钝顶螺旋藻多糖对辐射所致小鼠造血功能抑制的对抗影响

目的　观察钝顶螺旋藻多糖 (Spirulinaphatensispolysaccharide ,SPP)对辐射损伤小鼠造血功能的影响。方法　小鼠5Gy全身照射后 5、10、15d分别取材 ,作骨髓粒单系、红系造血祖细胞培养 ,造血干细胞集落测定 ,以及外周血常规计数等。SPP用量为 12 5mg·kg 1 ·d 1 ,ip,伤后连续注射 6d。结果　辐射损伤后骨髓有核细胞数、粒单系CFU GM、红系CFU E、BFU E及造血干细胞CFU S集落数均显著低于正常对照组 (P <0 .0 1) ,但应用SPP后 ,上述各项指标数值 ,均比同伤情的不用药组显著提高 ,尤以伤后10d恢复最快 (P <0 .0 1)。结论　SPP对辐射损伤有明显保护和促进造血恢复的作用。     

B细胞刺激因子在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞上的表达及意义

目的 探讨B细胞刺激因子(Blys)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞上的表达情况及临床意义.方法 应用流式细胞仪技术,检测50例SLE患者(其中活动期和稳定期各25例)外周血单个核细胞上Blys的表达,与25例健康献血人员作比较.并分析SLE患者外周血单个核细胞上Blys的表达与病情活动、其他实验指标及自身抗体的关系.结果 SLE患者外周血单个核细胞上表达Blys的百分率上调(P＜0.001),活动期和稳定期SLE患者Blys的表达率均高于健康对照组(P＜0.001和P＜0.05);其中,活动期和稳定期SLE患者比较,活动期患者Blys的表达更高(P＜0.05).SLE患者外周血单个核细胞上Blys的表达水平与SLEDAI评分呈正相关(r=0.702,P＜0.001),与免疫球蛋白IgG、IgM呈正相关(r=0.695,P＜0.001和r=0.356,P＜0.01),与补体C3、C4呈负相关(r=-0.42,P＜0.001和r=-0.31,P＜0.05).dsDNA抗体( )组患者外周血单个核细胞上Blys的表达较dsDNA抗体(-)组高(P＜0.05).Clq抗体( )组患者外周血单个核细胞上Blys的表达也较C1q抗体(-)组高(P＜0.05).结论 Blys在SLE外周血单个核细胞上的表达率升高.Blys的表达在一定程度上反映了病情的活动,并与自身抗体的产生相关.     

螺旋藻多糖对放烧复合伤所致小鼠造血功能抑制的保护作用

目的　观察螺旋藻多糖 (SPP)对放烧复合伤所致造血功能抑制的保护作用。方法　小鼠 5Gy全身照射复合 15 %Ⅲ度烧伤后 5、10、15d分别取材 ,作骨髓粒单系、红系造血祖细胞培养 ,造血干细胞集落测定 ,以及外周血常规计数等。SPP用量为 12 5mg·kg-1·d-1,ip ,伤后连续注射 6d。结果　放烧复合伤后骨髓有核细胞数、粒单系CFU GM、红系CFU E、BFU E及造血干细胞CFU S集落数均显著低于正常对照组 (P <0 0 1) ,但应用SPP后 ,上述各项指标数值 ,均比同伤情的不用药组显著提高 ,尤以伤后 10d恢复最快 (P <0 0 1)。结论　SPP对放烧复合伤有明显保护和促进造血恢复的作用     

血虚证小鼠模型骨髓细胞红系祖细胞、粒单系祖细胞变化规律及中药复方对其的影响

目的：研究血虚证小鼠模型骨髓造血祖细胞体外增殖水平及变化规律,以及中药复方地甘口服液,红霖四物口服液对其的影响。方法：以Balb/c小鼠为实验对象,分别采用免疫介导法和综合放血法制作血虚证模型。采集其骨髓有核细胞进行培养;并分组灌服地甘口服液,红霖四物口服液,比较观察各组小鼠骨髓细胞体外培养CFU－E,BFU－E,CFU－GM集落的形成情况。结果：两种血虚证小鼠模型的CFU－E,BFU－E,CFU－GM集落形成较空白对照组显下降,尤以前为甚;两种中药复方均可促进模型小鼠骨髓细胞的增殖,但对于免疫介导血虚证模型,两治疗组的效果存在一定差异。结论：血虚证小鼠模型骨髓造血干（红9系,粒单系）细胞的体外增殖较正常小鼠明显下降,而地甘口服液,红霖四物口服液可以促进骨髓CFU－E,BFU－E,CFU－GM集落的形成。     

系统性红斑狼疮患者血清IL-1β和IL-18的表达及意义

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-18的表达及其临床意义.方法 选取40例SLE患者为病例组,同时选取30例同期健康体检者作为对照组.检测两组血清IL-1β和IL-18的水平,并分析SLE患者血清IL-1β、IL-18水平与疾病活动度、相关临床指标的关联.结果 SLE患者血清IL-1β和IL-18浓度均高于对照组(P<0.01).Spearman 相关性分析结果显示,血清IL-1β水平与浆膜炎、SLEDAI评分、ESR、狼疮肾炎呈正相关(r=0.35、0.505、0.379、0.35,P<0.05),与白蛋白、血红蛋白、C3呈负相关(r=-0.319、-0.375、-0.409,P<0.05).血清IL-18水平与狼疮肾炎、SLEDAI评分、24 h尿蛋白呈正相关(r=0.487、0.442、0.419,P<0.01).活动期患者血清IL-1β和IL-18的水平均较稳定期患者明显升高(P<0.01).不同等级SLEDAI评分的SLE患者血清IL-1β水平差异有统计学意义(P<0.05),其他3组不同程度活动组患者均显著高于稳定期患者.不同等级SLEDAI评分的SLE患者血清IL-18水平差异有统计学意义(P<0.05),中度活动期患者显著高于稳定期患者和轻度活动期患者.结论 SLE患者血清IL-1β和IL-18水平升高,且与疾病活动度及其他能反映SLE病情的多个临床实验室指标相关.     

小鼠骨髓基质细胞系QXMSC1促进骨髓移植后的造血重建

目的：观察骨髓基质细胞系QXMSC1在骨髓移植后早期能否加速造血重建。方法：用脾克隆形成单位（CFU-S）测定QXMSC1对造血干细胞的影响。计数每根股骨有核细胞数，用半固体琼脂克隆形成法测定粒单系祖细胞（CFU－GM），微量甲基纤维素法测定红系祖细胞（CFU-E及BFU－E）。结果：QXMSC1细胞可明显增加CFU－S克隆数。在骨髓移植后第10天，QXMSC1可增加骨髓有核细胞数，增加CFU－GM、CFUE克隆数。移植后第20天，这些作用更明显，且对BFU-E也有明显的刺激作用。结论：骨髓基质细胞系QXMSC1与骨髓细胞共移植可明显促进骨髓移植后早期造血功能重建。     

急性脑梗死患者外周血造血干细胞测定的临床意义

目的:探讨急性脑梗死患者自体外周血造血干细胞水平的变化及其临床意义.方法:采用流式细胞术方法分别检测40例急性脑梗死患者3,7,10和14dCD34+CD38-细胞百分率.结果:脑梗死急性期外周血CD34+CD38-细胞水平明显高于对照组(P<0.05),梗死后3dCD34+CD38-细胞水平上升,10d达高峰,然后开始下降(P<0.01).脑梗死早期CD34+CD38-细胞水平与Fugl-Meyer量表评分负相关(r=-0.281,P<0.05).神经功能恢复越好,CD34+CD38-细胞水平越高(P<0.05).结论:外周血造血干细胞在参与脑梗死急性期神经的修复过程中起重要作用.     

GST-π基因对人脐血造血干细胞抗肿瘤药物耐药性的影响

目的：研究谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)基因转染人脐血造血干细胞对其抗肿瘤药物耐药性的影响。方法：取正常足月妊娠分娩抗凝脐血，采用磁分离法分离CD34 细胞，应用反转录病毒载体将GST-π基因转导入人脐血CD34 细胞。采用RT—PCR检测GST-π基因在被转染的CD34 细胞内的表达。采用克隆培养技术进行体外耐药试验，检测在不同浓度的卡铂、4-羟基环磷酰胺(4-HC)或阿霉素(ADM)存在的条件下，CD34 细胞形成CFU—GM及BFU—E克隆的数目，判断GST-π基因转染对CD34 细胞耐药性的影响。并采用RT—PCR技术检测耐药CFU—GM克隆中GST-πmRNA的表达。结果：体外耐药试验显示，药物浓度为0时，实验组与对照组CFU—GM及BFU—E无显著性差异；当卡铂达到一定浓度时，经GST-π基因转染的CD34 细胞，CFU—GM及BFU—E克隆形成数显著高于对照组。ADM及4-HC存在条件下，实验组CFU—GM形成数也显著高于对照组，而BFU—E在两组差异无显著性。在对卡铂(3μg／ml)耐药的CFU—GM中，70％(7／10)检测到GST-πmRNA；对ADM(25ng／ml)耐药的CFU—GM中，80％(8／10)检测到GST-πmRNA；对4-羟环磷酰胺(2．5μg/ml)耐药的CFU—GM中，80％(8／10)检测到GST-πmRNA。对照组中均未检测到GST-πmRNA。结论：GST-π基因转染人脐血造血干细胞，能增强造血干细胞对卡铂、阿霉素及4-羟基环磷酰胺的耐药性。     

脐血造血细胞培养的特性

目的　培养脐血中具有造血潜能的造血细胞 ,分析脐血中造血细胞的特性。方法　用密封的采血袋采集脐血 ,采用羟乙基淀粉一次沉淀法分离有核细胞 ,用半固体培养体系培养 ,7天计数红系集落形成单位 (CFU E) ,14天后计数红系爆式集落形成单位 (BFU E)、粒单系集落形成单位 (CFU GM) ,同时染色分析集落的组成成分。结果　采集 34份脐血 ,平均体积为 (99± 2 2 )ml;有核细胞数为 (0 6 4～ 2 5 9)×10 9,有核细胞回收率为 79 2 %± 13 7% ,回收的有核细胞绝对值为 (1 2 2± 0 43)× 10 9;平均每份脐血中含有BFU E(1 39± 0 75 )× 10 6,CFU GM (2 15± 1 2 2 )× 10 6。结论　脐血富含各期具有造血潜能细胞 ,每份脐血在有核细胞数和各种集落总数都可以满足成人移植的需求。     

儿童再生障碍性贫血骨髓祖细胞的测定和意义

目的通过对再生障碍性贫血 (AA)患儿红系 (BFU E、CFU E)、粒单核系 (CFU GM)及巨核系 (CFU Meg)祖细胞培养 ,了解骨髓祖细胞增殖情况。方法抽取 4 7例AA患儿骨髓分别作四类祖细胞培养 ,在 7、14d测定其集落数。结果 4 7例AA患儿中 ,四类集落数均值与对照组比较均有显著下降 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,且四类集落数均值在AA三种类型中 ,基本上随病情加重均值逐步下降 ,其中四类集落数低于对照组下限的患儿分别为BFU E 36 .17%、CFU E 85 .11%、CFU GM 74 .4 7%、CFU Meg 91.4 9 %。BFU E、CFU GM和CFU Meg随着患儿疾病的加重 ,低于对照组下限的患儿百分比同步上升 ,且三者的表现与外周血三系表现一致 ,而CFU E却未见上述现象。结论在部分AA患儿中存在着四类祖细胞培养集落数的下降 ,且基本上与患儿病情成正比 ;BFU E的变化较CFU E更能代表患儿骨髓红系祖细胞的变化。     

小剂量外照射对小白鼠自细胞数、骨髓象及CFU-GM的影响

小鼠X射线照射:0.05、0.25、0.5、0.75、1.0Gy后24小时检查外周血白细胞数、淋巴细胞绝对值、骨髓有核细胞计数和骨髓CFU—GM存活率。0.5Gy照射可引起白细胞总数和淋巴细胞减少。0.05Gy即可引起骨髓CFU—GM存活率明显降低。白细胞计数、淋巴细胞绝对值、骨髓有核细胞计数,CFU—GM存活率皆随照射剂量增加呈线性减低。     

骨髓增生异常综合征患者血清造血抑制活性的研究

目的：通过研究骨髓增生异常综合征患者血清造血抑制活性,探讨致ＭＤＳ无效造血的可溶性因素。方法：以甲基纤维素半固体细胞培养法,观察患者血清对正常骨髓ＢＦＵ－Ｅ,ＣＦＵ－ＧＭ的抑制作用,及对单个核细胞素集落生成的刺激作用;以ＤＮＡ末端标记技术,检测１例ＭＤＳ患者血清与正常骨髓单个核细胞共育后的凋亡细胞。     

补肾生血药干预不同时间对环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠细胞周期与细胞增殖的影响

目的 观察补肾生血药干预不同时间对环磷酰胺诱发骨髓抑制小鼠骨髓细胞周期及细胞增殖的影响.方法 52只雄性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、补肾生血药低剂量组、补肾生血药高剂量组.先预防用药3 d,补肾生血药低剂量组、高剂量组灌胃不同剂量补肾生血药,其余组灌胃蒸馏水.第4～6天造模,除空白对照组...     

维生素D受体与MCP-1在系统性红斑狼疮患者中的表达及意义

目的 观察维生素Ｄ受体（VDR）在系统性红斑狼疮患者（SLE）中的表达以及与单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的关系。方 法 共计纳入中南湘雅三医院肾脏风湿科住院SLE患者60 例和募集28 例健康志愿者作为研究对象。使用实时荧光定量聚合链反应方法（QRT-PCR）检测外周血单个核细胞（PBMC）的VDR mRNA和MCP-1 mRNA,Western blot检测VDR蛋白表达,ELISA法检测外周血MCP-1水平,使用单因素方差分析、Pearson相关分析进行统计学分析。结果 我们发现SLE患者PBMC的VDR mRNA及蛋白表达量均显著低于正常对照组（P<0.01）,活动组低于非活动组（P<0.05）;SLE患者PBMC的MCP-1mRNA及血清水平显著高于正常对照组（P<0.01）,活动组高于非活动组（P<0.01）;Pearson相关分析显示PBMC VDR mRNA与SLE疾病活动指数（SLEDAI）呈负相关（r=-0.417,P=0.001）;VDR mRNA与MCP-1 mRNA、VDR蛋白与血清MCP-1浓度分别呈负相关（r=-0.554,P=0.000;r=-0.400,P=0.028）。结论 本研究表明SLE患者PBMC的VDR表达下调与SLE疾病活动度成负相关,且可通过影响MCP-1的表达在SLE发病过程中发挥重要作用。     

骨髓内皮细胞条件培养液促进小鼠胚胎干细胞生成造血集落形成细胞

目的:为观察骨髓内皮细胞务件培养液(mouse bone marrow stromal cell-conditional medium,mBMEC-CM)对鼠胚胎干细胞生成造血集落形成细胞的影响.方法:将鼠胚胎干细胞系D3细胞(embry-onic stem cell line-D3,ES-D3)形成4 d拟胚体(day-4 embryoid bodies,4dEBs),再用mBMEC-CM诱导4dEBs生成高增殖潜能集落形成细胞(high proliferation potential-colony formation cell,HPP-CFC)和红系爆式集落形成单位(burst forming unit-erythroid,BFU-E).以形成造血集落的数量为检测指标,观察mBMEC-CM诱导浓度、天数和诱导生成的细胞数与形成HPP-CFC和BFU-E数之间的关系.结果:形成的HPP-CFC和BFU-E集落数均与诱导生成的4dEBs细胞数呈正相关(HPP-CFC:r=0.916,P＜0.05;BFU-E:r=0.927,P＜0.05),且均随着种入的细胞数(在1×107～4×107/L范围内)增加而呈现相应的增加.当种入的细胞数增加到5×107/L时两种集落数均不再增加.mBMEC-CM诱导浓度(在0～20%范围内)与其诱导生成的HPP-CFC和BFU-E数呈剂量依赖性正相关(HPP-CFC:r=0.909,P＜0.05;BFU-E:r=0.927,P＜0.01).20%浓度mBMEC-CM诱导4dEBs来源的细胞于3,6和9 d形成的HPP-CFC和BFU-E数,以诱导3 d者最高,6 d次之,9 d最低.结论:骨髓内皮细胞条件培养液能促进鼠胚胎干细胞分化为HPP-CFC和BFU-E.     

趋化因子配体19在系统性红斑狼疮中的表达及其与B细胞异常的相关性研究

目的 检测趋化因子配体19(C-C chemokine ligand 19, CCL19)在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)患者血清中的表达,并分析其与SLE患者临床和实验室指标的关系,探讨CCL19在SLE发病机制中的可能作用。方法 采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)法检测90例SLE患者(未接受过糖皮质激素和免疫抑制剂治疗的初治患者15例,曾治疗过的患者75例)和30名健康对照血清中CCL19的表达水平,分析SLE患者血清CCL19水平与临床特征和实验室指标的相关性。利用流式细胞术检测SLE患者B细胞及其亚群的比例,并进行血清CCL19水平与B细胞及其亚群比例的相关性分析。数据分析采用独立样本t检验、配对t检验、Pearson和Spearman相关分析。结果 (1)SLE初治患者和经治患者血清CCL19表达水平[分别为(596.25±409.19) ng/L和(422.90±395.84) ng/L]显著高于健康对照组[(157.79±125.23) ng/L,P均<0.001],初治患者组血清CCL19表达水平又高于经治患者组(P<0.05);(2)SLE患者血清CCL19表达水平与抗双链脱氧核糖核酸(double-stranded deoxyribonucleic acid, dsDNA)抗体、抗核小体抗体(anti-nucleosome antibody, AnuA)水平呈正相关(分别为r=0.38, P=0.007; r=0.332, P=0.029),与免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平呈正相关(分别为r=0.30, P=0.005; r=0.31, P=0.003; r=0.469, P=0.0001);(3)SLE有光过敏、关节炎和继发干燥综合征患者血清CCL19表达水平[分别为(562.25±399.12) ng/L、(565.6±435.24) ng/L和(694.9±531.02) ng/L]分别较无光过敏、无关节炎和未继发干燥综合征SLE患者高[分别为(394.7±281.42) ng/L、(385.90±325.33) ng/L和(424.8±305.46) ng/L],P均<0.05;(4)血清CCL19水平与外周血CD27^-B 细胞和CD27^-IgD^-双阴性记忆性 B 细胞的比例呈正相关(分别为r=0.519, P=0.007; r=0.461, P=0.018),与CD27⁺记忆性B细胞和CD27⁺IgD^-转化后记忆性B细胞的比例呈负相关(分别为r=-0.433, P=0.027; r=-0.616, P=0.001)。结论 SLE患者血清中高表达CCL19,与自身抗体的产生显著相关,CCL19可能通过影响B细胞亚群分布的内稳态参与SLE发病。     

SLE患者机体免疫缺陷与CMV抗体水平的关系

目的 :检测SLE患者机体免疫缺陷与血清CMV抗体浓度的关系。方法 :用ELISA法检测了 5 0例SLE患者及 5 0例正常人血清中的抗人类巨细胞病毒 (HCMV)IgM类IgG抗体。结果 :SLE组抗CMV -IgM抗体水平显著高于对照组 (P <0 .0 1) ,而抗CMV -IgG抗体水平无明显差别 (P >0 .0 5 )。结论 :SLE患者机体免疫缺陷状态可能是导致血清中抗CMV -IgM抗体水平升高的因素     

系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞分泌IL-12的水平及其临床意义

目的检测系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）分泌ＩＬ－１２的水平,探讨其与ＳＬＥ活动性的关系。 方法　体外培养ＰＢＭＣ,予脂多糖（ＬＰＳ）刺激后用夹心ＥＬＩＳＡ法检测其上清中的ＩＬ－１２水平,用系统性红斑狼疮疾病活 动性指数（ＳＬＥＤＡＩ）估计ＳＬＥ的病情活动性。结果ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ分泌ＩＬ－１２水平［（６４５．０５±１３．８５）ｐｇ／ｍｌ］较正常对照 ［（６５７．９６±６．９１）ｐｇ／ｍｌ］低（ｔ＝３．６９５,Ｐ＝０．０１）,且与ＳＬＥＤＡＩ呈负相关（ｐ＝０．８７３,ｔｒ＝８．２０５,Ｐ＜０．０１）。结论ＳＬＥ患者存在 ＩＬ－１２水平的异常,且ＩＬ－１２水平可作为评价ＳＬＥ患者病情活动性大小的一个有效指标。     

组胺受体激动剂及其拮抗剂对红系祖细胞产率的影响

研究组胺及其拮抗剂对早期和晚期红系祖细胞(BFU-E 和CFU-E)产率的影响。结果表明,一定浓度的组胺和2—噻唑乙胺对CFU-E和BFU-E的产率均产生抑制效应,而4—甲基组胺则无此作用;事先用甲苯苄二胺阻断H_1-受体,能减弱组胺对CFU-E和BFU-E的抑制效应;相同条件下用甲氰咪胍阴断H_2-受体无此效应。提示组胺对红系祖细胞的抑制效应系通过组胺H_1—受体所介导。