儿童感染肺炎克雷伯菌产AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析

目的了解广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产质粒介导的AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特征,为临床合理用药提供参考依据。方法采用标准纸片扩散法检测ESBLs,头孢西丁三维试验法检测AmpC酶,K-B纸片法测定肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性。结果共检出248株肺炎克雷伯菌,其中46株产AmpC酶,阳性率为18.5%;157株产ESBLs,阳性率为63.3%;同时产AmpC酶和ESBLs菌株阳性率为18.1%。产AmpC酶肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素高度耐药,耐药率达80%～100%;对头孢吡肟、含酶抑制剂复合药的耐药率也在56.5%～93.5%之间;但对环丙沙星、阿米卡星的耐药率则在30%以下,对亚胺培南全部敏感。产ESBLs菌株对头孢菌素、含酶抑制剂复合药的耐药率也较高,在50%～91.7%之间,但对阿米卡星、环丙沙星、亚胺培南仍高度敏感。ESBLs阴性肺炎克雷伯菌对所测抗生素的敏感率均在81.2%以上。产酶菌株耐药率明显比非产酶菌株高。结论广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的状况已十分突出;产酶菌株对常用抗生素的耐药率较高;碳青霉烯类抗生素可作为治疗产AmpC酶和/或E...     

产ESBLs与AmpC大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的基因型分析

目的 了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)与AmoC酶大肠埃希菌(escherichia coli,ECO)和肺炎克雷伯菌(klebsiella pneumoniae,KPN)的基因型特征.方法 用表型确证试验从临床分离的74株ECO和KPN中筛选出16株产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases,ESBLs)、4株产AmpC酶及25株产ESBLs AmpC菌株.应用多重聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR),扩增菌株的TEM,SHV和CTX-M-G1型超广谱β-内酰胺酶基因和DHA-1,ACT-1型AmpC酶基因,并对PCR产物经凝胶电泳后进行初步的分析.结果 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌携带TEM,SHV,CTX-M-G1,DHA-1和ACT-1基因的检出率分别为54.2%,50.0%,62.5%,57.1%,35.7%;29.4%,52.9%,41.2%,66.7%,46.7%.相当一部分菌株同时携带2种或2种以上的基因型.结论 产ESBLs与AmpC酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为多重耐药菌株,存在多种耐药基因.应采取积极的措施防止产酶菌株的流行.     

产超广谱β-内酰胺酶和质粒AmpC酶肺炎克雷伯菌耐药性检测

目的探讨泰安市产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和质粒AmpC酶肺炎克雷伯菌的耐药性。方法2005年1月至2006年7月我院临床分离的肺炎克雷伯菌251株,用Kirby-Bauer法进行药敏试验,根据NC-CLS2002年判断标准分析结果。结果251株肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs和高产AmpC酶154株,检出率61.4%,其中单产ESBLs143株,单产AmpC酶8株,同时产AmpC酶和ESBLs3株,总检出率分别为57.0%,3.19%和1.20%。其中3株同时产AmpC酶和ESBLs的肺炎克雷伯菌对头孢菌素、酶抑制剂、氨曲南、头孢西丁都耐药,1株对亚胺培南耐药。单产ESBLs肺炎克雷伯菌对头孢曲松、头孢噻肟、左氧氟沙星耐药率在70%以上,对美罗培南、亚胺培南敏感性好。单产AmpC酶的肺炎克雷伯菌对头孢菌素,酶抑制剂的抗菌药物都耐药,对亚胺培南,头孢吡肟敏感。结论产ESBLs和高产AmpC酶是导致肺炎克雷伯菌耐药的两类主要酶,产酶株对多种抗菌药物耐药,对美罗培南、亚胺培南敏感性好.     

肺炎克雷伯菌AmpC、ESBL的检测和耐药性分析

目的：分析肺炎克雷伯菌的耐药现状,检测ESBLs、AmpC酶的流行状况。方法：利用CLSI纸片法确认实验和APB纸片增强试验分别检测ESBLs和AmpC酶,用纸片扩散法检测82株肺炎克雷伯菌对16种抗生素的耐药情况。结果：单产ESBLs和AmpC酶分别占56.1%和9.8%。结论：肺炎克雷伯菌的耐药现象严重、多重耐药现象突出,ESBLs检出率高。     

肺炎克雷伯菌产ESBLs的检测与耐药情况分析

目的探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的流行趋势及耐药谱分析,为肺炎克雷伯菌感染防控提供抗生素使用的合理依据。方法采用法国生物梅里埃公司VITEK-2全自动细菌鉴定仪对2011-2013年广州医科大学附属第二医院住院患者各类标本进行分离鉴定,参照美国临床实验室标准化委员会(CLSI)推荐方法确认产ESBLs菌株,采用纸片扩散法(K-B)对检出的产ESBLs肺炎克雷伯菌的药敏结果进行分析。结果检出肺炎克雷伯菌486株,痰液的检出率最高占86.4%,感染人群以老年群体为主,超过60岁检出率为60.5%。产ESBLs菌株248株,总检出率为51.0%,对抗生素耐药率较高的依次为氨苄西林、头孢噻肟、庆大霉素、复方新诺明和氨曲南;亚胺培南的敏感性最高。结论肺炎克雷伯菌引起的感染以呼吸道为主,易感人群为老年人,产ESBLs的发生率较高,对三代头孢耐药严重,可优先考虑选用亚胺培南。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌感染呼吸道的危险因素分析

目的:探讨产ESBLs肺炎克雷伯菌感染呼吸道的危险因素。方法:收集123株肺炎克雷伯菌,采用双纸片协同法检测ESBLs,根据产ESBLs情况,把肺炎克雷伯菌分为A组(ESBLs阳性组,57株)和B组(ESBLs阴性组,66株),统计产ESBLs肺炎克雷伯菌的感染危险因素,采用χ2检验和多因素Logistic回归分析数据。结果:">60岁"、"ICU"、"侵入性操作"、"住院患者"、"住院天数>14 d"、"Charlson并发症指数>3"和"死亡"在A组和B组间的差异明显(P<0.01),"侵入性操作"和"住院天数>14 d"在A组和B组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:众多因素与产ESBLs肺炎克雷伯菌感染呼吸道关系密切,其中"侵入性操作"和"住院天数>14 d"是独立危险因素。     

脑外科医院获得性肺炎产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学研究

目的研究脑外科医院获得性肺炎(HAP)产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型。方法回顾性分析41例脑外科HAP产ESBLs肺炎克雷伯菌患者的临床资料,采用酶抑制剂增强法作ESBLs表型确证试验,纸片扩散法作药敏试验,聚合酶链反应(PCR)扩增ESBLs基因。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌的阳性率为85.42%;仅对亚胺培南、美罗培南敏感;几乎所有病例均存在不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受侵袭性操作等;SHV、CTX-M和TEM基因的检出率分别为73.17%(30/41)、63.26%(26/41)和14.63%(6/41);46.34%(19/41)的菌株同时携带多个基因。结论脑外科HAP产ESBLs肺炎克雷伯菌阳性率高、耐药情况严重,治疗应首选碳青霉烯类抗生素;不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受各种侵袭性操作可能是其危险因素;最常见的ES-BLs基因型是SHV,其次为CTX-M。     

清远地区产ESBLs肺炎克雷伯菌药敏分析与基因研究

目的：了解清远地区产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型分布。方法：按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的表型确证试验确定临床标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌224株,用Etest测定其最低抑菌浓度（MIC）,分别用TEM、SHV、CTX-M通用引物进行聚合酶链反应（PCR）,并对结果进行分析。结果： 清远地区产ESBLs肺炎克雷伯菌对多种抗生素耐药,对美罗培南的敏感率最高（88.9%）,其次是亚胺培南（83.9%）,哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星的敏感率分别为72.8%和70.2%。PCR扩增结果显示TEM、SHV和CTX-M基因的阳性率分别为45%、51.7%和76.3%,15.1%的菌株同时携带多个基因。结论：清远地区产ESBLs肺炎克雷伯菌对美罗培南的敏感率最高;最常见的基因型是CTX-M,其次为SHV、TEM。     

脑外科产ESBLs肺炎克雷伯菌医院获得性肺炎相关因素分析

目的　研究脑外科医院获得性肺炎 (HAP)产超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性、危险因素 ,并试图揭示菌株间的亲缘关系。方法　回顾性分析 2 0 0 2～ 2 0 0 3年脑外科HAP下呼吸道标本分离出产ESBLs肺炎克雷伯菌的临床资料 ;药敏试验采用Kirby -Bauer琼脂扩散法 ;表型确证试验检测ESBLs ;分层聚类分析研究菌株间抗生素亲缘关系。结果　产ESBLs肺炎克雷伯菌的阳性率为 86 96 % ;仅对亚胺培南、美罗培南敏感 ;几乎所有病例均存在不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受侵袭性操作等 ;抗生素亲缘关系分析将 2 0株菌分为 7个型。结论　脑外科HAP产ESBLs肺炎克雷伯菌阳性率高、耐药情况严重 ,治疗首选碳青霉烯类抗生素 ;不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受侵袭性操作可能是其危险因素 ;抗生素亲缘关系分析结论与流行病学情况不符 ,不宜单独用于菌株间亲缘关系分析。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学研究

目的研究获得性肺炎（HAP）产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型。方法回顾性分析18例感染产ESBLs肺炎免雷伯菌患者的临床资料．采用酶抑制剂增强法作ESBLs表型确证试验．纸片扩散法作药敏试验．聚合酶链反应（PCR）扩增ESBLs基因。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌的阳性率为78．3％；仅对亚胺培南、美罗培南敏感；几乎所有患者均存在不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受侵袭性操作等；SHV、CTX-M和TEM基因的阳性半分别为72．2％、61．1%和16．7％；44．4％的菌株同时携带多个基因。结论HAP产ESBLs肺炎克雷伯菌阳性率高、耐药情况严重．治疗应首选碳青霉烯类抗生素；不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受各种侵袭性操作可能是其危险因素；最常见的ESBLs基因型是SHV．其次为CTX—M。     

肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的检测及耐药性分析

目的了解聊城地区临床分离的肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶情况及其耐药性,为临床合理使用抗生素提供依据。方法对156株肺炎克雷伯菌的标本来源进行回顾调查分析,采用Vitek2-compact全自动微生物鉴定系统进行细菌鉴定,药敏试验采用K—B纸片扩散法;同时采用纸片扩散确证法检测ESBLs、采用三维确认试验检测质粒介导AmpC酶。结果检出单产ESBLs54株（34．6％）,单产AmpC酶6株（3．8％）,同时产AmpC酶和ESBLs共3株（1．9％）。产ESBLs和AmpC酶菌株对亚胺培南和哌拉西彬他唑巴坦100％敏感,其对抗生素的耐药率除亚胺培南和哌拉西林／他唑巴坦外均高于不产ESBLs和AmpC酶菌株。结论肺炎克雷伯菌产Es—BLs和AmpC酶的情况在聊城地区已经出现,产ESBLs和AmpC酶菌株对常用抗生素的耐药率较高,应引起临床注意。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因谱及遗传学特征

目的:了解产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因谱及其遗传学特征。方法:对35株产ESBLs肺炎克雷伯菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测aac(3)-Ⅰ,aac(3)-Ⅱ,aac(6′)-Ⅱ,ant(3″)-Ⅰ,ant(2″)-Ⅰ,aac(6′)-Ⅰ,aac(6′)-Ⅰb等7种氨基糖苷类修饰酶基因,TEM,SHV,LEN,OKP,CTXM-1,CTXM-2,CTXM-9,GES,PER,VEB,OXA-10,OXA-1,OXA-2,DHA,ACT-1等15种β-内酰胺酶基因,intI1,intI2,intI3等3种整合子基因,tnpA(TnA转座子标记),merA(Tn21/Tn501转座子标记),qacEΔ1-sul1消毒剂耐药基因,qnr喹诺酮类耐药基因,共检测29种耐药基因并对部分产物进行测序。结果:35株肺炎克雷伯菌中检出β-内酰胺酶基因22株,阳性率62.9%。整合子基因阳性22株,阳性率62.9%。氨基糖苷类修饰酶基因阳性26株,阳性率74.3%。tnpA全部阴性。merA阳性2株,阳性率5.7%。qacEΔ1-sul1阳性13株,阳性率37.1%。qnr全部阴性。在测序中发现一种新的基因型,并以aac(6′)-Ⅰb-Suzhou型命名,登录于美国NCBI(登录号:EF375621)。结论:产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因及耐消毒剂基因的携带率非常高,耐药基因谱及其遗传学特征非常复杂。     

替加环素耐药肺炎克雷伯杆菌医院感染老年患者的临床特点分析

目的探讨替加环素耐药肺炎克雷伯杆菌医院感染老年患者的临床特点。方法对发生医院感染且分离培养到替加环素耐药肺炎克雷伯杆菌的87例患者临床资料进行分析,比较老年患者（≥60岁,45例）与非老年患者（＜60岁,42例）的性别、年龄、住院时间、科室分布、感染部位、抗生素使用情况、临床操作、合并基础疾病、临床感染指标、疾病转归等。结果两组患者性别、住院时间、替加环素耐药前各类抗生素使用率比较,差异均无统计学意义（均P＞0.05）。老年组脑科重症监护病房、肺部感染、气管插管及使用呼吸机、合并高血压及脑血管疾病者比例均明显高于非老年组（均P＜0.05）。感染期间老年组C反应蛋白及降钙素原最低值、末次测量值均明显高于非老年组（均P＜0.05）。两组患者疾病转归比较,非老年组优于老年组（P＜0.05）。结论老年替加环素耐药肺炎克雷伯杆菌感染部位主要为肺部,可能与气管插管及使用呼吸机等操作有关;应重视合并高血压或脑血管疾病的老年患者发生替加环素耐药肺炎克雷伯杆菌感染。     

从大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中检测超广谱β内酰胺酶和AmpC酶

目的:研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的产酶及耐药模式,并对9种抗菌药做药敏试验,比较产酶菌与非产酶菌对9种抗菌药的耐药率,为临床治疗产酶菌感染提供理论依据。方法:菌株来源于2005年1月~2007年5月我院呼吸科住院患者送检合格痰标本中分离的大肠埃希菌43株、肺炎克雷伯菌67株。应用头孢西丁三维试验检测AmpC酶,采用美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)表型筛选和确认试验检测ESBLs菌株,以K-B琼脂扩散法做药敏试验。结果:在110株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,6株(5.45%)产AmpC酶,20株(18.2%)产ESBLs,1株(0.90%)同时产AmpC酶和ESBLs。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中AmpC酶检出率分别为6.98%、5.97%,ESBLs检出率分别为16.3%、20.9%。产酶株对亚胺培南、头孢吡肟、阿米卡星耐药率低。结论:产AmpC酶和产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为多重耐药菌株,治疗产2种β内酰胺酶细菌引起的感染亚胺培南为首选,头孢吡肟和阿米卡星可作为选用药物之一。     

新生儿感染产超广谱β—内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌药敏分析

目的：探讨新生儿病房产超广谱β－内酰胺酶（ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌耐药特点,指导临床用药。方法：经痰、血、脑脊液培养确诊为产ESBLs肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌引起新生儿感染69例,分析药敏试验结果及治疗情况。结果：产ESBLs菌对亚胺培南普遍敏感,对舒普深耐药率低,肺炎克雷伯菌耐药率为36．36％,大肠埃希菌为25．0％,对头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟及氨曲南耐药率高达75％－100％,且部分体外敏感菌株在体内却表现出临床意义的耐药,对磺胺类．氨基糖甙类．氟喹诺酮类均表现出较高的耐药性。结论：亚胺培南及含β－内酰胺酶抑制剂复合物为新生儿病房产ESBLs菌感染的首选药物。     

北京世纪坛医院亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌院内感染流行病学调查

目的 探讨临床分离亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌菌株间同源性关系及耐药菌可能的传播途径,为临床该类菌的传播控制提供依据.方法 常规进行临床样本采集及细菌培养;同时对ICU病房医护人员手表面及患者床旁物品表面采样并做细菌计数及培养;细菌鉴定及药敏测定采用VITEK-2 COMPACT全自动细菌鉴定/药敏分析系统;细菌同源性测定采用肠杆菌科基因组内重复序列聚合酶链反应(ERIC-rep-PCR)法.结果 2011年1月至2013年12月临床共分离到642株亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌,菌株来源为ICU 389株(60.59％);呼吸内科72株(11.21％);神经内科53株(8.26％);心血管科41株(6.39％);外科31株(4.83％);消化内科11株(1.71％);肾脏内科5株(0.78％);急诊科17株(2.65％);其他科室23株(3.58％).ICU物体表面分离到1株亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌.642株临床菌株中含8个主要克隆,该8个克隆菌合计394株,占全部菌株的61.37％,其余248株菌为单一克隆.结论 亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌在该院确实存在单克隆流行,接触传播可能是此类感染的传播途径.     

产KPC酶肺炎克雷伯菌的感染分布特点及中西医药物结合对其的抑制效果

目的探讨产KPC酶肺炎克雷伯菌的临床感染分布特点及中西医结合的干预效果。方法收集临床多个科室标本,共筛查出产KPC酶肺炎克雷伯菌株523株,分析其临床分布情况及病区分布情况。将配置好的头孢三嗪、鱼腥草注射液、穿琥宁注射液分别单独或与西药配伍加入适当浓度的产KPC酶肺炎克雷伯菌落中,经动态比浊法测定内毒素含量。结果在临床分离出的523例产KPC酶肺炎克雷伯菌株中,来自于呼吸道标本所占的比率最高,其次为中段尿液、脓液及伤口分泌物、血液。在各标本中产ESBLs阳性率最高的为呼吸道标本,其次为脓液及伤口分泌物、血液、中段尿液。产KPC酶肺炎克雷伯菌的临床病区分布情况:呼吸科所占比率最高,其次为ICU、感染科、泌尿外科。产ESBLs情况也存在明显差异,ICU所占百分比最高,其次为肿瘤科、呼吸科、感染科。鱼腥草组、穿琥宁组及与西药配伍组内毒素产生的量均明显低于西药组(P0.01)。结论产KPC酶肺炎克雷伯菌的临床分布有一定特点,中药抗菌药物配伍西药对产KPC酶肺炎克雷伯菌内毒素的释放有明显的抑制作用。     

肺炎克雷伯菌医院内下呼吸道感染的临床和药敏分析

目的了解肺炎克雷伯菌(KPN)医院内下呼吸道感染的临床特点、产ESBLs的发生率及对抗菌药物的耐药性。方法回顾性分析2003年11月～2004年12月肺炎克雷伯菌医院内下呼吸道感染38例患者的临床资料及药敏结果。结果年龄>60岁患者占73.7%;患有各种严重基础疾病者占84.2%;使用过广谱抗菌药物者占89.5%;住院时间>20天者占86.8%;接受侵入性操作者占34.2%。临床表现不一。产ESBLs菌占44.7%,主要分布神经外科、呼吸内科、神经内科;产ESBLs菌和非产ESBLs菌均对亚安培南高度敏感,对氨苄西林严重耐药;对其他15种抗菌药物,产ESBLs菌耐药性较非产ESBLs菌显著增高。结论肺炎克雷伯菌医院内下呼吸道感染多发生在有严重基础疾病、免疫功能低下及广谱抗生素的大量使用者;临床表现无特异性;产ESBLs的发生率较高,其耐药性增高,亚安培南为首选的治疗药物。     

多重耐药肺炎克雷伯菌氨基糖苷类药物耐药相关基因研究

目的：了解多重耐药肺炎克雷伯菌氨基糖苷类修饰酶基因的存在状况。方法：自2006年1月至2006年10月住院病人标本中分离并筛选出20株多重耐药肺炎克雷伯菌,微量肉汤稀释法检测20种抗菌药物的敏感性;PCR法检测15种氨基糖苷类修饰酶基因。结果：20株多重耐药肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类药物庆大霉素、妥布霉素、奈替米星及阿米卡星耐药率分别为75％、80％、65％和60％,其中氨基糖苷类修饰酶aac（3）-Ⅱ基因阳性15株,aac（6’）-I b基因阳性1株,ant（3”）-I基因阳性16株,aph（3’）-I基因阳性3株,ant（2”）-I基因阳性1株。结论：多重耐药肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类药物耐药的主要原因是aac（3）-Ⅱ、aac（6’）-I b、ant（3”）-I、aph（3’）-I和ant（2”）-I等5种氨基糖苷类修饰酶基因的存在;从肺炎克雷伯菌中检出aac（6’）-I b-Cr型和aph（3’）-I均为国内首次。     

新生儿科产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药性分析及基因分型

目的：了解本院新生儿科送检标本中,分离的产超广谱13一内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯茵的耐药性及基因分型。方法：收集本院新生儿科送检标本中分离的肺炎克雷伯茵,采用双纸片协同试验的方法进行ESBLs初筛及表型确证试验;K—B纸片扩散法进行抗茵药物敏感性试验;聚合酶链反应（PCR）法分析ESBLs的基因分型。结果：产ESBLs肺炎克雷伯茵的检出率为71．11％（64／90）。产ESBLs肺炎克雷伯菌对第3代头孢菌素与B一内酰胺酶抑制剂合剂、碳青霉烯类抗生素较敏感。ESBLs的基因型分析结果显示,产ESBLs肺炎克雷伯菌中SHV、TEM、CTX-M-1基因扩增阳性率分别为71．64％、37．50％、49．79％,同时携带2种或3种耐药基因的菌株分别占37．71％和12．28％。结论：新生儿科产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药现象严重,ESBLs基因型以SHV、CTX—M一1为主。