棘阿米巴的分离及实验室培养

[目的 ]为棘阿米巴感染的病原诊断、形态学观察及进一步的研究建立棘阿米巴的实验室培养方法 .[方法 ]将含有阿米巴的 1g土壤置于敷有大肠杆菌的 15mg/L琼脂培养基上 ( 2 5℃ )培养 1周 ,取单个棘阿米巴包囊纯培养 ,以 0 1mol/L盐酸进行杀菌处理后 ,用PYG培养液进行无菌培养 .[结果 ]从第 3日起可在培养基上观察到滋养体 ,第 5日开始部分形成包囊 ,棘阿米巴滋养体形态呈不规则 ,具有特征性棘状伪足 ,颗粒状胞质内有较多空泡 .包囊具有双层囊壁 ,外囊皱缩 ,内囊呈四边形或波浪状 .[结论 ]建立了分离及培养棘阿米巴的实验方法     

伏立康唑对体外培养棘阿米巴增殖和形态表现的影响

目的：探讨伏立康唑对体外培养棘阿米巴的增殖和形态表现的影响,阐明伏立康唑对棘阿米巴滋养体和包囊的抑制和杀伤作用。方法：选取对数生长期的棘阿米巴原虫分为对照组和实验组（2.5 和25.0 mg·L^-1）,分别于药物作用后24、48、72和96 h收集各组虫体,计数虫体数量并绘制增殖曲线;光镜下观察棘阿米巴的形态表现、活力和贴壁情况;电镜下观察其超微结构。结果：与对照组比较,实验组棘阿米巴虫体数量减少（P<0.01）;光镜下实验组棘阿米巴形态变化明显,由不规则带棘状伪足的滋养体转化为圆形包囊,出现大量细胞碎片;电镜下实验组棘阿米巴的超微结构出现不同程度的破坏、坏死。结论：一定浓度伏立康唑能够有效抑制体外培养棘阿米巴的增殖并改变其形态甚至超微结构,对滋养体和包囊均具有明显杀伤作用。     

阿米巴病

阿米巴病由溶组织阿米巴感染所引起，溶组织阿米巴有二种形态，即包囊和滋养体，包囊为传染型，滋养体为寄生型，寄生于肠腔和肠壁中。阿米巴肝病是阿米巴肠病最常见的一种并发症。     

埃尔托霍乱弧菌感染棘阿米巴原虫的实验研究

目的 探讨埃尔托霍乱弧菌能否在棘阿米巴原虫内生存繁殖,并观察棘阿米巴原虫对埃尔托霍乱弧菌存活的影响.方法 采用埃尔托霍乱弧菌与棘阿米巴共培养的方法,通过倒置显微镜和电镜切片观察霍乱弧菌在阿米巴滋养体内的生长情况.结果 共培养8 h后可见埃尔托霍乱弧菌已进入棘阿米巴滋养体的细胞质中.随着共培养时间的延长,吉曼尼兹染色下可见埃尔托霍乱弧菌在棘阿米巴滋养体的空泡中的数量增多.共培养液经成囊培养待95%棘阿米巴转化为包囊后,使用盐酸处理的包囊传代实验能再分离培养出埃尔托霍乱弧菌.与棘阿米巴共培养的霍乱弧菌的活菌数在15 d内维持在(1.02～9.77)106 CFU/mL;而单独培养的埃尔托霍乱弧菌的活菌数量2 d后下降了3个数量级,在后续13 d内基本保持(1.40～3.07)×103 CFU/mL;对每一时间段两者作t检验比较,差异在统计学上都有显著性意义(P<0.01).结论 埃尔托霍乱弧菌能在棘阿米巴的滋养体和包囊内生存繁殖,棘阿米巴能提高埃尔托霍乱弧菌的存活数量.     

溶组织内阿米巴和其他细菌混合感染小儿腹泻18例临床分析

目的　总结引起小儿腹泻溶组织阿米巴混合感染的其他细菌的菌种及临床特点。方法　选择 18例小儿腹泻的阿米巴肠炎病例 ,进行便常规检查 ,细菌培养加药敏试验 ,查阿米巴滋养体、包囊和霉菌。结果　 18例混合感染患儿均查到溶组织阿米巴滋养体。其中 3例同时查到包囊 ,便菌培养 15例福氏志贺菌生长 ,3例宋内氏志贺菌生长、沙门氏菌尿生长 ;5例查到霉菌生长。结论　溶组织阿米巴感染造成的小儿腹泻 ,多为细菌、霉菌等混合感染。因此 ,诊断中应注意常规检查、菌培养 ,以明确病致菌 ,采取相应治疗措施为宜     

眼角膜组织中棘阿米原虫的培养

阿米巴原虫多见于水、土壤和腐殖质中。其滋养体以细菌为食,以二分裂的简单方式增殖,可形成包膜应付不利的生活环境。1965年阿米巴原虫被首次报道可偶尔侵入人体引起疾病,受损皮肤和眼腈是阿米巴原虫常见的入侵途径。棘阿米巴是阿米巴的一种,棘阿米巴性角膜炎,是棘阿米巴原虫感染引起的顽固性、进行性角膜炎和角膜溃疡。     

阿米巴痢疾的诊断与鉴别诊断

阿米巴痢疾(amebic dysentery,intestinal amebiasis)是溶组织阿米巴引起的肠道传染病.溶组织阿米巴有大滋养体、小滋养体及包囊三种形态.当包囊被人食入后,在小肠的下端经胰蛋白酶的消化脱囊成为小滋养体,若人体抵抗力降低,则小滋养体变为大滋养体侵入肠壁而致病.     

阿米巴肝脓疡患者大便中检出溶组织阿米巴包囊体一例

溶组织内阿米巴是阿米巴疾病及各种阿米巴病的病原体.根据其生活史各期的变化可分滋养体和包囊体.主要寄生于结肠,在一定条件下侵入结肠壁组织形成溃疡,可随血流转移至肝、肺、脑等处引起阿米巴脓肿.笔者在1例以发热和咳嗽为主要症状的患者的大便常规中检出溶组织阿米巴包囊体.     

溶组织内阿米巴与哈门氏内阿米巴感染的调查

我国各地区溶组织内阿米巴(又名痢疾阿米巴、痢疾变形虫)的感染率悬殊较大,高者可达30％,低者仅为0.37％;华北地区一般较华中及华南地区低。由于此种致病性阿米巴感染引起的发病例占少数,各地学者对其致病力的见解不同,如有些学者依据其滋养体及包囊的大小、形态结构结合虫株毒力。对人体及动物产生的病变以及在培养基上繁殖的情况,作为划分宗、株与致病的关系。综合文献资料,多数学者认为大宗阿米巴,它们的滋养体直径在12微米以上,包囊直径在10微米以上者为大型致病性阿米巴,命名为溶组织内阿米巴(Entamoebahistolytica);小宗阿米巴,它们的滋养体直     

小鼠棘阿米巴性脑炎模型的建立

[目的]建立小鼠棘阿米巴性脑炎模型.[方法]经鼻腔滴注给ICR小鼠接种赫氏棘阿米巴,感染后每天观察病程变化并记录死亡例数.取死亡小鼠一半的脑组织匀浆置于铺了灭活处理大肠杆菌的琼脂培养基上培养,观察棘阿米巴的生长情况;取另一半脑组织行HE染色观察病理学改变.[结果]棘阿米巴感染后1周开始可见死亡小鼠,实验组小鼠脑组织中可观察到棘阿米巴生长.脑组织HE染色观察可见棘阿米巴滋养体浸润,其周围有炎性细胞浸润.[结论]应用鼻腔滴注法成功建立了棘阿米巴性脑炎模型.     

卡那霉素在体外对A.healyi的杀伤作用

[目的]观察卡那霉素在体外对棘阿米巴A.healyi的杀伤作用.[方法]用1.0,10.0,100.0g/L卡那霉素和0.2,2.0g/L甲硝唑在体外培养棘阿米巴3,8,24,48h,观察用药前及不同培养时间的生长情况.[结果]1.0g/L卡那霉素对棘阿米巴无抑制作用,10.0g/L卡那霉素在培养48h时及100.0g/L卡那霉素培养24h时抑制棘阿米巴生长,100.0g/L卡那霉素在培养48h时杀伤棘阿米巴.2.0g/L甲硝唑作用48h时仍无明显的杀伤作用.[结论]在体外卡那霉素质量浓度为10.0g/L时对棘阿米巴有抑制作用,100.0g/L时具有杀伤作用.     

卡泊芬净在体外对棘阿米巴生长的抑制作用

[目的]观察卡泊芬净在体外对棘阿米巴的抑制作用．[方法]用生理盐水作为空白对照,甲硝唑2．0g／L作为阳性对照,观察50,100,500mg／L质量浓度卡泊芬净在体外作用4,8,24,48,72h时观察棘阿米巴生长情况．[结果]与对照组比较,卡泊芬净质量浓度为50,100mg／L时棘阿米巴的生长差异不明显,质量浓度500mg／L、抑制时间4h开始棘阿米巴的生长明显得到抑制．[结论]卡泊芬净质量浓度为500mg／L时在体外对棘阿米巴的生长有抑制和杀伤作用,且效果优于甲硝唑．     

白花蛇舌草与半枝莲复合提取物对膀胱癌YTS-1细胞系抑制作用的研究

目的探讨白花蛇舌草与半枝莲复合提取物对膀胱癌YTS-1细胞系的作用。方法常规方法培养膀胱癌YTS-1细胞株,取对数生长期细胞进行实验。采用MTT法观察不同浓度药物（0.25、0.5、1、2、4和8mg／ml）对细胞的生长抑制率;流式细胞技术观察2mg／ml药物作用24、48、72h后细胞周期的改变;克隆形成实验检测不同浓度药物（0.25、0.5、1.0、2.0、4.0mg／m1）处理后细胞克隆形成率的变化。结果（1）不同浓度白花蛇舌草与半枝莲复合提取物作用于YTS-1细胞系24、48、72h后,在0.25-2mg／ml范围内随着药物浓度的增加和作用时间的延长,其对YTS-1细胞的生长抑制率也相应升高,抑制作用表现出良好的量效和时效依赖关系（P〈0.05）。（2）实验组2mg／ml白花蛇舌草与半枝莲复合提取物作用48h后,G2／M期细胞明显减少（P〈0.05）;作用72h后G2／M期细胞显著减少（P〈0.01）。在sub-G1区域出现了一个细胞峰,表明YTS-1出现了细胞凋亡迹象。（3）空白对照及025、0.5、1.0、20、40mg／ml的白花蛇舌草和半支莲复合提取物作用YTS-1细胞后克隆数分别为216.6±18.50、156.7±16.29、81.33±6.66、43.00±6.56、37.67±14.22、43.00±12.12,克隆形成率分别为10.8％、0.78％、0.41％、0.21％、0.18％、0.22％,除0.25mg／ml浓度处理组与空白对照组克隆形成率无明显差异外（P〉0.05）,其余各浓度处理组克隆形成率均显著低于空白对照组（P〈0.01）。结论白花蛇舌草和半支莲复合提取物可以抑制膀胱癌YTS-1细胞集落的形成,诱导细胞凋亡,具有明显的肿瘤抑制作用。     

氯诺昔康复合不同剂量舒芬太尼用于妇科手术患者术后自控镇痛的疗效观察

目的观察氯诺昔康复合不同剂量舒芬太尼用于妇科手术患者术后自控镇痛的临床效果。方法选择84例ASAⅠ～Ⅱ级的妇科择期手术患者,按照术后静脉镇痛的方案随机分为A、B、C3组,每组28例。A组为氯诺昔康40mg＋舒芬太尼50μg,B组为氯诺昔康40mg＋舒芬太尼75μg,C组为氯诺昔康40mg＋舒芬太尼100μg,各组均用生理盐水稀释至100ml。患者清醒拔管后,接电子镇痛泵,基础流量2ml／h,PCA剂量0．5ml／次,锁定时间15min。记录患者术后4、8、12、24、48h的VAS评分和不良反应。结果术后4、8、12hC组的VAS评分显著低于A组,差异有统计学意义（P〈0．05）。3组不良反应的发生率比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论氯诺昔康40mg＋舒芬太尼100μg用于妇科手术后静脉自控镇痛效果良好,且不良反应少。     

槲皮素通过STAT3信号通路抑制肺癌A549细胞迁移和侵袭

目的 观察槲皮素通过抑制信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法 体外培养A549细胞,以不同浓度(0、7.5、15、30、60、120μmol/L)槲皮素处理24、48和72 h,采用CCK-8检测槲皮素对A549细胞增殖的抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50).A549细胞随机分为4组:分别以0(空白对照组)、15和30μmol/L槲皮素和3μg/ml顺铂(阳性对照组)处理24 h.采用细胞黏附实验、划痕修复实验、Transwell小室体外侵袭实验观察A549细胞黏附、迁移、侵袭能力,Western印迹法检测STAT3、磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT3)蛋白表达的变化.结果 槲皮素剂量依赖性地抑制A549细胞增殖.与空白对照组相比,槲皮素显著抑制A549细胞黏附率、迁移率、侵袭细胞数(P<0.05或P<0.01);与空白对照组相比,槲皮素显著降低A549细胞STAT3和p-STAT3蛋白表达(P<0.05或P<0.01).结论 槲皮素具有明显的抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的作用,其机制可能与抑制STAT3信号通路有关.     

二巯基丙磺酸钠体内外抗肿瘤作用研究

目的观察含有两个巯基的化合物-二巯基丙磺酸钠(DMPS)在体内外的抗肿瘤作用。方法在体外培养的人肺腺癌A549细胞株中,通过MTT实验,观察不同浓度的DMPS对肿瘤细胞生长繁殖的抑制作用;通过荧光显微镜和细胞凋亡-Hoechst33258染色试剂盒,观察不同浓度的DMPS对肿瘤细胞凋亡的诱导作用。在体内小鼠S180肉瘤模型中,观察不同浓度的DMPS对肿瘤生长的抑制作用。结果体外实验中,终浓度为8 mmol/L和16 mmol/L的DMPS应用48h(P<0.01)和72h(P<0.01)后,显著地抑制肿瘤细胞的生长繁殖;终浓度为8 mmol/L和16 mmol/L的DMPS应用6h和9h后,肿瘤细胞凋亡数量显著地增多(P<0.05,P<0.01)。体内实验中,1.5%DMPS以0.2ml/10g体重腹腔注射,1次/d,连续2周,可显著地降低瘤体重量(P<0.05)。结论高浓度的DMPS显著地抑制体外A549细胞系、体内S180细胞系的生长繁殖。     

三种药物对体外人芽囊原虫的作用效果观察

目的了解甲硝唑、替硝唑和阿奇霉素对人芽囊原虫的作用效果。方法从门诊病人阳性粪便中分离出人芽囊原虫，接种到96孔无菌培养板中，实验组加入不同药物浓度的甲硝唑、替硝唑和阿奇霉素，对照组加入无菌生理盐水，应用细胞增殖实验方法检测三种药物对人芽囊原虫的抑制和杀灭作用。结果药物作用72h后，甲硝唑、替硝唑和阿奇霉素药物浓度为5μg／ml时相对抑制率分别为5．45％、16．13％和11．23％，光镜下原虫形态发生了改变。结论甲硝唑、替硝唑和阿奇霉素对体外人芽囊原虫的生长具有抑制和杀灭作用，替硝唑的作用效果最好     

湖北十堰地区25例阴道毛滴虫分离株对灭滴灵敏感性分析

目的检测十堰地区阴道毛滴虫十堰分离株对灭滴灵的敏感性,分析本地区滴虫多分离株灭滴灵耐药性总体趋势。方法收集阴道毛滴虫临床分离株25株,体外纯培养,设不同灭滴灵药物组,终浓度分别为：50μg/ml、31.25μg/ml、25μg/ml、l5.63μg/ml、7.81μg/ml、3.91μg/ml、1.95μg/ml、0μg/ml,置37℃培养,分别于4、8、12、24h观察虫体生长存活情况,计算各株滴虫各时间点死亡率,对各时间点死亡率进行汇总并分析灭滴灵敏感性浓度区间分布。结果高浓度组（50μg/ml、31.25μg/ml、25μg/ml、l5.63μg/m、7.81μg/ml）培养12h,滴虫死亡率均为100%,3.91μg/ml浓度作用24h,滴虫死亡率为96%（24/25）,1株滴虫死亡率为98.73%。结论十堰地区阴道毛滴虫分离株对灭滴灵总体较敏感,24株体外24h有效最低杀虫浓度区间为1.95～3.91μg/ml,1株滴虫为3.91～7.81μg/ml。     

舒芬太尼静脉自控镇痛在骨科脊柱手术后的应用观察

目的观察舒芬太尼在骨科脊柱全麻手术后静脉自控镇痛的效果、安全性和不良反应。方法选择行择期脊柱全麻手术病例60例,ASA分级均为Ⅰ-Ⅱ级,随机分成两组,术后行静脉自控镇痛。A组术后镇痛采用芬太尼1 mg＋托烷司琼2 mg＋生理盐水共100 ml。B组术后镇痛采用舒芬太尼150μg＋托烷司琼2 mg＋生理盐水共100 ml。A组负荷量为芬太尼50μg＋托烷司琼2 mg,B组负荷量为舒芬太尼5μg＋托烷司琼2 mg。两组背景剂量为2 ml/h,单次给药0.2 ml/次,锁定时间为15 min。观察全麻术后镇痛2h、4 h、8 h、24 h、48 h的VAS评分、镇静评分和恶心呕吐、皮肤瘙痒、呼吸抑制等不良反应。结果B组术后2 h、4 h、8 h、24 h、48 h的VAS评分、镇静评分均优于A组（P〈0.05）。两组恶心呕吐、皮肤瘙痒等不良反应都比较低,两组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论舒芬太尼用于脊柱手术后静脉自控镇痛疗效确切、安全可靠、不良反应少,值得在临床上推广。     

不同浓度的中药刺蒺藜对黑素细胞和酪氨酸酶的作用

OBJECTIVE: To study the effects of the decoction of Tribulus terrestris L on tyrosinase activity and melanogenesis. METHODS: MTT was employed to study the proliferation of human melanocytes cultured in vitro, and tyrosinase activity was estimated by measuring the rate of oxidation of DL-dopa, after the cells were treated with different concentrations of decoction of Tribulus terrestris L. RESULTS: The treatment with the decoction increased the amount of melanin at higher concentrations but act to the reverse effect at lower concentrations, with the best concentrations for promoting and inhibiting the cell growth being 1.5 mg/ml (P<0.05) and 0.5 mg/ml (P<0.05) respectively. At high concentrations the decoction enhanced the tyrosinase activity that was inhibited at low concentrations. The best concentrations for enhancing and inhibiting tyrosinase activity were 100 mg/ml (P<0.05) and 10 mg/ml (P<0.05) respectively. CONCLUSION: Tribulus terrestris L decoction exercises a two-way regulation on the activity of tyrosinase and the proliferation of melanocytes.