离体兔肺灌注模型的建立及不同成份保存液的肺保护研究

目的:建立离体兔肺灌注模型,研究不同成分保存液对离体兔肺的保存作用.方法:将30只兔分为5组分别为对照组(A组)、uw液 硝酸甘油组(B组)、uw液 前列腺素E1(C组)、UW液与自身动脉血1:2混合组(D组)、UW液与自身动脉血1:4混合组(E组).切取兔心肺作为离体心肺模型,对心肺模型进行冷灌注、低温保存.分别在2 h和4 h取肺部分标本做电镜分析.4 h末检测肺湿干重比、肺气道压力.离体肺接呼吸机后将自身静脉血用泵从主肺动脉泵入,用负压吸引真空试管取左心房血液做血气分析.结果:E、D组对于肺组织气体交换功能的保护相当,明显优于其他组.B、C组对于肺实质细胞的气体交换功能的保护结果相当,明显优于A组.结论:本实验模型可靠.稳定性好.在UW液中加入自体动脉血对离体肺灌注可以使肺保存时间明显延长、肺气体交换功能保存良好,明显优于其他组.在UW液中加入前列腺素E1和硝酸甘油对离体肺保护作用再次得到肯定,明显好于对照组,但和自体动脉血组相比仍有不足.     

前列腺素E1?腺苷对离体兔肺保护作用良好

目的:研究前列腺素E1以及腺苷对离体兔肺的保护作用.方法:将18只新西兰大白兔分为3个实验组,分别为单纯UW液(A组、对照组)、UW液+前列腺素E1(B组)、UW液+腺苷(C组).切取实验兔整体心肺作为离体心肺模型,对心肺模型进行冷灌注、低温保存.分别在2 h末和4 h末,取肺部分标本做电镜分析.于4 h末,结扎右肺门,取右肺检测肺湿/干重比(W/D)、测肺气道压力(Paw).左侧离体心肺接呼吸机模拟移植手术后呼吸,并将自身静脉血用泵从主肺动脉泵入,用负压吸引真空试管取左心房血液做血气分析.结果:B组肺组织气体交换功能的保护作用以及降低供体肺保存过程中含水量的作用明显优于其他组;降低气道压力和C组相当,明显优于对照组.C组肺实质细胞的气体交换功能的保护、降低肺含水量以及降低气道压力明显优于A组.结论:UW液中加入前列腺素E1进行离体肺灌注可以使肺保存时间明显延长、肺气体交换功能保存良好.     

评价含抑肽酶肺保护液疗效的实验研究

目的：利用兔在体肺保存模型．评价含抑肽酶的改良肺保护液对肺的保护作用。方法：新西兰白兔30只,随机分为对照组、低钾右旋糖酐液（LPD液）组、抑肽酶组．每组10只。制备免在体左肺保存模型,对照组仅阻断肺门和冷藏．不灌肺保护液,LPD液组和抑肽酶组分别经肺动脉插管,在体灌注LPD液和含抑肽酶的LPD液,完毕后将左肺下叶放入特制的肺保存器内在体低温冷藏2h．移去肺保存器。开放肺门再灌注2h。在实验过程中抽取肺静脉血标本行血气分析,取肺组织行病理学检查．同时检测支气管灌洗液中性粒细胞百分比及肺湿／干重比以评价肺保存效果。结果：抑肽酶组再灌注5min和2h两个时间点肺静脉血氧分压显著高于LPD液组和对照组（P〈0．05）。抑肽酶组肺泡出血及肺结构损害分级均较对照组及LPD组轻微（R0．05）。肺湿／干重比抑肽酶组较对照组和LPD液组均有非常显著的差异（P〈0．01）。结论：含抑肽酶的肺保护液对肺的保护效果确切,其保护作用明显优于单纯LPD液。     

Euro-Collins液、LPD液、前列腺素E1及硝酸甘油对离体肺保护作用的比较

目的 应用兔离体肺再灌注模型研究Euro-Collins液，低钾保护液（LPD）及LPN液（前列腺素E1，硝酸甘油加入LPD）在离体肺保护中的作用。方法 27只实验用兔随机分为3组（n=9)，分别以Euro-Collins液（E组），LPD液（L组）及LPN（LPN组）进行肺灌洗及保存。每组再分为3小组（各含6个肺）分别保存2，4，8h后进行再灌注，测定再灌注后肺血管阻力（PVR),肺通气阻力（LR），肺含水量（LW）及PO2以了解肺保护效果。结果 保存8h后E组LR显著增高，且明显高于L组及LPN组LPN组PVR在保存各时间明显低于E组及L组。结论 LPN组在保护肺血管内皮细胞及降低肺血管阻力方面优于E组及L组，作用机制可能通过扩张肺动脉，改善肺早期灌洗及抑制中性粒细胞，血小板在肺内聚集而减轻肺再灌注损伤。     

同种异体犬单肺移植的实验研究

目的：通过同种异体犬单肺移植，掌握供肺的灌注、切取、保存和修剪方法以及爱体单肺移植的手术技巧。方法：杂种犬8只（供体4只，受体4只），供体犬经肺动脉顺行及逆行灌注改良Euro-Coilins（iEC）液后，整块切取心肺，进行保存和修剪。受体犬取后外侧切口第4肋间入胸，切除一侧全肺后，按支气管-肺动脉-左房袖的顺序吻合。结果：全组实验无手术死亡，移植后肺动脉通畅良好，受体犬存活26h～14d。结论：通过实验，掌握了同种异体肺移植供肺获取及植入全过程，为进一步开展同种异体肺移植研究打下了基础．并为临床开展人体肺移植积累了经验。     

肺动脉和支气管动脉双循环冲洗在供肺保存中的作用

目的：探讨肺动脉和支气管动脉双循环冲洗在供肺保存中的作用。方法：12只健康新西兰白兔随机分为2组；对照组（肺动脉冲洗组）和实验组（肺动脉和支气管动脉双循环冲洗组），每组6只。供肺经过24h保存后采用离体肺循环灌流模型再灌流60min。灌流中观察2组肺动静脉血氧分压差（△po2）、二氧化碳分压差（△pco2）、肺动脉压（pPA）、气道压（pAW）、静态肺顺应性（Cstat）的变化和2组保存末、灌流末肺组织和灌流末支气管肺泡灌洗液中的总磷脂（TPL）、卵磷脂（PC）、卵磷脂／总磷脂（PC／TPL）、卵磷脂／鞘磷脂（L／S）的变化。比较2组间肺质量湿干比（W／D）。结果：实验组灌流中△po2、△pco2、Cstat明显高于对照组，pPA、pAW明显低于对照组，保存末、灌流末肺组织和灌流末支气管肺泡灌洗液中的TPL、PC、PC／TPL、L／S均明显高于对照组，W／D明显低于对照组。结论：肺动脉和支气管动脉双循环冲洗能保护肺表面活性物质磷脂，从而改善供肺保存和再灌注后的肺功能。     

用新的离体肺灌注模型探讨不同浓度的维生素C对大鼠肺缺血再灌注损伤的影响

目的:建立一种新的大鼠离体肺灌注模型,用于肺缺血再灌注损伤的研究;用该新模型探讨不同浓度的维生素C对肺缺血再灌注损伤的影响。方法:将32对Sprague Dawley大鼠随机分为4组:A组(Euro-collins液)、B组(维生素C100mg/L)、C组(维生素C200mg/L)、D组(维生素C400mg/L)。每组8对,每对中一只作为供体提供肺,另外一只作为受体鼠用于灌注。取肺并于4℃保存6h后连接体外灌注装置,灌注1h。动态监测气道压、肺动脉压,灌注完毕后行动静脉血气分析,取肺组织分析干湿比、MDA、ATP,并行组织病理学检查。结果:该灌注模型运转顺利,供体、受体的手术时间分别为30min、25min。与A组相比,B、C、D组肺组织再灌后的含水量、MDA、动脉压均降低(P<0.05),ATP、PaO2水平提高(P<0.05),再灌后的组织损伤也轻。A、B、C3组的气道压于再灌后无明显差异,但D组低于其它3组(P<0.05)。结论:该离体肺灌注模型用于研究大鼠肺缺血再灌注损伤有很多优点,耗费少,简单易行,维生素C对肺缺血再灌注损伤有保护作用,可降低肺血管阻力,减少氧自由基的生成,提高ATP水平及肺组织的氧合能力,并减轻肺水肿及组织损伤,而增加保存液中维生素C的浓度,可能对肺组织提供更好的保护作用。     

L-精氨酸在供肺离体保存中的作用

目的:探讨NO前体L-精氨酸(L-Arg)在供肺离体保存中的作用及可能机制. 方法:将实验犬10只随机分为2组,每组5只,对照组以4℃ euro-collins(EC)液灌注及保存供肺,实验组以4℃含L-Arg(2 g/L)的EC液灌注及保存供肺. 分别于肺离体低温保存30,60,120,180和240 min后取材,测定不同时间点NO、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量变化及240 min肺组织的湿干质量比(W/D)和超微结构的改变. 结果:两组在不同时间点NO,SOD,MDA的含量和W/D有显著性差异(P<0.05, P<0.01);实验组肺组织中NO及SOD含量明显增高,MDA含量显著降低. 随着时间的延长,NO,SOD均有下降趋势,但实验组下降幅度较对照组小. MDA均轻度上升,但实验组上升幅度较对照组小. W/D测定及光镜检查发现,实验组损伤明显轻于对照组(P<0.05). 结论:在EC液中加入L-Arg用于离体肺的灌注和保存,能明显减轻供肺损伤,其机制可能与NO生成增加、氧自由基生成及清除过程的变化有关.     

改良EC液低温灌注犬肺离体组织中一氧化氮与氧自由基变化的研究

目的 探讨改良型EC液低温灌注犬肺离体组织内一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量和湿干重比值（W／D）的变化,旨在为实验动物供肺保存研究提供分子水平的观察依据。方法 4℃改进型EC洗灌注6只健康成年杂种犬肺并离体低温保存,30、60、120、180、240min后取材测定不同时间NO、MDA、SOD含量和W／D,以灌注前为对照组。结果 不同时间点NO、SOD和MDA含量及W／D实验组与对照组之间无显著性差异（P＞0．05）;随时间延长NO、SOD均有下降趋势,MDA、W／D轻度上升。结论 改良EC液具有增加渗透压和清除氧自由基的作用;灌注前肺动脉内注射PGE1及增加代谢底物有助于抑制供体肺保存期间氧自由基的产生。     

A2a受体激动剂联合LPD对大鼠供肺组织病理结构的影响

目的：观察A2a受体激动剂联合低钾右旋糖苷(LPD)对大鼠供肺组织病理学结构的影响,探讨A2a受体激动剂在供肺组织中的保存作用。方法选择20只健康雄性SD大鼠,体重为350 g左右,采用随机数字表法分为两组(n=10),L组大鼠供肺组织采用常温LPD液进行肺灌注,LC组则在L组的灌注液及保存液中加入A2a受体激动剂CGS21680液,灌注肺离体后置于4℃相应组的保存液里保存6 h后,取两组移植肺组织行光镜下病理学观察并进行积分计算和统计学分析。结果肺组织炎症渗出积分方面LC组为3.5分,低于L组的9.5分,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);肺组织病理评分总分方面,L组为(10.67±1.63)分,LC组为(7.50±1.22)分,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 A2a受体激动剂可减少供体肺组织炎症细胞浸润程度,提高LPD液对供肺组织保存效果。     

经皮体外循环心肺复苏与常规复苏的对比性实验研究

目的：探讨经右颈动脉插管急诊体外循环心肺复苏的方法与效果。方法：健康成年雄性杂种犬18只平均分成3组,窒息心跳停止建立模型,A组行常规心肺复苏,B组经股动静脉穿刺体外循环复苏,C组经颈动脉、股静脉穿刺体外循环复苏。结果：B、C两组自主循环恢复（ROSC）率显著高于A组,ROSC前C组冠脉灌注压（CPP）、平均动脉压（MAP）高于B组。结论：颈动脉插管较股动脉插管体外循环心肺复苏提供更佳的冠脉灌注压和血气,缩短自主循环恢复时间。     

蛇床子素注射液对心肺联合移植供肺保护作用的实验研究

目的：研究蛇床子素注射液（Osthole injection）在心肺联合移植中对供肺的保护作用及可能机制。方法：将健康成年犬20只随机分为两组，对照组以4℃低钾右旋糖酐（Low—Potassium Dextran LPD）液灌注及保存供肺，实验组以4℃含蛇床子素注射液（40mg／kg）的LPD液灌注及保存供肺。分别监测受体麻醉后和心肺移植后主动脉开放5min和主动脉开放30min的血气分析（PaO2、PaCO2），测定肺组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的含量及肺组织的湿／干重比（W／D），并观察移植肺组织的超微结构变化。结果：实验组动物PaO2高于对照组（P〈0．05，P〈0．01），主动脉开放5min PaCO2明显低于对照组（P〈0．05）。实验组肺组织中sOD的含量较对照组增高（P〈0，01），MDA的含量较对照组降低，差异有显著性（P〈0．05）。实验组较对照组的W／D低，差异有显著性（P〈0．05）。电镜检查实验组的肺组织损伤明显轻于对照组。结论：蛇床子素注射液可改善移植肺的肺功能，减轻供肺损伤，增加心肺联合移植的成功率。     

改进的保存供体离体兔肺再灌注模型的建立

目的 :建立一个简单可靠的保存供体离体兔肺灌注模型 ,并将其应用于供肺保存研究 .方法 :将日本大耳白兔 12只作为供体 ,随机分为两组 ,肝素化后以高钾液处死 .建立改进的离体兔肺再灌注模型 ,其中A组 (n =6 ) ,供肺未经历温缺血 ,直接进行持续灌注 ;B组 ,供肺在室温下经历温缺血 1h ,然后给予再灌注 .监测再灌注前及再灌注期间的平均肺动脉压 (MPAP)、血气、湿干比等指标 .结果 :整个灌注期间 ,A组动、静脉血PvO2 、PvCO2 、MPAP及供肺湿干比均在正常范围 ;B组动脉血PaO2 低于A组 (P <0 . 0 1) ,湿干比高于A组 (P <0 . 0 5 ) .结论 :改进的新模型是供肺保存研究的简单、可靠的动物模型     

Lipo-PGE1注射液对无心跳兔肺缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的研究Lipo-PGE1注射液对无心跳兔肺缺血再灌注损伤的保护作用，并探讨其可能的作用机制。方法将16只健康新西兰大白兔随机分为两组，各8只，肝素化后处死，2 h后对照组以LPD液灌注及保存，实验组将Lipo-PGE1注射液（20μg&#183;L^-1）加入LPD液灌注及保存。两组在4℃保存2 h后再灌注1 h，测定经肺氧合后动脉血氧分压（PaO2）和肺气道峰压（PawP）。于再灌注结束后取右上肺组织，测其湿质量（W）与干质量（D），计算湿干质量比（W/D），ELISA法检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量，免疫组化法检测核因子-κB（NF-κB）的表达，并用光学显微镜和透射电子显微镜观察再灌注后肺组织结构的病理变化。结果再灌注30 min后，两组的PaO2逐渐降低、PawP逐渐升高，实验组PaO2降低程度及PawP的升高程度均低于对照组（P〈0.01）；实验组的SOD含量明显高于对照组（P〈0.01），MDA含量及肺组织NF-κB的表达低于对照组（P〈0.01），肺组织的病理变化较对照组轻。结论Lipo-PGE1注射液能减轻无心跳兔肺缺血再灌注损伤，改善肺功能，具有肺保护功能。     

供肺保存和再灌注期间的肺表面活性物质变化

目的 探讨供肺保存和再灌注期间的肺表面活性物质变化。方法 实验动物分为对照组（非缺血保存组）和实验组（缺血保存组）,对保存和再灌注期间的肺组织和支气管肺泡灌洗液中的肺表面活性物质磷脂进行了分析。结果 与对照组相比,实验组保存后肺组织总磷脂（ＴＰＬ）和卵磷脂（ＰＣ）含量明显降低,卵磷脂占总磷脂的比例（ＰＣ／ＴＰＬ）降低,卵磷脂与鞘磷脂比（Ｌ／Ｓ）降低。实验组再灌注后肺组织和支气管肺泡灌洗液中的ＴＰＬ     

丹参对大鼠肺缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的：探讨丹参对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其机制。方法：60只wistar大鼠随机分为3组：手术对照组（A）,缺血再灌注组（B）,丹参干预组（C）。每组分别于缺血第45min、再灌注30、60、120min,观察肺组织病理形态变化,检测血浆丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量,测定肺组织湿／干重（W／D）比值,TUNEL法测定肺组织中细胞凋亡指数（AI）。结果：（1）肺组织病理变化：B组肺组织毛细血管充血、水肿、炎性细胞浸润显著,c组肺组织较B组减轻;（2）血浆MDA、SOD含量：经缺血再灌注后,B和C组血浆MDA较A组均明显增加（P〈0．05）,B组增加的程度明显高于C组（P〈0．05）;B和C组血浆SOD较A组同时点均显著下降（P〈0．05）,C组减少的程度明显小于B组（P〈0．05）;（3）肺组织W／D比值：经缺血再灌注后,B组和C组的肺组织W／D比值都呈进行性上升（再灌注60,120min vs缺血45min,P〈0．05）;C组上升幅度明显小于B组（再灌注60,120min时,C组vsB组,P〈0．05）;（4）肺组织细胞AI的变化：B组及C组缺血再灌注后均可见肺组织细胞凋亡现象,但与B组相比,C组相同时点的肺组织细胞凋亡数显著减少（P〈0．05）。结论：丹参对于实验性大鼠肺缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其作用机制与清除氧自由基、抗氧化及抗细胞凋亡有关。     

羟乙基淀粉及动脉灌注法结合持续低流量灌注对兔心肺联合保存的作用

目的研究胶体物质羟乙基淀粉（ＨＥＳ）及低流量灌注技术（ＬＦＰ）对兔心肺联合保存的作用。方法选用健康家兔５０只，２只用于正常心肺组织的超微结构观察，４８只随机均分为晶体液（ＣＳ）组、ＨＥＳ组及ＬＦＰ组，每组８对供、受体。用Ｓｔ．Ｔｈｏｍａｓ液及改良Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｌｉｎｓ液灌注ＣＳ组心、肺，含５％ＨＥＳ的Ｓｔ．Ｔｈｏｍａｓ液及改良Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｌｉｎｓ液灌注ＨＥＳ组及ＬＦＰ组心、肺，取心与左肺整体４℃保存７ｈ，保存期间ＬＦＰ组经主、肺动脉持续低流量（０．２５ｍｌ／ｇ心肺重量／ｈ）灌注４℃相应保存液。移植后每３０ｍｉｎ测定供体心左室收缩压（ＬＶｓｐ）、左室舒张末压（ＬＶｅｄｐ）、右房压（ＲＡＰ）及供体肺气道峰压（Ｐａｗ），取动脉血测氧分压（ＰａＯ２），实验结束时记录异丙肾上腺素用量，计算心肺重量增值，测定心肺组织丙二醛（ＭＤＡ）含量，取心肺组织观察超微结构。结果ＣＳ组心肺重量增值高于ＨＥＳ组（Ｐ＜０．０１），ＨＥＳ组与ＬＦＰ组无明显差异。ＣＳ组ＬＶｓｐ均低于ＨＥＳ组（Ｐ＜０．０５或＜０．０１），３０，６０ｍｉｎ时ＬＦＰ组高于ＨＥＳ组（Ｐ＜０．０５）。ＣＳ组ＬＶｅｄｐ均高于ＨＥＳ组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）     

腺苷预处理对肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨腺苷预处理对肺缺血再灌注（I/R）损伤的保护作用。方法：72只健康大耳白兔随机分为3组，每组24只。Ⅰ组：未行缺血再灌注处理；Ⅱ组：行左肺缺血再灌注处理；Ⅲ组：行左肺缺血再灌注处理，并于术前10min经静脉给予腺苷。采用在体肺缺血再灌注损伤模型，于缺血45min、再灌注1h、2h、4h进行动脉血气分析、血浆及左肺组织丙二醛（MDA）、左肺组织过氧化物酶（MPO）活性、左肺组织湿干重比（W/D）的测定。结果：Ⅱ组再灌注2h、4h动脉血氧分压显著降低，各时点血浆MDA、左肺组织W/D均显著升高（与Ⅰ组比较）；Ⅲ组腺苷预处理后可明显改善上述指标变化。结论：腺苷预处理通过抑制多核中性粒细胞（PMN）在肺内的聚集和活化，减轻肺血管内皮细胞损伤的程度，而防治肺缺血再灌注损伤。     

改良LPD液、硝普钠对犬肺缺血/再灌注损伤内皮素-1的影响

目的：采用犬单肺原位常温缺血/再灌注模型,探讨及研究改良LPD液（low potassium dextra glucose,LPD）,改良LPD液+硝普钠2种保护液对犬肺缺血/再灌注损伤时血浆及肺组织匀浆中内皮素-1（endothelin-1,ET-1）的影响有无差异。方法：选用健康成年杂交犬12只,随机分成2组,每组6只,A组以常温LPD液行左肺灌洗,灌注量50～60 ml/kg,灌注压力< 40 mmH2O;B组以常温LPD液+硝普钠行左肺灌洗,其余同A组。2组采用酶联免疫吸附法分别于再灌注后0、2、4 h测定血浆、肺组织匀浆中ET-1的含量以及实验结束时称取肺湿、干重,计算肺湿/干比重。结果：2组血浆、肺组织匀浆中的ET-1含量无差异（P >0.05）,肺湿/干比重比较有变化（P<0.05）。结论：改良的LPD液可能通过减少ET-1的表达水平,降低肺湿/干比重,减轻肺缺血/再灌注损伤,但在改良的LPD液基础上加上硝普钠,对ET-1的表达水平及肺湿/干比重无明显影响。     

同种异体单肺移植治疗晚期慢性阻塞性肺病1例分析

目的：对1例慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者肺移植手术方法、肺保存、术后管理加以总结.方法：2004年12月行1例COPD同种异体肺移植术.供肺者为脑死亡,患者采用低钾右旋糖酐灌注液（LPD）液肺灌注.受体与供体血型匹配,行右肺移植,肺支气管、肺动脉为端端吻合,肺静脉实行心房-心房吻合,手术前后常规应用抗生素和免疫抑制剂,术后监测心肺肝肾功能、使用抗菌素及调整免疫药物.结果：未出现支气管、肺动静脉吻合口并发症.目前手术后存活1年,已恢复体力和劳动能力.结论：肺移植是多学科协作的复杂工程,我们在手术适应证的选择、供肺的选择和保存、手术操作以及手术前后的管理上已逐渐成熟.