灯盏细辛对大鼠脑缺血再灌注后NF-κB表达的影响

目的 探讨灯盏细辛对大鼠脑缺血再灌注后核因子κB(NF-κB)表达的影响.方法 采用改良的Zea Longa线拴法建立大鼠左侧大脑中动脉动物缺血再灌注模型模型(MCAO).再灌注后用药组立即将灯盏细辛45 mg/kg由腹腔注射,对照组以相同剂量的生理盐水注射.于再灌注后6,24,48 h用免疫组化方法检测NF-κB表达的变化.结果 6 h时,用药组NF-κB蛋白表达较盐水组减少,但差异无显著性(P＞0.05);24h时,用药组较盐水组明显减少(P＜0.01);48 h时,用药组NF-κB蛋白表达较盐水组减少,差异有显著性(P＜0.05).结论 灯盏细辛可抑制NF-κB激活,达到脑保护作用.     

灯盏细辛注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤后梗死面积比和波谱的影响

目的研究大鼠脑缺血再灌注后梗死面积比的变化、T2加权像(T2WI)以及波谱变化,探讨灯盏细辛注射液在脑缺血再灌注损伤中的作用。方法采用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注不同时间点模型,观察灯盏细辛注射液对脑缺血1.5h再灌注24、48、96h的T2WI和局域质子谱显示的一些代谢分子N-乙酰天门冬氨酸(NAA)、肌酐(Cr)、胆碱(Cho)的影响,取出脑组织进行红苯氮唑(TTC)染色测定脑梗死面积比。结果模型组缺血侧再灌注24h显示出高信号强度区,与体外取出大脑进行的TTC染色相比,缺血位置大致相同。波谱检测显示在24hNAA/Cr减小,Cho/Cr增大,96h这种趋势继续增大。灯盏细辛注射液治疗组NAA/Cr、Cho/Cr值与同时间点模型组相比,均有所改善。TTC染色显示灯盏细辛治疗后减小了脑梗死面积比。结论灯盏细辛注射液能对脑物质代谢产生影响,减轻脑梗死,从而对脑缺血再灌注损伤起到一定程度的改善作用。     

尼莫通对大鼠脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响

①目的 探讨尼莫通过大鼠脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响。②方法 对实验大鼠于脑缺血前应用尼莫通进行干预,在脑缺血再灌注不同时间内,用免疫组化法检测凋亡相关基因ｃ－ｆｏｓ及ｂｃｌ－２蛋白表达的变化。③结果 尼莫通组大鼠脑缺血后的梗死体积显著减小（ｔ＝２．７９,Ｐ〈０．０５）;尼莫通组脑缺血再灌注时皮层和基底核区ｃ－ｆｏｓ的表达明显下降（ｔ＝４．８４,６．１４,Ｐ〈０．００１）,而ｂｃｌ－２蛋白的表达明     

大鼠局守脑缺血再灌注后GM1的保护作用及其对细胞凋亡的影响

为了探讨大鼠局灶脑缺血再灌注后单唾液酸神经节苷（ｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅ,ＧＭ１）的保护作用及其对细胞凋亡的影响。我们采用栓线法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌腹腔注射给予ＧＭ１,利用ＴＵＮＥＬ法检测细胞凋亡情况,并对病理学改变进行观察。结果：正常对照组假手术组偶可见凋亡细胞,缺血再灌注组可见大量凋亡细胞主要位于梗塞边缘区内侧,而ＧＭ１用药组与缺血再灌注组相比,凋亡细胞明显减少。光镜及电镜观察发现,缺血再     

地塞米松对大鼠脑缺血再灌注后神经元凋亡的影响

目的：探讨凋亡机制在地塞米松（DXM）加剧脑局灶缺血再灌注后神经元损伤中的意义。方法：缺血前3天始腹腔注射DXM,采用线栓法大鼠右侧大脑中动脉阻塞检测,TTC染色后测定脑梗死体积,TUNEL法标记凋亡阳性细胞。结果：应用DXM大鼠缺血再灌注后脑梗死体积较对照组明显增加,不同剂量DXM组间脑梗死体积差别无显著性意义;应用DXM大鼠细胞凋亡指数较对照组明显增加,且不同剂量DXM组之间细胞凋亡指数差别有显著性意义。结论：DXM诱导缺血再灌注后神经的凋亡可能是引起局灶缺血再灌注损伤加剧的机制之一。     

大鼠小脑缺血再灌注损伤的细胞凋亡航尼莫通的保护作用

目的：探讨小脑缺血再灌注损伤神经元的死亡方式及尼莫通的保护作用。方法：将实验用ＳＤ大鼠１５只分为三组，即缺血再灌组、药护组、正常对照组。采用四血管闭塞法制作全脑缺血再灌注动物模型，再灌后４８小时取小脑，石蜡包埋切片。应用末端转移酶介导的缺口末端标记法原位检测凋亡细胞。药护组缺血前３０分钟腹腔注射尼莫通。结果：在小脑皮质及小脑核均见反应阳性的凋亡细胞，药护组的凋亡细胞数显著少于缺血组。结论：细胞凋亡     

山楂叶总黄酮对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡的保护作用

目的：探讨山楂叶总黄酮（FMCL）对脑缺血再灌注(CIR)损伤的保护作用及其可能机制。方法：将大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组（舒血宁1.8 mg•kg^-1）及山楂叶总黄酮高、中、低（100 、30和10 mg•kg^-1）剂量组，采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型；流式细胞仪检测神经细胞凋亡率；原位末端标记（TUNEL）法测定神经细胞凋亡；免疫组化染色观察凋亡相关蛋白Fas、细胞色素C(CytC)蛋白表达的变化。结果：与模型组比较，山楂叶总黄酮高剂量组TUNEL染色阳性细胞数明显减少（P<0.01），凋亡率明显下降（P<0.01）；与模型组比较，山楂叶总黄酮高和中剂量组CytC蛋白表达明显降低（P<0.05或P<0.01），Fas蛋白表达无明显变化。结论：山楂叶总黄酮可抑制脑缺血再灌注后神经细胞凋亡，其机制可能与抑制线粒体Cyt C通路的凋亡有关。     

不同脑温对全脑缺血再灌注后相关基因及细胞凋亡的影响

目前国内外学者开始尝试低温治疗脑缺血、脑出血和重型颅脑外伤 [1 ] ,但是脑缺血后脑温控制到何种程度方可发挥最大的脑保护作用 ,同时又不产生严重的并发症 ,至今尚未见统一的标准。为此 ,本研究以大鼠全脑缺血再灌注模型 ,观察不同程度降温对脑缺血后海马 CA1 区的 c- fos和大脑皮质bcl- 2相关基因以及脑细胞凋亡表达的影响。1　材料与方法1.1　动物及分组　健康雄性 Sprague- Dawley(SD)大鼠 ,体重 2 5 0± 15 g,随机分为假手术组和脑缺血组 ,后者再分为常温 (37～ 38℃ )组、亚低温 (31～ 32℃ )组和高温 (41～ 42℃ )组 ,每组 6只…     

灯盏细辛对大鼠缺血-再灌注损伤的保护作用

目的:评价灯盏细辛对大鼠缺血-再灌注损伤的保护作用.方法:将40只SD大鼠随机分为两组,分别为生理盐水组和灯盏细辛治疗组,每组20只.①生理盐水组,造模成功后,每天给予1ml/100g生理盐水腹腔注射.②灯盏细辛治疗组,造模成功后,每天给予1ml/100g灯盏细辛注射液腹腔注射.7 d后处死动物,取脑,每组10只行TTC染色,测量梗死体积,计算出梗死体积百分比;10只行免疫组化染色,测量MMP-9表达水平.结果:灯盏细辛治疗组和生理盐水组梗死体积百分比分别为(8.01±0.86)%和(9.49±0.76)%,灯盏细辛治疗组有减小梗死体积的趋势,但两组无显著性差异;脑组织免疫组化染色MMP-9表达分别为(31.89±12.50)和(37.08±6.05);两组有显著性差异.结论:灯盏细辛可显著降低MMP-9表达及减小梗死体积,对缺血脑组织具有保护作用.     

替勃龙对大鼠脑缺血再灌注后神经元凋亡的影响

目的:研究雌激素对缺血性脑损害的神经保护作用是否与抗神经元凋亡有关。方法:30只雌性成年SD大鼠,随机分为假手术组(sham),手术对照组(OVX),替勃龙组\[0.25 mg/(kg·d)\];采用大鼠大脑中动脉闭塞制成局灶性脑缺血模型。在缺血2 h、再灌注24 h后立即断头取脑,应用2,3,5-三苯基氯化四唑(TTC)染色观察脑梗死体积,TUNEL法检测凋亡细胞,链酶菌抗生物素蛋白过氧化物酶(SP)法检测抗凋亡基因Bcl-2、细胞凋亡诱导因子Bax和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶caspase-3的表达。结果:替勃龙用药组较手术对照组脑梗死体积显著缩小(P<0.05),TUNEL阳性细胞数减少(P<0.01),Bcl-2阳性细胞增多(P<0.01),Bax及caspase-3阳性细胞减少(P<0.01)。结论:替勃龙可抑制去卵巢大鼠局灶性脑缺血再灌注时神经细胞凋亡,具有神经保护作用。     

藻蓝蛋白对大鼠脑缺血再灌流后神经元损伤的保护作用

目的　探讨大鼠脑缺血再灌流后神经元损伤的机制以及藻蓝蛋白对神经元的保护作用。方法　用线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌流模型 (MCAO) ,分别对假手术组、模型对照组、藻蓝蛋白组进行神经功能缺失评分 ,用TTC染色法测量脑梗死体积 ,用干湿重法计算脑的含水量 ,应用原位末端标记 (TUNEL)观察脑缺血再灌流不同时间点神经元凋亡的变化。结果　 (1)在大鼠脑缺血再灌流后 2小时应用藻蓝蛋白 ,能够明显改善神经功能缺失症状 ,脑缺血再灌流后 2 4小时 ,藻蓝蛋白组的Bederson神经功能评分与模型对照组间差别有显著性意义 (P <0 0 5 ) ,且这种差异一直持续到脑缺血再灌流后 4 8小时。藻蓝蛋白还能够缩小脑梗死的体积 ,脑缺血再灌流后 4 8小时 ,藻蓝蛋白组的脑梗死体积与模型对照组间差别有显著性意义 (P <0 0 5 )。藻蓝蛋白还能够减轻脑水肿 ,使脑组织的含水量明显减少。 (2 )模型对照组 ,脑缺血再灌流后凋亡神经元主要分布于缺血周围区 ,随着再灌流时间的延长 ,凋亡细胞数逐渐增加 ,至 2 4小时达高峰 ,2天开始下降 ,14天时与假手术组间差别仍有显著性意义 (P <0 0 5 )。藻蓝蛋白组凋亡细胞的数量相对较少 ,其变化规律与模型对照组相似 ,同一时间点相比较 ,藻蓝蛋白组与模型对照组间差别有显著性意义     

全身亚低温对脑缺血再灌流损伤神经细胞凋亡及Caspase-3的影响

目的 探讨亚低温对大鼠局灶性脑缺血再灌流后神经细胞凋亡及Caspase-3基因表达的影响。方法 应用原位末端标记(TUNEL)和原位杂交技术分别观察亚低温组、常温组脑缺血再灌流不同时间点神经细胞凋亡的变化及Caspase-3 mRNA的表达。结果 (1)常温组脑缺血再灌流后凋亡神经细胞主要分布于缺血周围区，随着再灌流时间的延长凋亡细胞数逐渐增加，至24小时达高峰，2天后开始下降，14天时仍高于假手术组；(2)亚低温组脑缺血再灌流后，凋亡神经细胞也主要位于缺血周围区，数量相对较少，其变化规律与常温组相似，同一时间点相比较，亚低温组均显著低于常温组；(3)常温组脑缺血再灌流2小时后，神经细胞Caspase-3 mRNA开始表达，并随着再灌流时间的延长而增强，24小时达高峰，2天后逐渐下降，至14天略高于假手术组；(4)亚低温组脑缺血再灌流后，神经细胞Caspase-3 mRNA的表达也主要位于缺血周围区，其变化规律与常温组相似，同一时间点相比较，亚低温组均显著低于常温组。结论 脑缺血再灌流后。缺血周围区神经细胞的凋亡是一个动态的渐进过程，Caspase-3基因在介导脑缺血损伤神经元凋亡过程中起关键作用。亚低温对短暂性脑缺血后的神经元凋亡有明显的抑制作用，亚低温可能通过Caspase-3 mRNA途径抵抗脑缺血损伤。     

高血压对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡的影响

目的:通过观察高血压对大鼠脑缺血再灌注后神经功能和细胞凋亡的影响,探讨高血压加重缺血性脑损伤的机制。方法:将Wistar雄性大鼠随机分为肾性高血压缺血再灌注组(HIR),正常血压缺血再灌注组(IR)和假手术组(N),采用大脑中动脉线栓法造成大脑缺血再灌注模型,缺血时间为2h,再灌注24h。进行神经功能评分后取脑,采用免疫组织化学技术检测脑组织bcl-2、Bax的表达,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:正常血压缺血再灌注组神经功能评分低于肾性高血压缺血再灌注组(P<0.05)。肾性高血压缺血再灌注组与正常血压缺血再灌注组比较,bcl-2表达明显减少(P<0.05),Bax表达明显增多(P<0.05),神经细胞凋亡明显增多(P<0.05)。结论:高血压通过增加Bax表达、抑制bcl-2表达,促进脑细胞凋亡,加重缺血再灌注后脑损伤。     

瑞芬太尼对大鼠全脑缺血再灌注后神经元凋亡和半胱天冬酶-3表达的影响

目的 观察瑞芬太尼对大鼠全脑缺血再灌注损伤后海马神经细胞凋亡和半胱天冬酶(Caspase)-3表达的影响.方法 80只大鼠随机分为假手术(sham)、NS、REM2、REM6和REM20组,每组16只.NS、REM2、REM6和REM20组分别于缺血再灌注前静脉滴注0.9%氯化钠溶液及瑞芬太尼2、6、20μg·kg~(-1)·min~(-1).采用双侧颈总动脉阻断+低血压法建立大鼠短暂性全脑缺血模型.于全脑缺血前30 min由靶控微量注射泵经股静脉注射瑞芬太尼,并于双侧颈总动脉阻断前及开放后10 min进行动脉血血气分析.再灌注后24 h,每组各取8只大鼠,取其新鲜海马组织,采用实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组Caspase-3 mRNA的表达.再灌注后72 h,取剩余大鼠,灌注取脑,制作脑组织切片,采用苏木精伊红(H-E)染色和原位末端标记法(TUNEL法)观察各组大鼠海马退变的神经元数和凋亡细胞数,采用免疫组织化学法检测各组Caspase-3蛋白的表达.结果 ①H-E染色结果:sham组偶可见退变的锥体细胞,缺血再灌注72 h后,NS组及各瑞芬太尼预处理组海马退变的神经元数较sham组显著增加(P值均<0.05),REM6及REM20组海马退变的神经元数较NS组显著减少(P值均<0.05).②TUNEL法检测结果:sham组未见TUNEL阳性细胞,缺血再灌注72 h后,NS组及各瑞芬太尼预处理组海马CAI区的凋亡锥体细胞数较sham组显著增加(P值均<0.05),REM6和REM20组海马CAI区的凋亡锥体细胞数较NS组显著降低(P值均<0.05).③免疫组织化学法检测结果:sham组可见少量Caspase-3免疫阳性细胞,缺血再灌注72 h后,NS组及各瑞芬太尼预处理组海马区Caspase-3蛋白的免疫阳性细胞数较sham组显著增多(P值均<0.05),各瑞芬太尼预处理组Caspase-3蛋白的免疫阳性细胞数显著低于NS组(P值均<0.05),REM6和REM20组Caspase-3蛋白的免疫阳性细胞数显著低于REM2组(P值均<0.05).④实时RT-PCR结果:sham组大鼠海马组织中Caspase-3 mRNA呈低水平表达,缺血再灌注24 h后,NS组及各瑞芬太尼处理组Caspase-3 mRNA的表达水平较sham组显著升高(P值均<0.05),REM6组Caspase-3 mRNA的表达较NS组显著降低(P<0.05).结论 瑞芬太尼预处理(以6 μg·kg~(-1)·min~(-1)为佳)对全脑缺血再灌注后的神经元损伤具有一定的保护作用,其机制可能与抑制神经元凋亡及下调Caspase-3基因有关.     

盐酸法舒地尔对脑缺血再灌注大鼠神经元形态和Caspase-9 mRNA表达的影响

目的观察盐酸法舒地尔对脑缺血再灌注大鼠神经元损伤的保护作用。方法建立脑缺血再灌注大鼠模型,采用Caspase-9mRNA原位杂交技术,DAB显色,光镜观察细胞浆呈棕黄色为阳性细胞。经图像分析阳性细胞的数量,观察盐酸法舒地尔对脑缺血再灌注损伤大鼠神经元的保护作用。结果盐酸法舒地尔治疗组与模型组比较,Caspase-9mRNA阳性细胞平均密度减小(模型组4.83±0.49,治疗组2.2±0.30),平均灰度值增大(模型组123±7,治疗组191±8),组间比较有明显差异(P<0.05)。结论盐酸法舒地尔对脑缺血再灌注损伤大鼠神经元有一定的保护作用。     

灯盏花素磷脂复合物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察灯盏花素磷脂复合物(Ber-PC)对脑缺血再灌注大鼠脑损伤的影响.方法 复制大鼠大脑中动脉脑缺血再灌注损伤模型,观察缺血后大鼠神经功能障碍情况,测定再灌注后缺血侧脑梗死范围及脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性及丙二醛(MDA)的含量.结果 Ber-PC剂量依赖性减轻脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能障碍,减少脑梗死面积,拮抗缺血脑组织MDA含量的增加,提高脑组织SOD、GSH-PX活性.结论 Ber-PC对脑缺血再灌注损伤大鼠具有明显的保护作用,具有良好的新药开发前景.     

脑心康片对大鼠脑缺血再灌注损伤后凋亡相关基因Caspase-3表达的影响

[目的]观察脑心康片对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,进一步探讨其作用机制。[方法]Wistar大鼠雄性70只,按照体质量随机分为7组,每组10只。即脑心康片高剂量组、中剂量组、低剂量组、尼莫地平组、银杏叶片组、模型组和假手术组,分别给等体积生理盐水,各组均连续灌胃给药7d。末次给药30min后,采用大鼠大脑中动脉线栓法制备不完全脑缺血模型,观察脑心康片给药前后大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠神经功能缺损导致的行为学变化;免疫组织化学法检测脑心康片对脑缺血后24、48、72h脑组织半胱氨酰天冬氨酸激酶-3(Caspase-3)蛋白表达的影响。[结果]脑心康片能明显改善脑缺血大鼠的神经功能缺损症状,抑制Caspase-3蛋白的表达。[结论]脑心康片对脑缺血具有保护作用,遵循一定的时效关系和量效关系,其机制可能与脑心康片抑制凋亡相关基因的表达,进而抑制神经元细胞凋亡有关。     

血栓通对脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡影响的研究

目的 研究血栓通在脑缺血再灌注过程中对神经细胞的作用机理,特别是血栓通与细胞凋亡的关系。方法 利用末端标记法,测定血栓通干预后脑缺血鼠脑组织中神经细胞的凋亡情况。结果 血栓通能明显降低神经细胞凋亡百分率,降低凋亡神经细胞积分光密度,减轻病理损害。结论 血栓通可显著抑制缺血再灌注诱导的脑神经细胞凋亡,起到一定程度的神经保护作用。     

针刺对缺血再灌注大鼠脑细胞凋亡的保护作用及机制

Objective To investigate the protective effect and mechanisms of acupuncture on the mem-brane potential in mitochondria of the brain cells injury induced by ischemia and reperfusion. Method The mid-dle cerebral artery occlusion/repeffusion (MCAO/R) rat model was established by the modified Longa occlusion method. The Baihui and Shuigou Point in Du meridian was acupunctured electrically 30 min. After reperfusion 24 h and 48 h, mitochondrial membrane potential, apoptosis and mitochondria ultrastrocture of brain cells were detected by the method of Rhodamin123 fluorescence staining,TUNEL in situ labeling and electron microscopy respectively after repeffusion 24 h and 48 h. Results The fluorescence intensity of Rhodamin123 was 961.27±34.22 and 1231.23±121.54 after focal cerebral ischemic reperfusion 24 h and 48 h respectively,this result was increased to compare with sham-operated group. The fluorescence intensity of Rhodamin 123 in group of using the intervention of acupuncture was 808.44±56.23 and 954.25±35.11 after operation 24 h and 48 h respectively ,this values de-creased significantly to compare with the group of ischemic reperfusion. The amount of apoptosis cells after cerebral ischemia reperfusion 24 h and 48 h were more than the sham group. The amount of apoptosis cells after acupuncture was less than the cerebral ischemic reperfusion group. The mitochondrial membrane shown intumesee,disaggrega-tion, endocrista collapsing and toxic granulation increased after ischemie reperfusion and this non-specificity change of mitochondrion alleviated by using acupuncture. Conclusion Acupuncture stabilized the permeability of mitochon-drial membrane, reduced the dissipation of mitochondrial transmembrane potential, decreased the amount of apopto-sis of brain cells of ischemic reperfusion and increased the toleration of brain against the ischemic and anoxie inju-ry. Conclusion Acupuncture could stabilized the permeability of mitochondria membrane. It could decreased the dissipation of cytochondriome transmembrane potential and the amount of apoptosis of brain cells. It could increased the toleration of brain against the ischemic and anoxic injury.     

米诺环素对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡的抑制作用

目的 观察米诺环素对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡的影响.方法 30只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为假手术组、氯化钠溶液组、预处理组、大剂量组、小剂量组,每组6只.采用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型.采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学、Hoechst染色、磁共振T2加权像等方法,了解米诺环素对缺血后细胞凋亡的影响.结果 假手术组可见少量半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3阳性细胞,氯化钠溶液组缺血灶周围可见大量caspase-3阳性细胞.与假手术组相比,氯化钠溶液组的caspase-3光密度值显著升高(P＜0.01);与氯化钠溶液组相比,预处理组、大剂量组、小剂量组的caspase-3光密度值均显著降低(P值分别＜0.05、0.01).假手术组大鼠大脑皮层只有少量凋亡细胞,氯化钠溶液组大鼠脑缺血灶周围可见大量凋亡细胞.与假手术组相比,氯化钠溶液组的细胞凋亡率显著降低(P＜0.01);与氯化钠溶液组相比,预处理组、大剂量组、小剂量组的细胞凋亡率均显著升高(P值均＜0.01).与氯化钠溶液组相比,预处理组、大剂量组、小剂量组的相对脑缺血体积均显著缩小(P值分别＜0.05、0.01).与假手术组相比,氯化钠溶液组白细胞介素-1β转化酶(ICE)的表达显著升高(P＜0.05);与氯化钠溶液组相比,预处理组、大剂量组、小剂量组ICE的表达均显著降低(P值均＜0.05).结论 米诺环素能抑制缺血后细胞凋亡.