众生丸体内抗H9N2亚型禽流感病毒的研究

目的:研究众生丸对滴鼻感染H9N2亚型禽流感病毒的小鼠的治疗作用。方法:以利巴韦林及达菲为阳性对照,通过小鼠滴鼻感染H9N2亚型禽流感病毒,分别建立小鼠禽流感病毒性肺炎动物模型和禽流感病毒感染致小鼠死亡的动物模型,观察小鼠肺部病变和死亡情况,评价众生丸对感染H9N2亚型禽流感病毒小鼠的治疗效果。结果:众生丸高中低剂量均可显著降低禽流感病毒性肺炎小鼠的肺指数(P<0.05,P<0.01),能减少感染小鼠的死亡数,延长平均存活时间,但与病毒对照组比较无统计学差异。结论:众生丸对滴鼻感染禽流感病毒H9N2亚型的小鼠有一定的治疗作用。     

克感利咽口服液在小鼠体内抗H9N2亚型禽流感病毒的作用

目的观察克感利咽口服液对滴鼻感染H9N2亚型禽流感病毒的小鼠的保护作用。方法以达菲为阳性对照药,通过小鼠滴鼻感染H9N2亚型禽流感病毒,分别建立小鼠禽流感病毒性肺炎动物模型和禽流感病毒感染致小鼠死亡的动物模型,研究克感利咽口服液体内对感染H9N2亚型禽流感病毒小鼠的保护效果。结果克感利咽口服液可显著降低禽流感病毒性肺炎小鼠的肺指数,减少染毒小鼠的死亡数,延长平均存活时间。结论克感利咽口服液对滴鼻感染禽流感病毒H9N2亚型的小鼠有一定的保护作用。     

清开灵和双黄连口服液体内抗禽流感病毒作用

目的 评价清开灵和双黄连口服液体内抗禽流感病毒药效,探讨其对感染流感病毒小鼠免疫功能的影响.方法 建立H9N2亚型禽流感病毒鼠肺适应株人工感染BALB/c小鼠模型,以肺指数抑制率、生命保护率和肺病毒滴度为主要评价指标,研究清开灵和双黄连口服液对感染H9N2亚型禽流感病毒小鼠的防治效果;以脾指数、胸腺指数和T细胞亚群比率(CD4+/CD8+)为主要评价指标,探讨清开灵和双黄连口服液对感染流感病毒小鼠免疫功能的影响.结果 清开灵和双黄连口服液均能显著抑制H9N2亚型禽流感病毒引起的小鼠肺炎实变,攻毒后第4天小鼠肺指数抑制率分别为34.1%、26.3%.清开灵和双黄连口服液对感染小鼠有显著的生命保护作用,存活率分别为70.0%、60.0%,显著高于病毒对照组的存活率(30.0%),鼠肺病毒滴度显著低于病毒组(P＜0.01).清开灵和双黄连口服液对感染病毒后小鼠脾脏和胸腺萎缩具有显著的抑制作用,并能提升感染小鼠脾脏中CD4+/CD8+值.结论 清开灵和双黄连口服液具有显著的抗禽流感病毒作用,对病毒复制的抑制及对病毒感染导致的小鼠免疫功能下降的调节作用是其发挥抗病毒功效的重要机制.     

野菊花水提物体内外抗甲1型流感病毒(H_1N_1)作用研究

目的:从体内外抗病毒实验观察野菊花水提物抗甲1型流感病毒(H1N1)作用。方法:以病毒滴鼻感染小鼠,观察野菊花水提物对肺指数、病毒致小鼠死亡率的影响;体外实验以H1N1感染MDCK细胞,观察野菊花水提物抗H1N1病毒作用。结果:野菊花水提物0.34、0.17、0.085 g/kg 3个剂量组口服给药均能有效降低流感病毒感染小鼠肺指数,与模型组比较肺指数抑制率分别达到28.9%、28.9%、23.6%,野菊花水提物0.34 g/kg能延长流感病毒感染小鼠平均生存时间,降低死亡率;体外实验显示野菊花水提物在无毒浓度下的最大稀释浓度18.28μg/mL下可以完全抑制病毒。结论:野菊花水提物在体内外对甲1型流感病毒均有较好的抑制作用。     

众生丸在小鼠体内抗H5N1亚型禽流感病毒的实验研究

目的：研究众生丸在小鼠体内对禽流感病毒H5N1亚型的抑制作用。方法：以达菲为阳性对照,观察众生丸对小鼠流感病毒性肺炎的抑制作用和对染毒小鼠的死亡保护作用,从而判定其抗流感病毒作用。结果：与病毒对照组相比较,众生丸可降低禽流感病毒性肺炎小鼠肺指数,调节T淋巴细胞亚群,降低小鼠血清中TNF-α含量,促进IFN-γ和IL—10产生,减轻肺间质、肺泡内炎症;众生丸低剂量组对H5N1亚型禽流感病毒所致小鼠的死亡有降低作用,并延长生存时间。结论：众生丸对H5N1禽流感病毒感染小鼠所致肺病变具有抑制作用。     

葛根汤颗粒治疗上呼吸道感染所致小鼠病毒性肺炎及死亡保护作用

目的：研究葛根汤颗粒对甲型H₁N₁流感病毒PR8株感染致小鼠病毒性肺炎模型的治疗及死亡保护作用。方法：采用甲型H₁N₁流感病毒(PR8株)滴鼻感染小鼠造成病毒性肺炎模型,观察小鼠的肺指数和肺指数抑制率,肺内细支气管及肺组织苏木精-伊红(HE)染色病理切片镜下病变观察及等级评分;同时采用流感病毒PR8毒株滴鼻感染小鼠造成死亡保护模型,观察小鼠感染后2周内的死亡情况,计算小鼠的死亡率、死亡保护率、平均存活天数和生命延长率。结果：葛根汤颗粒高、中剂量组可显著降低模型组小鼠肺指数(P<0.01);葛根汤颗粒高、中剂量组与模型组比较可显著减轻支气管炎症反应渗出状况,红肿相对消退,并且缓解病毒感染所致肺泡、肺间质渗出炎症反应及红细胞渗出情况(P<0.01,P<0.05);模型组小鼠死亡率90%,平均存活天数9.95 d,葛根汤颗粒3个剂量组与模型组比较可显著降低小鼠死亡率,延长小鼠平均存活天数,提高生命延长率(P<0.01,P<0.05)。结论：本研究发现葛根汤颗粒可显著降低病毒性...     

众生丸在小鼠体内抗H5N1亚型禽流感病毒的实验研究

目的：研究众生丸在小鼠体内对禽流感病毒H5N1亚型的抑制作用。方法：以达菲为阳性对照,观察众生丸对小鼠流感病毒性肺炎的抑制作用和对染毒小鼠的死亡保护作用,从而判定其抗流感病毒作用。结果：与病毒对照组相比较,众生丸可降低禽流感病毒性肺炎小鼠肺指数,调节T淋巴细胞亚群,降低小鼠血清中TNF-α含量,促进IFN-γ和IL-10产生,减轻肺间质、肺泡内炎症;众生丸低剂量组对H5N1亚型禽流感病毒所致小鼠的死亡有降低作用,并延长生存时间。结论：众生丸对H5N1禽流感病毒感染小鼠所致肺病变具有抑制作用。     

黄芩提取物与有效成分抗亚洲甲型流感病毒作用的实验研究

目的:比较两组黄芩提取物(河北黄芩水提组与黄芩成分配比物组)对流感病毒甲型鼠肺适应株(FM1)感染小鼠的死亡保护作用以及肺指数、肺组织病毒血凝滴度的影响。方法:以FM1感染小鼠为动物模型,感染1h后给药,以死亡率、肺指数、血凝滴度为评价指标,观察两组黄芩提取物在小鼠体内的抗流感病毒作用。结果:两组黄芩提取物均能降低流感病毒感染小鼠的死亡率。(P<0.05),延长小鼠的存活时间(P<0.05),降低肺指数(P<0.05),降低血凝滴度(P<0.05)。结论:两组黄芩提取物对FM1感染小鼠均具有良好的抗流感病毒感染作用,两组疗效相当,说明黄芩苷、汉黄芩素及黄芩素的合理配比可体现黄芩的药效质量。     

众生丸对H1N1流感小鼠的保护及免疫调节作用研究

目的研究众生丸对H1N1流感病毒感染小鼠的保护及免疫调节作用。方法以奥司他韦为阳性药,H1N1流感病毒滴鼻感染小鼠复制小鼠病毒性肺炎模型。比较小鼠病毒性肺炎模型的肺指数、肺组织形态学、死亡保护率、小鼠T淋巴细胞亚群和细胞因子干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的数量变化。结果与病毒对照组比较,众生丸可显著降低H1N1感染小鼠的肺指数,提高存活率,调节T细胞亚群含量,促进血清中IFN-γ和IL-10产生。结论众生丸可通过减轻炎症,调节免疫而减轻H1N1亚型流感病毒所致小鼠肺部病变,提高染毒小鼠存活率。     

清解防感颗粒对流感病毒A/PR/8/H1N1感染小鼠的死亡保护及肺脏保护作用

目的:研究清解防感颗粒抗流感病毒的作用。方法:采用亚洲甲型鼠肺适应株(A/PR8/H1N1)滴鼻感染小鼠制作小鼠病毒性肺炎模型,观察药物延长感染小鼠生命的作用以及光学显微镜下观察小鼠肺组织的病变程度并评分,计算小鼠肺指数,比较组间肺指数的变化趋势及评分差异。结果:清解防感颗粒8g/kg、4g/kg剂量组可显著延长感染小鼠生命、降低死亡率,降低感染小鼠的肺指数,明显增加体重并降低小鼠肺部病变指数。结论:清解防感颗粒对小鼠感染流感病毒PR8有明显的死亡保护及肺脏保护作用。     

岗梅根总皂苷对高脂血症大鼠降血脂作用的实验研究

目的:探讨岗梅根总皂苷对高血脂模型大鼠的降血脂作用。方法:将72只大鼠,随机分为6组,正常组、模型组、辛伐他汀组、岗梅总皂苷高、中、低剂量组。通过给予大鼠饲喂高脂饲料,建立高血脂大鼠模型。正常组和模型组均灌胃等体积生理盐水,辛伐他汀组灌胃辛伐他汀4 mg/kg,岗梅总皂苷高、中、低剂量组分别灌胃440 mg/kg、220 mg/kg、110 mg/g岗梅根总皂苷混悬液。连续给药10周,每天1次。测量血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清瘦素(LEP)、脂联素(ADP)、白细胞介素-6(IL-6)、C-反应蛋白(CPR)水平。结果:与模型组比较,岗梅根总皂苷高、中、低剂量组大鼠血清中TC、TG、LDL-C、LEP、CRP和IL-6水平均显著降低(P0.01),岗梅根总皂苷各剂量组HDL-C水平均显著升高(P0.01,P0.05),岗梅根总皂苷高剂量可显著升高ADP水平(P0.05)。结论:岗梅根总皂苷对高血脂大鼠有降血脂作用。     

复方黄芩提取物对小鼠体内流感病毒mRNA复制和干扰素(IFN)表达的影响

目的:研究复方黄芩提取物对小鼠体内流感病毒(influenza virus,Ⅳ)mRNA复制的抑制作用和干扰素(interferon,IFN)表达的诱生作用。方法:以流感病毒鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染的小鼠肺炎为模型,采用RT-PCR技术测定小鼠体内流感病毒mRNA和干扰素含量。观察复方黄芩提取物对小鼠体内流感病毒mRNA复制和IFN表达的影响。结果:复方黄芩提取物对小鼠体内流感病毒mRNA表达有较好的抑制作用(P<0.01),对干扰素的表达有诱生作用(P>0.05)。结论:复方黄芩提取物具有诱生干扰素、抑制流感病毒在小鼠体内的复制作用。     

Evaluation of the anti-neuraminidase activity of the traditional Chinese medicines and determination of the anti-influenza A virus effects of the neuraminidase inhibitory TCMs in vitro and in vivo

Etnopharmacological relevance

Neuraminidase (NA) inhibitors are currently the most effective drugs to treat influenza A viruses infection. Many traditional Chinese medicines (TCMs) have been used in the clinics to treat influenza. The anti-viral mechanisms of these TCMs and their inhibitory effects towards NA need to be systematically tested.

Aim of the study

To evaluate the anti-NA activity of the TCMs and the anti-influenza A virus effects of the NA inhibitory TCMs in vitro and in vivo.

Material and methods

We tested the inhibitory activity of water extracts from 439 TCMs towards NA. The in vitro anti-influenza virus activities of the 5 TCMs were evaluated using the strain A/California/7/2009 (H1N1) NYMC X-179A of influenza A virus. A randomly selected TCM with NA inhibitory activity, Melia toosendan extract, was further evaluated using a mouse model infected with influenza A virus.

Results

Five TCMs, Duchesnea indica (Andr.) Focke [Fragaria indica Andr.], Liquidambar formosana Hance., Lithospermum erythrorhizon Sieb. et Zucc., Melia toosendan Sieb. et Zucc., and Prunella vulgaris L., exerted potent inhibitory activity towards NA. These TCMs in the range of 25-250 μg/mL had the ability to reduce virus-induced cytopathic effect (CPE) and the virus yield in MDCK cells. Melia toosendan significantly reduced death rate and prolonged mean day to death (MDD) of the viral infected mice.

Conclusions

This study describes five TCMs exerted strong inhibitory activities towards NA, and exhibited antiviral effect against influenza A virus by reducing viral reproduction and reduced CPE of the viral infected cells. Melia toosendan, significantly reduced death rate and prolonged survival of the H1N1 viral infected mice.     

黄连香薷饮抗流感病毒作用的拆方研究

目的：对古方黄连香薷饮进行拆方研究,筛选出抗甲型H1N1流感病毒作用的有效中药组合。方法：以甲型H1N1流感病毒滴鼻感染小鼠,建立小鼠病毒性肺炎模型,并以黄连香薷饮全方及拆方组合进行给药治疗,同时设立阳性对照组和正常对照组,计算各组小鼠的肺指数及肺指数抑制率,并观察小鼠肺组织病理变化。结果：与模型组比较,阳性对照组、香薷组、黄连-厚朴组及黄连香薷饮全方组小鼠的肺指数均显著降低,肺指数抑制率分别为31.43%、47.74%、47.74%和41.74%,且肺部病变明显减轻。结论：香薷单味药、黄连-厚朴药对和黄连香薷饮全方均具有显著的抗甲型H1N1流感病毒的作用。     

黄芩素抑制流感病毒A／FM1／1／47（H1N1）的一个新机理：干扰病毒中后期mRNA的合成

目的：阐明黄芩素在细胞培养中对流感病毒A／FM1／1／47（H1N1）的抑制机理。方法：通过结晶紫染色实验测定黄芩素对流感病毒的抑制作用,采用不同加药方式进一步研究黄芩素对病毒复制周期不同阶段的影响。通过RT-PCR方法比较黄芩素给药组和病毒模型组流感病毒M1基因mRNA的水平,确定黄芩素对病毒mRNA合成的抑制作用。结果：不同浓度的黄芩素在体外能够明显抑制流感病毒A／FM1／1／47（HIN1）和A／Beijing／32／92（H3N2）的感染,并呈剂量依赖。病毒感染后再加入药物黄芩素（治疗法）的抑制作用明显好于病毒感染前（预防法）和病毒感染同时（同时法）加入的抑制效应。在病毒感染6h、9h时,黄芩素给药组的病毒M1基因mRNA水平明显降低。结论：黄芩素体外可通过干扰流感病毒A／FM1／1／47（HIN1）中后期mRNA的合成抑制病毒的复制。     

小儿肺热咳喘口服液防治甲型H1N1流感病毒感染免疫低下小鼠的研究

目的:评价小儿肺热咳喘口服液对免疫低下小鼠感染甲型H1N1流感病毒的防治作用。方法:ICR小鼠sc环磷酰胺造成免疫低下,以甲型H1N1流感病毒滴鼻感染造成肺炎模型,造模同时及造模前ig 20,10,5 mL·kg-1小儿肺热咳喘口服液4 d后观察肺部炎症、计算肺指数,死亡率和生命延长率,Real-time RT-PCR法检测肺组织中病毒载量,酶联免疫法检测血清中免疫因子的含量。结果:小儿肺热咳喘口服液治疗性给药或预防性给药后能明显降低流感病毒FM1株和PR8株感染后免疫低下小鼠的肺指数、降低死亡率、延长平均存活天数、显著降低小鼠肺组织中的病毒载量,明显升高小鼠血清中CD4/CD8的比值。结论:小儿肺热咳喘口服液对甲型H1N1流感病毒感染免疫低下小鼠造成的病毒性肺炎具有明显的防治作用。     

滨蒿总黄酮对H1N1流感病毒感染的A549细胞先天免疫信号通路的影响＊

目的 探讨滨蒿总黄酮（Total flavonoids from Artemisia scoparia Waldst. et Kit.，ASTF）对抗流感病毒作用及H1N1流感病毒感染的人肺癌A549细胞先天免疫反应过程中起调控作用。方法 定量检测H1N1流感病毒致犬肾上皮MDCK细胞病变（Cytopathic effect， CPE）作用；用TRIzol提取总RNA，RT-qPCR检测ASTF对流感病毒相关信号通路的抗病毒效果，并用流式微球技术（Cytometric bead array， CBA）和ELISA检测ASTF对H1N1流感病毒感染的A549细胞分泌炎性细胞因子的影响。结果 ASTF在体外对H1N1流感病毒有一定抑制作用，可降低H1N1感染的A549细胞先天免疫通路中的RIG-I、AKT、P38、PI3K、STING、PKR和Viperin mRNA表达水平及炎性细胞因子IL-2、IL-6、IL-17A的分泌。结论 ASTF通过抑制胞内先天免疫信号通路RLRs、PI3K/AKT、P38 MAPK发挥免疫调节和抗炎作用，从而达到抗流感的效果。