细菌脂多糖诱导活性小胶质细胞对少突胶质前体毒性作用的体内研究

目的 探讨细菌脂多糖(LPS)诱导活性小胶质细胞(MG)激活对少突胶质前体(preOLs)毒性作用.方法 2日龄SD大鼠随机分为假手术组和脑室周围白质软化(PVL)模型组,每组24只.脑立体定位仪下对PVL组新生大鼠经脑室注人LPS 1μg/g,建立感染型PVL新生大鼠动物模型;对假手术组新生大鼠经脑室注入相同体积的无菌PBS.于造模后第5天处死取脑,分别进行光镜下脑白质病理评估、硝酸还原法检测NO含量、还原比色法检测O-2含量、免疫组织化学染色检测过氧亚硝酸盐(ONOO-)含量以及OL前体的存活率.结果 与假手术组相比,LPS诱导可引起新生大鼠的脑白质严重损伤(Z=7.498,P=0.000),脑内O-2含量(42.822±3.600比187.717±8.566,t=26.907,P=0.000)明显增加,NO含量[(1.097±0.079)μmol/gprot比(2.878±0.183)μmol/gprot,t=34.728,P=0.000]、ONOO-含量[(0.000±0.000)%比(11.000±1.732)%]均显著增加,脑白质内O4阳性OL前体[(11.513±0.775)%比(3.353±0.442)%,t=16.013,P=0.000]大量减少.结论 从体内确认LPs诱导OL前体的死亡通路,是通过LPS诱导MG激活,促使生成大量NO、O-2和ONOO-,作用于OL前体,导致OL前体的死亡.     

百日咳菌液诱发大鼠脑水肿时脑组织中兴奋性氨基酸时相的变化

目的　了解百日咳菌液诱发大鼠脑水肿时脑组织中兴奋性氨基酸时相的变化及与感染性脑水肿的关系。方法　SD大鼠 81只 ,随机分成空白对照组 (C组 ) ,生理盐水对照组 (NS组 ) ,百日咳菌液组 (PB组 )。百日咳菌液诱发大鼠感染性脑水肿后 ,应用高效液相色谱法检测大鼠脑组织匀浆中兴奋性氨基酸含量。结果　C组和NS各组脑组织匀浆中谷氨酸 (Glu)、门冬氨酸 (Asp)含量较稳定 ,各组差异无显著意义 (P >0 0 5 )。PB组注射菌液后 3 0min ,大鼠脑组织中Glu[( 11 0 3± 2 4 4)μmol/g脑组织 ]和Asp含量 [( 1 5 7± 0 3 7) μmol/g脑组织 ]明显增加 ,与C组 [Glu ( 7 12± 0 80 ) μmol/g脑组织 ,Asp ( 0 99± 0 15 ) μmol/g脑组织 ]、NS组及PB 5、60、12 0和 2 4 0min组比较 ,差异有非常显著意义 (P均 <0 0 1)。结论　兴奋性氨基酸增高与感染性脑水肿关系密切 ,其参与了感染性脑损害的过程。     

谷氨酸诱导新生大鼠皮层神经元毒性损伤的作用

目的　研究谷氨酸 (Glu)对神经细胞毒性损伤的作用。方法　采用皮层神经细胞原代培养技术 ,建立Glu诱导新生大鼠皮层神经细胞损伤模型。采用倒置显微镜观察细胞形态学变化 ;分别用MTT法和生化法测定细胞存活率和LDH漏出率 ;用流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果　倒置显微镜下Glu处理组神经细胞毒性损伤明显 ,与正常对照组比较 ,Glu处理组细胞存活率 [(2 5 .36± 1 5 .33) % ]明显下降 (t=4.58　P <0 .0 0 1 )、LDH漏出率 [(44.59± 9.35) % ]和凋亡率 [(2 1 .77± 1 0 .78) % ]明显升高 (t=2 .40 ,3 .0 9　P <0 .0 0 5 ,0 .0 0 1 )。结论　Glu可诱导新生大鼠皮层神经元毒性损伤。     

卡托普利及氯沙坦对肺动脉高压大鼠肺组织细胞凋亡的影响

目的 探讨卡托普利及氯沙坦对肺动脉高压(PAH)大鼠肺组织细胞凋亡的影响,以了解卡托普利及氯沙坦治疗PAH的可能作用机制.方法 40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、左肺切除加野百合碱组(模型组)、卡托普利干预组、氯沙坦干预组,每组10只.5周后观察各组平均肺动脉压(mPAP)、右心室与左心室加室间隔质量比[RV/(LV+S)];应用TUNEL法检测其肺组织细胞凋亡率,免疫组织化学染色检测其凋亡相关基因Bcl-2和Bax 在肺组织中的表达.结果 模型组mPAP及RV/(LV+S)[(5.27±0.44)kPa,(65.19±3.78)%]较卡托普利干预组[(3.46±0.37)kPa,(49.08±4.48)%]、氯沙坦干预组[(3.24±0.30)kPa,(48.51±5.07)%]及正常对照组[(2.34±0.21)kPa,(27.35±2.67)%]均增高,差异有统计学意义(Pa<0.05);模型组肺组织细胞凋亡率[(29.84±4.82)%]显著高于卡托普利干预组[(18.65±3.21)%]、氯沙坦干预组[(20.33±4.22)%]及正常对照组[(8.24±1.32)%],同时Bcl-2和Bax在模型组肺组织中的表达均显著高于卡托普利、氯沙坦干预组及正常对照组,差异有统计学意义(Pa<0.05).结论 卡托普利及氯沙坦干预可调节肺组织细胞凋亡,从而缓解PAH和肺血管重构的形成.     

泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对高氧肺损伤大鼠肺上皮细胞凋亡的影响

目的 观察泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对高氧肺损伤大鼠肺上皮细胞凋亡的影响并初步探讨相关机制.方法 实验采用完全随机设计.将26只SD大鼠分为4组:高氧组(n=8)、高氧+MG-132组(n=8)、空气对照组(n=5)、MG-132对照组(n=5).成功制备高氧肺损伤大鼠模型后,观察肺组织病理学改变,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达并计算Bcl.2/Bax值.结果 高氧组SD大鼠肺组织可见明显急性炎症反应.高氧组、高氧+MG-132组的凋亡指数分别为66.76±7.64、34.78±4.40,明显高于空气组与MG-132对照组(14.48±1.75、12.88±1.95),但高氧+MG-132组的凋亡指数要低于高氧组,差异有显著性(P<0.05).高氧+MG-132组Bcl-2/Bax值(1.22±0.15)高于高氧组(0.87±0.11),差异有显著性(P<0.05).结论 高氧诱发肺组织细胞发生凋亡,蛋白酶体抑制剂MG-132可以通过调节Bcl-2与Bax的表达减轻高氧引起的细胞凋亡.     

高压氧治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型

目的：探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型脑组织神经细胞凋亡抑制蛋白Bcl2、促凋亡蛋白Bax的表达和胞浆线粒体细胞色素C(CytC)水平的关系及高压氧(HBO)对其的影响。方法：新生7日龄健康SD大鼠随机分为4组:空白对照组(n=34),假手术组(n=33,分离左颈总动脉后不结扎直接缝合皮肤),HIBD组(n=30,分离并结扎左颈总动脉联合8%低氧暴露2h),HBO组[n=33,HIBD后行HBO治疗(2个绝对大气压,1h/d,连续7d)]。免疫组织化学法检测脑组织神经细胞Bcl2和Bax的表达,Westernblot检测神经细胞胞浆线粒体CytC的水平。结果：HBO组Bcl2阳性细胞较HIBD组明显增多,阳性表达率分别为64%和47%(P<0.05),但较空白对照组(82%)和假手术组(79%)低,(P均<0.05);HBO组Bax免疫阳性细胞表达率(67%)与HIBD组(77%)比较差异无显著性(P>0.05),但明显高于空白对照组(15%)和假手术组(36%),(P<0.01和P<0.05)。空白对照组和假手术组神经细胞胞浆仅有弱阳性的CytC表达,HIBD组胞浆CytC的表达最强,HBO组的表达较HIBD组减轻。结论：HBO治疗可能通过诱导脑组织神经细胞Bcl2蛋白的表达,减轻线粒体CytC的释放,从而减轻缺氧缺血性脑损伤后神经细胞的凋亡。     

iNOS抑制剂阻断由细菌脂多糖诱导活性小胶质细胞对少突胶质细胞前体毒性作用的研究

目的 探讨由细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的活性小胶质细胞(MG)对少突胶质细胞(OL)前体的毒性作用及选择性iNOS抑制剂1400W对毒性作用的阻断效果.方法 取2日龄SD大鼠脑内MG和OL前体共培养,分为共培养对照组,共培养LPS组以及共培养LPS+1400W组.对共培养细胞经LPS 100 ng/ml诱导后48 h,分别应用硝酸还原比色法检测一氧化氮(NO)含量,免疫细胞染色法检测过氧亚硝酸盐(ONOO-)含量,Westem blot法检测诱生型一氧化氮合酶(Inducible Nitric Oxide Synthase,iNOS)蛋白合成量,Hochest 33342/PI荧光染色观察细胞凋亡形态学改变,以及流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 与共培养对照组比LPS可诱导培养细胞内NO含量[(82.27±3.41)tunol/L vs(167.86±9.87)μmol/L,t=8.593,P<0.01]、ONOO-含量[(6.14±1.27)×107/L vs(34.38±7.75)×107/L,t=5.892,P<0.01]以及iNOS蛋白合成量相对值[(0.18 4-0.027)vs.(0.79±0.068),t=9.26,P<0.01]明显增高,OL前体的凋亡率亦显著增加[(6.73 4±1.39)%vs.(24.77 4±2.05)%,t=12.619,P<0.01].应用1400W 10 μmol/L则可显著抑制因LPS诱导而增高的NO含量[(69.55±5.07)μmol/L,t=8.896,P<0.01]、ONOO-含量[(10.33±3.47)×107/L,t=14.96,P<0.01]以及iNOS蛋白的合成量(0.35±0.042,t=5.506,P<0.01),并显著降低了OL前体的细胞凋亡率[(11.8±2.06)%,t=7.715,P<0.01].结论 NO、iNOS以及ONOO-等物质在LPS诱导OL前体的死亡通路中扮演了重要角色,1400W通过选择性抑制iNOS,减少了NO以及ONOO-的生成,从而有效阻断了由LPS诱导活性MG对OL前体的毒性作用,提高了OL前体的存活率.     

新生儿氧疗时血浆中氧化及抗氧化水平的动态观察

目的　探讨氧疗时新生儿血浆中抗氧化水平的动态变化。方法　选择需氧疗的新生儿 3 8例 ,其中早产儿 2 0例 (A组 ) ,足月儿 18例 (B组 )。分别于吸氧前、吸氧后 3d、7d各测血浆中还原型谷胱甘肽 (GSH)、谷胱甘肽过氧化酶 (GSH px)、谷胱甘肽S转移酶 (GST)、丙二醛 (MDA)含量的变化。并以同期住院的不需氧疗的早产儿 2 0例 (C组 )及正常足月儿 (D组 )作为对照组。结果　①GSH :早产儿出生时GSH水平较足月儿低 (P <0 0 5 ) ,A组吸氧 3d及 7d时GSH较给氧前 (0d)时明显下降 ,且与对照组相比 ,差异具有显著性意义 (P <0 0 5 )。②GSH px :早产儿出生时GSH px水平早产儿较足月儿低 (P <0 0 5 ) ,B组GSH px活性于吸氧 3d[(76 0 0±6 3 9)U/L]及 7d[(87 3 5± 7 80 )U/L]时较 0d[(66 65± 7 65 )U/L]明显增强 ,且 7d时更为显著 (P <0 0 1) ;而A组变化却不明显。③GST :早产儿出生时GST含量较足月儿高 (P <0 0 5 ) ,而氧疗后 3d均出现明显下降。④MDA :氧疗后 7d时MDA含量A组 [(6 80± 0 92 ) μmol/L]、B组 [(4 2 7± 0 76) μmol/L]分别较 0d[(5 48± 1 0 3 )μmol/L、(2 98± 0 5 6) μmol/L]明显增加 (P <0 0 5 ) ,与对照组比较差异具有显著性意义 (P <0 0 5 )。结论　血浆中GSH、GSH px、GST及     

二氧化硫对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉结构的影响

目的 探讨二氧化硫(sulfur dioxide,SO2)对于低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉结构的影响.方法 将大鼠分为3组:对照组(n=8)、低氧组(n=8)和低氧+SO2组(n=10,给予Na2SO3/NaHSO3).对低氧组和低氧+SO2组大鼠进行低氧处理21 d.同时对照组置于常氧环境.检测各组大鼠肺动脉平均压.并通过光镜检测肌型小动脉相对中膜厚度(RMT),应用透射电镜观察各组大鼠肺小动脉超微结构的变化,检测血浆SO2含量.结果 低氧组大鼠肺动脉平均压[(5.12±0.51)kPa]较对照组[(2 25±0.50)Ida]高(t=5.091,P＜0.01),低氧组肺动脉RMT测定值(9.66±1.27)较对照组(6.83±1.57)高(t=3.392,P＜0.01),超微结构观察显示低氧组大鼠肺小动脉内皮细胞体积增大变性,内弹力层疏松厚薄不均.平滑肌细胞体积增大,细胞器丰富,细胞间见胶原原纤维增多,同时低氧组血浆SO2含量[(27.01±4.17)tunol/L]较对照组[(33.36±5.62)μmol/L]低(t=3.767,P＜0.05);低氧+SO2组大鼠的肺动脉平均压[(3.94±0.33)kPa]较低氧组[(5.12 ±0.51)kPa]低(t=2.712,P＜0.01),低氧+SO2组RMT测定值(6.97±1.83)较低氧组(9.66±1.27)低(t=3.009,P＜0.01),超微结构观察显示给予SO2干预后上述改变较低氧组明显改善,同时血浆SO2含量[(29.89±4.52)μml/L]较低氧组[(27.01±4.17)μmol/L]高(t=1.263,P＞0.05).结论 SO2对低氧性肺动脉高压大鼠肺小动脉结构具有重要的调节作用.     

姜黄素预处理对大鼠感染性脑水肿的保护作用及其机制研究

目的　观察姜黄素预处理对大鼠感染性脑水肿的保护作用 ,并从预处理后的脑组织氧自由基、细胞因子含量及HSP70表达三方面探讨其可能的作用机制。方法　SD大鼠随机分为 5组 :(1)正常对照组 (NS组 ,n =9) ;(2 )感染性脑水肿组 (PB组 ,n =12 ) ;(3)溶剂对照组 (DMSO组 ,n =9) ;(4)热休克预处理组 (HS组 ,n =9) ;(5 )姜黄素预处理组 (CUR组 ,n =13)。制备感染性脑水肿模型。用干湿法测定脑含水量 ;原子光谱吸收法测定脑组织钠、钾含量 ;比色法测定脑组织匀浆上清MDA、SOD含量 ;ELISA测定TNF α、IL 1β含量及Western印迹方法研究HSP70的表达。 结果　脑含水量、脑组织钠离子含量、脑组织匀浆上清MDA含量及TNF α、IL 1β含量 :PB组比NS组增高 (P<0 0 1) ,HS组、CUR组低于PB组 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。SOD含量PB组低于NS组 (P <0 0 5 ) ,HS组、CUR组高于PB组 (P <0 0 5 )。Western印迹分析经图像处理仪扫描显示CUR组、HS组、PB组高于NS组及DMSO组 ,其中以CUR组最高 (P <0 0 1)。结论　姜黄素预处理对大鼠感染性脑水肿具有保护作用 ,姜黄素的保护作用可能与抗脂质过氧化、抑制细胞因子的过度产生、诱导或加强HSP70的表达这三方面均有关。     

新生儿脑氧合及脑功能监测的意义

围生期新生儿易发生各种类型的缺氧，导致脑损伤，严重者遗留神经系统后遗症。早期客观评价新生儿脑氧合、血流动力学、脑反应的改变，及时发现并治疗脑组织缺氧，已成为临床迫切需要解决的问题。近红外光谱技术（Near Infrared Spectroscopy，NIRS）可直接反映组织中氧与血红蛋白的氧合与解离情况，表明组织中的血氧合状态，是脑组织氧合、血流及灌注客观评价的手段，     

新生儿脑梗死

新生儿脑梗死(neonatal cerebral infarction),又称为新生儿中风(neonatal stroke)、围生期脑梗死(perinatal cere-bml infection)或围生期中风(perinatal stroke),通常指在胎龄28周至生后28 d之间发生于某一或某些脑血管供血区内的脑组织的缺血性坏死,分为出血性脑梗死和缺血性脑梗死.     

Primary cerebral rhabdomyosarcoma

Primary intracranial rhabdomyosarcomas are extremely rare tumors; those in the supratentorial location are commoner in adults. A 10 year old girl with primary cerebral rhabdomyosarcoma is presented.