肝炎肝硬化患者血清病原学类型及HCV与HBV重叠感染临床意义

肝炎肝硬化患者血清病原学类型及ＨＣＶ与ＨＢＶ重叠感染临床意义常州市第三人民医院薛焕俊，白敬羽，葛其童，孙启源，查雁生，苏瑞福关键词肝炎；肝硬变；ＨＣＶ；ＨＢＶ；重叠感染中图法分类Ｒ５１２．６肝炎肝硬化多由ＨＢＶ引起，现已对ＨＣＶ引起的肝硬化引起了人们...     

HBV DNA和HCV RNA检测试剂抗干扰能力验证

目的:评估乙型肝炎病毒(HBV)脱氧核糖核酸(DNA)和丙型肝炎病毒(HCV)核糖核酸(RNA)定量检测试剂的抗干扰能力.方法:选择高、低浓度HBV DNA和HCV RNA阳性血清标本,采用实时荧光定量PCR技术检测不同浓度血红蛋白(hemoglobin,Hb),总胆红素(total bilirubin,TBIL)和甘油三酯(triglyceride,TG)对2种阳性血清标本检测的干扰.以偏差<±7.5％ 为可接受范围.结果:HBV DNA检测,当Hb浓度≤4.5 g/L时,各样本均未受到干扰,Hb浓度≥8.1 g/L时,各样本受到不同程度的干扰;当TBIL浓度≤370μmol/L时,高浓度样本检测未受到明显干扰,TBIL浓度≥666μmol/L,各样本受到不同程度的干扰;TG浓度≤12.6 mmol/L时,未对检测造成干扰.HB≤8.1 g/L,TBIL浓度≤666μmol/L,TG浓度≤12.6 mmol/L均未对HCV RNA检测造成干扰.结论:HBV DNA和HCV RN A定量检测试剂具有一定的抗干扰能力.     

应用聚合酶链反应进一步探讨原发性肝癌与HBV,HCV感染的关系

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测原发性肝癌（ＰＨＣ）及肝硬化（ＬＣ）患者血中ＨＢＶ－ＤＮＡ及ＨＣＶ－ＲＮＡ，同时检测血中乙肝５项标志及抗－ＨＣＶ。结果５６例ＰＨＣ中，ＨＢＶ５项标志阳性者４３例（７６．７８％），ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者４２例（７５．００％），两种方法联合应用阳性率为４９例（８７．５％）；其中３４例检测ＨＣＡ－ＲＮＡ阳性者８例（２３．５３％）。６２例ＬＣ中，ＨＢＶ５项标志阳性者３５例（５６．４５％），ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者３８例（６１．２９％），二者联合应用阳性数为４５例（７２．５８％），其中３４例检测ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性数为９例（２３．６８％）。ＰＨＣ组ＨＢＶ感染率显著高于ＬＣ组（Ｐ＜０．０５），ＨＣＶ感染率两组差异无显著性（Ｐ＜０．０５）。并对ＨＢＶ、ＨＣＶ感染与ＬＣ、ＰＨＣ的发生发展作进一步讨论。     

多重PCR快速扩增血清中HBVDNA和HCVRNA

多重ＰＣＲ快速扩增血清中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ阎小君，肖乐义，李陕区，郭宴海，苏成芝，侯瑜，刘君，陈远鑫（全军基因诊断技术应用研究所西安７１００３３）关键词聚合酶链反应；乙型肝炎病毒；丙型肝炎病毒中图号Ｑ５２３多重ＰＣＲ是在同一ＰＣＲ体系内用多对...     

定量聚合酶链反应检测血清中HCV RNA^＋

目的：探讨定量聚合酶链反应用于检测丙型肝炎病毒HCV含量变化的意义。方法：用信号引物能量转移定量聚合酶链反应（PCR），检测68例丙型肝炎患者血清HCVRNA水平。结果：其HCVRNA含量范围103～1011拷贝／ml，急性丙肝106.83±3.72拷贝／ml，慢性丙肝106.54±2.67拷贝／ml，而无症状携带者104.95±2.16拷贝／ml。血清HCVRNA水平同ALT水平呈相关。结论：丙肝病毒感染后HCV复制水平与肝损害相关，定量检测HCVRNA的水平变化是预测和评价干扰素疗效的重要指标。     

血液病儿童输血后HCV感染的分析

对112例血液病儿童输血后用PCR方法进行丙型肝炎病毒检测，阳性率为18．75％．分析男女间、4种病组间无显著性差异．30例无输血史非血液病儿童对照组中皆阴性．     

套式PCR检测新疆地区不同人群HCV基因型

对采自新疆地区不同人群１１２２份血清分别进行抗－ＨＣＶ ＥＬＩＳＡ和ＨＣＸＶ ＲＮＡ基因型检测，结果显示：该地区自然人群，职业献血员，肝硬变和肝细胞癌患者抗－ＨＣＶ阳性率分别为２．０％，３５．７％，４２．５％及２０．８％，该人群ＨＣＶ基因型以混合型感染为主，单一基因型感染以Ⅱ型为主。     

贵州HCV感染株基因分型研究

为了解本地区ＨＣＶ感染株的基因型及现有分型方法的适用性，从贵州２０６例慢性肝炎和血液病患者中筛出３５份抗－ＨＣＶ阳性血清，用逆转录套式聚合酶链反应作ＨＣＶＲＮＡ检测。３０份ＨＣＶＲＮＡ阳性血清用３种分型方法（核心区特异引物ＰＣＲ，非结构５区特异探针核酸杂交，５′末端非编码区限制性长度多态性分析）进行ＨＣＶ基因分型。结果３份血清为ＨＣＶ２ａ感染，２７份为ＨＣＶ１ｂ感染。对８份ＨＣＶ１ｂ、１份ＨＣＶ２ａ血清的ＰＣＲ扩增产物直接测序，核酸序列分型结果与原型别一致。表明ＨＣＶ１ｂ是贵州地区ＨＣＶ感染株的主要基因型，ＨＣＶ２ａ感染并不常见。以ＨＣＶ基因组不同区域为基础的各方法分型结果间有很好的相符性。     

慢性肝炎及肝硬化患者抗——HCV的检测

为了解丙型肝炎病毒(HCV)在我区慢性肝炎及肝硬化发病中所起的作用,我们对105例广西慢性肝炎及肝硬化患者进行了抗-HCV抗体的检测,现将结果报道如下。     

HCV基因型与IFN—α2b抗病毒疗效的关系

目的；研究丙肝病毒基因型与丙肝患者使用ＩＦＮ－α２ｂ治疗效果的关系。方法；采用ＨＣＶ基因组ＮＳ５区ＰＣＲ产物酶切分型方法，对７９例丙肝患者做ＨＣＶ基因分型。所有病例均按预定方案应用ＩＦＮ－α２ｂ治疗，根据ＡＬＴ的变化情况和判断疗效。首先考察应用１ＭＵ和３ＭＵ ＩＦＮ－α２ｂ两种剂量在治疗效果上的差异性；然后研究ＨＣＶ基因型对ＩＦＮ－α２ｂ治疗效果的影响。     

贵州HICV感染株基因分型研究

为了解本地区ＨＣＶ感染株的基因型及现有分型方法的适用性，从贵州２６例慢性肝炎和血液病患者中筛出３５份抗－ＨＣＶ阳性血清，用逆转录套式聚合酶链反应作ＨＣＶ ＲＮＡ检测，３０份ＨＣＶ ＲＮＡ阳性血清用３种分型方法进行ＨＣＶ基因分型。结果３份血清为ＨＣＶ２α感染，２７份为ＨＣＶ１ｂ感染。对８份ＨＣＶ１ｂ，１份ＨＣＶ２ａ血清的ＰＣＲ扩增产物直接测序，核酸序列分型结果与原型另一致。     

用高度保守区引物和套式PCR扩增丙型肝炎病毒

采用套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，以具有高度保守性的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ５＇端非编码区引物对，扩增１０例输血后肝炎血清，８例（８０％）阳性。并将逆转录与第一轮ＰＣＲ结合连续进行，使操作简便有效。间接证明了ＨＣＶ上海株与世界若干地区ＨＣＶ株５＇端非编码区核酸序列具有高度同源性和保守性。     

医护人员HBV和HCV院内感染

院内感染是当代临床医学、流行病学和卫生学的重要课题 ,是医疗实践的一大障碍 ,院内感染不仅限于病人 ,对医护人员的健康威胁亦很大。尤其是与患者血液及分泌物接触较多的科室更为严重。近年来国内已有丙型肝炎在一定范围内流行 ,故研究ＨＣＶ在医院工作人员中的感染极为重要。为了提高医护人员的健康水平 ,保证医疗质量和各项指标的完成 ,我们对哈尔滨市 5家综合性医院 10 0 2名职工体检的ＨＢＶ和ＨＣＶ感染情况进行了调查 ,凡有ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｃ、抗ＨＢｅ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｃ ＩｇＭ中一项阳性者为乙肝病毒感染者 ,抗 -ＨＣＶ阳…     

丙型肝炎病毒NS5B区基因的扩增、克隆及序列分析

目的 对丙型肝炎病毒(HCV)NSSB区基因克隆并测序，研究其变异状况。方法 从HCV RNA阳性血清中抽提病毒RNA，利用巢式RT-PCR对NS5B区基因进行扩增，将扩增获得的靶cDNA克隆至P^KPL-3a质粒载体中，并以内引物为测序引物进行序列测定分析。结果 构建了已克隆HCVNS5B区基因的重组质粒KHC5—1；序列分析表明，与HCV-BDS株同源性最高，属于主要流行于我国的HCV 1b基因亚型。结论 证实了在NS5B区，与RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)活性密切相关的基元结构Gly-Asp-Asp及其相邻序列的同源性非常高。     

母婴间TTV、HBV和HCV的重叠感染

目的 :探讨母婴间 TTV、HBV和 HCV重叠感染的分布及感染率。方法 :对 1 40例产妇及新生儿血清应用聚合酶链反应 ( PCR)、反转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)检测 TTV、HBV和 HCV感染的阳性率。结果 :HBV- DNA及 HCV- RNA双重阳性产妇的新生儿双重阳性率为 1 0 0 % ,HBe Ag阳性产妇的新生儿 HBe Ag阳性率为 82 % ,抗 - HCV阳性产妇的新生儿阳性率为 75 % ,HBe Ag阳性并发 TTV阳性产妇的新生儿阳性率为 73% ,HCV并发 TTV阳性产妇的新生儿阳性率为 66.6%。结论 :母婴间存在 TTV并发 HCV、HCV双重感染     

多重PCR检测HBV和HCV方法的建立

目的:建立可同时检测血清HBVDNA和HCVRNA的多重PCR。方法:利用已知的基因序列设计了对于不同亚型HBV保守的C基因区的一对引物HBV-P623及对于不同亚型HCV高度保守的位于5’端非编码区(5’-NCR)的两对引物HCV-P289和HCV-P174,扩增经基因释放剂(Genereleaser)处理的HBV和HCV阳性血清。结果:多重引物、逆转录套式PCR反应体系可同时扩增HBV DNA和HCV RNA,分别在623bp和174bp处出现特异DNA扩增带。该反应体系具有较高的特异和敏感性,受检血清中仅含有10fgHBV DNA和5CID HCV RNA即可检出。血清标本不需要提取核酸,可直接进行PCR。用此体系检测30例输血后病人血清,其中15例为HBV感染,8例为HCV感染,7例为阴性。结论:多重PCR检测HBV及HCV的方法具有简便性和实用性。     

血清HCV RNA与抗—HCV关系研究

目的 研究血清ＨＣＶ ＲＮＡ与抗－ＨＣＶ之间的关系。方法 对５０例抗－ＨＣＶ阳性的丙型肝炎病人，用酶标仪测血清抗－ＨＣＶ ＯＤ值，同时用逆转录－套式－聚合酶链反应检测血清ＨＣＶ ＲＮＡ。结果 ５０例抗－ＨＣＶ阳性丙型肝炎（ＨＣ）患者中３０例ＨＣＶ ＲＮＡ阳性，即６０％的ＨＣ病人存在病毒血症；在不同的抗－ＨＣＶ ＯＤ值范围内ＨＣＶ ＲＮ检出率不等，ＨＣＶ ＲＮＡ检出率随抗－ＨＣＶ ＯＤ值增高而增加（     

一步PCR快速扩增血清中HCVRNA

一步ＰＣＲ快速扩增血清中ＨＣＶＲＮＡ阎小君，肖乐义，李陕区，郭晏海，苏成芝，刘君，候瑜，陈远鑫（全军基因诊断技术应用研究所西安７１００３３）关键词聚合酶链反应；丙型肝炎病毒；核糖核酸中图号Ｑ５２３．３反转录巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测丙型肝炎病毒（...