－I抗原检测的预后意义

运用流式细胞仪（ＦＣＭ）和免疫组化技术对５５例睾丸肿瘤ＤＮＡ倍体和ＨＬＡ－Ｉ抗原表达进行分析。３例二倍体肿瘤均存活，异倍体肿瘤中非三倍体肿瘤３４例，死亡７例，平均存活时间４１．２个月，三倍体肿瘤１６例，死亡１０例，平均存活时间１５．５个月（Ｐ＜０．０５），ＨＬＡＩ－抗原阳性者２７例，死亡４例，平均存活４０．０个月，阴性者２５例，死亡１３例，平均存活１２．７个月（Ｐ＜０．０５），综合二者进行评估时，ＨＬＡ－Ｉ抗原阴性的三倍体肿瘤预后最差（Ｐ＝０．００１）。提示多参数综合分析在肿瘤预后预测中有十分重要的实用价值。     

骨纤维结构不良中癌基因蛋白的表达及意义

了解骨纤维结构不良中癌基因蛋白的表达情况。方法应用免疫组化法对３７例骨纤维结构不良行多种癌基因蛋白检测。结果３７例实验组中ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ蛋白均有高表达（Ｐ＜０．０１）。ｒａｓｐ２１蛋白在该病恶变组中有高表达（Ｐ＜０．０５）。结论ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ蛋白过度表达在骨纤维结构不良的发生发展中起重要作用，ｒａｓｐ２１蛋白过度表达在该病的恶性变过程中起作用。本研究结果对骨纤维结构不良的诊断和治疗具有广阔的应用前景。     

影响胰腺癌预后的因素分析

目的　探讨影响胰腺癌预后的决定因素。 方法　应用流式细胞仪检测胰腺癌ＤＮＡ倍体６２ 例,采用免疫组织化学法检测ｐ２１ 、ｐ５３ 在胰腺癌中的表达,应用Ｃｏｘ 比例风险模型对其预后因素进行分析。 结果　本组共有６２ 例经手术和病理学检查证实的胰腺癌病人,其中胰腺癌患者二倍体２５ 例,四倍体１１ 例,预后较好,平均生存期分别为２８ 个月和３０ 个月,非四倍体异倍体者２６ 例平均生存期仅为５ 个月。胰腺癌组织ｐ２１ 阳性率为８９％ ,ｐ５３ 阳性率为５１％ 。二者表达均与临床分期密切相关;单因素分析发现,ＤＮＡ倍体、后腹膜浸润、手术方式、肝转移、临床分期、ｐ２１ 表达、十二指肠浸润等与预后密切相关,多因素分析中仅ＤＮＡ倍体和临床分期是独立预后决定因素。 结论　ＤＮＡ倍体和临床分期是胰腺癌独立预后的决定因素     

膀胱癌细胞P53基因蛋白表达的流式分析

采用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术，对４２例膀胱移行细胞癌细胞Ｐ５３蛋白表达和ＤＮＡ倍体进行定量分析，结果表明，Ｐ５３表达与肿瘤分级密切相关。结合Ｐ５３表达和ＤＮＡ倍体对预后作了综合分析，结果显示，Ｐ５３阳性异倍体肿瘤患者的生存率最低，Ｐ５３阳性肿瘤患者的生存率次之，而二倍体肿瘤患者的生存率最高。在复发的肿瘤中，Ｐ５３阳性表达（８１．３％）显著高于Ｐ５３阴性表达（１８．７％）。提示：测定膀胱肿瘤Ｐ５３表达，对预后可作出客观评价。     

食管鳞癌DNA含量与临床病理及预后的关系

应用自动化图像分析仪对５０例食管鳞癌进行细胞ＤＮＡ定量分析，结合临床资料，发现肿瘤分化越差、外侵越严重，ＤＮＡ含量越高。淋巴结转移组ＤＮＡ含量高于非转移组。二倍体或近二倍体组１、３、５年生存率明显高于异倍体组（Ｐ＜０．０１）。表明ＤＮＡ含量的测定可从核酸代谢的分子水平揭示食管癌恶性生物学行为，同时可作为估计手术预后的客观定量指标。     

图像细胞分析与癌基因检测辅助诊断直肠癌

目的提高直肠癌术前活检的诊断率。方法对１７例术前活检未证实为直肠癌的患者的活检标本（实验组）和１５例正常肠粘膜活检标本（对照组）的石蜡包埋块进行常规病理检查、细胞图像分析（ＩＣＭ）、ｐ５３与ｒａｓ癌基因产物检测。结果实验组ＩＣＭ结果５３％为异倍体,癌基因检测结果ｐ５３与ｒａｓ基因表达阳性率分别为７１％、４７％。对照组的ＩＣＭ与癌基因检测结果均阴性。实验组中,常规病理检查１１例为不典型增生,５例为慢性炎症。常规病理检查为不典型增生的病例中经ＩＣＭ、癌基因检测８例为异倍体,ｐ５３与ｒａｓ基因表达阳性分别为１１和７例;慢性炎症病例中则既无异倍体,又无ｐ５３与ｒａｓ基因表达,二者之间,异倍体和两种基因表达阳性率差异均有显著意义（Ｐ＜００５）。ＩＣＭ与癌基因检测结果有较好的一致性。结论ＩＣＭ与癌基因检测,可以作为常规病理的补充,提高直肠良恶性病变的鉴别力。     

胆汁中突变基因与大肠癌肝转移关系的研究

目的 探讨胆汁中的点突变基因对诊断大肠癌肝转移的价值。方法 采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及ＤＮＡ测序技术,检测大肠癌患者原发灶、肝转移灶、胆汁中相同突变位点的ｐ５３、ｋ－ｒａｓ基因。结果 在５０例大肠癌中,检出有ｐ５３、ｋ－ｒａｓ基因突变３８例（７６．０％）。其中有ｐ５３基因突变２８例（５６．０％）,ｋ－ｒａｓ基因突变１６例（３２．０％）。在１２例出现肝转移者的胆汁中检出有与原发灶相同的点突变基因者１０例     

肾细胞癌bc1－2、P53、ER、PR的表达及临床意义

为了更好地选择估价肾细胞癌预后的指标，应用免疫组化技术检测５４例肾细胞癌中ｂｃ１－２、Ｐ５３蛋白及雌、孕激素受体的表达。ｂｃ１－２阳性３８例（７０．４％），Ⅰ、Ⅱ级肿瘤阳性３３例，Ⅲ、Ⅳ级肿瘤阳性５例（Ｐ＜０．０５）；Ｐ５３蛋白阳性１０例（１８．３％），对照组无一例阳性（Ｐ＜０．０５）；ＥＲ、ＰＲ阳性分别为２９例（５７．７％）、３９例（７３．７％）。ｂｃ１－２蛋白表达与ＥＲ、ＰＲ呈正相关（Ｐ＜０．０１，ｒ＝０．４５２），与Ｐ５３蛋白表达呈负相关（Ｐ＜０．０１，ｒ＝－０．４２１）。结果提示：ｂｃ１－２蛋白的表达有助于肾细胞癌预后的评估     

胃癌组织中p16,p53蛋白的表达及其临床意义

为探讨ｐ１６，ｐ５３蛋白在胃癌发生、发展中的作用及其临床意义。应用免疫组化方法，对６０例胃癌、１８例胃良性疾病及１５例胃正常组织中ｐ１６，ｐ５３蛋白的表达情况进行检测。结果显示：胃癌组织中ｐ１６蛋白的阳性率（２５％）低于胃良性疾病（６１．１１％）及胃正常组织中的阳性率（６３．３３％），有显著性差异（Ｐ＜０．０５）；而胃癌组织中ｐ５３蛋白的阳性率（６１．６７％）高于胃良性疾病（１１．１１％）及胃正常组织（０），差异非常显著（Ｐ＜０．００１）。ｐ１６，ｐ５３蛋白的表达与胃癌的组织学分化、临床分期及淋巴结转移密切相关，与患者年龄、性别、肿瘤位置无关；ｐ１６蛋白表达还与肿瘤大小有关。研究结果表明，ｐ１６蛋白的失表达发生在胃癌发生、发展的晚期阶段，ｐ１６，ｐ５３蛋白可作为判别胃的良、恶性疾病及胃癌患者预后的一个指标。     

结直肠癌核仁组成区嗜银蛋白的预后价值

本作者采用银染技术和流式细胞分析技术分别对８３例结直肠癌细胞的核仁组成区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）和ＤＮＡ含量进行测定，并结合临床随访和病理学资料评估其预后价值及相互关系。结果显示：结直肠癌组ＡｇＮＯＲ平均计数（９．７９±３．６７０）明显高于正常结肠粘膜组（２．９３７±０．８１２）。不同组织学分级的ＡｇＮＯＲ有显著性差异（ｐ＝０．０２３），分化好的肿瘤ＡｇＮＯＲ计数低。术后生存≥５年组的ＡｇＮＯＲ数（８．１７７±３．２９６）低于＜５年组（１１．６２２±３．１２３），二组间差异显著（Ｐ＜０．００１）。高ＡｇＮＯＲ（≥１０）组患者的术后生存率亦明显低于ＡｇＮＯＲ＜１０组的患者。结合ＤＮＡ倍体进行分析，ＡｇＮＯＲ＜１０的二倍体肿瘤患者的预后最好，而ＡｇＮＯＲ≥１０的异倍体肿瘤的预后最差，提示ＡｇＮＯＲ是一项预后参考指标，与ＤＮＡ从不同水平影响结直肠癌的恶性潜能，联合检测ＡｇＮＯＲ和ＤＮＡ可较好地反映结直肠癌患者的预后。     

癌基基ras产物P21在胰腺癌,胰腺导管上皮不典型增生及胰腺…

采用免疫组织化学方法对５３例胰腺癌，５例癌旁胰腺导管上皮不典型增生，１１例胰腺内分中瘤进行癌基因产物Ｐ２１表达的研究。结果发现，Ｐ２１阳性表达率分别为８８．７％，１００％和９％，胰腺癌中Ｐ２１弥漫阳性表达者较局限或片状阳性表达及阴性表达者预后好（Ｐ〈０．０１），结果提示ｒａｓ癌基因突变性胰腺癌早期发生起重要作用，Ｐ２１表达与否及表达类型可作为胰腺癌预后的指标。     

p21 ras和nm23-H1表达与胃癌淋巴结转移的关系

为探讨ｐ２１ｒａｓ和ｎｍ２３－Ｈ１表达与胃癌淋巴结转移的关系,采用ＬＳＡＢ法观察了８０例胃癌患者的ｐ２１ｒａｓ和ｎｍ２３Ｈ１的表达,并分析其与淋巴结转移的关系,结果：有淋巴结转移（ＬＮＭ）组ｐ２１ｒａｓ表达阳性率（６２．５％）明显高于无ＬＮＭ组（４２．５％）但ｎｍ２３－Ｈ１表达阳性率（２７．５％）则明显低于无ＬＮＭ组（４７．５％）ＬＮＭ数为１－３枚和ｐ２１ｒａｓ表达阳性率（３３．３％）明显低于４－