一种双侧供肾大鼠肾移植模型的建立

目的 探讨同时取大鼠双侧肾脏分别移植的可行性，其目的是节省实验费用、缩短手术时间。方法 以近交系Brown-Norway大鼠为供者，同时取其双肾作为供肾，原位灌洗；近交系Lewis大鼠为受者，切除其左肾，移植供肾1只。以冠状动脉造影支架为支撑行供肾静脉与受者肾静脉端端吻合，供肾动脉与受者的腹主动脉行端侧吻合，供肾输尿管膀胱瓣与受者的膀胱吻合。受者术中预置右侧肾脏血管体外结扎线，术后3d结扎。结果 每只供鼠手术耗时约40min，热缺血时间约10S，冷缺血时间约20min。40次实验均获成功，移植肾功能正常，在不用免疫抑制剂的情况下，受者存活时间均超过7d。结论 同时取双侧肾脏分别移植给2个受者是可行的，可降低实验成本；要获得相同数量的供肾，同时取双肾的耗时较仅取单侧肾脏大大缩短。     

大鼠肾移植模型建立研究进展

大鼠肾移植实验模型建立显微外科以及分析移植相关方面的研究有着其重要的意义.随着临床肾移植的不断发展,以及对于器官移植排斥反应研究的重视,大鼠肾移植模型愈来愈受到人们的关注,本文对于大鼠肾移植模型建立研究进展综述如下.     

一种改进的大鼠肾移植模型

目的建立一种改进的大鼠异体肾移植模型。方法应用120只Wistar大鼠分别作为供体和受体，采用原位灌注、将供肾的血管与受体的同名血管作端-端吻合以及输尿管直接植入膀胱的方法建立大鼠原位肾移植模型。结果建立并改进了大鼠同种异体肾移植模型，成功率达到90％。热缺血时间小于3s，冷缺血（低温灌洗、供肾修整和冷保存）时间（40±5）min，血管吻合时间约35min，总手术时间为（160±10）min。结论该模型稳定性强，重复性好，适合于移植免疫的基础研究。     

改进的套袖法吻合肾动脉建立大鼠原位肾移植模型

目的 观察改进的套袖法吻合肾动脉用于大鼠肾移植的可行性.方法 选择F344大鼠和Lewis大鼠分别作为肾移植的供、受者.切取供者左侧肾脏时,先剪断输尿管,然后阻断肾动、静脉水平上下的腹主动脉和下腔静脉,靠近下腔静脉剪断左肾静脉根部,经腹主动脉注入含肝素的4℃生理盐水对供肾进行原位灌洗后,靠近腹主动脉剪断肾动脉根部,取出供肾,放入4℃生理盐水中保存.切除受者左侧肾脏时,尽可能长的保留肾动、静脉以利于吻合.供肾植入时,采用改进的套袖法:用显微镊轻轻扩张供肾动脉后,协助显微持针器将针从供肾动脉血管外向血管内穿入,并从血管断端穿出第1针;接着穿入受者肾动脉断端,从受者肾动脉腔内向腔外穿出第2针;然后再从供肾动脉腔内、靠近第1针进针点处向腔外穿出,并与第1针的另外一端打结,此时受者的肾动脉已套入供肾动脉内;将供肾动脉边缘与受者肾动脉外膜固定2针,2针呈180度对角.供、受者的肾静脉及输尿管均行端端吻合.术后5 d内.若受者死亡,则认为手术失败.结泉共行肾移植20次,整个手术耗时70～90 min,供肾热缺血时间为4～9 s,冷缺血时间为30～40 min,肾动脉吻合用时(4.6±0.6)min,肾静脉吻合用时(11.8±1.2)min,输尿管吻合用时(12.2±1.4)min.术后5 d内,受者不明原因死亡1只,存活19只,手术成功率为95%.结论 采用改进的套袖法吻合肾动脉具有便捷、易于掌握、可靠及实用等优点,大鼠肾移植的成功率较高.     

应用新技术建立大鼠肾移植模型

针对目前大鼠肾移植模型中静脉吻合及原肾切除方法存在的不足 ,我们设计了带临时内支架的供、受体肾静脉吻合以及受体原肾肾血管体外延迟结扎两项新技术 ,用其建立了更为简便、可靠的大鼠肾移植模型。一、材料与方法1.实验动物及麻醉供、受体均采用近交系雄性Ｌｅｗｉｓ大鼠 ,共 46只 ,随机分为数量相等的供、受体对。以 10 ｇ/Ｌ戊巴比妥钠腹腔注射麻醉。2 .供体手术 :取左肾作为供肾。开腹后 ,于髂血管分叉上方钳夹腹主动脉及腔静脉 ,结扎远端后 ,紧贴血管钳下方切断血管 ,将腹主动脉及腔静脉近心断端提起 ,将其两侧分支逐一结扎至左肾静…     

改良性大鼠同种异体肾移植模型的建立

为了开展肾移植免疫方面的研究，我们建立了一种改良性大鼠同种异体肾移植模型，符合大鼠同种异体肾移植研究的模型要求。     

改良双肾移植法建立大鼠肾移植急性排斥反应模型

应用双肾移植法建立大鼠肾移植模型，操作难度小，成功率高，术后经病理切片证实为急性排斥反应，环孢素A可明显抑制该反应。     

简单条件下大鼠肾移植模型的建立

目的探讨在简单条件下,稳定的、用于移植后早期免疫功能等实验研究的大鼠肾移植模型的建立方法。方法以Wistar大鼠为供体,Sprague Dawley大鼠为受体。取供体大鼠左肾,移植物包括与肾静脉相连的下腔静脉段,与肾动脉相连的腹主动脉段,以及与输尿管相连的供体膀胱瓣,经腹主动脉原位低温灌注6～8mL4℃肝素生理盐水。受体手术于裸眼下完成,供体下腔静脉与受体下腔静脉、供体腹主动脉与受体腹主动脉行端侧吻合,供体输尿管带膀胱瓣与受体膀胱两定点连续缝合。结果共完成50例异体肾移植大鼠模型,存活41例,手术成功率82%,存活时间（6.3±1.6）d。供体手术时间（44.8±7.4）min、受体手术时间（59.0±6.6）min、动脉吻合时间（15.9±2.3）min、静脉吻合时间（14.2±2.7）min、尿路重建时间（5.3±0.8）min、热缺血时间（55.7±4.5）s和冷缺血时间（55.1±5.9）min。结论建立此模型所需要的实验条件简单,术者容易掌握,移植成功率高。     

供体存在副肾动脉时大鼠肾移植模型的建立

目的 解决大鼠原位肾移植过程中供体出现副肾动脉时供肾循环难以建立的问题.方法 9例供肾存在副肾动脉,其中2例结扎副肾动脉后行肾动脉端端吻合;7例利用受体正常肾动脉在接近肾门处2到3支分支,修剪出2个吻合端,端端吻合供肾的2条肾动脉.结果 结扎副肾动脉吻合肾动脉后出现肾脏血液灌注不良以及缺血坏死,应用新设计的方法可建立良好的供肾血液循环.结论 利用新方法,解决了供肾存在副肾动脉的情况下建立的大鼠原位肾移植问题,节约了试验动物.     

肾动脉内套法建立大鼠肾移植模型

目的探索一种操作简单、成功率高的建立大鼠肾移植模型的手术方法。方法选择SD大鼠24只作为供体,Wistar大鼠48只作为受体,采用。肾动脉内套法建立大鼠。肾移植模型。所有受体大鼠均接受左侧原位肾移植,自体右肾切除。受体大鼠动脉重建借助自制动脉套管将受体肾动脉内套人供肾动脉,缝线固定及3点外膜加固行肾动脉重建,受体肾静脉与供体后腔静脉借助自制导管行端一端吻合,尿路改建采用供体输尿管膀胱瓣与受体膀胱吻合。结果研究共实施48例大鼠肾移植术。24只供体大鼠平均手术时间（354±6）min,供肾修整时间（3．9±1．2）rain,供肾热缺血时间（5．7±1．5）s,冷缺血时间（52±6）rain。48只受体大鼠手术时间（39±6）min,动脉吻合时间（6．9±2．5）min,静脉吻合时间（14．2±2．3）min,尿路重建时间（6．6±1．1）min。术后3d内,2只大鼠因血管吻合口出血死亡,2只因移植肾动脉内血栓形成死亡,1只因尿瘘致腹膜炎死亡,其余43只大鼠均获手术成功,成功率89．6％。截至术后14d,共7只受体大鼠存活,所有受体大鼠中位存活时间6d10结论肾动脉内套法操作简单,受体大鼠成功率高,初学者掌握快,易于推广。     

大鼠慢性移植肾肾病动物模型的制作经验总结

目的 总结制作稳定的大鼠慢性移植肾肾病(CAN)动物模型的经验.方法 以F344近交系大鼠为供者,取供者左肾作为供肾,原位低温灌注;以Lewis近交系大鼠为受者,行左侧原位肾移植,供肾动脉与受者腹主动脉端侧吻合,供肾静脉与受者肾静脉端端吻合,输尿管带膀胱瓣与受者膀胱吻合.术后用环孢素A灌胃10 d,剂量为10 mg·kg-1·d-1.每月采集受者血液和尿液,测定血肌酐及24 h尿蛋白,分别于术后2、4个月获取移植肾进行病理检查.结果 45只进行移植,手术成功率为85%,单次手术时间为(120±20)min.移植后1个月,大鼠即出现血肌酐、尿素氮及血胱抑素升高,24 h尿蛋白增加,与术前相比,各项指标均升高(P<0.05);术后2个月及4个月,除尿蛋白继续增加外,其余观察指标上升不明显.移植术后2个月,移植肾有轻度至中度的间质纤维化,淋巴细胞和浆细胞的浸润;4个月时,移植肾可见广泛的间质纤维增生,间质细胞大量浸润,肾小球基底膜增厚、硬化、闭塞,肾小管萎缩退化,符合CAN的病理改变.结论 通过充分的手术强化训练及改进,规范大鼠取、肾、移植术中、术后管理的每个细节,大鼠CAN模型的成功率及稳定性高.

Abstract：

Objective To summarize the experience of establishing the stable rat model of chronic allograft nephropathy. Methods We used Fisher rats as donors and Lewis rats as recipients.After the left kidney of the donor perfused in situ under hypothermic condition, the left renal vein,abdominal aorta and bladder flap of the donor was anastomosed with the left renal vein, renal artery and bladder of the recipient, respectively. The recipients were given cyclosporin oral solution 10 mg/kg every day by gavage for 10 days after transplantation. The blood and urine samples were collected 1 month, 2 months and 4 months after transplantation and renal function and total urine protein were examined. The pathological changes of the renal allograft were observed 2 and 4 months after transplantation. Results Forty-five rats received operation and achievement ratio was 85%. The renal transplantations were finished in 120 ± 20 min. The Scr, BUN, Cycs and total urine protein demonstrated a significant increase one month after transplantation. On the second and fourth month,with the exception of urine protein continued to increase, the other indicators did not change significantly. Two months after transplantation renal pathology demonstrated light to moderate interstitial fibrosis, infiltration of lymphocytes and plasma cells. At 4th month the renal allografts showed extensive interstitial fibrosis, a large number of infiltrating interstitial cells, thickening,hardening, occlusion of glomerular basement membrane, and renal tubular atrophy that were consistent with pathological changes of chronic allograft nephropathy. Conclusion Through adequate surgical training and improvement, and specification for rat nephrectomy, transplantation surgery,and postoperative management in every detail, the model with high success rate and stability can be achieved.     

大鼠胰十二指肠移植动物模型的制作

目的　建立大鼠腔静脉内分泌引流、肠道外分泌引流的动物模型。方法　雄性SD大鼠为供受者,供体鼠门静脉与受体鼠左肾静脉行袖套吻合,形成腔静脉内分泌引流;供者腹主动脉与受者腹主动脉行端侧吻合;供者十二指肠与受者近端空肠行侧侧吻合。结果　5 0只药物诱导的糖尿病大鼠移植术后超过2 4h者46只,手术时间为(93±7)min。移植前大鼠血糖为(2 8.3±1.7)mmol/L ,移植后43只大鼠血糖降至正常水平。结论　该模型方法简单易行,可作为胰腺移植的理想模型     

大鼠肝移植小移植物模型的研究

目的 建立大鼠肝移植小移植物模型，探讨移植物体积对受体生存的影响。方法 48只雄性SD大鼠随机分为4组：70％肝切除组(A组)、全肝移植组(B组)、中等移植物组(C组)、小移植物组(D组)。观察各组大鼠生存率。于术后不同时间点，采取外周静脉血检测肝功能；行肝组织常规组织学及透射电镜检测。结果 D组第3天生存率为56％，显著低于A、B、C组(P＜0．01)；各时间点D组各生化指标均显著高于其他3组(P＜0．01)；A、C和D组肝脏组织学以肝细胞再生的表现为主，B组以淋巴细胞浸润为主。D组术后第3天光镜下和透射电镜检查可见分裂肝细胞；第21天移植肝体积已达正常水平。结论 大鼠肝移植小移植物模型供肝量应超过全肝重量的45％。影响小移植物成活的主要因素是缺血—再灌注损伤和手术技术。     

大鼠同种异体穿透性角膜移植排斥模型的建立与评价

目的:远交系Wistar大鼠与SD大鼠行穿透性角膜移植,评价其作为角膜移植排斥模型的可行性,并总结操作体会、技术特征。方法:Wistar大鼠右眼作为受体,SD大鼠双眼作为供体,行穿透性角膜移植,供体角膜植片靠近角膜缘取材,受体术后保留缝线,观察角膜移植排斥反应发生的进程。结果:异体角膜移植组排斥反应在术后(9.65±0.77)天出现,排斥反应发生率100%;自体角膜移植组无排斥反应发生。两组80例模型术后并发症:瞳孔不圆9例,虹膜前粘连6例,白内障4例,眼内感染3例,虹膜脱出3例。结论:远交系Wistar大鼠和SD大鼠行穿透性角膜移植,可作为角膜移植排斥模型用于模拟人类角膜移植排斥反应进行相关临床和基础研究。选择MHC抗原差异大的品系、偏中心植片及保留缝线等方法可增加角膜排斥反应的发生率。熟练的显微手术技巧、锐利的手术器械、术前充分散瞳及术后前房形成是减少术后并发症的关键。     

用补体裂解片断C4d监测大鼠移植肾慢性排斥反应

目的探讨补体裂解片断C4d在监测大鼠肾移植后慢性排斥反应中的作用与意义。方法以封闭群Wistar大鼠为供者,SD大鼠为受者,建立大鼠肾移植模型。将42只受者随机平均分为2组,A组在肾移植术后10d内给予小剂量环孢素A(5mg·kg-1·d-1)治疗;B组除使用环孢素A外,另给予霉酚酸酯10mg·kg-1·d-1灌胃。术后第3、5和10周观察各组移植肾形态变化及移植肾组织中C4d沉积情况。结果从术后第3周起,A组开始出现轻微慢性排斥反应的病理改变,并随着时间的推移逐渐明显。B组于术后第5周开始出现慢性排斥反应的病理改变,程度轻于A组。术后第3周A组即出现明显C4d沉积,至第10周时沉积已较广泛。B组也有C4d沉积,但沉积程度较A组同时段轻(P<0.05)。结论移植肾组织中C4d的沉积早于慢性排斥反应的病理改变,可作为预测慢性排斥反应的有效指标。     

青藤碱对肾移植大鼠T细胞亚群的影响

目的：研究青藤碱(SIN)对肾移植大鼠T细胞亚群及肾功能的影响，探讨SIN免疫抑制作用的可能机制。方法：实验分四个组，采用改良式大鼠肾移植术行wistar—SD大鼠单肾移植，观测术后受体鼠的尿量、尿蛋白及血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)；用免疫组化法测定受体鼠外周血T细胞亚群。结果：与对照组比较SIN可增加受体鼠的尿量而降低其尿蛋白，并与CsA有协同影响；SIN、环孢素A(CsA)能降低受体鼠血BUN及Cr水平，亦见两药的协同作用。SIN能显著降低肾移植大鼠外周血T淋巴细胞，且主要是降低CD4^ T细胞，并与CsA有协同作用；SIN对CD8^ T细胞无明显影响，因而可使CD4^ T／CD8^ T比值下降，并与CsA有协同影响。结论：SIN对大鼠肾移植的急性排斥反应具有一定的抑制作用，并与低剂量CsA产生显著的协同效应。SIN免疫抑制作用机制可能是抑制T细胞亚群，且主要是抑制CD4^ T细胞，使CD4^ T／CD8^ T比值下降。     

Prolongation of rat renal allograft survival time by donor pretreatment with 8-methoxypsoralen and longwave ultraviolet irradiation of the graft (PUVA therapy)

Summary Pretreatment of the kidney donor with 8-methoxypsoralen (8-MOP) and ex vivo longwave ultraviolet irradiation (UVA) of the kidney prolonged the subsequent survival on allogeneic recipients. The efficacy of this treatment seems to be dependent on the time and dose of UVA irradiation rather than on the dose of 8-MOP. In conclusion, PUVA treatment is effective in reducing the immunogenicity of the rat kidney allograft, although the mechanism remains unclear. These experimental findings are new and preliminary results in clinical human kidney transplantation are favourable.     

Influence of acute selective endothelin-receptor-A blockade on renal hemodynamics in a rat model of chronic allograft rejection

We have recently demonstrated up-regulation of renal endothelin (ET) synthesis in a rat model of chronic renal allograft rejection. Treatment with a selective ET-A receptor antagonist improved survival and reduced functional and morphological kidney damage. However, the underlying mechanisms have not yet been elucidated, as ET exhibits both hemodynamic and inflammatory properties. Therefore, in the present study we investigated acute hemodynamic effects of the selective ET-A receptor antagonist LU 302146 (LU) on chronic renal allograft rejection in rats. Experiments were performed in the Fisher-to-Lewis model of chronic renal allograft rejection. Lewis-to-Lewis isografts served as controls. After 2, 12, and 24 weeks, hemodynamic measurements were performed on anesthetized animals. Measurement of mean arterial pressure (MAP) was performed via a catheter in the femoral artery. Renal blood flow (RBF) was measured by an ultrasonic flow probe placed around the renal transplant artery. Medulla blood flow (MBF) and cortex blood flow (CBF) were determined with laser Doppler probes. Hemodynamic response upon intravenous bolus injection of LU (50 mg/kg) was investigated. The application of LU was followed by a decline in MAP that reached statistical significance only in isografts (ISOs) after 12 weeks and allografts (ALLOs) after 24 weeks. RBF slightly decreased in all groups; however, without reaching statistical significance. MBF showed a small increase in ALLO12 and ALLO24 whereas CBF slightly decreased in all groups. Acute ET-A receptor blockade does not induce important hemodynamic effects in kidneys undergoing chronic rejection. The lack of response to ET-A receptor blockade suggests that the beneficial effect of ET receptor antagonists in this model is likely to be due to improvement of renal morphology.