神经内分泌分化与前列腺癌关系的研究进展

随着越来越多的目光投向前列腺癌的神经内分泌分化,人们在认识前列腺癌的发生和进展方面取得了较大的进步。由于神经内分泌细胞缺乏雄激素受体并可能导致前列腺癌的雄激素非依赖性的发生,使之与肿瘤的进展密切相关。晚期前列腺癌激素治疗主要是通过抑制雄激素的产生并阻断其受体的功能,但这并不能减少神经内分泌分化的癌细胞。相反,这些癌细胞可能通过旁分泌网络刺激前列腺癌雄激素非依赖性分化的发生,使其更多地增殖,从而导致肿瘤的进展。现回顾神经内分泌细胞在前列腺癌中的作用,包括可能的分子机制及其与前列腺癌恶性演进的关系,同时展望前列腺癌在该领域治疗和研究。     

前列腺癌神经内分泌分化及其与Ki-67的关系

目的 研究前列腺癌神经内分泌分化(neuroendocrine differentiation,NED)及Ki-67与前列腺癌预后的关系. 方法 收集有完整临床和随访资料的40例前列腺癌手术切除标本,应用免疫组化Polymer conjugate法检测嗜铬素A(CgA)、神经特异性烯醇化酶(NSE)、突触素(SYN)及增殖指标Ki-67表达情况,同时分析NED与增殖指标Ki-67及Gleason积分的关系.单因素Cox风险模型分析前列腺癌NED与患者术后生存的关系. 结果 40例前列腺癌患者中有11例伴有神经内分泌分化(27.5%),且这组患者的3年生存率明显低于同时期不伴有神经内分泌分化的前列腺癌组(P<0.05).前列腺癌伴NED患者中Ki-67表达水平与不伴有NED的前列腺癌患者比较差异有统计学意义(P<0.05),且NED表达水平与Gleason积分成正相关.单因素Cox回归分析显示前列腺癌术后生存时间与Gleason积分(P<0.05)、NED阳性密切相关(P<0.05).结论 前列腺癌NED与患者术后生存有关,联合检测前列腺癌NED与Ki-67的表达可能能更好地判断前列腺癌的预后.     

穿心莲内酯对前列腺癌细胞的增殖及神经内分泌分化的抑制作用

目的 探讨穿心莲内酯(Andro)对前列腺神经内分泌癌细胞增殖及神经内分泌分化的影响.方法 Andro处理前列腺癌细胞(PC3),用MTT法检测48 h时Andro作用的最大效应浓度及对PC3细胞增殖的时间依赖性;进一步提取细胞蛋白,通过Western blotting检测神经内分泌分化标志物(NSE、CgA)表达情况.结果 Andro作用48 h时7.5 μmol/L达到最大效应浓度,且随着时间的延长Andro抑制PC3细胞增殖的作用越显著;Andro能明显抑制PC3细胞的增殖,并具有浓度和时间依赖性.Western blotting检测结果显示,NSE、CgA是PC3细胞中神经内分泌的标志物,Andro能显著抑制NSE、CgA的表达.结论 Andro可抑制PC3细胞增殖及神经内分泌分化.     

前列腺癌神经内分泌分化的研究进展

神经内分泌(neuroendocrine,NE)细胞又称内分泌-旁分泌细胞或amine precursor uptake and decarboxylation(APUD)细胞,正常的前列腺组织中存在着散在的NE细胞,参与构成弥散性神经内分泌调节系统,分泌多种生物活性物质,对前列腺上皮生长、分化及外分泌的调节发挥着重要作用。前列腺癌(PCa)组织内的神经内分泌分化(neuroendocrine differentiation,NED)现象与PCa的进展、雄激素非依赖性转化和不良预后等有重要关系,可为PCa的诊断、治疗及预后判断提     

神经内分泌分化与前列腺癌生物学行为的相互关系研究

目的 探讨前列腺癌中神经内分泌细胞分化(NED)与抗雄激素治疗抵抗的关系.方法 对55例行间歇性抗雄激素治疗的前列腺癌标本(TURP术)做单克隆嗜铬黏蛋白(CgA)抗体免疫组化染色,定期行血清PSA值及影像学检查.结果 前列腺癌CgA的表达率为47.3%,神经内分泌(NE)细胞在Gleason≥7肿瘤中以巢状分布为主,而在Gleason<7肿瘤中以单个散在分布为主,NED与Gleason分级明显相关(P<0.05);Ⅲ、Ⅳ期肿瘤的NED(分别为67%、71.4%)明显高于Ⅱ期肿瘤(25%)(P<0.05);NED与术前PSA无明显相关(P>0.05).中位随访时间25(5～85)个月,30例在中位治疗18(5～79)个月后转为非依赖性(A组),而25例在中位治疗31(17～85)个月后未发生疾病进展(B组),A组NED明显高于B组(P<0.05);单因素分析显示NE阳性、Gleason≥7、pT4期、有骨转移的肿瘤为患者PSA复发或临床进展的影响因素(P<0.05),多因素Cox回归分析显示,NED和术前PSA值为无骨转移病例疾病进展的独立风险因素.结论 NED与前列腺癌的不良生物学行为密切相关,是前列腺癌内分泌治疗产生雄激素抵抗的独立预测因子.     

TGF-α诱导前列腺癌DU145细胞神经内分泌分化和增强DU145对顺铂的化疗耐药性

目的:研究TGF-α是否具有EGF相似的可诱导前列腺癌DU145细胞发生神经内分泌分化(neuroendocrine differentiation,NED) 的作用,并探讨TGF-α诱导的前列腺癌DU145细胞神经内分泌分化对肿瘤化疗耐药性的影响。方法:将接受不同培养液处理的DU145细胞分为3组:2%FBS组、2%FBS+TGF-α 5 ng/mL组和2%FBS+TGF-α10 ng/mL组。显微镜下观察TGF-α处理后DU145细胞的形态变化;Real time RT-PCR法检测神经特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE) mRNA的表达水平;Western印迹检测NSE,P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp),多药耐药相关蛋白1(multiple drug resistance protein,MRP1)和Bcl-2蛋白的表达水平。流式细胞术分析TGF-α(5 μg/mL)处理后DU145细胞周期的变化;MTT比色法测定TGF-α(5 μg/mL)对DU145细胞顺铂化疗耐药性的影响。结果:同2%FBS组相比,2%FBS+TGF-α处理组的DU145细胞出现多形性,细胞伪足伸出;NED 标志物NSE mRNA的表达水平升高,分别为上调了(3.6±0.5)倍(P<0.05)和(10.1±0.1)倍(P<0.01);细胞的NSE,Bcl-2和MRP1蛋白的表达水平也明显增加,但未检测到P-gp蛋白的表达;同时,TGF-α(5 μg/mL)处理后DU145细胞的G1期细胞比例降低,S期和G2/M期细胞比例升高;顺铂的化疗耐药性增加。结论:TGF-α也可诱导前列腺癌DU145细胞神经内分泌分化增强,从而进一步增强DU145细胞对顺铂的化疗耐药性。     

恶性肿瘤神经内分泌分化

恶性肿瘤有着许多特征，但基本特征之一是细胞的异常分化。在肿瘤细胞向不成熟方向退行性发育的过程中，可出现原来组织或器官中的正常细胞所没有的新的分化特征或原有一些特征的丢失，这种分化不仅给肿瘤的诊断带来困难，同时也给肿瘤治疗造成了许多障碍。     

神经内分泌前列腺癌生物标志物与治疗靶点研究进展

神经内分泌前列腺癌(neuroendocrine prostate cancer, NEPC)是晚期前列腺癌治疗耐药的重要原因,目前临床对其早期诊断与治疗的认知仍存在不足。针对这一现状,本文回顾了NEPC近年来新出现的诊断、治疗靶点,拟为今后相关临床工作提供更加全面的诊疗参考。     

肾上腺皮质腺瘤的神经内分泌分化

目的 探讨肾上腺皮质腺瘤发生学，为临床治疗方式的改进提供实验依据。方法 通过免疫组化方法观察了39例肾上腺皮质腺瘤（20例醛固酮症，10例库欣综合征，9例无功能腺瘤），10例正常肾上腺皮质的3种神经内分泌指标：神经丝蛋白（NF）、神经特异性烯化酶（NSE）、突触胞蛋白（SYN）的阳性表达。结果 10例正常肾上腺皮质仅2例NSE在肾上腺皮质球状带有少量阳性表达。39例肾上腺皮质腺瘤NF阳性14例（35．89％）。NSE阳性26例（66．66％）。SYN阳性24例（61．53％）。以3种不同临床表现形式的肾上腺皮质腺瘤的神经内分泌指标阳性表达率差异无显性意义（P＞0．05）。结论 肾上腺皮质腺瘤相对正常肾上腺皮质有神经内分泌分化；3种不同临床表现形式的肾上腺皮质腺瘤，其神经内分泌蛋白表达差异无显性变化。     

胃神经内分泌癌和胃癌伴神经内分泌分化的临床病理研究

目的：探讨胃神经内分泌癌和胃癌伴神经内分泌分化的临床病理特征。方法：回顾12例胃神经内分泌癌和8例胃癌伴神经内分泌分化的临床病理资料及苏木精-伊红染色切片，并作神经内分泌标记物(CgA、syn、NSE等)的免疫组化染色和AB/PAS组化染色。结果：两组患者均以老年男性为主，肿块大多为溃疡型，多位于胃贲门部或胃窦部。12例胃神经内分泌癌中，典型类癌2例、不典型类癌9例、低分化神经内分泌癌1例，大部分癌细胞均表达神经内分泌标记物，其中7例不典型类癌内见少数腺癌或粘液细胞癌成分，后二者阳性表达CEA和PAS。8例胃癌伴神经内分泌分化者见少数神经内分泌标记物阳性的细胞散在分布于胃癌组织内。结论：胃神经内分泌癌和胃癌伴神经内分泌分化属不同的组织学类型，免疫组化染色可明确区分二者。     

miRNA-29c抑制前列腺癌细胞系LNCaP的增殖和侵袭

目的观察miRNA-29c(miR-29c)对前列腺癌细胞系LNCaP增殖和侵袭能力的影响,探讨其潜在的应用价值。方法采用qRT-PCR观察雄激素依赖性(LNCaP)与雄激素非依赖性(LNCaP-AI)前列腺癌细胞中miR-29c的表达差异;采用miR-29c抑制物(anti-miR-29c)下调LNCaP细胞中miR-29c的表达量,绘制LNCaP细胞生长曲线,利用流式细胞仪测定细胞周期;Transwell侵袭实验分析miR-29c抑制前后LNCaP细胞的体外侵袭能力。结果 qRT-PCR显示LNCaP-AI细胞中miR-29c水平明显低于LNCaP细胞(P<0.05);下调LNCaP细胞中miR-29c的表达量,可明显促进LNCaP细胞体外增殖及侵袭能力(P<0.05)。结论 miR-29c的正常表达有利于抑制LNCaP细胞的体外增殖和侵袭,有望成为前列腺癌生物治疗的潜在靶点。     

野生型KLF6对前列腺癌LNCaP细胞的作用

目的:探讨野生型抑癌基因KLF6对前列腺癌LNCaP细胞的生长增殖、细胞周期和侵袭转移能力的影响及其可能的作用机制.方法:利用RT-PCR法克隆目的基因KLF6,并将含KLF6的pEGFP-C1质粒转染入LNCaP细胞.分为转染组和对照组分别进行MTT法观察LNCaP细胞的生长抑制率,流式细胞仪观察细胞周期比例变化和凋亡率,细胞爬片划痕法观察LNCaP细胞的侵袭转移能力变化.结果:转染了野生型抑癌基因KLF6的前列腺癌LNCaP细胞生长抑制率为(31.9±4.7)%,对照组为0%,差异有统计学意义(P＜0.01),细胞周期比例表现为G2/M期减少,G0/G1期比例增加为(75.0±8.8)%,对照组为(55.9±7.1)%,差异有统计学意义(P＜0.05),细胞凋亡峰为(29.3±3.7)% ,对照组为(8.6±0.9)%,差异有统计学意义(P＜0.01);每毫米划痕区内迁移入的细胞数为102.8±15.4,对照组为(192.7±25.2),差异有统计学意义(P＜0.05).结论:野生型抑癌基因KLF6的转染可以明显抑制前列腺癌LNCaP细胞的生长增殖,并诱导其调亡,使其侵袭转移能力下降,其机制可能与野生型抑癌基因KLF6部分地逆转LNCaP细胞的恶性表型有关.     

胃癌中miR-148a通过DNMT1调控E-cadherin的表达

目的:研究胃癌中miR-148a与E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达的相关性,并进一步探索miR-148a对E-cadherin的内在调控机制?方法:通过qRT-PCR或Western blot检测胃癌组织中E-cadherin及miR-148a的表达,使用Pearson相关分析检测E-cadherin与miR-148a表达的相关性;通过去甲基化药物处理,研究启动子异常甲基化与E-cadherin表达的关系;通过转染miR-148a mimics 提高miR-148a的表达水平,转染DNA化转移酶1(DNMT1)siRNA干扰DNMT1的表达水平,进一步研究miR-148a对E-cadherin的调控机制?结果:与正常胃黏膜相比,E-cadherin的mRNA及蛋白表达水平在胃癌组织中显著下调,并与miR-148a的表达呈正相关?去甲基化药物5-aza-dC处理后,胃癌细胞MGC-803及SGC-7901中E-cadherin的mRNA及蛋白表达水平显著上升?胃癌细胞转染miR-148a mimics后,E-cadherin的蛋白表达水平明显提高,并且干扰DNMT1的表达后,E-cadherin的蛋白表达水平也显著上调?结论:miR-148a能通过DNMT1进一步调控E-cadherin的表达?     

Evaluation of apoptotic effects of mPEG-b-PLGA coated iron oxide nanoparticles as a eupatorin carrier on DU-145 and LNCaP human prostate cancer cell lines

Many studies have so far confirmed the efficiency of phytochemicals in the treatment of prostate cancer. Eupatorin, a flavonoid with a wide range of phytomedical activities, suppresses proliferation of and induces apoptosis of multiple cancer cell lines. However, low solubility, poor bioavailability, and rapid degradation limit its efficacy. The aim of our study was to evaluate whether the use of mPEG-b-poly (lactic-co-glycolic) acid (PLGA) coated iron oxide nanoparticles as a carrier could enhance the therapeutic efficacy of eupatorin in DU-145 and LNcaP human prostate cancer cell lines. Nanoparticles were prepared by the co-precipitation method and were fully characterized for morphology, surface charge, particle size, drug loading, encapsulation efficiency and in vitro drug-release profile. The inhibitory effect of nanoparticles on cell viability was evaluated by MTT test. Apoptosis was then determined by Hoechest staining, cell cycle analysis, NO production, annexin/propidium iodide (PI) assay, and Western blotting. The results indicated that eupatorin was successfully entrapped in Fe₃O₄@mPEG-b-PLGA nanoparticles with an efficacy of (90.99 ± 2.1)%. The nanoparticle’s size was around (58.5 ± 4) nm with a negative surface charge [(−34.16 ± 1.3) mV]. In vitro release investigation showed a 30% initial burst release of eupatorin in 24 h, followed by sustained release over 200 h. The MTT assay indicated that eupatorin-loaded Fe₃O₄@mPEG-b-PLGA nanoparticles exhibited a significant decrease in the growth rate of DU-145 and LNcaP cells and their IC50 concentrations were 100 μM and 75 μM, respectively. Next, apoptosis was confirmed by nuclear condensation, enhancement of cell population in the sub-G1 phase and increased NO level. Annexin/PI analysis demonstrated that eupatorin-loaded Fe₃O₄@mPEG-b-PLGA nanoparticles could increase apoptosis and decrease necrosis frequency. Finally, Western blotting analysis confirmed these results and showed that Bax/Bcl-2 ratio and the cleaved caspase-3 level were up-regulated by the designing nanoparticles. Encapsulation of eupatorin in Fe₃O₄@mPEG-b-PLGA nanoparticles increased its anticancer effects in prostate cancer cell lines as compared to free eupatorin. Based on these results, this formulation can provide a sustained eupatorin-delivery system for cancer treatment with the drug remaining active at a significantly lower dose, making it a suitable candidate for pharmacological uses.     

胃癌相关mir-148a靶向调控胃泌素受体CCKBR

目的研究胃癌相关miR-148a与胃泌素受体CCKBR的调控关系,并分析其调控结合位点。方法生物信息学预测人CCKBR 3’UTR上miR-148a的结合位点;利用PCR扩增miR-148a前体构建真核表达载体;Northern Blot检测miR-148a真核表达载体的表达;构建CCKBR 3’UTR野生型和突变型荧光素酶报告载体,并利用双荧光素酶活性分析检测分析miR-148a对CCKBR基因表达的调控和结合位点;Western Blot检测miR-148a过表达对CCKBR蛋白表达的作用。结果在人CCKBR 3’UTR上找到3个miR-148a的潜在结合位点;miR-148a真核表达载体构建成功,转染胃癌细胞后可显著过表达;miR-148a通过人CCKBR 3’UTR上423bp处的结合位点抑制CCKBR的基因表达;miR-148a过表达显著抑制胃癌细胞中CCKBR的蛋白表达。结论 CCKBR是胃癌相关miR-148a的靶基因,miR-148a通过其3’UTR上的结合位点抑制CCKBR的基因表达和蛋白合成,提示miR-148a可能通过调控CCKBR参与胃癌的发生发展。     

原花青素对前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究原花青素对人雄激素依赖性前列腺癌细胞株LNCaP细胞增殖和凋亡的影响.方法 体外培养的LNCaP细胞株与100、200、300 μg/ml的原花青素共孵育,分别在24、48和72 h时观察细胞形态学变化,MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞术分析细胞凋亡情况.结果 原花青素可引起LNCaP细胞形态较明显改变.不同浓度(100、200、300 μg/ml)原花青素对LNCaP细胞作用的细胞增殖抑制率分别为27.1%、72.1%和86.4%.流式细胞术检测表明原花青素可诱导LNCaP细胞凋亡,300μg/ml原花青素处理72 h引起36.5%的凋亡率.这3种作用均随原花青素浓度和作用时间的延长而增强.结论 原花青素可在体外抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖,并促进其凋亡.     

漆树酸对人前列腺癌细胞 LNCaP 细胞周期的影响及机制

目的：观察漆树酸对人前列腺癌细胞 LNCaP 细胞周期的影响并分析其机制。方法人前列腺癌细胞 LNCaP 经漆树酸处理后,MTS 法观察不同时间、不同浓度的漆树酸对细胞增殖率的影响,流式细胞术分析细胞周期变化,Western blot 方法观察漆树酸作用后细胞周期相关因子 CDK4、CDK6、cyclin D1和 P27蛋白水平的表达变化。结果（1）漆树酸时间和浓度依赖性地抑制细胞增殖;（2）经漆树酸处理后的细胞出现生长抑制,细胞主要阻滞在 G0／G1期;（3）漆树酸作用细胞后,CDK4、CDK6、cyclin D1蛋白表达水平低于溶剂对照组,而 P27蛋白表达水平高于溶剂对照组。结论漆树酸可抑制 LNCaP 细胞增殖,其机制可能是与细胞周期相关蛋白 P27的上调, CDK4、CDK6、cyclin D1表达下调有关,导致细胞阻滞在 G0／G1期。     

MicroRNA-148a在妊娠期肝内胆汁淤积症中的表达及临床预测价值

目的 探讨microRNA-148a在妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）中的表达及临床预测价值。方法选取2020年2月—2022年1月天水市中西医结合医院收治的113例ICP患者作为ICP组,另选取同期在该院产检的80例健康孕妇作为对照组。对比两组肝功能及microRNA-148a相对表达量。随访统计ICP患者妊娠结局,并依据妊娠结局分为不良组和良好组。对比不同妊娠结局ICP患者临床资料及microRNA-148a相对表达量。多因素逐步Logistic回归模型分析影响ICP患者妊娠结局的相关因素。绘制受试者工作特征（ROC）曲线,以曲线下面积（AUC）分析microRNA-148a对ICP患者妊娠结局的预测效能。结果 ICP组总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、门冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）及microRNA-148a相对表达量高于对照组（P <0.05）。不良组与良好组年龄、体质量指数、孕周、产次构成、DBIL、AST、ALT、白细胞计数、血小板计数、平均血小板体积、血红蛋白、尿蛋白、血肌酐比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。不良组重度ICP...     

MiR-148a调控胃癌细胞侵袭迁移的作用机制研究

目的 研究miR-148a在胃癌侵袭迁移中的作用,为新肿瘤标志物的研究提供理论基础。方法 荧光实时定量PCR（RT-PCR）检测miR-148a在胃癌细胞系和正常胃黏膜细胞中的表达水平,HGC-27分别转染miR-148a control/miR-148a mimic和miR-148a control/miR-148a inhibitor后检测miR-148a表达水平的改变,Transwell法检测miR-148a对HGC-27细胞侵袭和迁移的影响,Western blot法检测miR-148a对胃癌细胞中c-myc蛋白表达的调控。结果 MiR-148a在胃癌细胞中的表达明显低于正常胃黏膜细胞;HGC-27转染miR-148a mimic后miR-148a表达升高,HGC-27转染miR-148a inhibitor后miR-148a表达下降;miR-148a能够显著抑制HGC-27细胞的侵袭和迁移;miR-148a能够明显下调c-myc蛋白的表达。结论 miR-148a通过c-myc来发挥抑制胃癌侵袭迁移的作用。     

多西他赛对肺癌A549细胞中eIF3a表达的影响

目的：探讨人类肺癌细胞株中,不同剂量的多西他赛对真核翻译起始因子3a（eukaryotic initiation factor 3 subunit a, eIF3a）和α-微管蛋白（α-tubulin）表达的影响及其时效、量效关系。方法：人类肺腺癌细胞株A549用不同浓度的多西他赛处理不同的时间后,Real-time PCR法检测α-微管蛋白和eIF3a的mRNA表达水平,Western印迹法检测α-微管蛋白和eIF3a的蛋白表达水平。结果：多西他赛不能影响α-微管蛋白mRNA和蛋白水平的表达,且eIF3a与α-微管蛋白的表达水平之间没有明显的相关性。高浓度(30 μg/L)多西他赛处理细胞后,eIF3a的mRNA表达水平随着时间的延长有上升的趋势。 结论：多西他赛在高剂量时具有增加eIF3a mRNA表达的趋势,eIF3a不参与α-微管蛋白表达的调节。