大豆异黄酮对大鼠心肌肥厚与纤维化的保护作用

目的研究大豆异黄酮(daidzein,DD)对大鼠压力负荷性心肌肥厚及纤维化的保护作用及其机制。方法采用腹主动脉缩窄法制备大鼠心肌肥厚模型。大鼠随机分为假手术组、模型组、DD(30、60、120mg/kg)组;4周后处死大鼠,测量大鼠全心质量指数(HW/BW)和左心室质量指数(LVW/BW,即LVI),测定心肌纤维直径(MD);分别检测心肌组织中胶原水平、血管紧张素(Ang)、一氧化氮(NO)的量和钙调神经磷酸酶(CaN)、Na ,K -ATP酶、Ca2 -ATP酶活性。结果模型组大鼠的HW/BW、LVI、MD明显增大;心肌组织CaN活性、胶原水平及Ang的量明显增高;NO水平和Na ,K -ATP酶、Ca2 -ATP酶活性显著降低。与模型组比较DD能显著提高心肌组织NO量和Na ,K -ATP酶、Ca2 -ATP酶活性,降低CaN活性;明显抑制心肌组织Ang和胶原的产生;减轻心脏质量参数(HW/BW、LVI)及MD,抑制心肌肥厚及纤维化。结论DD对腹主动脉缩窄所致大鼠心肌肥厚及纤维化有保护作用,可能与其升高NO量、降低CaN活性、抑制Ang产生有关。     

亚降压剂量依那普利预防大鼠压力负荷性心肌肥厚的作用

目的：观察心脏肾素-血管紧张素系统（RAS）在压力负荷性心肌肥厚中的作用，并了解亚降压剂量转换酶抑制剂（ACEI）－依那普利对RAS和心肌肥厚的作用。方法：采用腹主动脉缩窄造成大鼠压力负荷升高，其中一组术前1天始予以亚降压剂量依那普利干预。于术后4周测定心脏局部血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、血浆AngⅡ、左室重量（LVW）、左室重量／体重比值（LVW／BW）、心肌细胞直径（DC）。结果：腹主动脉缩窄4周后实验手术组大鼠心肌局部AngⅡ（5．470132±0．52Pg／mg）较对照组（3．24±0.39Pg／mg）明显升高，且与LVW、LVW／BW、DC呈近相关（r分别为0．7152，0．8149，0．7528）；亚降压剂量依那普利干预后实验治疗组大鼠心肌局部AngⅡ，LVW，LVW／BW，DC均较手术组明显降低（3．48±0．41vs5．47±0．52pg／mg，438，9±4．22vs599．3±80.98mg，1.98±013vs2．64±0．19mg／g，16．45±0．4vs19．68±0．47um）；各组血浆AngⅡ无显著性差别（P＞0．05）结论：心肌局部RAS参与了大鼠压力负荷性心肌肥厚的发生发展过程；亚降压剂量依那普利能预防心肌肥厚的发生，并阻止心肌局部AngⅡ的升高。     

高脂饮食加重压力超负荷诱发的小鼠心肌肥厚

目的探讨高脂饮食能否加重压力超负荷诱发的ApoE基因敲除小鼠心肌肥厚。方法通过升主动脉缩窄(TAC)构建ApoE基因敲除小鼠压力超负荷心肌肥厚模型。将18只ApoE基因敲除小鼠随机分为假手术组、TAC组和高脂饮食+TAC组,每组6只。模型建立成功2周后,对小鼠心脏进行超声及病理形态学检查,同时测量左心室压力、心脏重量/体重比值、心肌细胞表面积以及相关肥厚基因和蛋白。结果与假手术组比较,TAC组的心肌肥厚各项指标(左心室室壁厚度、心脏重量/体重、心肌细胞表面积、胚胎基因表达)明显升高(P值均<0.05)。高脂饮食+TAC组心肌肥厚的各项指标均显著高于TAC组(P值均<0.05)。TAC组血管紧张素Ⅱ受体(AT1R)水平显著高于假手术组(P<0.05),而高脂饮食+TAC组又显著高于TAC组(P<0.05)。结论高脂饮食加重压力超负荷诱发的小鼠心肌肥厚可能与AT1R有关。     

补肾方药对压力负荷增加大鼠肥厚心肌血管紧张素Ⅱ及其Ⅰ型受体的影响

目的　研究补肾方药对心肌局部血管紧张素Ⅱ及其Ⅰ型受体的影响。方法　采用腹主动脉狭窄术造成压力负荷增加大鼠心肌肥厚模型 ,观察补肾方药对左室重量指数 (LVWI)、放射免疫法测定血浆及局部心肌的血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )含量、反转录PCR测定心肌血管紧张素Ⅱ -Ⅰ型受体mRNA (AT1mRNA)表达及AT1受体蛋白免疫组化的影响。结果　模型组LVWI、血浆及局部心肌的AngⅡ含量、心肌AT1mRNA表达及AT1受体蛋白与对照组间差别均有显著性意义 ;补肾方药大、小剂量组LVWI、血浆及局部心肌的AngⅡ含量、心肌AT1mRNA表达及AT1受体蛋白均与模型组间差别有显著性意义。结论　补肾方药可通过抑制心肌局部AngⅡ含量及AT1受体发挥逆转心肌肥厚的作用 ,在一定剂量范围内增加补肾方药的剂量并不能增加疗效     

牛磺酸对肾性高血压大鼠心肌肥厚及心源性血管活性物质间平衡的影响

目的探讨牛磺酸对肾血管性高血压大鼠心肌肥厚及心源性血管活性物质间平衡的影响。方法采用两肾一夹型肾血管性高血压大鼠模型。所有大鼠被随机分为3组(每组20只):假手术对照组;高血压对照组;牛磺酸治疗组。于术后第5周开始给予牛磺酸50m g.kg-1.d-1。采用标准尾套法间接检测清醒大鼠血压。给药8周后,大鼠处死,分离其左室心肌以用于检测左室质量/体质量比、心肌组织的血管紧张素Ⅱ和一氧化氮含量。结果与假手术组大鼠相比,未给药2K1C高血压大鼠血压明显升高,左室质量/体质量比增大,心肌组织血管紧张素Ⅱ含量增加,一氧化氮含量降低。应用牛磺酸治疗则明显抑制了肾动脉狭窄术后大鼠血压的升高,降低了2K1C高血压大鼠左室质量/体质量比和心肌血管紧张素Ⅱ含量,并使心肌一氧化氮含量升高。结论长疗程牛磺酸治疗可抑制肾性高血压大鼠心肌肥厚的发生,其机制可能与调节心肌组织局部血管紧张素Ⅱ与一氧化氮间平衡有关。     

大豆异黄酮对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠胸主动脉内皮细胞增殖的影响

目的:观察大豆异黄酮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠胸主动脉内皮细胞(RAECs)增殖的影响及机制。方法:组织贴块法培养RAECs,AngⅡ刺激RAECs建立细胞增殖模型。采用MTT法检测细胞增殖,观察不同浓度大豆异黄酮、亚硝基-精氨酸甲酯(L-NAME,100μmol/L)对AngⅡ诱导RAECs增殖的影响。硝酸还原酶及化学比色法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平。半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测RAECs iNOS mR-NA的表达。结果:大豆异黄酮在0.1～1.0μmol/L呈剂量及时间依赖性抑制RAECs增殖,但可被L-NAME部分抵消;大豆异黄酮能升高NO、NOS和iNOS水平,增加iNOS mRNA的表达。结论:大豆异黄酮对AngⅡ诱导的RAECs增殖有抑制作用;而上调iNOS基因表达,升高NO水平可能是其发挥作用的机制。     

牛磺酸对压力超负荷大鼠心肌肥厚的影响

心肌肥厚与心肌纤维化是高血压重要的病理结果,近年来发现心肌中钙调神经磷酸酶（CaN）是促进心肌肥厚的重要信号转导通路之一,该信号通路直接受细胞内Ca2＋的调节,血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）是可以反应心肌肥厚程度的敏感指标之一,同时能够使心肌细胞内Ca2＋水平升高;钙ATP酶（Ca2＋-ATPase）可逆浓度差向胞外和线粒体等细胞器转运Ca2＋,是保证细胞内Ca2＋稳定的重要因素之一。     

COX抑制剂对压力超负荷性心肌肥厚大鼠心室重构的作用

目的 研究环氧化酶(COX)抑制剂阿司匹林、塞来昔布对压力超负荷性心肌肥厚大鼠心室重构的影响及机制。方法 选取200±20g SPF级SD大鼠,通过腹主动脉缩窄法建立心肌肥厚大鼠模型,随机分为正常对照组、模型组、模型＋阿司匹林组、模型＋塞来昔布组。正常对照组和模型组以0.9%氯化钠溶液2ml/100g灌胃,阿司匹林组10mg/100g灌胃,塞来昔布组1.8mg/100g灌胃,分别灌胃至第8、10、12、14周取血浆和心肌组织。计算左心室质量指数,HE染色观察左心室心肌细胞形态,Masson 染色观察左心室胶原纤维的变化,ELISA法检测血浆炎性因子TNF-α、IL-10的含量,免疫组化检测相关蛋白Notch1、Hey2的表达。结果 与正常对照组比较,模型组心肌细胞排列紊乱,胶原纤维增生,左心室质量指数、细胞短轴直径、血浆炎性细胞因子TNF-α、IL-10含量及Notch1和Hey2的蛋白含量显著升高,且随着时间的变化,模型组的各项检测指标逐渐增加。与模型组比较,阿司匹林组及塞来昔布组的心肌细胞排列稍显整齐,左心室质量指数、细胞短轴直径、胶原纤维、血浆炎性细胞因子TNF-α、IL-10含量显著下降,且随时间的延长,加药的两组上述指标整体趋势逐渐降低,Notch1和Hey2的蛋白表达量随时间变化先升高后下降。结论 环氧化酶抑制剂具有减轻压力超负荷性心肌肥厚大鼠心室重构的作用,这可能与Notch1信号通路蛋白的调节及炎症因子含量降低相关。并且在短期内,阿司匹林发挥作用较早,长时间后,塞来昔布的作用逐渐显现,效果同阿司匹林相似。     

牛磺酸对肾性高血压大鼠心肌肥厚及组织局部RAS的影响

目的探讨牛磺酸对肾血管性高血压大鼠心肌肥厚及组织局部肾素-血管紧张素系统(RA S)的影响。方法采用两肾一夹型肾血管性高血压大鼠模型。所有大鼠被随机分为3组(每组20只):假手术对照组,高血压对照组和牛磺酸治疗组,于术后第5周开始给予牛磺酸50m g.kg-1.d-1。采用标准尾套法间接检测清醒大鼠血压。给药8周后,处死大鼠,分离左室心肌,检测左室重/体重比、心肌的血管紧张素Ⅱ含量(放射免疫法检测)和血管紧张素转换酶活性(分光光度计法检测)。结果与假手术组大鼠相比,未给药2K1C高血压大鼠血压明显升高,左室重/体重比增大,心肌的血管紧张素Ⅱ含量增加和血管紧张素转换酶活性均增高。应用牛磺酸治疗则明显抑制了肾动脉狭窄术后大鼠血压的升高,降低了2K1C高血压大鼠左室重/体重比、心肌的血管紧张素Ⅱ含量和血管紧张素转换酶活性。结论长疗程牛磺酸治疗可抑制肾性高血压大鼠心肌肥厚的发生,其机制可能与抑制心肌组织局部血管紧张素Ⅱ生成有关。     

大豆异黄酮对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:研究大豆异黄酮对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响并探讨其作用机制?方法:分离大鼠胸主动脉,组织贴块法培养VSMC,以AngⅡ为诱导剂,建立VSMC细胞增殖模型?应用MTT法,CellTiter-Glo■ Assay法检测细胞增殖,观察不同浓度的大豆异黄酮及亚硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)对AngⅡ诱导的VSMC增殖的影响?硝酸还原酶法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)含量;化学比色法测定一氧化氮合酶(NOS),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平;半定量RT-PCR检测VSMC iNOS mRNA的表达?结果:大豆异黄酮能剂量依赖性的抑制VSMC增殖,该作用可被L-NAME部分抵消;大豆异黄酮能升高NOS?iNOS和NO水平,增加iNOS mRNA的表达?结论:大豆异黄酮可呈剂量依赖性的抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖,该作用可能通过上调iNOS基因表达?升高NO水平实现的?     

表没食子儿茶素没食子酸酯对压力超负荷导致的大鼠心肌肥厚的预防作用

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocathechin-3 Gallate,EGCG)是否能够抑制压力超负荷导致的心肌肥厚.方法 心肌肥厚模型通过腹主动脉收缩术(abdominal aortic constriction,AC)实现.结果 手术后3周,HW/BW在AC组比sham组增加了34％.EGCG...     

压力超负荷性肥大心肌细胞AT1和AT2 mRNA表达的动态变化

目的:观察压力超负荷性肥大心肌细胞表面AT1和AT2受体mRNA表达的动态变化. 方法:构建压力超负荷性心肌肥大模型,于不同时间点急性分离心肌细胞. 采用RT-PCR法观察肥大心肌细胞中AT1和AT2 mRNA表达的动态变化. 结果:随着大鼠心肌肥厚程度的逐渐加重,于术后4 wk起,AT1与AT2 mRNA的表达水平较之假手术组均逐渐升高,8 wk时继续升高. 主动脉缩窄12 wk组AT1的表达水平与8wk组无显著性差异,但AT2的表达水平从0.438±0.088进一步升高至0.580±0.066,且差异有显著性(P＜0.05). 各时段假手术对照组间心肌细胞中AT1与AT2的表达水平均无明显变化. 结论:在压力超负荷性心肌肥大过程中,心肌细胞AT1与AT2 mRNA的表达呈现动态的变化过程. 表达增多的AT2受体可能会在随后心力衰竭的发生中发挥一定作用.     

特异性环氧化酶抑制剂对大鼠慢性压力负荷性心肌肥厚的影响

目的观察特异性环氧化酶抑制剂对大鼠慢性压力负荷性心肌肥厚过程中左室重构的影响以及此过程中炎症反应标记物的动态变化。方法将SD大鼠随机分3组:模型对照组、模型组和实验组,模型组和实验组按腹主动脉缩窄致压力负荷性心肌肥厚制作大鼠模型。实验组加用特异性环氧化酶抑制剂(rofecoxib)干预,20周用高频超声测定左心室结构和功能,心肌组织胶原Masson染色,测定总胶原容积百分比(CVF-T)和无冠状动脉小血管视野胶原容积百分比(CVF-NV),检测大鼠不同时间炎症反应标记物的变化。结果模型组左室壁增厚,特别是室间隔增厚明显,左室重量增加(P<0.01),左室腔扩大。实验组左室舒张内径(LVDD)及左室重叠(LVM)较模型组降低(P<0.01)。模型组CVF-T和CVF-NV明显增加(P<0.001),实验组则减少(P<0.001),与模型对照组差异无显著性(P>0.05)。模型组TNF-α,IL-10升高(P<0.05),实验组均下降(分别P<0.05,P<0.01)。实验组TGF-β明显降低(P<0.01)。结论炎症参与了压力负荷性心肌肥厚过程,特异性环氧化酶抑制剂有抗心室重构作用,可能与通过抗炎症作用达到抗心肌纤维化作用有关。     

缝隙连接蛋白重构对肥厚心室肌心电生理的影响

目的观察心脏缝隙连接蛋白(Cx43)重构对肥厚心室肌心电生理的影响。方法随机选用新西兰白兔20只分为A(正常心肌)和B(肥厚心肌)两组,采用40%-60%结扎腹主动脉后饲养建立兔肥厚心肌模型,BL -410生物机能实验系统记录校正Q—T间期和R波振幅,切取左心室肌采用免疫组化测定缝隙连接蛋白Cx43 荧光表达面积和强度。结果B组心脏重量/体重比、左心室重量/体重比较A组明显增加,动物模型建立成功。校正Q—T间期B组[(332.57±24.34)ms]明显长于A组[(309.86±12.13)ms],上升约7.3%,R波振幅B组[(502.00±22.13)μm]明显高于A组[(426.29±33.96)μm]。Cx43荧光表达面积B组[(4232.33±484.43)μm2]明显于A组[(5 325.62±598.90)μm2],下降约20.5%,与校正Q—T间期相关(r=-0.775),并存在侧边偏移现象。结论肥厚心室肌存在缝隙连接蛋白Cx43数量下降和位置异常的重构现象,可能是肥厚心肌对缺血耐受性差、容易出现心律失常的分子病理学基础。     

阿托伐他汀对压力负荷心肌肥厚大鼠血管紧张素转换酶2表达的干预研究

目的:探讨血管紧张素转化酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)在压力负荷心肌肥厚大鼠中的表达以及阿托伐他汀干预对其的影响.方法:SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、正常对照加阿托伐他汀组(B组)、假手术组(C组),其余2组通过不完全结扎大鼠腹主动脉构建心肌肥厚模型,并分为阿托伐他汀干预组(D组)[术前l周起灌胃给予5 mg/(kg·d )阿托伐他汀,直至术后4周]和非药物手术组(E组).术后4周检测大鼠左心室质量指数,组织切片染色后光镜检查,并测心肌细胞平均直径及胶原容积百分比,分别用实时RT-PCR法和Western免疫印迹法测定心肌组织中ACE2 mRNA和蛋白水平的表达.结果:E组左心室质量指数、心肌细胞平均直径及胶原容积百分比较A组、B组及C组均显著增加(P<0.01),并且ACE2 mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.01).D组上述指标较E组显著下降(P<0.01).结论:心肌肥厚大鼠ACE2 mRNA和蛋白表达显著增加;阿托伐他汀能够有效地延缓压力负荷诱导的心肌肥厚,并能下调ACE2 mRNA和蛋白表达.     

澳洲茄碱对压力超负荷诱导的小鼠心肌纤维化的影响

目的 探讨澳洲茄碱(SS)对压力超负荷诱导的小鼠心肌纤维化(MF)的影响.方法 使用主动脉缩窄术(AB)建立小鼠心肌纤维化模型,采用随机数字表法将40只8～10周雄性C57/B6小鼠随机分为假手术组、假手术+SS组、AB组、AB+SS组,每组10只.AB手术3周后,AB+SS组每天腹腔注射SS(10 mg/kg),AB...     

GP130在压力超负荷性大鼠心肌中的表达变化及替米沙坦干预影响

目的观察糖蛋白130(GP130)9在压力超超负荷性大鼠心肌中的表达变化与心室重构的关系,以及替米沙坦对心室重构及GP130表达的影响。方法20只雄性SD大鼠行腹主动脉缩窄术后2周造成压力负荷性心肌肥厚模型,随机分为左室肥厚组(LVH)和替米沙坦组(Telmisartan,Tel),另设8只作为假手术组(Sham)。替米沙坦组灌胃给药(3mg·kg-·1d-1),连续4周。测定血流动力学指标和心室质量指数,放免法测定心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量,免疫组化法检测心肌中GP130蛋白水平表达。结果与假手术组比较,肥厚组SBP、DBP和MBP显著升高(P<0.05),LVMI和RVMI亦明显升高(P<0.05);心肌组织AngⅡ含量和GP130蛋白表达水平明显增加(P<0.05￣0.01)。相关分析表明,心肌组织中GP130的蛋白表达与AngⅡ水平及LVMI呈显著正相关(P<0.05￣0.01)。替米沙坦改善血流动力学指标(P<0.05￣0.01),降低LVMI和RVM(IP<0.05),AngⅡ含量显著降低(P<0.01),GP130蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论压力超负荷性大鼠心肌中GP130蛋白的过度表达与心室重构的发生密切相关;替米沙坦逆转心室重构的机制还可能与抑制GP130蛋白的过度表达相关。     

小檗碱对压力负荷所致心肌肥厚大鼠的保护作用

目的:通过动物实验探讨小檗碱(Berberine)对压力负荷所致大鼠心肌肥厚模型的保护作用,并探讨其作用机制。方法:通过主动脉缩窄术构建大鼠心肌肥厚模型,将造模成功的16只SD大鼠随机分为模型组及模型+小檗碱组,另外将假结扎主动脉的8只大鼠入组假手术组。术后4周,利用心脏超声测定大鼠的心功能指标;HE、Masson及TUNEL染色等分子生物学方法测定心肌细胞大小、心脏纤维化、心肌细胞凋亡等指标;同时使用RT-q PCR法检测左室心肌组织心房利钠因子(ANP)m RNA的表达;采用Western blot的方法检测内质网应激相关指标Bip/GRP78和CHOP的蛋白表达情况。结果 :与模型组相比,小檗碱可明显改善主动脉缩窄所致的心功能紊乱,显著降低心肌细胞大小(P<0.05)、心脏组织的纤维化程度以及心肌细胞凋亡比率(P<0.05);Western blot结果表明,小檗碱治疗可明显降低长期压力超负荷所致的内质网应激相关指标Bip/GRP78和CHOP的表达的增加(P<0.05)。结论 :小檗碱可显著改善压力超负荷所致的心肌肥厚及心功能紊乱,抑制心肌细胞凋亡,对肥厚型心肌起保护作用,且此种心脏保护性作用可能与其抑制压力负荷所致的内质网应激相关。     

瑞舒伐他汀对大鼠压力超负荷心肌肥厚的影响

目的:探讨瑞舒伐他汀干预对压力超负荷所引起大鼠心肌肥厚及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:SD大鼠随机分为5组,各组(除假手术组外)通过部分结扎大鼠腹主动脉构建心肌肥厚模型,A为假手术组,B为单纯手术组,C为卡托普利组,术前一周给予卡托普利(50mg/kg.d)灌胃直至术后4周,D、E组为瑞舒伐他汀组,术前一周分别给予瑞舒伐他汀(2mg/kg.d组及4mg/kg.d组)灌胃直至术后4周。同时A、B组给予等量生理盐水灌胃。测动脉血压,心脏质量指数(HMI),应用病理学方法检测胶原容积百分比(CVF)。用免疫组化法检测心肌组织CTGF蛋白表达,用RT-PCR法检测心肌组织中CTGFmRNA水平的表达。结果:1B组较A组动脉血压、HMI明显增加(P<0.01)、CVF明显增加(P<0.01);D、E组较B组心脏质量指数明显降低(P<0.01),胶原容积百分比降低(P<0.01);C组较A组其HMI、CVF明显降低(P<0.01)。2B组CTGF蛋白及CTGFmRNA表达较A组增加(P<0.01);D、E组CTGF蛋白及CTGFmRNA表达较B组明显下降(P<0.01);C组较B组其CTGF蛋白、CTGFmRNA表达明显下降(P<0.01)。结论:1心肌肥厚大鼠心肌组织中CTGF表达显著增加。2瑞舒伐他汀能够有效地延缓压力负荷诱导的心肌重构并降低CTGF蛋白、CTGFmRNA表达。     

改良慢性压力超负荷大鼠模型的对比研究

目的探讨通过双重缩窄大鼠腹主动脉制作心衰模型成功率的方法。方法将60只成年雄性SD大鼠采用随机数字表法分为3组：假手术组、腹主动脉缩窄模型组（模型组）、腹主动脉双重缩窄模型组（改良组）。造模8周后,使用BL-420E＋生物信号采集系统测定心功能指标,比较3组大鼠心功能的各项指标（SAP、DAP、LVEDP、LVMI、±dp/dtmax）。结果与假手术组相比,模型组与改良组大鼠SAP、DAP、LVEDP、LVMI显著升高（P〈0.01）,±dp/dtmax下降（P〈0.01）;改良组与模型组比较,大鼠SAP、DAP、LVEDP、LVMI显著升高（P〈0.05）,±dp/dtmax下降（P〈0.05）。结论双重缩窄大鼠腹主动脉制作慢性压力超负荷模型成功率高。