高效表达的NO对肺腺癌细胞A549放射敏感性的影响

目的 研究同步、高效表达的一氧化氮（NO）对肺腺癌细胞A549放射敏感性的影响,探寻增强肿瘤放射敏感性的新途径.方法 利用前期构建的可调控目的 基因高效表达的载体pfos-iNOS/GFP转染肺腺癌细胞A549,将阳性转染细胞和未转染细胞给予2 Gy X线照射后,检测细胞照射前后不同时相点NO的产量;给予不同剂量的X线照射后,检测照射后各组细胞的存活率,根据细胞存活率分别绘制各组细胞的辐射剂量-存活曲线,并进一步通过计算Do值及放射增敏比（SER）分析各组细胞放疗敏感性的变化.结果 转染载体pfos-iNOS/GFP的细胞照射后,NO浓度较照射前明显增高,其中照射后16 h较照射前增强10倍.转染治疗载体组Do值（1.16 Gy）明显低于未转染组（3.93 Gy）,治疗载体组的放疗敏感性是对照组的3.5倍.结论 高效表达的NO使体外肺腺癌细胞的放射敏感性明显增强,为肿瘤放疗增敏提供了新的模式.     

节律基因Period2对肿瘤细胞生长及放射敏感性的影响

目的探讨Period2（Per2）基因对细胞生长及放射敏感性的影响。方法体外培养C6神经胶质瘤细胞（C6 glioma cells）,使用脂质体包裹法将nr2表达质粒（pcDNA3．1-Per2）转导入C6细胞内;以免疫组化及流式细胞术检测Per2表达;通过流式细胞术和克隆形成试验检测稳定转染Per2阳性表达的C6细胞在正常情况下和γ射线照射后的凋亡、生长。结果未经γ射线照射的Per2阳性表达的C6细胞较对照组细胞增殖减慢、凋亡率增加,但γ射线照射后的较对照组细胞增殖速度快、凋亡率减少。结论节律基因Per2过表达会增加肿瘤细胞的凋亡,但在射线照射情况下会降低肿瘤细胞对射线的敏感性。     

耐辐射球菌pprI基因对γ射线损伤小鼠的抗辐射机制

目的 研究耐辐射球菌pprI基因活体电转染在哺乳动物γ射线放射损伤中发挥抗辐射作用的机制.方法 采用雄性昆明种小鼠,随机区组法分为健康对照组、单纯照射组、空载体转染组和基因转染组.将自行构建的含有pprI基因的pCMV-HA-pprI质粒注入接受6 Gyγ射线照射的小鼠肌肉内,然后采用活体基因电转导技术将该基因导入细胞内,应用Western blot法对PprI蛋白及其下游基因recA在哺乳动物细胞中的同源类似物Rad51以及Rad52蛋白表达进行检测.结果 照后1d基因转染组小鼠肌肉组织中PprI蛋白明显表达,7d后未见蛋白表达,其余组小鼠未见蛋白表达;在基因转染组小鼠,肺脏Rad51蛋白于照后第1、7和14天明显表达,明显高于单纯照射组及空载体转染组小鼠,肝脏Rad51蛋白于照后第1天和第28天明显表达,肾脏Rad51蛋白于照后第1天及第14天明显表达;在各组小鼠的肺脏、肝脏组织中检测了Rad52蛋白,其表达无明显规律.结论 耐辐射球菌pprI原核基因成功地在哺乳动物体内细胞表达了PprI蛋白,并作用于下游基因recA在哺乳动物细胞中的同源类似物rad51基因,使其蛋白表达显著增高而发挥其抗哺乳动物辐射损伤的作用.     

CD133+ U87人脑胶质瘤干细胞放射敏感性和DNA双链断裂损伤修复的实验研究

目的 探讨CD133+ U87人脑胶质瘤干细胞放射敏感性及DNA双链断裂损伤修复的情况。 方法 选择人脑胶质瘤U87细胞系,采用免疫流式分选技术分选出CD133+、CD133-细胞;采用克隆形成实验研究细胞的放射敏感性;采用中性单细胞凝胶电泳实验检测4 Gy X射线垂直照射后不同时间点的DNA双链断裂;采用间接免疫荧光技术检测不同时间点磷酸化组蛋白H2AX（γ-H2AX）荧光灶、Rad51（一种同源重组修复蛋白）荧光灶的表达。 结果 假照射条件下,CD133+细胞克隆的形成率明显高于CD133-细胞（t=3.66,P < 0.01）;CD133+细胞经4 Gy照射后的克隆形成率无明显变化（t=0.71,P > 0.05）,而CD133-细胞经4 Gy照射后的克隆形成率下降（t=2.91,P < 0.05）。4 Gy照射后0.5 h,CD133+、CD133-细胞间尾力矩差异无统计学意义（t=1.44,P > 0.05）,照射后6、24 h,CD133+细胞尾力距下降程度大于CD133-细胞（t=5.31和8.09,P < 0.01）;照射后0.5、6 h,CD133+、CD133-细胞间γ-H2AX灶的表达率差异均无统计学意义（t=0.12和0.99,P > 0.05）,照射后24 h,CD133+细胞的γ-H2AX灶的表达率下降程度大于CD133-细胞（t=4.99,P < 0.01）;照射后0.5 h,CD133+、CD133-细胞间Rad51灶的表达率差异无统计学意义（t=1.12,P > 0.05）,照射后6、24 h,CD133-细胞的Rad51灶的表达率与CD133+细胞相比明显下降（t=22.88和12.43,P < 0.01）,而CD133+细胞无明显变化。 结论 CD133+ U87人脑胶质瘤干细胞具有放射抵抗性,可能与其照射后DNA双链的断裂修复能力较高有关。     

西妥昔单抗对人舌癌细胞系Tca8113的放射增敏作用

目的 探讨西妥昔单抗( C225)对人舌癌Tca8113细胞系的放射增敏作用.方法 体外培养人舌癌Tca8113细胞系,C225组用西妥昔单抗(C225) 100 nmol/L处理后,6MVX射线不同剂量(0、2、4、6、8和10 Gy)照射C225组和单纯照射组,照射后用细胞计数法及四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖率,集落形成实验计算克隆数,采用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡.结果 不同照射剂量时C225+照射组的细胞生长抑制率均高于单纯照射组(t=-15.6～-3.0,P ＜0.05);C225+照射组的放射生物学参数值(D0、Dq、N、SF2)较单纯照射组低.C225+照射组的SER为1.353;C225+照射组的G0/G1期细胞比例在4、6、8 Gy时均高于单纯照射组(t=-7.64、-7.89、-4.78,P＜0.05).随着照射剂量升高,C225+照射组和单纯照射组的细胞早期凋亡率皆先升高后下降,4 Gy时两组差异最大[(7.96±0.36)％和(4.13±0.29)％,t- 12.75,P＜0.01].结论 C225对人舌癌Tca8113细胞系具有放射增敏作用.C225可能通过Go/G.期阻滞和诱导凋亡来增加人舌癌Tca8113细胞系的放射敏感性.     

辐射增强启动子调控的p53基因联合照射对肿瘤细胞的作用

目的 研究辐射增强启动子调控的野生型-p53抑癌基因系统联合照射对人肿瘤细胞系HeLa和A549细胞的特异性杀伤作用。方法 构建辐射增强启动子pE6（TATA）-p53,Western blot检测不同射线剂量诱导下人肺腺癌A549细胞系和人宫颈癌HeLa细胞系中P53蛋白的表达水平,筛选出最适的照射剂量;AnnexinV-FITC试剂盒检测肿瘤细胞系早期凋亡率;利用克隆形成实验检测此系统对肿瘤细胞放射敏感性的影响。结果 在HeLa和A549细胞中,P53蛋白表达均受放射线诱导增高,且在6 Gy时辐射诱导活性最高;实验组质粒的细胞早期凋亡率与转染对照组质粒的细胞早期凋亡率相比有明显提高（F=11.018、10.736,P<0.05）。HeLa细胞和A549细胞的放射增敏比（SER）分别为2.56和2.36。结论 辐射增强启动子调控的p53基因系统具有显著的诱导肿瘤细胞凋亡的作用,可以提高肿瘤细胞的辐射敏感性,对肿瘤的治疗提供了新思路。     

X射线对人肺腺癌A549细胞Pokemon基因表达的影响

目的 研究不同剂量X射线照射及照射后不同时间点对人肺腺癌A549细胞Pokemon基因表达的影响.方法 用吸收剂量分别为2、4、6和8 Gy的X射线照射体外堵养的人肺腺癌A549细胞,2、4、8、12、24、48和72 ha,用实时定量PCR技术检测其中的Pokemon mRNA表达水平,以未照射组为对照.结果 在2、4、6、8 Gy X射线照射后的早期(除2 Gy照射后的2和4 h外)Pokemon mRNA的表达降低,但在晚期(48 h以后)呈升高趋势,在大部分时间点实验组与对照组的差异有统计学意义(t=3.40～154.76,P<0.05).结论 较大剂量的X射线在早期可下调A549细胞Pokemon基因mRNA的表达,诱导肿瘤细胞凋亡;但在晚期又可诱导A549细胞高表达PokemonmRNA,这可能与辐射所致A549细胞的DNA损伤修复和细胞周期调控有关.     

电离辐射对不同放射敏感性细胞中高迁移率簇蛋白B1的诱导表达作用

目的 探讨电离辐射对已建立的宫颈癌放射抗拒细胞对比模型中高迁移率簇蛋白B1（HMGB1）和mRNA诱导表达的差异性,分析HMGB1对宫颈癌放射敏感性调控的可能性。方法人宫颈癌细胞系HeLa重复照射12次后,传代培养调整细胞状态至细胞增殖稳定,筛选得抗拒细胞系HeLaR。以2、5、10 Gy X射线分别照射亲代HeLa和HeLaR细胞,于照射后0、0.5、2、4、6、12、18、24、36、48 h收集细胞,提取蛋白质和RNA,采用Western blot和实时荧光定量PCR法分别检测样本中HMGB1蛋白和mRNA的表达情况。结果 在蛋白水平,2、5、10 Gy X射线照射后,HeLaR细胞在48 h内均表现为HMGB1表达量下降,在48 h达到未照射水平,后有增加趋势,与照射后0 h比较,2、5、10 Gy照射后6~36 h各时间点,差异具有统计学意义（t=3.574~9.754,P < 0.05）;相反,HeLa细胞在照射后6 h,其HMGB1表达逐渐增多,尤其在5和10 Gy表现明显,与照射后0 h比较,2 Gy照射后6、12、48 h（t=3.945~4.864,P < 0.05）、5 Gy照射后6、36、48 h（t=-2.875~3.295,P < 0.05）及10 Gy照射后36、48 h（t=-4.480、-4.517,P < 0.05）,差异具有统计学意义。在mRNA水平其趋势与蛋白水平基本一致。结论 不同剂量X射线照射后可诱导人宫颈癌细胞中HMGB1的表达变化,且其变化在人宫颈癌放射敏感细胞及放射抗拒细胞中不同。HMGB1可能参与人宫颈癌放射抗拒机制。     

γ射线增强喉癌细胞hTERTp启动子活性研究

目的 探讨γ射线对喉癌细胞中端粒酶逆转录酶基因启动子(hTERTp)活性的影响,以及通过射线增强hTERTp下游基因表达的可行性。方法 将含hTERTp的质粒转染细胞,采用报告基因评价启动子活性,通过RT-PCR和酶活性检测观察射线作用下hTERTp调控辣根过氧化物酶(HRP)的表达,克隆形成实验评价射线对phTERTp-HRP/IAA杀伤和放射增敏作用的影响。结果 在Hep-2细胞中,6 Gyγ射线照射后hTERTp活性是0 Gy照射后的2.96倍,在Hep-2R细胞中是1.60倍。质粒phTERTp-HRP转染Hep-2和Hep-2R细胞后,6 Gy照射组的HRP mRNA分别增高2.1和1.1倍,酶活性分别增高2.54和1.23倍。6 Gy联合吲哚乙酸(IAA)组Hep-2细胞的存活分数为1.3%,Hep-2R细胞的存活分数为3.5%,比对照组明显降低(F=234.280和F=357.148,P值均<0.01)。6Gy联合IAA组与IAA组相比,放射增敏比SER_<sub>SF2分别为1.52(Hep-2)和1.68(Hep-2R),存活曲线的参数α分别为0.416、0.099(Hep-2)和0.356、0.090(Hep-2R)。结论 γ射线可以增强不同放射敏感性喉癌细胞hTERTp活性,增强下游基因表达。射线联合phTERTp-HRP/IAA对喉癌细胞具有更加明显的杀伤和放射增敏作用。     

Increased susceptibility to delayed genetic effects of low dose X-irradiation in DNA repair deficient cells

Abstract

Purpose: To examine whether the levels of micronuclei induction, as a marker for genomic instability in the progeny of X-irradiated cells, correlates with DNA repair function.

Materials and methods: Two repair deficient cell lines (X-ray repair cross-complementing 1 [XRCC1] deficient cell line [EM9] and X-ray repair cross complementing 5 [XRCC5; Ku80] deficient X-ray sensitive Chinese hamster ovary [CHO] cell line [xrs5]) were used in addition to wild-type CHO cells. These cells were irradiated with low doses of X-rays (up to 1 Gy). Seven days after irradiation, micronuclei formed in binucleated cells were counted. To assess the contribution of the bystander effect micronuclei induction was measured in progeny of non-irradiated cells co-cultured with cells that had been irradiated with 1Gy.

Results: The delayed induction of micronuclei in 1 Gy-irradiated cells was observed in normal CHO and EM9 but not in xrs5. In the clone analysis, progenies of xrs5 under bystander conditions showed significantly higher levels of micronuclei, while CHO and EM9 did not.

Conclusion: Genomic instability induced by X-irradiation is associated with DSB (double-strand break) repair, even at low doses. It is also suggested that bystander signals, which lead to genomic instability, may be enhanced when DSB repair is compromised.     

表没食子儿茶素没食子酸酯逆转小剂量辐射引起的DNA甲基化

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对0.5 Gy X射线引起的小鼠Rad23b和Ddit3基因启动子CpG岛甲基化及表达改变的逆转作用。方法 BALB/c雄性小鼠30只按随机数字表法均分为6组：对照组、单纯照射组、EGCG低剂量单纯给药组、EGCG高剂量单纯给药组、EGCG低剂量给药照射组、EGCG高剂量给药照射组。照射方式为6 MV X射线分次照射（0.05 Gy/d×10 d）。小鼠在末次照射后2 h取血后处死,收集肾脏、肝脏、脾脏、脑及肺组织。采用BSP和Real-time PCR法检测各组小鼠外周血单个核细胞（PBMC）及各组织Rad23b和Ddit3启动子CpG岛的甲基化水平和mRNA表达变化。结果 末次照射后2 h,与对照组比较,单纯照射组Rad23b在PBMC、肝脏、脾脏、脑和肺组织中甲基化水平均升高（t=-20.19、-14.80、-12.05、-28.42、-12.58,P<0.05）,同时mRNA水平在PBMC、肝脏、脑和肺组织中表达降低（t=25.25、17.43、11.53、22.85,P<0.05）;Ddit3甲基化水平在PBMC、肝脏和肺组织中升高（t=-52.89、-20.31和-3.85,P<0.05）,mRNA水平在PBMC和肝脏中表达降低（t=11.89和16.52,P<0.05）。与单纯照射组比较,除脾脏中Rad23b外,不同浓度EGCG（10、20 mg/kg）给药照射组均能明显降低X射线引起的Rad23b和Ddit3启动子CpG岛高甲基化（t=-13.39~7.99,P<0.05）,并诱导mRNA重新表达（t=-34.02~-2.89,P<0.05）,且转录激活作用在高剂量给药照射组中更加明显。结论 EGCG作为逆转小剂量辐射损伤效应的天然药物,可能通过影响DNA甲基化来发挥作用。     

The Combined Effects of α-particles and X-rays on Cell Killing and Micronuclei Induction in Lung Epithelial Cells

Summary

Understanding how cellular damage produced by high-linear energy transfer (LET) radiation interacts with that produced by low-LET is important both in radiation therapy and in evaluating risk. To study such interactions, rat lung epithelial cells (LEC) were grown on Mylar® films and exposed to both X-rays and α-particles, separately or simultaneously. Cell killing, and the numbers of binucleated cells and micronuclei, were measured as indicators of damage. X-rays and α-particles given separately caused dose-related increases in cell cycle time, with α-particles producing greater mitotic delay than X-rays. Damage from α-particles and X-rays given simultaneously did not interact to alter further the cell cycle. Cell survival data following exposure to X-rays and α-particles, combined or individually, were fitted by linear-quadratic models. Survival curves following exposure to α-particles only, or to 1·0 Gy α-particles plus graded X-ray doses, were adequately described using only the linear (α) term of a linear-quadratic model with α coefficients of 0·9 ± 0·04 and 1·03 ± 0·18 Gy^?1, respectively. Survival following exposure to X-rays only or to 0·06 Gy α-particles combined with X-rays was best fitted using both α and β terms of the linear-quadratic model (0·12 ± 0·03)D + (0·007 ± 0·002)D² and (0·57 ± 0·08)D + (0·3 ± 0·02)D², respectively. The numbers of micronuclei produced by exposure to α-particles or X-rays alone increased linearly with dose, with slopes of 0·48 ± 0·07 and 0·19 ± 0·05 micronuclei/binucleated cell per Gy for α and X-rays, respectively. Simultaneous exposure to graded levels of X-rays and a constant α dose of either 1·0 or 0·06 Gy increased micronuclei frequency, with a slope of 0·74 ± 0·05 or 0·58 ± 0·04 micronuclei/binucleated cell per Gy, respectively. These slopes are similar to that produced by α-particles alone. These studies demonstrated that both cell killing and the induction of micronuclei were increased by combined exposure compared with that predicted for separate exposures.     

0.075 Gy X射线诱导EL-4细胞凋亡及细胞周期的适应性反应

观察低剂量Ｘ射线照射能否诱导ＥＬ－４细胞凋亡及细胞周期的适应性反应。方法采用流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞凋亡及细胞周期。结果单纯２ＧｙＸ射线照射后１２小时ＥＬ－４细胞凋亡显著增多，并伴有明显Ｇ１阻滞；０．０７５Ｇｙ预照射可明显减轻间隔６小时后２Ｇｙ攻击剂量照射所致的细胞凋亡和Ｇ１阻滞。结论０．０７５ＧｙＸ射线离体照射可诱导ＥＬ－４细胞凋亡及Ｇ１阻滞的适应性反应     

X射线对人外周全血细胞nm23-H1基因表达的影响

目的 应用实时荧光定量反转录PCR的方法,分析不同剂量X射线对人外周全血细胞nm23-H1基因表达的影响,探讨运用nm23-H1基因表达变化作为电离辐射生物剂量计的可行性。 方法 采用X射线照射人外周全血细胞,于不同剂量(0～5 Gy)照射后不同时间点(0、6、12和24 h)收集细胞提取总RNA,并反转录为cDNA,利用实时定量PCR检测不同剂量照射后nm23-H1基因表达变化,分析其剂量-效应关系及时间-效应变化。结果 照后0 h,各剂量组之间nm23-H1基因表达变化差异无统计学意义(F=0.478,P> 0.05),照后6 h,在1～3 Gy照射剂量范围内,nm23-H1基因表达水平随剂量增加有增高的趋势(F=15.064,P<0.05),照后12 h,在1～5 Gy照射剂量范围内,nm23-H1基因表达水平随剂量增加而增高(F=3.435,P<0.05);照后24 h,各剂量组之间差异无统计学意义(F=0.444,P>0.05)。0、4 和5 Gy照射后,nm23-H1基因表达水平随时间的推移降低 (F=8.636、4.112、5.411,P<0.05);1 Gy照射后,不同时间点nm23-H1基因表达水平差异无统计学意义,仅12 h的 nm23-H1基因表达水平与0 h的表达水平差异有统计学意义(t=-2.527,P<0.05);2和3 Gy剂量照射后,nm23-H1基因表达水平均于24 h时降至最低点(F=12.517、6.622,P<0.05)。结论 电离辐射可诱导人外周血nm23-H1基因的表达改变,该基因的表达变化具有作为电离辐射生物剂量计应用于核辐射事故早期生物剂量估算的潜能。     

不同照射方式对结直肠癌CL187细胞的抑制作用和分子机制初探

目的 研究单次、分次和125Ⅰ粒子持续低剂量率照射对结直肠癌CL187细胞生物学效应的影响.方法 实验分高剂量率单次照射组(400 cGy/min,单次组)、分次照射组(2 Gy/次/d,400 cGy/min,分次组)和125Ⅰ粒子持续低剂量率照射组(2.77 cGy/h,125Ⅰ组).3组细胞照射0、2、4和8 Gy后,24和48 h进行细胞计数和锥虫蓝染色,比较细胞总数和细胞存活率的差异.利用克隆形成实验比较3组细胞增殖能力的差异.通过流式细胞仪检测细胞凋亡.蛋白免疫印迹法分析PHLPP2、PTEN和Bax蛋白表达的变化.结果 与单次组和分次组相比,125Ⅰ组细胞总数减少(t=34.28和29.48,P＜0.05)、存活细胞比例减少(t=-12.38和-14.61,P＜0.05),细胞克隆形成能力下降,相对生物学效应是1.41.照射后48 h细胞凋亡检测发现125Ⅰ组细胞凋亡比例增加(t=-15.08和-11.99,P＜0.05).蛋白免疫印迹法检测发现125Ⅰ组Bax表达量升高,PHLPP2和PTEN的表达量3组间差异无统计学意义.结论 单次、分次和持续低剂量率照射后细胞PHLPP2蛋白表达水平均升高,但剂量率的高低并不影响其表达水平.不同方式照射后,凋亡相关蛋白Bax的表达水平上升,125Ⅰ组升高更加明显,125Ⅰ持续低剂量粒子照射可能通过影响凋亡相关蛋白Bax的表达水平实现对结直肠癌CL187细胞的杀伤作用.     

蛋白酶体抑制剂MG132联合X射线对人肺腺癌细胞生长迁移和周期的影响及作用机制

目的 研究蛋白酶体抑制剂MG132联合X射线对人肺腺癌A549细胞生长、迁移、侵袭、细胞周期分布的影响及机制。方法 MTT法检测不同MG132浓度处理后不同时间肺腺癌A549细胞的增殖;克隆形成实验检测A549细胞的存活能力;划痕实验测定A549细胞的迁移能力;Transwell小室测定其侵袭能力;流式细胞术测定细胞周期分布的改变;Western blot法测定蛋白表达水平。结果 MG132明显抑制人肺腺癌A549细胞的生长,并呈现剂量-效应和时间-效应关系。MG132联合X射线对A549细胞克隆存活能力有显著抑制作用（F=554.78、954.64,P<0.01）,且加MG132组克隆存活率均低于照射组（t=4.44、12.41、3.52、6.72,P<0.05）。MG132在无毒性剂量下联合X射线可显著抑制A549细胞的迁移及侵袭能力（t=12.79,P<0.01）,并明显增加G₁期细胞阻滞（t=4.29,P<0.05）;MG132联合X射线明显降低A549细胞中基质金属蛋白酶-2,-9和G₁期相关蛋白Cyclin D1的表达水平,同时增加细胞中P53的表达。结论 MG132可以显著抑制人肺腺癌A549细胞的生长,且在无毒性剂量下联合X射线可以明显降低其转移和侵袭能力,显著增加肿瘤细胞的G₁期阻滞。     

小剂量X射线照射对人树突状细胞抗原递呈及白介素-12分泌的影响

目的 探讨小剂量x射线照射对体外不同培养时间的人外周血树突状细胞( dendritic cell,DC)抗原递呈及白介素-12(IL-12)分泌的影响.方法 分离人外周血单个核细胞(PBMC),以人粒-巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)及IL-4等诱导分化成DC.实验分为3组,A组:DC培养至第2天接受X射线照射;B组:DC培养至第6天接受X射线照射,A、B组受照剂量均为0.05、0.1、0.2和0.5 Gy;C组:即对照组,为同期培养的未受X射线照射的DC细胞.各组DC培养至第8天时,以DC致敏T 细胞,CCK-8( cell counting kit-8)法检测混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR),以评估抗原递呈能力;MTT法检测致敏T细胞杀伤人肺腺癌A549细胞;酶联免疫吸附试验( ELISA)检测DC细胞培养液中IL-12水平.结果 0.2、0.5 Gy照射后的DC抗原递呈能力,A组显著低于对照组(t =2.79和3.71,P＜0.05),B组显著高于对照组(t=3.60和3.11,P＜0.05);检测致敏T细胞对人肺腺癌A549细胞的增殖抑制能力,与对照组相比,A组抑制A549增殖能力减弱(t =2.89和2.91,P＜0.05),B组抑制A549增殖能力明显增强(t=2.91和2.82,P＜0.05);A组IL-12分泌量下降(t=4.44和6.93,P＜0.05),而B组明显上升(t=3.51和4.12,P＜0.05).结论 DC在培养早期阶段接受0.5 Gy以下的X射线照射,会降低抗原递呈能力及致敏T细胞杀伤A549能力,在培养阶段的后期给予此剂量照射则会增强.     

Gold nanoparticles as dose-enhancement agent for kilovoltage X-ray therapy of melanoma

Purpose: Melanoma is mainly treated by surgery and rarely with radiation because of the high radioresistance of this tumor. Nevertheless, radiotherapy is the preferred treatment modality for unresectable lesions and avoiding cosmetic disfigurement caused by surgical excision. This study investigated the therapeutic advantage of gold nanoparticles (AuNPs) for kilovoltage X-ray treatment of melanoma.

Materials and methods: Commercial AuNPs were evaluated for cytotoxicity and cellular internalization. The sensitivity of human skin melanoma cells to 150 and 450 kVp X-ray exposure was assessed in terms of clonogenicity with or without spherical AuNP treatment.

Results: AuNP treatment elicited dose enhancement effect on melanoma cells exposed to kilovoltage X-rays. Treatment with 320?μM 50?nm AuNPs before exposure to 150 kVp X-rays at 2?Gy resulted in clonogenic cell death equivalent to that caused by 4.3?Gy X-rays without AuNP treatment.

Conclusion: AuNPs of 50?nm in size can regulate melanoma cells in kilovoltage X-ray treatment by functioning as dose-enhancement agent and thus improving radioresponse of the cells. Melanomas of stages T1–T3 gain therapeutic benefits from 150 kVp X-ray treatment.