应用高速逆流色谱技术从延胡索中分离制备延胡索乙素

利用高速逆流色谱技术,一次进柱过程即可从延胡索粗提物中分离到活性成分延胡索乙素.两相溶剂系统用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水四元系统,上相为固定相,下相为流动相,转速为850r/min,流速为1.2ml/min.通过EI-MS和1H-NMR鉴定,基本确认了其化学结构.经HPLC分析,纯度达96.4%.     

高速逆流色谱法分离制备厚朴中magnoloside A

目的采用高速逆流色谱(HSCCC)法分离制备厚朴中magnoloside A。方法考察溶剂系统、转速、体积流量、温度、进样量对分离效果的影响,HPLC、NMR法对分离产物进行纯度检验和结构鉴定。结果最佳条件为两相溶剂系统乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水(1∶1∶0. 2∶2),上相固定相,下相流动相;转速850 r/min;流动相体积流量3 m L/min;温度45℃;进样量1 000 mg,粗提物中分离得到magnoloside A 121. 9 mg,纯度为95. 8%,回收率为81. 7%。结论该方法简便快速,回收率高,可用于分离制备厚朴中magnoloside A。     

高速逆流色谱法分离白鲜皮中化学成分条件的优化

目的优化高速逆流色谱分离白鲜皮中的化学成分。方法选择正己烷-醋酸乙酯-乙醇-水(1∶1∶1∶1,V/V)系统对白鲜皮85%乙醇提取物进行分离,上相作为固定相,下相作为流动相,流速为1.3 ml/min,仪器转速1 200 r/min。结果分离得到两个单体化合物白鲜碱和黄柏酮,经高效液相(HPLC)检测纯度均达到99%以上。结论该方法简单、快速、容易操作,可为提纯制备高纯度的化学对照品提供新途径。     

应用高速逆流色谱一次性分离白豆蔻中5-羟基-3,7,4′-三甲氧基黄酮

目的 研究高速逆流色谱分离白豆蔻中黄酮醇类活性成分的方法.方法 利用高速逆流色谱技术,采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水作为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,转速为900 r/min,体积流量为1.2 mL/min.结果 一次性从白豆蔻黄酮醇类物质中分离得到5-羟基-3,7,4′-三甲氧基黄酮.通过EI-MS、1H-NMR和13C-NMR鉴定,HPLC检测分析,纯度达98％以上.结论 利用高速逆流色谱技术可从白豆蔻中分离制备5-羟基-3,7,4′-三甲氧基黄酮,分离度好,产物纯度较高.     

葛根中大豆苷的高速离心分配色谱法分离纯化

目的应用高速离心分配色谱法(FCPC)分离纯化葛根中的大豆苷。方法以乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水(5:1:0.5:5)作为两相溶剂系统,上相为流动相,下相为固定相,转速1400 r/min,流速3.0 m L/min,检测波长254 nm,采用ascending模式进行分离制备,化合物的结构由质谱及核磁共振谱鉴定。结果从1.0 g葛根粗提物中分离得到16.3 mg大豆苷,纯度经HPLC分析为96.5%。结论该方法适合于葛根中的大豆苷的高效分离制备。     

pH区带逆流色谱法分离制备荷梗中O-去甲荷叶碱

目的:建立pH区带逆流色谱法(pH-zone refining counter-current chromatography)分离制备荷梗中O-去甲荷叶碱的方法。方法:溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(3∶7∶1∶9),上相添加三乙胺(10 mmol/L)作为固定相,下相添加盐酸(5 mmol/L)为流动相进行洗脱,在主机转速850 r/min、体积流量2 mL/min、检测波长272 nm条件下进行分离制备。结果:从2.10 g荷梗生物碱粗提物中一次分离得到53 mg O-去甲荷叶碱,纯度大于98%,通过MS、1H-NMR和13C-NMR进行了化学结构鉴定。结论:pH区带逆流色谱法是分离纯化荷梗中O-去甲荷叶碱的一种快速高效的分离方法。     

高速逆流色谱分离纯化草豆蔻中山姜素和小豆蔻明

目的建立高速逆流色谱分离纯化草豆蔻中山姜素和小豆蔻明的方法。方法使用正己烷-醋酸乙酯-甲醇-水(5∶5∶7∶3)为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,体积流量2.0 mL/min,转速800 r/min,温度25℃,固定相的保留率为50%,检测波长300 nm,对草豆蔻粗提物进行分离。结果从100 mg草豆蔻粗提物中一步分离纯化得到17.2 mg山姜素和25.1 mg小豆蔻明。经HPLC分析,质量分数分别为98.1%、99.2%,其化学结构由1H-NMR和13C-NMR鉴定。结论与传统的、存在不可逆吸附现象的柱色谱法相比,高速逆流色谱分离纯化草豆蔻中山姜素和小豆蔻明的方法具有简单、高效、回收率高等优点。     

基于含水量-电导率拟合曲线模型优化丹参酮提取物微乳的研究

目的 证实“含水量-电导率拟合曲线”模型测定微乳水包油(O/W)型相临界点的精确性,进一步使用该模型优化丹参酮提取物微乳。方法 以“含水量-电导率拟合曲线”模型确定微乳转变为O/W型的相临界点,根据微乳油相、总表面活性剂、水相占比,使用Origin 2021软件绘制伪三元相图,筛选成乳区域大的各相配比;以微乳的平均粒径、多分散系数(PDI)为考察指标,星点设计-响应面法优化微乳;采用高速离心和4、25℃下静置60 d,考察微乳的稳定性。结果 优化后的微乳处方为(含药油相为18.11%,聚山梨酯80为61.21%,1,2-丙二醇为20.68%,临界点含水量为64.29%),K_m为2.96,配制温度为27.4℃,不同实验条件下微乳的稳定性均良好。结论 “含水量-电导率拟合曲线”模型确定的O/W型相临界点精确性高,优化后的微乳稳定性好,达到了预期的研究目标。     

pH区带逆流色谱法分离制备荷叶中生物碱

目的建立对荷叶生物碱进行分离的pH区带逆流色谱方法。方法溶剂系统为叔丁基甲醚-甲醇-水(4∶1∶5),上相添加三乙胺(10 mmol/L)作为固定相,下相添加盐酸(5 mmol/L)为流动相进行洗脱,在主机转速800 r/min、体积流量1.5 mL/min、检测波长254 nm条件下进行分离制备。结果从2.18 g荷叶提取物中一次分离得到N-去甲荷叶碱110 mg、O-去甲荷叶碱420 mg、荷叶碱310 mg和莲碱190 mg 4种生物碱,质量分数均大于98%;各化合物通过HPLC、MS和1H-NMR进行了化学结构鉴定。结论 pH区带逆流色谱法是一种快速高效的分离纯化荷叶生物碱的方法。     

高效液相色谱法测定制剂中胆酸类成分

片剂或胶囊内容物置流动相中用超声波震荡分散溶解后用流动相稀释至50ml,微孔滤膜(0.45μm)滤过后供液相色谱测定。分析系统为色谱柱:Supelcosil LC-18-DB(5μm)150×4.6mm,流动相:甲醇-20mmol/L醋酸钠(4:1 v/v),用磷酸调至PH4.3,流量1ml/min,检测波长:紫外210nm。鹅去氧胆酸在2.5～7.5mg/ml,熊去氧     

应用高速逆流色谱技术从附子中分离制备苯甲酰新乌头原碱

利用高速逆流色谱技术,一次进柱即可实现从附子粗提物中分离得到苯甲酰新乌头原碱。两相溶剂系统用氯仿-甲醇-0.3mol／L盐酸三元系统,上相为固定相,下相为流动相,转速为892rpm,流速为1.2ml／min。通过ESI-MS、^13C-NMR,^1H-NMR鉴定,确认了其化学结构。经HPLC分析,纯度达98％以上。     

Analysis of gossypol by high performance liquid chromatography

Several high performance liquid chromatographic methods for the analysis of gossypol in different kinds of sample were developed. (1) Pure gossypol: separation on C18 column with MeOH/H2O/CHCl3 (70:30:40) containing 0.1% H3PO4 as mobile phase or on SO3H column with MeOH/citrate buffer (pH 6.3) (55:45) as mobile phase was recommended. With these systems, minute amounts of contaminants difficult to separate by other HPLC systems could be determined. (2) Plant material: acetone was selected as the extraction solvent. After evaporation of acetone from the extract, the residue was redissolved in 1% HOAc in CHCl3. An aliquot of this solution was chromatographed and quantified by peak area method. The mean recovery of pure gossypol added to plant material was 91.1 +/- 1.1% (S.D.). (3) Plasma sample: a HPLC method with electrochemical detector was developed. A plasma sample with glutathione as protective agent and gossypol dimethyl ether as internal standard was introduced on to a C18 pre-column. By using column-switching technique, a certain part of the eluate containing gossypol and gossypol dimethyl ether was subjected to a C8 analytical column for further separation. MeOH/citrate buffer (pH 3.2) (80:20) was used as the mobile phase. The optimum potential for detection was +0.6 V vs. Ag-AgCl. The assay sensitivity was 5 ng/ml. This method is sensitive and selective, suitable for clinical pharmacokinetic studies.     

当归补血汤有效部位指纹图谱归属分析

目的分析当归补血汤的石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇部位的特征峰在复方全方及在单味药中的归属。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Sh im-Pack VP-ODS柱,250 mm×4.6 mm I.D.,流动相为甲醇-水(梯度洗脱),检测波长为280 nm,流速为1 m l/m in。结果复方石油醚部位的9个特征峰5个来自当归,4个来自黄芪;氯仿部位的9个特征峰6个来自黄芪,3个来自当归;醋酸乙酯部位的11个特征峰,7个同时来自当归和黄芪,1个来自当归,3个来自黄芪;正丁醇部位的7个特征峰,6个同时来自于当归和黄芪,1个来自黄芪。结论复方各部位的指纹图谱为阐明各部位的药效物质基础提供科学依据,为下一步的临床应用以及新药的开发提供参考。     

Evaluation of sesquiterpene lactone fraction of Saussurea lappa on transudative,exudative and proliferative phases of inflammation

The sesquiterpene lactone fraction of Saussurea lappa roots was evaluated for its effect on the transudative, exudative and proliferative phases of inflammation using the cotton pellet granuloma assay in rats. The fraction (25-100 mg/kg, p.o.) showed significant dose-dependent inhibition of the increase in wet weight of the cotton pellet at 3 h (transudative phase), leakage of dye from the bloodstream around granuloma at 24 h (exudative phase) and increase in dry weight of the cotton pellet on day 6 (proliferative phase). It significantly lowered the elevated biochemical parameters such as alkaline phosphatase, acid phosphatase, gamma-glutamyltranspeptidase and significantly elevated the lowered albumin concentration in serum. The studies suggest that the antiinflammatory activity of the sesquiterpene lactone fraction of S. lappa may, in part, be due to stabilization of lysosomal membranes and an antiproliferative effect.     

UPLC-DAD法研究栽培两面针不同生长期不同部位有效成分的动态累积

目的:研究栽培两面针有效成分在不同生长期及不同药用部位的动态累积规律,以期为两面针合理用药及人工优质栽培提供理论依据.方法:采用UPLC-DAD法,测定栽培两面针药材不同生长期、不同药用部位(根、茎、枝)中氯化两面针碱含量变化.结果:两面针根、茎、枝不同部位中均含有氯化两面针碱,但含量差异较大,依次为根＞茎＞枝条;不同部位、不同生长期两面针药材中氯化两面针碱含量呈规律变化,出现两个较明显的高峰及一个低谷,即5,10 ～ 11月含量较高,6月含量最低.结论:两面针不同生长期,不同部位有效成分累积分布不同,根据其含量变化规律,建议两面针最佳采收期在栽培第3年的10 ～ 11月,药用部位为根部.两面针全株植物均具有一定的药用价值.     

甲状腺乳头状癌的CT诊断

目的探讨甲状腺乳头状癌的CT表现及诊断价值,以提高对其CT表现的认识。方法回顾性分析经手术病理证实为甲状腺乳头状癌的22例患者资料,均行CT平扫及双期增强扫描。结果2例微癌为单一小结节低密度,20例表现混杂密度灶;15例原发病灶及9例颈部转移淋巴结颗粒钙化,2例原发病灶囊壁钙化;22例原发实质病灶及10例颈部转移淋巴结双期增强扫描呈"强化一致性",16例原发实质病灶及4例颈部转移淋巴结有乳头结节状强化。结论原发实质病灶及转移淋巴结双期增强扫描"强化一致性"、原发病灶颗粒状钙化为甲状腺乳头状癌重要征象,原发病灶及转移淋巴结乳头结节状强化、颈部转移淋巴结钙化为甲状腺乳头状癌特征性表现。对肿瘤是否累及周围组织器官应慎重,以组织器官管腔僵硬及管腔内肿物突出为诊断肿瘤外侵金标准。     

Simultaneous Determination of Seven Flavonoids in Aerial Parts of Artemisia frigida by HPLC

Objective To establish an HPLC method for the determination of seven flavonoids from the aerial part of Artemisia frigida. Methods Hypersil ODS-2 (300 mm × 4.6 mm, 5 μm) column was used, with acetonitril-0.2% phosphoric acid (gradient elution) as a mobile phase, and the detection wavelength was at 283 nm with flow rate at 1 mL/min. Results All calibration curves showed good linear regression (r > 0.9990) within the tested range. All average recovery was more than 98.00% and RSD was less than 3.0% (n = 6). Conclusion The method is steady and with good repeatability, and could be used to determine the content of flavonoids in A. frigida from different areas.     

Evaluation of antinociceptive,antinflammatory activities and phytochemical analysis of aerial parts of Urtica urens L.

The antinociceptive and antiinflammatory activities of the ethanol extract of the aerial part of Urtica urens were determined by experimental animal models. U. urens extract was found to possess significant antinociceptive activity in chemically induced mouse pain models (ED₅₀ 39.3 mg/kg: 17.2–74.5 mg/kg) in the writhing test and 62.8% inhibition of the licking time in the late phase of the formalin test at a dose of 500 mg/kg p.o. and antiinflammatory activity on carrageenan‐induced rat hind paw edema (41.5% inhibition at a dose of 300 mg/kg i.p.). The extract displayed activity neither in the thermal model of pain nor in the topical inflammation model. The major component of the extract was determined as chlorogenic acid (670 mg/1000 g dry weight) and could be partly responsible for this activity. Copyright © 2010 John Wiley & Sons, Ltd.     

复方安替威胶囊血中移行成分的富集工艺研究

目的:研究复方安替威血中移行成分的富集工艺条件及参数。方法:以复方安替威的主要入血成分绿原酸和黄芩苷为考察指标,用HPLC测定含量,确定大孔树脂法富集复方安替威血中移行成分的最佳工艺条件。结果:复方安替威胶囊内容物经水提醇沉后,以NKA-2型大孔树脂为吸附剂,3 BV的水洗脱除去杂质后,收集5 BV的50%乙醇洗脱液为最佳富集工艺;终产物中绿原酸和黄苷芩的含量均较原复方安替威胶囊提高了近5倍。结论:以中药血清药物化学为指导的大孔树脂法,是富集复方安替威血中移行成分的有效方法,也为其他中药复方的精制提供借鉴。     

不同产地、不同采收期和不同部位金钮扣中绿原酸含量比较研究

目的:建立金钮扣药材中有效成分绿原酸HPLC含量测定方法,为其药材质量评价和资源合理利用提供科学依据。方法:采用高效液相色谱法对不同产地、不同采收期和不同部位金钮扣中绿原酸含量进行比较分析。色谱柱为Agela Promosil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(10∶90),流速为1.0mL/min,检测波长为327nm,柱温为35℃。结果:绿原酸的浓度在0.1000～200.0μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系r,=0.9999,平均回收率为99.8%,RSD为0.71%。不同产地、不同采收期和不同部位金钮扣中绿原酸含量存在一定差异。结论:所建立的方法准确可靠、灵敏度高、专属性强,可有效控制金钮扣药材的质量,为金钮扣资源合理利用提供科学依据。