黄芪甲苷对兔脂肪来源的间充质干细胞体外增殖和细胞周期的影响

目的观察黄芪甲苷对兔脂肪来源的间充质干细胞(ASCs)体外增殖的作用。方法提取实验家兔ASCs,培养之后,设实验组和对照组,实验组加入不同浓度黄芪甲苷溶液,对照组加常规培养液,用流式细胞仪观察细胞周期,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞的增殖率,比较细胞周期和细胞增殖率。结果实验组和对照组培养24 h后,实验组增殖期细胞为72.9%,明显高于的对照组的61.2%(P<0.01);48 h后观察,黄芪甲苷浓度在0.019 5 mg/L时,对ASCs无明显的促进增殖作用(P>0.05);而黄芪甲苷浓度在0.039 1～10 mg/L范围时,对ASCs均有明显的促进增殖的作用(P<0.01)。结论黄芪甲苷对ASCs体外增殖有明显的促进作用。     

三七总皂苷对类风湿关节炎患者环瓜氨酸肽特异性T细胞增殖的影响

目的观察三七总皂苷(PNS)对类风湿关节炎(RA)患者环瓜氨酸肽抗原特异性T细胞(CCP/AST)体外增殖的影响。方法体外分离培养24例RA患者外周血淋巴细胞,分为以下5组,空白对照组:不加任何干预药物;CCP组:仅加CCP干预(CCP终浓度为20μg/mL);甲氨蝶呤(MTX)对照组:同时加CCP与甲氨蝶呤干预(CCP与甲氨蝶呤终浓度均为20μg/mL);PNS低剂量组:同时加CCP与PNS干预(CCP与PNS终浓度分别为20、10μg/mL);PNS高剂量组:同时加CCP与PNS干预(CCP与PNS终浓度均为20μg/mL)。体外培养72h后,用CCK-8法测定T细胞增殖水平。结果 CCP组患者外周血淋巴细胞增殖(0.70±0.08)与空白对照组(0.49±0.06)相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);PNS低剂量组和高剂量组与CCP组相比,淋巴细胞增殖均可被明显抑制(0.57±0.06、0.47±0.06与0.70±0.08),差异均有统计学意义(P<0.01);且PNS高剂量组与PNS低剂量组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PNS对CCP/AST增殖的抑制作用可能在RA的治疗中发挥重要作用,其抑制程度可能与PNS剂量有一定的相关性。     

藤茶双氢杨梅树皮素对Hela细胞及A2780细胞增殖的抑制作用

目的探讨藤茶双氢杨梅树皮素（ampelopsin,APS）的抗肿瘤作用。方法以四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT法）、克隆形成法观察APS对Hela细胞及A2780细胞的体外抑制作用。结果APS均能明显抑制体外培养的Hela细胞及A2780细胞的生长,MTT法的半数抑制浓度（IC50）分别为24．6μg／mL和1．2μg／mL,集落形成法中APS质量浓度在4．4～22．2μg／mL时抑制率均为100％。结论藤茶APS对体外培养的Hela细胞及A2780细胞均有明显的抑制作用。     

蛇葡萄素聚合物胶束对3种人癌细胞体外增殖的影响

目的 观察蛇葡萄素聚合物胶束(ampelopsin loaded polymer micelles,AMP-PM)体外对人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人前列腺癌细胞PC-3和人肝癌细胞HepG-2增殖的影响,探讨AMP-PM的体外抗癌活性.方法 体外培养人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人前列腺癌细胞PC-3和人肝癌细胞HepG-2,采用CCK-8法检测原料药及AMP-PM在不同时间和不同浓度下对3株人癌细胞增殖的影响,并与原料药进行对比;实验结果采用抑制率、细胞生长抑制曲线、半数抑制浓度分析.结果 蛇葡萄素(ampelopsin,AMP)及其聚合物胶束对3株人癌细胞的增殖均表现出抑制作用,且这种作用呈现一定的剂量和时间依赖性;AMP对MDA-MB-231、PC-3和HepG-2细胞作用72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为33.6 μg/mL、81.9 tg/mL和75.8μg/mL;而AMP-PM对MDA-MB-231、PC-3和HepG-2细胞作用72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为25.4μg/mL、60.8 μg/mL和60.2 μg/mL;空白载体在相同实验浓度范围内对正常的人脐静脉内皮细胞HUVEC以及3种人癌细胞均无抑制作用.结论 AMP-PM在体外能显著抑制MDA-MB-231、PC-3和HepG-2细胞的增殖,且抑制作用明显高于原料药.     

藤茶双氢杨梅树皮素对人肝癌BEL-7404细胞增殖的抑制作用

目的：探讨藤茶双氢杨梅树皮素（APS）的抗肿瘤作用。方法：以MTT法、生长曲线法、克隆形成法观察APS对人肝癌BEL-7404细胞的体外抑制作用。结果：MTT法中，APS对BEL-7404细胞的IC50为22．99μg／mL；细胞生长曲线法提示其对BEL-7404细胞生长有明显抑制作用；克隆形成法中，药物浓度在9．88μg／mL以上时抑制率为100％，药物浓度为6．58μg／mL时抑制率为69．65％。结论：APS对BEL-7404细胞的增殖有明显的抑制作用。     

可溶性Jagged1/Fc对大鼠骨骺干细胞Notch信号通路的影响研究

目的 探究可溶性Jagged1/Fc对鼠骨骺干细胞Notch信号通路的激活及生物学特性的影响。方法 将2周龄内SP大鼠离体培养获取大鼠骨骺干细胞,设置不同浓度(0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL)的Jagged1/Fc对第3代骨骺干细胞进行干预诱导,体外培养,在倒置显微镜下观察细胞生长情况,记录细胞贴壁情况及时间、细胞形态变化及增殖情况,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,及使用Western印迹检测Jagged1/Fc对骨骺干细胞增殖分化影响。结果 经可溶性Jagged1/Fc干预诱导后,与对照组比较,实验组与对照组细胞形态变化基本类似,但浓度为0.5μg/mL的Jagged1/Fc实验组细胞增殖速度显著加快,贴壁所需的时间较对照组缩短(P<0.05).CollagenⅡ蛋白表达明显增多,胶原蛋白X表达明显减少。结论 单个Jagged1/Fc配体可激活Notch信号通路,促进骨骺干细胞增殖的最适浓度是0.5μg/mL。     

黄芪多糖促进人树突状细胞体外分化成熟的实验研究

目的：研究黄芪多糖（APS）对人树突状细胞（DCs）体外分化成熟及存活时间的影响。方法：健康志愿者外周血单个核细胞培养2 h获得贴壁的单核细胞,加入含rhGM-CSF（1000 U/mL）r、hIL-4（500 U/mL）的无血清培养基,实验组再加入3种浓度的APS（1μg/mL,10μg/mL,100μg/mL）,对照组加入等体积生理盐水,一组细胞体外培养7 d,收集悬浮细胞获得普通DCs（Mo-DCs）及APS诱导的DCs（APS-DCs）,流式细胞仪测定细胞免疫表型,同种异体混和淋巴细胞反应检测DCs的免疫激活功能,另外一组细胞体外连续培养14 d,光镜下观察细胞形态及存活时间。结果：APS能够显著促进DCs表面免疫分子HLA-DR、CD83、CD80、CD86、CD40、CD54的表达,APS-DCs较Mo-DCs具有更强的T细胞体外激活能力,并显著延长DCs的体外存活时间达2～3 d。结论：APS可以促进DCs的成熟和延长DCs的存活时间,从而发挥增强机体免疫力的功能。     

吉非替尼(Iressa)对鼻咽癌CNE-Ⅰ细胞系抑制作用的研究

目的研究表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼(Iressa)在体外对鼻咽癌CNE-Ⅰ细胞系的抑制作用。方法MTT法检测Iressa对CNE-Ⅰ细胞的吸光度A550值并计算抑制率;培养瓶克隆形成率实验;流式细胞术检测CNE-Ⅰ细胞在10,30μg/mL的Iressa作用后24,48h细胞周期和凋亡率变化。结果MTT数据显示CNE-Ⅰ细胞的抑制率与Iressa浓度成正相关,随Iressa浓度升高,抑制作用越明显,经计算IC50=13.155μg/mL。培养瓶克隆形成率实验,对照组克隆形成率为33.2±1.8%,而10μg/mL Iressa组、30μg/mL Iressa组均为0,提示Iressa能明显抑制CNE-Ⅰ细胞增殖。流式细胞术分析显示Iressa处理48h使CNE-Ⅰ细胞凋亡率明显升高,且随浓度升高凋亡率升高越明显(P<0.001),细胞周期结果显示Iressa使细胞周期G0-G1期比例升高,S期和G2-M期比例下降,但除10μg/mL Iressa组G2-M期比例下降明显以外(P=0.042),其他各组间差异无显著性。结论Iressa在体外对鼻咽癌CNE-Ⅰ细胞有显著抑制增殖和促进凋亡作用。     

片仔癀体外抗肿瘤作用研究

目的研究片仔癀对体外肿瘤细胞增殖的影响,以及对鸡胚尿囊膜血管生成的抑制作用。方法采用MTT法检测片仔癀对体外培养肿瘤细胞(肝癌SMMC-7721细胞、胃癌SGC-7901细胞、宫颈癌HeLa细胞)的抗肿瘤作用;以鸡胚尿囊膜血管生成(CAM)实验,研究片仔癀对新生血管生成的抑制作用。结果片仔癀在0.2～1.0mg/mL对各肿瘤细胞的增殖有显著抑制作用,1.0mg/mL片仔癀对肝癌细胞增殖抑制率达到81.55%;片仔癀在0.1～1000μg/mL对鸡胚尿囊膜血管生成有显著抑制作用,给药鸡胚的新生血管数减少,血管变细,其中10μg/mL抑制率最高,一级血管抑制率为61.1%,二级血管抑制率为59.1%。结论在实验给药浓度下,片仔癀对受试肿瘤细胞的增殖具有较强抑制作用,对鸡胚尿囊膜血管生成有显著抑制作用。     

吉非替尼(Iressa)对鼻咽癌CNE-Ⅰ细胞系抑制作用的研究

目的研究表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼(Iressa)在体外对鼻咽癌CNE-Ⅰ细胞系的抑制作用。方法MTT法检测Iressa对CNE-Ⅰ细胞的吸光度A550值并计算抑制率;培养瓶克隆形成率实验;流式细胞术检测CNE-Ⅰ细胞在10,30μg/mL的Iressa作用后24,48h细胞周期和凋亡率变化。结果MTT数据显示CNE-Ⅰ细胞的抑制率与Iressa浓度成正相关,随Iressa浓度升高,抑制作用越明显,经计算IC₅₀=13.155μg/mL。培养瓶克隆形成率实验,对照组克隆形成率为33.2±1.8%,而10μg/mL Iressa组、30μg/mL Iressa组均为0,提示Iressa能明显抑制CNE-Ⅰ细胞增殖。流式细胞术分析显示Iressa处理48h使CNE-Ⅰ细胞凋亡率明显升高,且随浓度升高凋亡率升高越明显(P<0.001),细胞周期结果显示Iressa使细胞周期G0-G1期比例升高,S期和G2-M期比例下降,但除10μg/mL Iressa组G2-M期比例下降明显以外(P=0.042),其他各组间差异无显著性。结论Iressa在体外对鼻咽癌CNE-Ⅰ细胞有显著抑制增殖和促进凋亡作用。     

神经生长因子(NGF)对兔角膜缘干细胞增殖的影响

目的:探讨神经生长因子(NGF)对兔角膜缘干细胞增殖作用的影响及最佳有效浓度。方法:取成年大耳白兔角膜缘组织,应用组织块消化培养法进行原代培养,取第2代生长状态良好的干细胞,以5×103个/m l细胞浓度接种于96孔细胞培养板中,依次加入不同浓度的NGF,培养48h后,采用M TT法测定细胞增殖情况。结果:10ng/m l、50ng/m l、100ng/m l、200ng/m l不同浓度组的NGF均有促进角膜缘干细胞的增殖作用,与对照组比较差异均有显著性(P<0.01)。1ng/m l组与对照组、50ng/m l组与200ng/m l组比较差异均无显著性(P>0.05)。结论:NGF可有效促进培养角膜缘干细胞的生长,培养的适宜浓度为10~100 ng/m l,为角膜缘干细胞移植患者术后及角膜外伤或溃疡时局部应用NGF提供了理论依据。     

芦荟多糖对大鼠骨关节炎治疗作用的体内和体外研究 #br#

目的 通过体外和体内实验探究芦荟多糖（APS）对大鼠骨关节炎（OA）的治疗作用。方法 体外分离SD 乳鼠的关节软骨细胞,培养至2代后,通过CCK-8法筛选实验组APS安全剂量。后续通过检测DNA含量和糖胺聚糖 （GAG）分泌量评估软骨细胞的增殖和基质降解情况,实时荧光定量PCR检测OA相关基因表达情况,酶联免疫吸附 测定（ELISA）法检测炎症因子水平;通过HE染色、番红O和免疫荧光染色等来观察其抗炎和软骨保护效果;并进一 步在SD大鼠骨关节炎模型中探究其作用效果。结果 通过CCK-8法筛选出剂量为5、10、20 g/L的APS作为低、中、 高剂量组。各剂量组的DNA含量均显著高于模型组（P＜0.05）;高剂量组GAG分泌量高于模型组（P＜0.05）。高剂 量组的蛋白聚糖（ACAN）和Ⅱ型胶原（COL2A1）基因表达水平相对模型组显著上调（P＜0.05）,而肿瘤坏死因子 （TNF）-α、白细胞介素（IL）-6、基质金属蛋白酶（MMP）-3和MMP-13基因表达显著下调（P＜0.05）。低、中、高剂量 组TNF-α和IL-6的分泌量显著低于模型组（P＜0.05）,HE和番红O染色也显示APS实验组的细胞形态较模型组好, MMP-13免疫荧光显示高剂量组的表达量显著低于模型组（P＜0.05）。体内实验软骨组织番红O染色及国际骨关节 炎研究学会（OARSI）软骨损伤评分结果显示APS干预的实验组关节软骨损伤程度明显低于模型组（P＜0.05）。结论 APS对OA具有一定的抗炎和软骨保护作用。     

Generation of reactive oxygen species in adipose-derived stem cells: friend or foe?

INTRODUCTION: Reactive oxygen species (ROS) participate in cellular apoptosis and are involved in pathophysiological etiology of degenerative diseases. However, recent studies suggest that ROS at low levels may play a pivotal role as second messengers and activate normal cellular processes. Intracellular ROS increase the proliferation, migration, and regenerative potential of adipose-derived stem cells (ASCs). In contrast, manipulations that diminish intracellular ROS levels interfere with normal ASC function. ROS generation therefore acts like a double-edged sword. AREAS COVERED: This review discusses the following research questions: i) Do ROS stimulate or suppress ASCs? ii) How are ROS generated from ASCs? iii) Which function(s) is/are regulated by intracellular ROS generation? In addition, the antioxidant/antiapoptotic effect of ASCs is briefly introduced. EXPERT OPINION: Whether ROS is harmful or beneficial is primarily a question of dosage. Low or moderate ROS generation increases the proliferation, migration and regenerative potential of ASCs. Therefore, it is beneficial to expose ASCs to moderate oxidative stress during manipulation. The addition of a ROS donor in culture can reduce the cost for the expansion of ASCs and a ROS preconditioning can enhance the regenerative potential of ASCs.     

粉防已碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及细胞周期的影响

目的观察粉防己碱对培养的人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及周期的影响。方法培养人体增生性瘢痕的成纤维细胞,设实验组和对照组,实验组加入粉防己碱,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察细胞的增殖率,用流式细胞仪观察细胞周期,比较两组之间的细胞增殖率和细胞周期。结果细胞增殖率实验组吸光度为(0.31±0.03),对照组为(0.53±0.04),两组比较差异有统计学意义(P<0.05);对照组处于增殖期的细胞占细胞总数的68.3%,实验组处于增殖期的细胞明显减少,为占总数的40.8%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论粉防己碱通过阻止成纤维细胞由静止期进入增殖期而抑制其增殖,可能具有防治瘢痕的作用。     

抗磷脂综合征患者妊娠结局分析

目的探讨妊娠并抗磷脂综合征患者的妊娠结局及相关护理。方法,选择抗心磷脂抗体（ACA）阳性孕妇40例作为观察组和40例ACA阴性的孕妇为对照组,比较两组患者的妊娠结局情况。结果观察组发生流产6例（15．0％）,死胎2例（5．0％）,妊娠丢失8例（20．0％）;对照组发生流产2例（5．0％）,无死胎,妊娠丢失2例（5．0％）;观察组妊娠丢率失明显高于对照组（χ^2=9．54,P〈0．05）;采用相应治疗护理后（孕中期）ACA—Igg阳性率达40．0％低于治疗前的52．5％（χ^2=3．85,P〈0．05）;产后1月ACA—IgM阳性率37．5％低于孕中期40．0％（χ^2=3．81,P〈0．05）。结论ACA阳性与妊娠丢失有密切的关系,采取相应的治疗护理干预可提高疗效,减少妊娠并发症。     

黄芪多糖与人参总皂苷联用的免疫调节作用初步研究

目的:研究黄芪多糖(APS)与人参总皂苷(TG)联用对正常人外周血T细胞增殖及对环磷酰胺(CY)处理后小鼠免疫功能 的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测并计算人外周血T细胞的增殖率;测定小鼠脾脏、胸腺等免疫器官重量。结 果:APS浓度在25-100μg／ml范围内、TG浓度在5-20μg／ml范围内均可促进人外周血T细胞的增殖,增殖率分别为102．3％- 141．1％和113．9％-163．1％,二者联用后的增殖率为262．3％-383．0％;与CY组比较,APS、APS+TG组小鼠脾脏指数明显更 高(P<0．05),而TG组无明显差异。结论:APS与TG联用能促进正常人外周血T细胞增殖和增强小鼠免疫功能,并具有一定的 协同作用。     

Generation of reactive oxygen species in adipose-derived stem cells: friend or foe?

Introduction: Reactive oxygen species (ROS) participate in cellular apoptosis and are involved in pathophysiological etiology of degenerative diseases. However, recent studies suggest that ROS at low levels may play a pivotal role as second messengers and activate normal cellular processes. Intracellular ROS increase the proliferation, migration, and regenerative potential of adipose-derived stem cells (ASCs). In contrast, manipulations that diminish intracellular ROS levels interfere with normal ASC function. ROS generation therefore acts like a double-edged sword.

Areas covered: This review discusses the following research questions: i) Do ROS stimulate or suppress ASCs? ii) How are ROS generated from ASCs? iii) Which function(s) is/are regulated by intracellular ROS generation? In addition, the antioxidant/antiapoptotic effect of ASCs is briefly introduced.

Expert opinion: Whether ROS is harmful or beneficial is primarily a question of dosage. Low or moderate ROS generation increases the proliferation, migration and regenerative potential of ASCs. Therefore, it is beneficial to expose ASCs to moderate oxidative stress during manipulation. The addition of a ROS donor in culture can reduce the cost for the expansion of ASCs and a ROS preconditioning can enhance the regenerative potential of ASCs.     

黄芪多糖对丝裂霉素C(MMC)致骨髓抑制小鼠骨髓及脾脏造血祖细胞的生成作用的影响

目的　研究黄芪多糖 (APS)对MMC致骨髓抑制小鼠的骨髓和脾造血祖细胞生长的影响。方法　d 0腹腔注射丝裂霉素C(MMC) 7mg·kg- 1 ,APS皮下注射 1 0 0mg·kg- 1·d- 1 ,给药方案分 3种 :① 0～ 4d ,共 5d ;② 0～ 1 1d ,共 1 2d ;③ 1 2d给药 ,3wk内给完 ,用造血细胞集落培养法观察APS的药理作用。结果　在d 3时 ,APS治疗组对MMC致骨髓抑制小鼠骨髓CFU C数目增加了 3倍 ,分别为 1 870±40 /股骨和 62 4 0± 1 1 0 /股骨 ,从d 3～d 1 8,APS治疗组的骨髓CFU C均高于模型组。在给MMC后d 1 4之前APS对脾CFU C的生长没有影响 ,APS在d 1 4和d 1 8时APS有刺激脾造血祖细胞增殖作用 (分别高 3倍和 2倍 )。结论　APS对MMC引起骨髓抑制小鼠有促进骨髓和脾脏造血祖细胞的增殖和成熟的作用     

碱性成纤维细胞生长因子对兔甲状软骨细胞的影响

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对免甲状软骨细胞的影响，探索软骨细胞体外扩增方法，为软骨组织工程提供理论依据。方法 分离鬼甲状软骨细胞，分4组培养，每组用含不同成分的培养基一第1组：只用DMEM培养基；第2组：DMEM培养基 10％小牛血清；第3组：DMEM培养基加bFGF(10ng/m1)；第4组：DMEM培养基 10％小牛血清 bFGF(10ng/m1)。采用软骨细胞计数观察各组细胞增殖情况。结果 在培养基成分相同时，补充bFGF组比未补充组细胞数目明显增多，即第3组多于第1组，第4组多于第2组。结论 bFGF能够促进单层培养中兔甲状软骨细胞的增殖，在软骨组织工程细胞增殖阶段，可能成为软骨细胞体外大量扩增的主要生长因子之一。