氯化甲基汞对小鼠卵巢细胞周期的影响

为探讨氯化甲基汞对雌性动物生殖系统的影响，采用氯化甲基汞给雌性昆明种小鼠急性染毒，剂量为１／２００ ＬＤ５０，１／２０ ＬＤ５０和１／２ ＬＤ５０，染毒后采用ＦＡＣ－Ｓｃａｎ流式细胞仪技术分析了氯化甲基汞对卵巢细胞周期的影响。结果表明：１／２０ ＬＤ５０组和１／２ ＬＤ５０组中处于Ｇ０／Ｇ１期时相的细胞百分数高于对照组（Ｐ〈０．０５），而１／２－ ＬＤ５０组和１／２ ＬＤ５０组的Ｓ期时相的细胞的百     

氯化甲基汞对大鼠脑神经细胞c-fos表达的影响

目的通过体内与体外实验相结合的方法研究氯化甲基汞(MMC)对脑神经细胞c-fos表达的影响,探讨甲基汞所致脑发育损伤的机制.方法体外实验中,应用免疫细胞化学方法观察MMC对培养神经元c-fos表达的影响.体内实验中,Wistar妊娠大鼠于妊娠7～10d连续灌胃,每日给予MMC4mg/kg.取出生后第1、3、5、7、10和15d仔鼠大脑组织制备常规组织切片.采用免疫组织化学方法检测c-fos表达.结果体外培养的神经元中加入0.3μmol/LMMC持续作用后,神经元中c-Fos阳性细胞率在0.5h开始增多,并随时间的延长而增加.培养神经元接触MMC10min和2、6h组,细胞阳性率分别为(6.97±2.86)%、(66.86±5.32)%、(64.49±3.09)%.体内实验中,对照组和实验组中仔鼠大脑皮层中c-Fos蛋白阳性细胞率随发育时间延长逐渐减少,但实验组均高于相应对照组,实验组第1、3天组c-Fos阳性率分别为(47.01±3.79)%和(46.71±1.96)%,与对照组的(35.86±3.04)%和(33.35±1.06)%相比,差异有非常显著性.结论MMC可诱导脑神经细胞c-fos的过表达,这可能是MMC所致脑发育损伤的机制之一.     

氯化甲基汞对体外培养胚胎的发育毒性实验研究

用体外全胚胎培养模型并结合电镜技术探讨了氯化甲基汞对大鼠胚胎的发育毒性。结果表明：氯化甲基汞的体外最小致畸剂量为０．２μｇ／ｍｌ，除ＶＹＳ直径和ＶＹＳ血管形成２项指标外，其它各指标值均明显低于对照组（Ｐ＜０．０５）。随着染毒剂量增加，氯化甲基汞对体外培养胚胎的发育毒性作用明显增强，呈剂量－反应关系，浓度达１．６μｇ／ｍｌ时全部胚胎均死亡。氯化甲基汞在＜０．８μｇ／ｍｌ时并不影响ＶＹＳ胎盘的生长发育，表现在ＶＹＳ直径、ＶＹＳ血管形成和电镜观察ＶＹＳ的超微结构均与对照组无显著性差异，说明氯化甲基汞能迅速透过胎盘，直接攻击胚胎细胞。提示氯化甲基汞的直接细胞毒作用，可能是其体外致畸作用、胚胎毒性作用的一个重要机制。     

宫内接触氯化甲基汞对发育阶段小鼠学习记忆能力和海马神经元超微结构的影响

目的　研究宫内接触氯化甲基汞对发育阶段小鼠学习记忆能力及海马神经元超微结构的影响.方法　对妊娠7～10天的小鼠每天灌胃给予0和4mg kgbw氯化甲基汞。以出生6周龄仔鼠进行学习记忆能力测试及透射电镜技术观察宫内接触氯化甲基汞对发育阶段小鼠学习记忆能力及海马神经元超微结构的影响。结果　氯化甲基汞暴露组学习记忆能力显著低于对照组(P <0 . 0 5 )。超微结构显示海马神经元细胞膜结构不清,部分核膜消失,核膜皱缩,核孔不清,染色质淡染;线粒体肿胀变大、粗面内质网扩张、空泡变性,核糖体减少;轴突环出现分层;有髓神经纤维脱髓鞘、板状分离。结论　甲基汞可致小鼠学习记忆障碍和海马神经元超微结构改变;宫内接触氯化甲基汞引起海马神经元超微结构的改变与小鼠学习记忆障碍密切相关。     

氯化甲基汞对APL模型裸鼠的作用研究

目的研究氯化甲基汞（MMC）对急性早幼粒细胞性白血病（APL）模型裸鼠的作用。方法去除免疫力BALB／C裸鼠经3Gy60Co照射10min,尾静脉接种5×10^7／ml对数生长期NB4细胞0．1ml,建立APL裸鼠模型。隔2日灌胃给予10mg／kg（0．1ml／10g）的MMC或三氧化二砷（ATO）（ATO作抗癌阳性对照）,探讨MMC对APL裸鼠白细胞计数及分类、脾／体比值及生存期等的影响。结果MMC能降低APL裸鼠的白细胞计数、白血病细胞比例及脾／体比值,延长APL裸鼠生存期,且与APL对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论4MMC对APL裸鼠各项指标有一定影响,可通过进一步的机制研究探讨将其用于治疗。     

氯化甲基汞对雄性小鼠的生殖毒作用

以１／５０００ＬＤ５０、１／１０００ＬＤ５０和１／１００ＬＤ５０的氯化甲基汞剂量分别给雄性小白鼠经口染毒７５天后，测定睾丸组织中的ＬＰＯ和ＬＤＨ－ｘ。结果表明，实验组的ＬＰＯ高于对照组；１／１０００ＬＤ５０和１／１００ＬＤ５０组的ＬＤＨ－Ｘ均低于对照组和１／５０００ＬＤ５０组；睾丸脏器系数各组间无差别。同时探讨了甲基汞造成雄性动物生殖能力下降的可能机制。     

甲基汞对培养大鼠脑神经细胞损伤的影响

目的 通过体外实验探讨氯化甲基汞(methylmerculy chloride，MMC)所致脑发育损伤及其与c—fos表达的关系。方法 采用形态学试验方法，观察MMC对体外培养大鼠脑神经细胞的损害作用，并应用免疫细胞化学方法观察MMC对神经元、神经胶质细胞c—fos表达的影响。结果 体外培养的神经细胞接触0．3μmol／L MMC后，出现胞浆浓缩、轴突回缩，染色质边聚、固缩等现象，呈凋亡的典型形态。神经细胞培养体系中加入0．3μmol／L MMC持续作用后，神经元和神经胶质细胞中c—fos阳性细胞率在0．5h开始增高，并随时间的延长而增加，2h以后维持较高水平。培养细胞接触MMC 10min、2h、6h后，实验组神经元c—fos阳性表达率分别为8．78％，68．26％，64．96％，神经胶质分别为7．74％，66．61％，72．52％。结论 MMC可诱导体外培养大鼠脑神经细胞c—fos高表达，并诱发其凋亡。MMC诱发神经细胞凋亡可能与c—fos介导有关。     

长期接触低剂量氯化甲基汞致脑发育损伤大鼠动物实验模型的研究

目的:观察大鼠长期接触低剂量氯化甲基汞(MMC)不同发育阶段仔鼠脑汞含量。方法:雌性Wistar大鼠体重(120±20)g,随机分为3个实验组和对照组各30只。实验组母鼠从妊娠前90天至仔鼠出生后30天连续喂饲含有不同剂量(0.75、1.50和3.00 mg/kg)MMC的普通饲料,对照组给予普通饲料。采用干烧法用F732-V冷原子吸收测汞仪分别测定仔鼠大脑、小脑和海马组织汞含量。结果:在建立MMC所致脑发育损伤动物实验模型过程中,发现实验组母鼠的产子率低于正常鼠,高剂量组尤为明显,生后仔鼠外观无异常表现,不同脑区(大脑、小脑和海马)脑汞含量差异无统计学意义(P>0.05)。各实验组生后不同时间仔鼠脑汞含量明显高于相应对照组(P<0.05),各实验组仔鼠脑汞含量随母鼠接触剂量的增高而有不同程度升高(P<0.05),同一实验组内仔鼠脑汞含量随生后时间的延长逐渐升高,在生后30天达峰值。结论:甲基汞可透过血脑屏障蓄积于仔鼠脑内,且仔鼠脑汞含量与母鼠接触剂量之间存在一定剂量反应关系。     

氯化甲基汞对大鼠脑神经细胞凋亡及P^53基因表达的影响

选用Ｗｉｓｔａｒ系雄性大鼠,经皮下注射给予１０ｍｇ／Ｋｇ体重氯化甲基汞（ＣＨ３ＨｇＣｌ）,连续７天,第１５天取其脑组织,利用细胞和分子生物学技术进行ＤＮＡ电泳和流式细胞术（ＦＣＭ）分析。实验结果,染毒组大鼠脑组织ＤＮＡ电泳呈现特征性梯形电泳带;ＦＣＭ分析染毒组大鼠脑神经细胞的凋亡率、Ｐ５３基因表达率显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。结果表明：ＣＨ３ＨｇＣｌ以诱导凋亡方式导致脑神经细胞损伤,Ｐ５３基因参与ＣＨ３ＨｇＣｌ诱导脑神经细胞凋亡的基因调控过程。     

氯化甲基汞激发程序性细胞死亡与胚胎神经系统发育的关系探讨

用ＴｄＴ介导脱氧核苷酸切口末端标记（ＴＵＮＥＬ）、尼罗兰活体染色、扫描和透射电镜及体内致畸试验等方法研究了氯化甲基汞（一次性腹腔注射剂量范围是０～３．２ｍｇ／ｋｇ）能否使神经胚形成期大鼠胚胎发生细胞凋亡亦称程序性细胞死亡（ＰＣＤ）及其ＰＣＤ对胚胎神经系统发育的影响。实验结果表明：随着甲基汞剂量的不断增高，胚胎脑组织ＰＣＤ检测阳性率亦显著增加，呈明显的剂量－反应关系；电镜下发现胚胎脑上皮细胞表面微绒毛数量减少和变短，细胞膜上出现大小不一的空洞样变，细胞器正常形态亦发生病理性改变，例如出现凋亡小体；甲基汞诱发脑发育异常的主要表现是神经管未闭。研究结果提示ＰＣＤ是甲基汞导致胚胎脑部畸形发生的重要机理之一。     

线粒体DNA缺失和功能缺失对核基因影响

目的 探讨线粒体DNA(mtDNA)缺失和线粒体功能缺失对核基因表达的影响.方法 应用人全基因组芯片分别对mtDNA缺失、线粒体功能缺失及正常HepG2细胞的核基因表达谱进行生物信息学分析.结果 与正常HepG2细胞比较,核基因表达差异倍数>2倍的m tDNA缺失细胞共有5 489个,其中3 350个上调,2 139个下调;而线粒体功能缺失细胞共有3 334个,其中1 457个上调,1 877个下调;mtDNA缺失和线粒体功能缺失对细胞信号途径均有明显影响,与正常HepG2细胞比较,线粒体功能缺失时信号途径差异明显的有334个,mtDNA缺失时信号途径差异明显的有188个.结论 mtDNA缺失和线粒体功能缺失对核基因表达均有明显影响,mtDNA缺失对核基因表达的影响比功能缺失的影响更大,其可能机制在于对不同信号途径的影响.     

丙烯腈对大鼠脑组织和神经胶质细胞中核因子-κB信号传导通路活性及相关基因表达的影响

目的丙烯腈(ACN)对大鼠脑组织和大鼠神经胶质细胞中核因子κB(NF-κB)信号传导通路活性及相关基因表达的影响。方法利用micorarray和EMSA实验测定了SD大鼠经0和200mg/kg ACN分别作用14、28和90天后,大鼠脑组织NF-κB信号传导通路活性的变化及相关基因表达的变化;大鼠神经胶质细胞经0、25、50和75μg/ml ACN作用4和24h后细胞NF-κB信号传导通路活性的变化及相关基因表达的变化。结果ACN促进大鼠脑组织(体内)和神经胶质细胞(体外)NF-κB信号传导通路相关基因(NIK、IKK、NF-κB1、NF-κB2、IκBa和c-myc)的表达。EMSA实验也进一步证实了ACN可激活大鼠脑组织和大鼠神经胶质细胞中NF-κB信号传导通路。结论ACN诱导的氧化应激和ACN激活NF-κB信号传导通路具有一定的关系。