富马酸二甲酯对大鼠椎间盘退变髓核中低氧诱导因子-1α表达和功能的影响

目的 建立SD大鼠腰椎间盘退变模型采用测定低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在大鼠模型腰椎间盘髓核中的表达情况及作用,探讨富马酸二甲酯(DMF)对其表达及功能的影响.方法 对大鼠腰椎退变模型行磁共振成像(MRI)扫描后,取L4/L5节段髓核组织行蛋白多糖检测,石蜡包埋、切片后进行HIF-1α的免疫组化染色.结果 MRI结果显示模型对照组(B组)的椎间盘髓核存在明显的退变,T2加权相信号降低 (P<0.05).B组髓核中的HIF-1α呈强阳性,与另两组比较差异有统计学意义(P<0.05).对全部的髓核组织的进行蛋白多糖含量的检测,可见对照组B组的蛋白多糖成分(2.06±0.04) ng·g-1,流失最为严重,富马酸二甲酯用药组(C组)(2.06±0.05) ng·g-1相对较轻,正常对照组(A组)含量为(3.28±0.03) ng·g-1,三组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 HIF-1α在退变的腰椎间盘组织中表达增高,其表达与腰椎的退变密切相关.富马酸二甲酯作为HIF-1α的抑制剂能降低HIF-1α的表达,抑制和延缓腰椎间盘退变的形成和发展.     

大鼠退变椎间盘中缺氧诱导因子-1表达的意义

目的研究在大鼠退变椎间盘中缺氧诱导因子-1(HIF-1α)表达及意义。方法建立大鼠椎间盘退变动物模型,根据不同的时间点获得椎间盘标本,腰段手术干预椎间盘为模型组,无手术干预腰椎间盘为对照组。用免疫组化染色方法对模型组与对照组的椎间盘组织中HIF-1α的阳性表达进行定性、定位阳性检测,结果模型组免疫组化染色观察结果:第4周在椎间盘免疫组化切片中可以看到一些细胞具有HIF-1α表达,单因子表达细胞较少,细胞周围基质中可见散在阳性表达;第8周至第12周的模型组免疫组化染色切片中HIF-1α表达在逐渐增加。结论 HIF-1α表达增加和椎间盘退变的加剧呈正相关联系。     

红景天化学成分的研究及其对低氧诱导因子-1α表达的影响

目的 研究红景天的化学成分及其对低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响.方法 采用硅胶柱色谱法对红景天 中的化学成分进行分离纯化,运用现代波谱方法进行结构鉴定;采用RT-PCR法,检测化合物对缺氧状态下乳鼠心肌细胞HIF-1α mRNA表达的影响.结果 从红景天中分得到5个化合物,经鉴定为Rhodiolin(Ⅰ)、德钦红景天苷(Ⅱ)、没食子酸(Ⅲ)、酪醇(Ⅳ)、红景天苷(Ⅴ),化合物Ⅳ,Ⅴ 111.11 μg·ml-1与缺氧对照组相比,可促进HIF-1αt的表达(P<0.01).结论 采用二维核磁共振和质谱的方法确认了化合物Ⅰ的结构.化合物Ⅳ,Ⅴ能够增强心肌细胞HIF-1α mRNA的表达.     

宫颈癌HIF-1α表达与预后的关系

目的：探讨缺氧诱导因子-1α（HIF—1α）在早中期宫颈癌发生发展过程中的作用。方法：采用免疫组化S—P免疫酶染色法检测90例宫颈癌、30例CINIII和20例正常宫颈组织中HIF—1α蛋白的表达。结果：HIF-1α在CINIII、早期宫颈侵润癌中存在高表达,而正常宫颈组织无表达。HIF—1α的表达与宫颈癌Ⅰb-Ⅱa期肿瘤大小、宫颈和宫颈管深肌层侵润、盆腔淋巴结转移呈正相关,与年龄、FIG0分期、组织学类型、病理分级无关。结论：HIF-1α过表达可成为宫颈癌独立预后因子。可通过检测HIF—1α表达来评估宫颈癌患者的预后。     

退变椎间盘中NF-κB与IL-1、IL-6、TNF-α表达的相关性研究进展

椎间盘退变是导致腰腿痛常见的原因之一,给患者带来极大痛苦的同时严重干扰了患者的日常生活和工作.NF-κB作为调节细胞基因转录的关键因子,能对炎症因子的表达起到一定的调控作用,而炎性细胞因子IL-1、IL-6、TNF-α在椎间盘退变中发挥着重要作用,现就椎间盘退变中NF-κB与IL-1、IL-6、TNF-α表达的相关性做...     

芸香苷改善椎间盘退变大鼠髓核细胞焦亡的研究

目的 从细胞水平探究芸香苷对椎间盘退变大鼠髓核细胞焦亡的影响及作用机制。方法 将大鼠椎间盘髓核细胞随机分为对照组、模型组[白细胞介素-1β(IL-1β)诱导]、低剂量实验组(25μmol·L^-1芸香苷+10 ng·mL^-1 IL-1β)、中剂量实验组(50μmol·L^-1芸香苷+10ng·mL^-1 IL-1β)、高剂量实验组(100μmol·L^-1芸香苷+10 ng·mL^-1 IL-1β)、高剂量+SIRT1激动药组[100μmol·L^-1芸香苷+10 ng·mL^-1 IL-1β+1μmol·L^-1沉默信息调节因子1(SIRT1)激动药SRT1720]。用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实验、蛋白质印迹法检测相关基因和蛋白的表达水平,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测细胞活力,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测炎性因子的表达水平。结果 对照组、模型组、高剂量实验组、高剂量+...     

白细胞介素、肿瘤坏死因子-α与椎间盘退变的相关性研究

目的通过测定白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素-8（IL-8）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在退变椎间盘组织中的水平,探讨其在椎间盘退变中的作用。方法用放免法测量椎间盘退变组（观察组）和对照组椎间盘组织中IL-1、IL-8及TNF-α的含量,并进行统计学分析。结果观察组中IL-1、IL-8及TNF-α含量分别为（71．35±11．23）μg/L、（7．33±2．45）μg/L、（6．54±2．67）μg/L;对照组分别为（28．58±12．25）μg/L、（2．35±1．15）μg/L、（3．33±1．45）μg/L。观察组IL-1、IL-8及TNF-α水平显著高于对照组。结论椎问盘组织中细胞因子IL-1、IL-8及TNF—α水平与椎间盘退变有关,可能是导致椎间盘组织退变的重要原因之一。     

TNF-α、IL-1β在退变颈椎间盘的表达和意义

目的建立动静力失衡性大鼠颈椎病模型以观察和探讨TNF-α、IL-1β在颈椎间盘退变组织中的表达和意义,进而探讨颈椎间盘退变的发生机制,为颈椎病的临床治疗提供实验依据。方法SD大鼠40只,被随机分为颈椎病动物模型组和假手术对照组,其中模型组20只,对照组20只。模型组大鼠切断浅层和深层颈肌并切除1.5 cm长一段,同时切断棘上、棘间韧带建立动静力失衡颈椎病动物模型。采用免疫组化方法检测模型组退变颈椎间盘和正常对照组颈椎间盘中的INL-α和IL-1β的表达,并进行组间数据的统计学分析。结果颈椎病模型组的颈椎间盘组织形态学较假手术对照组有明显的退行性变化。免疫组化法检测模型组颈椎间盘组织中的TNF-α及IL-1β的表达较假手术对照组显著增高(P<0.01)。结论模型组大鼠颈椎间盘较假手术对照组出现典型的退变形态学变化,细胞因子TNF-α和IL-1β在颈椎间盘中呈高表达可能与颈椎间盘退变相关。     

退变腰椎间盘髓核组织中转化生长因子-α、基质金属蛋白酶-9的表达及意义

目的 观察退变腰椎间盘髓核组织中转化生长因子-α（TGF-α）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达并探讨其意义.方法 标本分别取自退变组和对照组.所有标本一份制作为石蜡切片,用免疫组织化学方法检测TGF-α、MMP-9蛋白表达情况;另一份用RT-PCR方法检测TGF-α、MMP-9 mRNA表达情况.结果 退变组腰椎间盘髓核组织中TGF-α、MMP-9的表达量均较对照组增多（蛋白水平：t=29.114,P＜0.01;t=19.926,P＜0.01.mRNA水平：t=47.642,P＜0.01;t=26.987,P＜0.01）,TGF-α和MMP-9蛋白、mRNA表达均呈正相关关系（蛋白水平：r=0.725,P＜0.01;mRNA水平：r=0.684,P＜0.01）.结论 TGF-α、MMP-9在正常与退变椎间盘髓核组织中表达量不同,退变椎间盘中二者表达量较高,两者可能与椎间盘退变有关.TGF-α对椎间盘退变的调节作用与MMP-9有一定的关系.     

复方景川片调控低氧诱导因子-1α表达对大鼠缺血性脑损伤的保护作用

目的探究复方景川片对大鼠缺血性脑损伤的保护作用并探讨其对低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法 60只大鼠按体质量随机分为假手术组、模型组、尼莫地平(0.012g/kg)组和复方景川片(0.780、1.560、3.120g/kg)组,除假手术组外,其余各组均采用线栓法构建大鼠大脑中动脉闭塞模型,连续给药10 d。采用评分法测定复方景川片对大鼠神经行为学的影响,采用TTC染色法测定脑梗死比例,采用TUNEL染色法检测大鼠缺血区脑组织神经细胞凋亡比率,并通过Real-Time PCR法和Western blotting法检测复方景川片对HIF-1αmRNA和蛋白表达水平的影响。结果与模型组比较,复方景川片各剂量组均能降低大鼠神经功能评分和横木行走实验评分,能显著性减少神经细胞凋亡、减小梗死体积,其中0.78、1.56、3.12 g/kg组脑梗死面积分别为44.53%、33.71%、29.93%。HIF-1α在复方景川片各剂量组中呈高表达状态,其升高水平与模型组相比具有统计学意义(P0.05、0.01)。结论复方景川片在一定剂量范围内能够有效改善大鼠脑缺血损伤程度并减少神经细胞凋亡,其对脑缺血损伤中的神经保护作用可能与其对HIF-1α表达的调控有关。     

复原胶囊对脓毒症大鼠肾组织HIF-1α表达的影响

目的:研究复原胶囊对脓毒症大鼠肾组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA表达的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术、模型及复原胶囊高、低剂量组,每组4只。复原胶囊组大鼠连续4d灌胃后行盲肠结扎穿孔(CLP)手术。各组复制模型后分别于3、6、12、24h行RT-PCR检测肾组织HIF-1α的表达;酶联免疫吸附法检测血清白介素-6(IL-6)水平;心脏取血检测血清肾功能;HE染色镜下观察肾组织病理学变化。结果:与假手术组比较,模型组HIF-1αmRNA表达3h时逐渐升高,24h达高峰(P<0.05);与模型组比较,复原胶囊高、低剂量组6、12、24h时HIF-1αmRNA表达显著降低(P<0.05);复原胶囊高、低剂量组BUN显著降低(P<0.05);HE染色显示复原胶囊组损伤较轻。结论:复原胶囊对脓毒症大鼠肾损伤的保护作用可能与调控HIF-1α的表达有关。     

六味地黄丸对兔退变椎间盘炎性因子表达的影响

目的：分析六味地黄丸对兔退变椎间盘肿瘤坏死因子－α（ TNF－α）与白介素1β（ IL－1β）表达的影响。方法选择8月龄成年新西兰兔30只利用异常应力负荷及椎间失稳法建立新西兰兔腰椎椎间盘退变模型,处死4只病理切片确认模型成功后,取6只备用作为模型组,余20只随机分为观察组与对照组各10只,同时取同月龄的正常新西兰兔6只作为正常组。对照组造模成功后,给予正常饮食及日常负重活动。观察组在对照组基础上给予六味地黄丸和治疗。分别与用药前及用药后3周采用酶联免疫吸附法测定椎间盘组织中的TNF－α与IL－1β表达水平。结果造模成功后用药前取模型组新西兰兔椎间盘组织TNF－α及IL－1β水平均高于正常组,差异有统计学意义（ P＜0．05）。用药后3周观察组TNF－α及IL－1β水平均低于对照组,差异均有统计学意义（ P＜0．05）。结论六味地黄丸能抑制兔退变椎间盘损伤加重,起到延缓椎间盘损伤的作用,其机制可能与抑制退变椎间盘炎性因子的过度表达有关。     

基于NF-κB通路探讨TNF-α对椎间盘退变小鼠模型髓核间充质干细胞衰老的影响

目的 探讨TNF-α通过NF-κB通路对椎间盘退变小鼠模型髓核间充质干细胞衰老的影响。方法 30只小鼠建立椎间盘退变模型,分离出髓核间充质干细胞（Nucleus Pulposus Mesenchymal Stem cells, NPSCs）,对NPSCs进行三系分化诱导鉴定,用含不同浓度梯度TNF-α(0、0.1、1、5、10 ng/mL)的培养液培养NPSCs,按照以上浓度分为五组。MTT检测NPSCs增殖情况,Western-blot检测NF-κB蛋白表达水平,β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老水平,对三种不同浓度（0,1,10 ng/mL）处理的NPSCs进行成软骨诱导分化,Western-blot检测蛋白聚糖（Aggrecan, Agg）、Ⅱ型胶原蛋白（CollagenⅡ, ColⅡ）、性别决定区Y框蛋白-9(sex determining region Y-box9,Sox-9)蛋白表达水平。结果 三系分化结果提示,NPSCs成脂诱导后细胞内可形成脂滴团和鲜红色脂滴泡,成骨诱导可见大量红染的矿化钙盐结节沉积,成软骨诱导细胞呈不规则多角形软骨细胞样改变。与0 ng/mL TNF-α...     

以TGF-β1表达诊断人体椎间盘退变的可行性研究

目的探讨转化生长因子-β1基因(TGF-β1mRNA)表达作为人体椎间盘退变诊断新指标的价值。方法采集创伤患者与椎间盘退变患者静脉血与手术切除组织,应用ELISA、HE染色、免疫印迹和RT-PCR等方法进行测定。结果血液与组织中TGF-β1mRNA的表达基本一致。在创伤组血液与组织中TGF-β1mRNA呈低表达;在退变组血液与组织中TGF-β1mRNA呈高表达,其表达量与病变程度成正比;退变组与创伤组比较具有非常显著性差异(P<0.01)。结论 TGF-β1mRNA表达可作为人体椎间盘退变诊断的新指标。     

糖尿病大鼠视网膜组织中缺氧诱导因子-1α、内皮素-1的表达研究

目的检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）与内皮素-1（ET-1）在糖尿病视网膜组织中的表达变化,探讨其在糖尿病视网膜病变（DR）发生、发展中的作用。方法将SD大鼠随机分为对照组（CON）和糖尿病（DM）组。其中糖尿病组采用STZ一次性尾静脉注射建立糖尿病模型,制模成功后分别于2、4、8、12周处死大鼠,取眼球组织,应用免疫组化和放免法检测各组大鼠视网膜组织中HIF-1α、ET-1的表达变化。结果免疫组织化学染色显示正常对照组大鼠视网膜不表达HIF-1α,DM组2周时有少量表达,4周时阳性细胞数量增多,8周达到高峰,12周时表达已降低,各组之间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。经放免法测定,对照组大鼠视网膜组织中仅有少量ET-1,而DM组大鼠随病程延长,视网膜组织中的ET-1含量呈进行性增加。各组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HIF-1α与其下游基因ET-1在DM病程中的表达变化提示二者可能与视网膜组织的损伤有关,并在DR的发生、发展中发挥重要作用。     

低氧对大鼠骨髓间充质干细胞HIF-1α表达影响的研究

目的通过体外不同氧浓度下培养大鼠骨髓间充质干细胞,RT-PCR方法检测,观察正常氧浓度和低氧浓度对HIF-1α(缺氧诱导因子-1α)表达的影响。方法分离雄性Wistar大鼠骨髓间充质干细胞体外培养,鉴定其CD34、CD44的表达,分为正常氧浓度组和低氧浓度组培养24h,RT-PCR方法检测,不同氧浓度对细胞HIF-1α表达的影响。结果贴壁法培养的细胞表达CD44,不表达CD34;正常氧浓度培养的细胞较少有HIF-1α的表达,低氧浓度培养的细胞HIF-1α的表达明显增加。结论细胞低氧可激活HIF-1α的表达,低氧浓度培养的细胞的HIF-1α表达较正常氧浓度培养的细胞的表达明显增加。     

结肠癌组织中HIF-1α的表达及生物学意义

目的研究缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在结肠癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组化技术检测68例结肠癌组织和10例癌旁组织中HIF-1α的表达,分析HIF-1α表达水平高低与临床病理特征的相关性。结果 HIF-1α阳性染色于细胞质和细胞核,在结肠癌组织表达率为44%,在癌旁组织不表达。HIF-1α高表达与肿瘤TNM分期(P<0.01)和转移显著相关(P<0.05),但与患者年龄、性别及肿瘤大小无相关性。结论 HIF-1α在结肠癌发病过程中可能起重要的作用,可作为结肠癌预后判断及淋巴结转移监测的有价值指标之一。     

乳腺癌组织中ING4、HIF-1α和HIF-2α表达及与肿瘤微血管新生的关系

目的 探讨乳腺癌组织中生长抑制因子4(ING4)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)表达及与肿瘤微血管新生的关系.方法 选取择期行手术治疗的乳腺癌病人107例,利用实时荧光定量PCR技术检测乳腺癌和癌旁组织中HIF-1α、HIF-2α、ING4和血管内皮生长因子(VEGF)基因表达,免疫组化染色检测乳腺癌和癌旁组织中微血管密度(MVD).结果 乳腺癌组织中HIF-1α mRNA、HIF-2α mRNA相对表达量均高于癌旁组织,而ING4 mRNA 相对表达量低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);HIF-1α mRNA相对表达量与淋巴结转移有关(P<0.05),HIF-2α mRNA相对表达量与肿瘤大小、淋巴结转移有关(P<0.05),ING4 mRNA相对表达量与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);乳腺癌组织中VEGF mRNA相对表达量和MVD计数均高于癌旁组织,均差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关分析显示,乳腺癌组织中HIF-1α mRNA、HIF-2α mRNA相对表达量均与VEGF mRNA相对表达量和MVD计数呈正相关(r=0.382、0.417和0.408、0.491,P<0.05),ING4 mRNA相对表达量均与VEGF mRNA相对表达量和MVD计数呈负相关(r=-0.395、-0.502,P<0.05).结论 乳腺癌组织中HIF-1α、HIF-2α基因表达升高,而ING4基因则被抑制,可能共同参与了乳腺癌组织中血管新生.