整合素α4β7在大鼠溃疡性结肠炎发病中的作用

目的 探讨淋巴细胞归巢受体整合素α4β7在溃疡性结肠炎（UC）大鼠发病中的作用.方法 60只SD大鼠分为对照组（20只,仅用丙酮液灌肠）、模型组（2、4-二硝基氯苯丙酮液灌肠,20只）和干预组（造模后即自大鼠尾静脉注入α4抗体,20只）.观察大鼠结肠黏膜损伤情况;采用ELISA法检测结肠组织IL-2和IL-6水平;采用RT-PCR检测结肠组织中α4和β7的表达;采用流式细胞技术检测大鼠门静脉血中整合素α4阳性淋巴细胞数.结果 模型组和干预组大鼠结肠组织α4mRNA相对表达量分别为0.68±0.24和0.58±0.37,β7 mRNA的相对表达量分别为0.84±0.37和0.65±0.30,均显著高于对照组（0.15±0.13,0.24±0.62,均P＜0.01）.模型组和干预组结肠静脉回流血中α4阳性淋巴细胞的比例分别为（76.7±8.2）%和（68.2±7.6）%,显著高于对照组的（14.7±6.7）%（P＜0.01）.与模型组比较,干预组大鼠结肠组织大体损伤评分、组织学评分、IL-2和IL-6水平均显著降低（均P＜0.05）.结论 淋巴细胞整合素α4β7的高表达与大鼠的结肠黏膜炎性反应形成有关,阻断整合素α4β7可有效减轻结肠黏膜炎性损伤.     

次级淋巴组织趋化因子在溃疡性结肠炎发病中的作用

目的 探讨次级淋巴组织趋化因子(SLC)对实验性溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠病变的影响.方法 60只SD大鼠随机分为对照组、UC模型组(模型组)及SLC抗体干预治疗UC模型组(干预组),观察、比较不同组别结肠黏膜炎性和淋巴细胞归巢状况以及结肠组织细胞因子(IL-2和IL-6)的变化.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法检测结肠组织中的SLC表达.结果 3组大鼠的结肠黏膜炎性反应评分和结肠组织细胞因子含量差异有统计学意义(P<0.05和P<0.01).模型组和干预组的结肠黏膜下存在淋巴细胞异常归巢现象;模型组和干预组SLCmRNA的表达量比对照组明显升高(0.846+0.047和0.768±0.135比0.312±0.112,P<0.01),但模型组与干预组间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 SLC与实验性溃疡性结肠炎大鼠的结肠黏膜炎性反应密切相关,阻断SLC是减轻结肠黏膜炎性反应的有效途径之一.     

溃疡性结肠炎大鼠淋巴细胞的过渡归巢与CCR7的表达

目的探讨实验性溃疡性结肠炎（UC）大鼠淋巴细胞过渡归巢现象与淋巴细胞表面CCR7受体表达的关系。方法40只SD大鼠随机分为对照组及模型组，观察结肠黏膜下淋巴细胞过渡归巢现象，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）半定量法检测结肠组织中CCR7的表达；流式细胞法（FCM）测定结肠回流血液中CCR7＋淋巴细胞的比例。结果模型组大鼠结肠黏膜下存在淋巴细胞过渡归巢，派尔集合淋巴结增生，最大截面积比较，差异有统计学意义[（9．56±0．32）比（1．48±0．58），t=5．12，P〈0．01]，CCR7mRNA的表达量与对照组比较明显升高[（0．772d-0．108）比（0．126±0．029），t=4．37，P〈0．01]、模型组结肠静脉回流血中CCR7＋淋巴细胞的比例明显高于对照组[（76．58±9．73）％比（16．62±7．84），t=3．97，P〈0．01]。结论溃疡性结肠炎大鼠的结肠黏膜下存在淋巴细胞过渡归巢现象，结肠组织中归巢受体CCR7的表达增高，结肠回流血液中CCR7＋的淋巴细胞的比例增高。     

不同营养途径对急性胰腺炎大鼠肠道淋巴细胞归巢的影响

目的探讨肠外、肠内营养对急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)大鼠肠道淋巴细胞归巢及黏附分子表达的影响。方法存活7 d的20只AP大鼠分别给予:肠外营养(n=10),肠外营养+肠内营养(n=10)。采集正常大鼠肠淋巴细胞体外~(51)Cr标记,于第7天将标记细胞输入各组大鼠体内后,引流肠系膜淋巴液1 h,流式细胞仪检测肠淋巴细胞CD4、CD8及归巢受体L-选择素(L-selectin)、α4整合素表达,免疫组化法测定肠淋巴细胞中B细胞百分比;处死大鼠取胃、Peyer淋巴结、小肠、大肠、肠系膜等器官组织,用γ-计数器测定各器官组织中的标记淋巴细胞占输入体内总量的百分比。结果肠外营养+肠内营养组1 h引流肠淋巴细胞数量明显多于肠外营养组(0．41±0．13×10~7vs．0．99±0．27×10~7,P＜0．05)．其中的B细胞、CD4、CD8T细胞百分比均明显高于肠外营养组(P＜0．05);归巢到小肠、Peyer淋巴结、肠系膜组织的标记淋巴细胞量明显多于肠外营养组(P＜0．05),L-选择素、α4整合素表达明显高于肠外营养组。结论肠内营养能改善AP大鼠肠淋巴细胞L-选择素、α4整合素的表达,促进肠道淋巴细胞归巢。     

TRAF4在溃疡性结肠炎中的表达及意义

本研究探讨TRAF4在溃疡性结肠炎（UC）中的表达，进一步了解TRAF4与自身免疫性疾病的关系。将UC患者35例（UC组）和普通肠炎患者15例（对照组）经结肠镜活检，HE、免疫组织化学检测肠黏膜腺上皮及淋巴细胞、浆细胞的TRAF4表达情况．并进行分类比较。结果显示，UC中淋巴细胞、浆细胞核的TRAF4的阳性率明显高于对照组（P〈0．05），UC肠黏膜腺上皮细胞核的TRAF4表达阳性率明显高于对照组（P〈0．05），UC中肠黏膜腺上皮细胞浆的TRAF4表达与对照组无明显差异（P〉0．05）。结果表明，TRAF4在UC中细胞核的表达存在异常，尤其在淋巴细胞、浆细胞核中的表达存在明显异常。     

整合素α6β4在膀胱移形细胞癌中的表达及临床意义

目的 研究整合素α6β4在膀胱癌中的表达度其与膀胱癌分化、慢袭转移的关系.方法 应用免疫组织化学万法对85例膀胱癌石蜡包埋标本进行整合素α6β4半定量检测.结果 有60例膀胱癌组织整合素α6β4呈阳性或不同程度表达增强,高分化癌的整合素α6β4阳性率明显低于低分化癌(P <0 05).整合素α6β4阳性率在膀胱癌伴淋巴结转移组高于淋巴结阴性组(P<0 05).结论 整合素α6β4表达与肿瘤细胞的分化程度呈负相关、与淋巴结转移呈正相关,整合素α6β4可作为判断膀胱癌恶性程度度怠者预后的生物学指标.     

肠功能恢复汤联合肠内营养对腹腔感染大鼠肠黏膜屏障功能的影响

目的:探讨肠功能恢复汤联合肠内营养对腹腔感染大鼠肠黏膜屏障的影响。方法:健康SD大鼠60只随机分为4组:假手术组、肠外营养(PN)组、肠内营养(EN)组、肠功能恢复汤加EN组,分别在24h、48h、3d、5d、7d采集血液检测血清中TNF-α含量。于实验第7d处死,光镜和电镜下观察各组大鼠肠黏膜形态学变化;通过免疫组织化学方法,检测各组肠黏膜上皮细胞occludin蛋白表达情况。结果:PN组大鼠死亡率较其他组高;其余三组肠转运功能较对照组明显降低,PN组小肠黏膜萎缩明显,电镜肠功能恢复汤加EN组肠粘膜比其他组好。各组血清TNF-α含量术后均较对照组升高,48h达峰值。结论:肠功能恢复汤联合肠内营养支持治疗能减轻腹腔感染后肠黏膜损伤,保护肠黏膜屏障,降低细菌移位率。     

肠移植早期黏膜地址素细胞黏附分子在大鼠移植小肠及其肠系膜淋巴结的表达

目的 探讨黏膜地址素细胞黏附分子（MAdCAM-1）在大鼠小肠移植早期移植肠及其肠系膜淋巴结中的表达及意义。方法 选用近交系F344／N和BN大鼠建立全小肠异位移植模型后分3组：第1组，非手术对照组（F344／N）；第2组，同基因移植组（F344／N→F344／N）；第3组，异基因移植组（BN→F344/N）。术后1、3、5、7d取各组移植肠及其肠系膜淋巴结检测MAdCAM-1表达的分布及变化，同期进行移植肠组织病理学检查。结果 同基因移植组各检测时点的肠黏膜组织表现与正常小肠的组织学特征基本相同；异基因移植组肠黏膜组织表现符合轻-中-重度排斥反应的渐进过程，2周后移植肠绒毛变的低平，散在黏膜上皮脱落，移植肠相关肠系膜淋巴结萎缩明显。MAdCAM-1在急性排斥反应期，高表达于移植肠固有层及其肠系膜淋巴结，特别是高表达于肠黏膜固有层中的扁平血管内皮细胞表面。同基因移植组术后MAdCAM-1的表达在1—7d均无明显量的变化；而异基因移植组MAdCAM-1在移植肠中的表达呈上升趋势，而在其肠系膜淋巴结中的表达呈下降趋势。结论 MAdCAM-1与小肠移植急性排斥反应的进展关系密切。     

β1整合素表达下调对结肠癌肝转移的抑制作用

目的 探讨β1整合素表达下调对人结肠癌细胞(HT-29)肝转移的抑制作用.方法 采用脂质体将β1整合素反义寡核苷酸(ASODN)转染到HT-29细胞内,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测β1整合素的表达.Transwell侵袭室方法检测HT-29体外侵袭转移能力.裸鼠开腹于脾脏被膜下注射转染的HT-29建立肝转移模型,30 d后处死裸鼠,计算肝转移癌的数量与大小,免疫组织化学(SP法)观察转移癌中β1整合素的表达.结果 与对照组比较,实验组β1整合素mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);Transwell体外侵袭实验实验组迁移的细胞数明显减少(P<0.05);体内裸鼠肝转移实验组转移癌数量(4.00±0.93)个/只、平均体积(10.10±6.50)mm3/只、平均重量(0.0440±0.0008)g/只、免疫组织化学肝转移癌中β1整合素表达阳性细胞百分率(28.60±3.79)%均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 β1整合素表达下调对结肠癌肝转移具有抑制作用.     

低氧诱导因子-1α和p53在肝脏低氧损伤中的作用

目的:探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、p53及细胞凋亡在大鼠肝脏低氧损伤中的作用。方法:雄性SD大鼠64只,随机分为对照组和肝动脉结扎组(n=32)。各组均行剖腹、肝脏骨骼化及肝素林格液肝脏灌注,肝动脉结扎组行肝动脉结扎术。术后1、3、7、14d留取肝脏组织及血标本。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肝脏组织HIF-1αmRNA表达水平;免疫组织化学方法检测肝脏组织HIF-1α及p53蛋白表达水平;TUNEL法检测肝细胞凋亡。自动生化分析仪检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)活性以评价肝损伤。结果:肝动脉结扎后肝组织HIF-1αmRNA及HIF-1α蛋白较对照组明显增高,分别于结扎后3d和7d达峰值[0.834±0.129比0.372±0.048,(7.8±3.1)%比(2.1±1.7)%,P均<0.01]。肝动脉结扎组肝细胞p53均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01),于术后7d达峰值[(41.2±9.1)%比(5.2±4.3)%,P<0.01]。肝动脉结扎组肝细胞凋亡指数均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01),于术后7d达峰值[(21.3±7.4)%比(3.7±3.5)%,P<0.01]。肝动脉结扎组ALT水平均明显高于对照组。HIF-1α、p53蛋白表达及凋亡细胞都主要位于肝小叶中央静脉周围。结论:HIF-1αmRNA表达增加、HIF-1α蛋白积聚以及p53促凋亡途径的激活在肝脏低氧损伤中可能发挥重要作用。     

IL-17A及Th17在炎症性肠病中的作用

目的:检测IL-17A、IL-10、IFN-阍诨航馄谘字⑿猿觃(inflammatory bowl disease,IBD)患者中的表达,探讨诸炎症因子及Th17在炎症性肠病的发病及治疗中的作用.方法:应用ELISA检测12例Crohn病(Crohn disease,CD)、46例溃疡性结肠炎患者(ulcerative colitis,uc)和20例健康人(正常对照组)血清中IL-17A、IL-10和IFN-愕乃剑⒂妹庖咦橹炸检测CD、UC及正常对照组结肠黏膜局部IL-17A的表达.结果:正常对照组结肠黏膜局部未检测到IL-17A的表达,而UC和CD组在结肠黏膜活组织中均检测到IL-17A的表达.同样UC和CD组血清中IL-17A明显增高,而正常对照组血清未检出IL-17A;UC和CD组患者血清IL-10水平均较对照组升高(P<0.05),且CD组明显高于UC组(P<0.05);CD、UC组与正常对照组血清中IFN-愕谋泶锊钜煳尥臣蒲徕襙(P>0.05).结论:IL-17A不仅在缓解期IBD患者结肠黏膜局部表达,同时在其血清中高表达,提示Th17及其分泌的IL-17A在缓解期IBD患者的发病过程中起重要作用,并伴随促炎因子和抑炎性因子失调.     

替米沙坦对糖尿病大鼠肾小球表达整合素α3β1的影响

目的 观察整合素α3β1在糖尿病大鼠肾小球的表达以及替米沙坦对其影响&#65377;方法 制备糖尿病大鼠模型,随机将动物分为糖尿病组&#65380;治疗组, 另设对照组&#65377;治疗组给予替米沙坦3 mg·kg^-1·d^-1&#65377;6周后,检测各组24 h尿白蛋白定量&#65380;肌酐清除率&#65380;血糖&#65380;血胰岛素&#65380;血压&#65380;肾重/体重;免疫组化法检测肾小球整合素α3β1表达部位及表达水平&#65377;分离肾小球,Western印迹法检测肾小球整合素α3β1蛋白表达水平&#65377; RT-PCR 检测肾小球TGF-β1mRNA 的表达&#65377;光镜下观察肾组织病理改变;电镜下观察肾组织超微结构变化&#65377;结果 免疫组化结果显示,正常大鼠整合素α3β1主要沿肾小球血管袢呈线性表达,系膜区有少量表达&#65377;糖尿病组肾小球整合素α3β1表达比正常对照组明显减弱;替米沙坦治疗组整合素α3β1表达较糖尿病组明显增加,24 h尿白蛋白定量及其它肾功能指标以及病理改变明显改善,血压无明显变化, 肾小球TGF-β1mRNA表达比糖尿病组显著下降&#65377;结论 替米沙坦可以减少糖尿病肾病大鼠早期的尿蛋白,改善病理变化,保护肾功能,其作用机制可能部分通过减少TGF-β1表达,上调整合素α3β1表达而实现&#65377;     

整合素β1和CD44V6在肝癌组织中的表达及其与肝癌浸润转移的关系

目的研究整合素β1和CD44V6在肝细胞癌(HCC)中的表达及与HCC病理学特点之间的关系。方法采用免疫组织化学染色法检测42例HCC、10例肝硬化和7例正常肝组织内整合素β1和CD44V6的表达情况。结果HCC组织中整合素β1和CD44V6的表达阳性率明显高于肝硬化(P<0.05,P<0.05)和正常肝组织(P<0.01,P<0.05);整合素β1的表达与包膜侵犯(u=3.06,P<0.01)、病理分级(u=3.78,P<0.01)及肿瘤转移(u=3.65,P<0.01)密切相关;CD44V6在有肿瘤转移组织中的阳性表达率显著高于无肿瘤转移的组织(χ2=5.12,P<0.05)。结论整合素β1和CD44V6在HCC中的表达上调可能与其浸润转移有关。     

整合素αVβ3、VEGF及MMP-9在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的：检测整合素αVβ3、血管内皮细胞生长因子（VEGF）及基质金属蛋白酶9（MMP-）在人膀胱移行细胞癌的表达,探讨整合素αVβ3与膀胱移行细胞癌血管生成及浸润转移的关系。方法：采用免疫组织化学SABC法检测59例膀胱移行细胞癌组织及15例正常膀胱黏膜组织中整合素αVβ3、VEGF、MMP-9的表达情况。结果：59例膀胱移行细胞癌中αVβ3、VEGF、MMP9的阳性表达率分别为45.76％、64.41％和55.93％,15例正常膀胱黏膜组织中三者的阳性表达率分别为13.33％、6.67％和6.67％三种蛋白在膀胱移行细胞癌与正常膀胱黏膜组织间的表达阳性率差异均有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）;αVβ3、VEGF、MMP-9的表达与膀胱移行细胞癌的分级分期相关;αVβ3、VEGF的表达与膀胱移行细胞癌的癌灶直径、单发／多发相关;αVβ3的表达与膀胱移行细胞癌患者的年龄相关;整合素αVβ3与VEGF及MMP-之间的阳性表达均呈正相关（r=0.3703,r=0.3182,P〈0.01）。结论：整合素αVβ3在膀胱移行细胞癌中表达升高,并与分级分期等指标相关,表明其具有促进膀胱移行细胞癌生长的作用。整合素αVβ3可能通过协同VEGF及MMP-9作用,促进膀胱移行细胞癌的血管生成及侵袭转移。     

整合素β1在微粒皮混合移植中的异位表达及定量分析

目的 了解自、异体微粒皮混合移植促进创面愈合的机制. 方法 建立自、异体微粒皮混合移植大鼠模型.第1部分实验分为3组,每组9只大鼠:(1)自体皮组,移植面积扩张比为10:1的自体微粒皮;(2)混合1组,移植自、异体微粒皮,面积扩张比均为10:1;(3)混合2组,移植自、异体微粒皮,面积扩张比分别为10:1和10:3.第2部分实验亦分为3组,每组6只大鼠:(1)自体皮组,移植面积扩张比为20:1的自体微粒皮;(2)混合1组,移植自、异体微粒皮,面积扩张比分别为20:1、20:3;(3)混合2组,移植自、异体微粒皮,面积扩张比分别为20:1和20:6.术后从各组大鼠愈合创面取样,第1部分实验于术后2、3、4周取样,第2部分实验于术后3、4周取样,每组大鼠各时相点检测3个样本.行常规组织学与免疫组织化学染色,测定整合素β1的表达.显微镜下测量表皮层厚度. 结果 (1)HE染色显示,术后各组大鼠创面的表皮层厚度明显增加,真皮内有不同程度的血管扩张和单个核细胞浸润.(2)术后2～4周,第1部分实验中2个混合组大鼠皮肤表皮层均明显厚于自体皮组(P＜0.05或P＜0.01);术后3、4周,第2部分实验中2个混合组大鼠皮肤表皮层厚度均明显厚于自体皮组(P＜0.05或P＜0.01).(3)免疫组织化学染色显示,术后各组新生表皮中均可见整合素β1阳性细胞,以棘层和颗粒层为主.术后2周,第1部分实验中混合组整合素β1的阳性表达明显强于自体皮组(P＜0.01),且混合1组的表达(10 982±2169)明显强于混合2组(4240±512,P＜0.01);术后3～4周,混合1组的表达仍明显强于自体皮组和混合2组(P＜0.01).第2部分实验仅在术后3周时混合2组整合素β1的阳性表达(1618±171)明显高于自体皮组(1060±146,P＜0.05). 结论 自、异体微粒皮混合移植中,整合素β1的异位表达和表达增强与表皮细胞的增殖分化、创面冉上皮化以及表皮层增厚有密切关系,在促进创面愈合过程中,整合素β1阳性表达细胞很有可能发挥了重要作用.     

己酮可可碱对肾小管上皮细胞转分化抑制作用的实验研究

目的:探讨己酮可可碱(PTX)对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾间质平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,并在体外研究其对肾小管上皮细胞转分化及其对Smad 7表达的作用.方法:将实验大鼠分为假手术组、UUO对照组和UUO PTX治疗组.用免疫组化法测定各组动物肾组织α-SMA表达.体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2),经TGF-β1及PTX干预后,用蛋白印迹检测α-SMA和Smad 7表达,用ELISA检测培养上清中Ⅰ型胶原含量.结果:假手术组大鼠肾组织仅血管壁α-SMA免疫染色阳性.UUO对照组第3 d、第7 d、第14 d,α-SMA表达程度分别为(2.90±0.71)%、(8.50±0.97)%、(17.9±2.70)%,PTX治疗组则分别为(2.70±0.62)%、(6.90±0.83)%、(13.8±1.9)%,术后第7 d(P<0.05)、第14 d(P<0.01)两组有统计学差异.TGF-β1(8 ng/ml)刺激HK-2细胞72 h后,α-SMA表达强度为(87.7±7.0)%,培养上清中Ⅰ型胶原浓度为(2 560.49±95.03) ng/ml;而加入PTX 10、50、100、300、500 μg/ml干预72 h后,α-SMA表达强度(F＝174.998,P<0.001)和培养上清中的Ⅰ型胶原(F＝460.883,P<0.001)呈浓度依赖性减少.在TGF-β1刺激前24 h、TGF-β1刺激后0 h、12 h、24 h、36 h或48 h后分别加入PTX(500 μg/ml),α-SMA表达强度(F＝144.131,P<0.001)和培养上清中的Ⅰ型胶原(F＝444.557,P<0.001)则呈时间依赖性减少.TGF-β1刺激的同时,分别加入PTX 10、50、100、300、500 μg/ml干预72 h后,Smad 7表达强度分别为(50.6±3.1)%、(49.4±2.9)%、(48.9±2.5)%、(51.4±1.8)%、(49.5±3.0)%,与阳性对照组(46.9±3.5)%比较无统计学差异(P＞0.05).结论:(1)PTX可减少UUO大鼠肾间质α-SMA表达;(2)在体外,PTX可抑制TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化,该作用与Smad 7表达无关,其机制有待于进一步研究.     

转化生长因子-β1在他克莫司肾毒性中的作用

目的 观察转化生长因子(TGF)-β1在他克莫司大鼠肾毒性中的作用.方法 将SD大鼠24只随机分成对照组、CsA组、FK506组和FK506+Dil组,用药4周后建立起各组大鼠模型.观察各组大鼠的肾功能,应用免疫组织化学技术检测各组大鼠TGF-β1的表达.结果 FK506组大鼠的血肌酐值为(34.17±4.54)μmol/L,肌酐清除率为(0.58±0.39)ml·min-1·100g-1,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).FK506组TGF-β1的阳性表达率均为100%(6/6),对照组TGF-β1的阳性表达率为16%(1/6),两者差异有统计学意义(P<0.05). 结论 TGF-β1可能介导了FK506引起的肾毒性.     

大鼠小肠移植早期应用趋化因子受体拮抗剂抑制移植物急性排斥反应

目的探讨趋化因子受体拮抗剂(MetRANTES)在小肠移植早期应用对排斥反应的免疫抑制作用及其与他克莫司的协同效应。方法SD大鼠为供者,Wistar大鼠为受者,建立异基因节段性异位小肠移植模型。移植后将大鼠分为4组,每组24只。第1组为对照组,移植前后不作任何处理;第2组为MetRANTES组,小肠移植后(0～7d)腹腔注射MetRANTES200μg/d;第3组为小剂量他克莫司(FK506)组,小肠移植后(0～7d)腹腔注射FK5060.5mg·kg-1·d-1;第4组为MetRANTES联合FK506组,2种药物的应用方法与第2、3组相同。观察移植大鼠的一般状况和存活时间以及免疫细胞浸润情况,并于移植术后3、5、7d分别取各组大鼠移植肠标本(n=6)进行组织病理学检查,采用免疫荧光染色和激光扫描共聚焦显微镜技术对移植肠RANTES和CD4 、CD8 、CD25 T淋巴细胞的表达进行连续定量测定。结果第1～4组大鼠平均存活时间分别为(7.37±1.19)d、(22.32±8.60)d、(23.64±6.58)d和(30.55±4.18)d,第2、3、4组大鼠与第1组相比,存活时间明显延长(P<0.01);第4组大鼠存活时间更长,与第2、3组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。第1组全部死于急性排斥反应及感染,组织病理学检查显示移植后第3、5、7d分别符合轻、中、重度排斥反应。第2、3、4组病理学检查无明显排斥反应征象。第1组大鼠的移植肠RANTES表达在术后各时段均显著高于其他3组(P<0.01),其动态变化与急性排斥反应的进程呈正相关;第2组和第4组大鼠移植肠RANTES、CD4 、CD8 和CD25 T细胞的表达均明显低于第1组(P<0.01)。结论MetRANTES能明显抑制小肠移植急性排斥反应,有效保护移植肠功能,显著延长移植物的存活时间,并可增强小剂量他克莫司的免疫抑制作用。     

烟雾吸入性损伤大鼠肺组织丝裂原活化蛋白激酶通路的变化

目的 了解烟雾吸入性损伤大鼠肺组织丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路及炎性细胞因子含量的变化,探讨其损伤机制. 方法建立密闭舱内烟雾吸入性损伤模型,将30只SD大鼠分为烟雾吸入性损伤后1、6、24、72 h及7 d组,另设正常对照组(6只).取各组大鼠肺组织行病理学观察,检测肺组织匀浆液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)和白细胞介素1β(IL-1β)含量,用蛋白质印迹法检测肺组织p38MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及各酶磷酸化水平.收集大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),检测TNF-α、MIP-2、IL-1β含量并行粒细胞分类、计数. 结果烟雾吸入使大鼠产生急性肺损伤样病理改变.伤后1 h组大鼠肺组织及BALF中TNF-α和IL-1β含量均高于正常对照组(P<0.01).各组肺组织MIP-2水平与正常对照组接近(P>0.05),伤后1 h组BALF中MIP-2水平高于正常对照组(P<0.01).各致伤组p38MAPK、ERK1/2、JNK水平接近正常对照组,但此3种酶的磷酸化水平在伤后不同时相组有高表达.伤后1 h组大鼠BALF粒细胞总数为(0.36±0.08)×106个/L,较正常对照组(0.61±0.09)×106个/L明显减少(P<0.05),伤后7 d组粒细胞总数[(1.71±0.67)×106个/L]却高于正常对照组(P<0.05).伤后6 h～7 d组中性粒细胞数多于正常对照组(P<0.05).伤后1 h组巨噬细胞数少于正常对照组(P<0.05),但6 h～7 d组逐渐增多.各组大鼠淋巴细胞数量接近(P>0.05).结论 密闭舱室内非金属材料燃烧释放的毒性气体能诱导肺组织产生明显的炎性反应,激活细胞MAPK通路中重要激酶的表达,这可能是毒性混合气体导致肺损伤的重要机制之一.     

整合素αv β3和VEGF在骨折愈合过程中的表达及意义

[目的]探讨整合素α,β3和VEGF在骨折愈合过程中的表达及意义.[方法]将新西兰大白兔20只,随机分为4组,每组5只,手术制作左侧兔桡骨中段骨干缺损模型,作为实验组.右侧作假手术处理,作为对照组;应用免疫组织化学链霉亲合素-生物素酶复合物(SABC)法检测术后2、4、8、12周骨痂组织中整合素αvβ3和VEGF的表达.[结果]在骨折愈合的不同时期,整合素仅αvβ3和VEGF的表达上调,对照组与实验组的表达差异有统计学意义(P＜0.05).术后2周整合素αvβ3和VEGF的表达水平最高,术后12周表达水平最低.[结论]整合素αvβ3和VEGF可能在骨折愈合的过程中起重要作用,检测整合素αvβ3和VEGF的表达有助于对骨折预后的判断.