胃癌与幽门螺杆菌感染及p53、ras 基因突变的关系

目的 探讨幽门螺杆菌(Hp) 感染和p53、ras 基因突变在胃癌发生中的作用.方法 采用聚合酶链反应- 单链构象多态性分析法(PCR-SSCP) 进行p53( 外显子7) 及ras( 第12 密码子) 进行基因突变分析,并应用快速尿素酶试验(RUT) 法和HE 染色法检测Hp 感染.结果 83 例胃癌组织中,p53 基因与ras 基因发生突变阳性率分别为67.47%、63.86%,男女无差异,有远处转移中二者阳性率更高,而对照组中均无p53 与ras 突变发生.胃癌组织中Hp 感染率为71.08%,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01),且Hp 阳性感染组织中p53 和ras 的突变率明显高于Hp 阴性组织,差异均具有统计学意义(P<0.01 ;P<0.05).结论 Hp 感染和p53、ras 基因突变可能是胃癌的发生机制之一,Hp 感染可导致多基因联合突变.用PCR-SSCP 法联合检测胃黏膜组织中p53、ras 基因的突变将有助于胃癌诊断和预测胃癌远处转移.     

p53和C-Ha-ras基因在胃癌发生中的作用

目的　探讨 p5 3和C Ha ras基因突变在胃癌发生中的作用。 方法　用PCR SSCP和直接测序检测胃癌组织中C Ha ras(12、13密码子 )和 p5 3(外显子 7)基因的突变。 结果　胃癌组织中C Ha ras和 p5 3基因突变发生率显著高于浅表性胃炎和正常胃黏膜组织 ,基因的联合突变在部分胃癌组织中表达。结论　基因联合突变可能是胃癌发生的机制之一。     

THE ROLE OF HELICOBACTER PYLORI IN GASTRIC CANCER AND PRECANCEROUS LESIONS

Objective To determine the role of Helicobacter pylori ( Hp ) in the development of gastric cancer and gastric precancerous lesions. Methods From the biopsy specintestinal metaplasiaens of gastric cancer and precancerous lesions lip organisms were detected by a combination use of three methods ( Clo-test,Giemsa and PCR ). Mutations of C-Ha-ras and p53 genes were determined by polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism analysis-direct sequencing ( PCR-SSCP-S ) . Results The detection rates of lip in gastric cancer, dysplasia and intestinal metaplasia were significantly higher than that of normal gastric mucosa , and the mutational rates of C-Ha-ras and p53 genes in Hp positive patients were significantly higher than those in lip negative patients. In gastric cancer patients, the mutational rate of p53 gene in lip positive patients was significantly higher than that of lip negative patients, in which spot mutation was the main pattern of gene changes.Conclusion Hp infection might be related to gastrocarcinogenesis and gene mutation might play a role in Hp related gastric cancer.     

胃癌及癌前病变组织中雌激素受体和P21ras的表达及意义

目的 探讨雌激素受体（ＥＲ）和ｒａｓ原癌基因蛋白－Ｐ２ｒａｓ的表达在胃癌发生、发展中的作用及与胃癌生物学行为的关系。方法 采用免疫组化ＳＰ法。结果 ＥＲ在慢性浅表性胃炎（２０例）、异型增生（２１例）中均为阴性,胃癌（４０例）的表达阳性率为４０％,三组比较有显著性差异（Ｉ〈０．０５）。Ｐ２１＾ｒａｓ在慢性浅表性胃炎、异型增生、胃癌的表达阳性率分别为１０％、２３．８％、４７．５％,三组比较差异有显著性     

联合检测胃粘膜组织P53、P16、K—ras对胃癌的诊断价值

目的 :探讨胃癌组织P53、P1 6 、K ras基因的协同突变情况 ,揭示P53、P1 6 、K ras基因突变与胃癌发生的关系。方法 :应用聚合酶链反应 (PCR)与单链构象多态性分析法 (SSCP)对 6 0例经病理切片诊断为胃癌组织和 2 0例正常胃粘膜组织进行P53、P1 6 、K ras基因突变分析。结果 :6 0例胃癌粘膜组织中 ,P53基因发生突变 5 3例 ,占 88 3% ;P1 6 基因发生突变 49例 ,占 81 7% ;K ras基因发生突变 5 6例 ,占 93 3% ;男女间突变率比较差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;而 2 0例正常胃粘膜组织无P53、P1 6 、K ras基因突变发生。结论 :P53、P1 6 、K ras基因突变是胃癌中常见的分子事件 ,用PCR—SSCP法联合检测胃粘膜组织P53、P1 6 、K ras基因的突变情况将有助于诊断胃癌 ,为临床提供更为可靠的检验资料     

Study on the association betweenHelicobacter Pylori infection and the pathogenesis of gastric cancer by using molecuar biological techniques

Summary Recent epidemiological observations have indicated that the role ofHelicobacter pylori (HP) infection in the pathogenesis of gastric cancer is an important but unresolved issue. We used the polymerase chain reaction, a sensitive and specific assay, to detect the HP infection in gastric biopsy specimens and examined the correlations between HP infection and point mutation at 12 codon of H-ras oncogene, overexpression of ras p21 and DNA content. The results showed that the mutation rate of H-ras oncogene is higher in the group with HP infection than in those without HP infection. Furthermore, there is strong evidence that HP infection is associated with the increased expression of ras p21 protein, which suggested that HP infection increased the risk of ras oncogene activation. It is also noted that a significant relationship between infection with HP and the increase of DNA content and s % phase cells, indicated that rapid turnover of cells resulting from infection injury increases the risk of DNA damage.     

Ha-ras、p53基因变异与膀胱癌预后关系的探讨

采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术检测了３９例膀胱癌及７例正常膀胱组织中Ｈａ－ｒａｓ基因、ｐ５３基因变异，并结合临床分期、病理分级等参数进行了综合分析。结果表明，膀胱癌组织中Ｈａ－ｒａｓ基因、ｐ５３基因变异率分别为３６％、３０．８％，两者均显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０５）；且与分级分期呈正相关。复发肿瘤的Ｈａ－ｒａｓ基因突变率显著高于原发肿瘤；６例标本同时呈现Ｈａ－ｒａｓ基因与ｐ５３基因突变。提示Ｈａ－ｒａｓ基因、ｐ５３基因变异及相互作用在很大程度上参与了膀胱癌的发生及演变，并与其生物学行为密切相关，有望成为判断肿瘤恶性程度、自然病程及预后的评估指标     

p53和ras癌基因表达产物联合检测在胃癌早期诊断中意义

目的：为了研究ｐ５３和ｒａｓ癌基因表达产物（ｐ５３蛋白和ｐ２１ｒａｓ、ｐ２１蛋白）在胃癌早期诊断中的价值。方法：对２２例浅表性胃炎,２５例重度不典型增生,３０例早期胃癌标本进行ｐ５３和ｐ２１蛋白免疫组化检测。结果：在浅表性胃炎中两种蛋白均为阴性：重度不典型增生和早期胃癌中两种蛋白阳性率非常接近,其差异性不显著（Ｐ＞００５）,但均高于浅表性胃炎,差异性显著（Ｐ＜００５）。ｐ５３和ｐ２１蛋白联合检测阳性率,在重度不典型增生（７６０％）和早期胃癌（７００％）中,均高于两组中ｐ５３蛋白单项阳性率（４００％和３６７％）和两组中ｐ５３和ｐ２１蛋白同时阳性率（２４０％和２６７％）其差异性均显著（Ｐ＜００５）。结论：重度不典型增生在ｐ５３和ｒａｓ基因表达水平上接近早期胃癌,二种基因表达产物联合检测在胃癌早期诊断中有临床应用价值。     

膀胱移行细胞癌ras,p53基因点突变检测及其临床病理学意义

为探讨基因的改变在膀胱移行细胞癌发生过程中的意义，应用聚合酶链反应——限制性片段长度多肽性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）法，检测５０例膀胱移行细胞癌ｒａｓ、ｐ５３基因突变。结果显示：正常膀胱粘膜未检测到基因突变，膀胱移行细胞癌Ｈａ－ｒａｓ基因第１２位密码子突变为１６例（３２％），ｐ５３基因突变为９例（１８％），均系２４８位点突变。Ｈａ－ｒａｓ－１２位点突变率随病理分级增高而增高，与膀胱移行细胞癌分级显著相关（Ｐ＜０．０５）。ｒａｓ基因、ｐ５３基因突变患者死亡率高于无突变患者。４例膀胱移行细胞癌存在ｒａｓ基因及ｐ５３基因共同突变。     

胃癌术后硫酸性肠化切缘P~（53）和ras P~（21）蛋白的表达及其意义

目的探讨硫酸性肠化切缘Ｐ５３和ｒａｓＰ２１蛋白的表达，进一步从分子生物学水平证实硫酸性肠化与胃癌术后切缘复发的关系。方法应用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术，对１８例硫酸性和１７例非硫酸性肠化切缘粘膜上皮细胞的Ｐ５３和ｒａｓＰ２１蛋白的表达量进行了定量研究．结果硫酸性肠化切缘上皮的Ｐ５３和ｒａｓｐ２１蛋白的表达量显著高于非硫酸性肠化切缘和正常粘膜上皮，而低于胃癌细胞．结论硫酸性肠化切缘的ｐ５３和ｒａｓＰ２１蛋白有过量表达，可能与胃癌术后复发有关。     

Study on the Association Between Helicobacter Pylori Infection and the Pathogenesis of Gastric Cancer by Using Molecuar Biolo

ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎＢｅｔｗｅｅｎＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ　ＰｙｌｏｒｉＩｎｆｅｃｔｉｏｎａｎｄｔｈｅＰａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆＧａｓｔｒｉｃＣａｎｃｅｒｂｙＵｓｉｎｇＭｏｌｅｃｕａｒＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓＹ...     

ras、P53基因突变和蛋白表达与尿路上皮肿瘤预后的关系

目的　研究ras、P5 3基因突变和蛋白表达以及DNA倍体异常与尿路上皮肿瘤预后的关系。方法　用聚合酶链式反应加单链多态性分析 (PCR -SSCP)及流式细胞术和细胞免疫荧光技术检测 5 2例尿路上皮肿瘤K -ras和P5 3基因突变及蛋白表达和DNA含量变化。结果　K -ras、P5 3基因突变分别为 9.6 2 % ( 5 /5 2 )、42 .31% ( 2 2 /5 2 ) ;rasP2 1、P5 3蛋白阳性表达分别为 6 9.2 3 % ( 36 /5 2 )、6 3 .46 % ( 33/5 2 ) ;异倍体和二倍体肿瘤分别为 42 .31% ( 2 2 /5 2 )、5 7.6 9% ( 30 /5 2 ) ;DNA倍体异常、P5 3基因突变及rasP2 1和P5 3蛋白表达随肿瘤病理分级和分期的上升而增加 ,与肿瘤预后有直接关系(P <0 .0 1) ;异倍体肿瘤其P5 3基因突变、rasP2 1和P5 3蛋白表达阳性率明显高于二倍体肿瘤 (P <0 .0 1)。结论　DNA倍体异常、P5 3基因及rasP2 1和P5 3蛋白表达对尿路上皮肿瘤预后有预测意义。     

胃癌及其癌前病变中ras, c-erbB-2, p53癌基因产物的表达

目的 探讨胃癌及其癌前病变中ras,c-erbB-2,p53癌基因蛋白产物的表达分布特点及其在胃癌发生发展中的作用。方法 应用免疫组化ABC方法,对58例胃癌、31例胃粘膜上皮异型增生和11例正常胃粘膜组织中,鼠抗人mAb ras基因p21蛋白、兔抗人c-erbB-2原癌基因产物多克隆抗体p185,鼠抗人mAb p53蛋白进行了检测。结果p21在正常胃粘膜和轻、中、重度异型增生和胃癌中的表达率分别为27．3％,30．0％,46．2％,75．0％和72．4％;其表达率在重度异型增生和胃癌中显著高于正常胃粘膜和轻、中度异型增生（P＜0．05）;p185在正常胃粘膜和轻、中度异型增生中无表达,在重度异型增生和癌中的阳性表达率分别为25．0％,18．9％,各组间无显著性差异（P＞0．05）;p53仅在癌中有表达,表达率29．3％,明显高于非癌组织（P＜0．05）。胃癌中两种以上癌基因蛋白同时表达率明显高于非癌组织（P＜0．05）。结论 ras基因可能作用于胃癌发生的早期阶段,c-erbB-2,p53基因可能作用于胃癌发生的较晚期。并认为胃癌发生需要多基因协同作用。     

P^53及P21^ras蛋白在甲状腺癌的表达与分化和转移的关系

目的：研究Ｐ＾５３和Ｐ２１＾ｒａｓ蛋白在甲状腺癌中的表达及与甲状腺癌分化与转移的关系。方法：对已确诊的５５例甲状腺癌组织，采用ＬＳＡＢ免疫组织化学方法标记Ｐ＾５３，Ｐ２１＾ｒａｓ蛋白。结果：Ｐ＾５３、Ｐ２１＾ｒａｓ蛋白在未分化甲状腺癌的阳性表达率分别为６３．６％和９．０９％；在分化型甲状腺癌的阳性表达率分别为１５．９１％和６８．１８％；有淋巴结转移的甲状腺癌的阳性表达率分别为６３．６４％和７７．２     

幽门螺杆菌感染状态与胃癌预后的关系

目的观察幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)在胃癌中的现症感染情况,探讨HP感染状态与胃癌患者临床病理特征及预后的关系。方法794例胃癌组织及癌旁组织石蜡切片分别取自第二军医大学长海医院和长征医院,采用改良Giemsa染色法检测切片中HP的感染状态,分析HP感染状态与胃癌患者临床病理参数间的关系;采用单因素分析(Kaplan-Meier法)和多因素分析(Cox比例风险模型)方法研究胃癌患者预后的影响因素。结果 HP感染与胃癌Lauren分型、肿瘤分化和淋巴结转移相关(P<0.05)。HP阳性胃癌患者中位生存时间为68.5个月,高于HP阴性患者的36.4个月(P=0.003)。接受根治性手术的HP阳性胃癌患者预后好于HP阴性患者(P=0.034)。亚组分析显示,HP阴性的肠型胃癌患者预后较HP阳性者差(P=0.006),但在弥漫型胃癌患者中未发现HP阴性和阳性者之间有差异(P=0.922)。结论 HP感染不是胃癌预后的独立影响因素。HP阳性感染状态的肠型胃癌患者临床预后可能较好。     

K-ras基因状态及ras蛋白表达在胃印戒细胞癌免疫表型分类中的意义

目的 探讨K-ras基因状态及ras蛋白表达在胃印戒细胞癌免疫表型分类中的意义.方法 应用组织芯片免疫组织化学技术检测180例胃印戒细胞癌组织中ras蛋白的表达;PCR扩增和DNA直接测序法检测癌组织中K-ras基因12、13密码子的突变情况.结果 ras蛋白阳性50例(27.8％),ras蛋白阳性表达率在肠型印戒细胞癌中显著高于胃型和混合型印戒细胞癌(P<0.05).在淋巴结转移阳性组织中,ras蛋白阳性表达率明显高于无淋巴结转移组织(P<0.05);随着肿瘤侵袭、演进及临床分期的升高,ras蛋白阳性表达率明显增高(P<0.05).K-ras基因突变型22例(12.2％).所有突变位点均位于12密码子,突变类型包括:GGT→AGT 1例,GGT→TGT 1例,GGT→GCT 2例,GGT→GTT 8例,GGT→GAT 10例.13密码子未发现突变.肠型印戒细胞癌K-ras基因突变率显著高于胃型和混合型印戒细胞癌(P<0.05).K-ras基因突变型病例ras蛋白阳性表达率明显高于K-ras基因野生型病例(P<0.05).Spearman等级相关分析显示,ras蛋白表达与K-ras基因突变呈正相关(r=0.61,P<0.05).结论 ras蛋白的过表达可能与胃印戒细胞癌侵袭潜能、淋巴结转移相关,ras蛋白表达和K-ras基因突变与肿瘤的免疫表型变化存在相关性,它们在癌细胞表型转化过程中可能起到一定作用.     

P21ras、TBK1、bcl-xl在胰腺癌中的表达及意义

目的探讨P21ras、TBK1及bcl-xl在胰腺癌中的作用和其相互关系。方法应用免疫组化的方法检测P21ras、TBK1和bcl-xl在胰腺癌中的表达。结果 P21ras、TBK1和bcl-xl在胰腺癌中的表达率分别是76%、66%、60%;TBK1与P21ras、TBK1与bcl-xl呈正相关（P〈0.05）;P21ras与bcl-xl表达呈正相关（P〈0.05）,TBK1在p21ras阳性组织表达高于在p21ras阴性组织中的表达。TBK1和bcl-xl的过表达与肿瘤分化程度正相关,p21ras在不同分化程度的胰腺癌组织中有不同程度的表达,p21ras、TBK1和bcl-xl蛋白表达与胰腺癌淋巴结转移有明显相关。结论胰腺癌发生机制涉及ras信号通路中p21ras、TBK1与bcl-xl多个基因的异常,且具有协同作用,p21ras、TBK1与bcl-xl过表达在胰腺癌组织中均呈高表达,p21ras的表达与TBK1与bcl-xl的过表达正相关,提示K-ras基因突变可上调TBK1与bcl-xl的过表达,TBK1可能在K-ras基因突变诱导肿瘤发生发展中起了关键作用。     

P53、P2lras蛋白和P—糖蛋白在胃癌中过表达的意义

目的研究胃癌组织p53、p21ras蛋白和P-耐药糖蛋白(P-gp)在胃癌中的表达及临床意义.方法采用免疫组化SABC法检测7例正常胃粘膜、12例慢性萎缩性胃炎、8例粘膜慢性胃炎伴肠型不典型增生和93例胃腺癌组织中p53、p21ras蛋白和P-gp的表达.结果p53、p21ras蛋白和P-gp在正常胃粘膜组、癌前病变组和胃腺癌组中的阳性率分别为0,14.3%,0;20.0%,25.0%,5.0%;55.9%,51.6%,44.1%.p53蛋白、P-gp表达均与淋巴结转移有关(P＜0.05);p21ras蛋白表达与肿瘤的浸润程度有关(P＜0.05);P-gP表达与p53和p21ras表达有显著的协同性(P＜0.05).结论p53和p21ras蛋白常并存于胃癌组织中.p53突变蛋白和P-gp过表达在胃癌淋巴结转移中起重要作用,因此早期进行p53蛋白和P-gp检测有重要的临床意义.     

胃癌组织P53、PCNA蛋白表达及细胞凋亡的研究

目的探讨P53、PCNA蛋白表达和胃癌细胞凋亡关系及其它们在胃癌发生发展中的可能作用。方法采用TUNEL及流式细胞术分别检测60份胃癌、癌旁正常黏膜组织细胞凋亡和P53、PCNA蛋白表达。结果胃癌组织细胞凋亡率明显低于癌旁正常组织（〈0.01）;P53、PCNA蛋白在胃癌组织中的表达率明显高于癌旁正常组织（〈0.01）。胃癌P53阳性组细胞凋亡率低于P53阴性组,而PCNA平均荧光强度高于P53阴性组。低分化胃癌病例其P53、PCNA蛋白高于高中分化的病例。有淋巴结转移的胃癌病例其P53、PCNA蛋白高于无淋巴结转移的病例。结论胃癌组织中癌细胞凋亡明显受到抑制,胃癌组织中P53高表达及细胞增殖活跃状态在胃癌的发生发展过程中起重要作用。     

胃癌变过程中幽门螺旋杆菌感染与COX-2、P53蛋白表达关系及其临床意义

目的：通过检测幽门螺旋杆菌（Helicobacter Pylofi，HP）感染胃粘膜组织环氧合酶-2（Cyclooxygenase-2，COX-2）和抑癌基因P53表达，探讨幽门螺旋杆菌相关胃癌的发生机制。方法：用快速尿素酶试验及改良Giemsa染色方法检测HP感染，COX-2表达检测选择免疫组化S-P法，用免疫组化LSAB法检测P53蛋白。结果：HP阳性感染率、COX-2和P53的阳性表达率，慢性萎缩性胃炎、肠化、非典型增生及胃癌中均明显高于慢性浅表性胃炎（P〈0．01）。慢性萎缩性胃炎、肠化、非典型增生及胃癌中HP感染与COX-2、P53的表达呈正相关（P〈0．01）。结论：COX-2、P53是HP感染胃癌变过程的早期事件，并参与了胃癌变的全过程。COX-2、P53蛋白可用为筛选胃癌高危癌前病变的标志物。