石榴叶鞣质对高血脂小鼠糖代谢影响及其机制

目的：探讨石榴叶鞣质对高脂小鼠糖代谢的影响以及降糖的作用机制。方法：通过高脂饮食建立高脂并高血糖小鼠,灌胃石榴叶鞣质,观察小鼠血清糖脂的变化,肝糖元含量;通过体外HepG2细胞实验观察石榴叶鞣质对葡萄糖的利用及其胞内糖元含量变化。结果：灌胃石榴叶鞣质8周后,高脂小鼠外周血总胆固醇、甘油三酯和血糖均有明显降低,肝糖元升高;体外实验石榴叶鞣质可以明显促进HepG2细胞对葡萄糖的利用,增加胞内糖元含量。结论：石榴叶鞣质对高脂合并的高血糖有明显的降低作用,其作用机制可能与增加肝内糖元转化有关。     

石榴叶鞣质对高血脂高血糖模型动物脂代谢的影响

目的 :观察石榴叶鞣质对高脂模型鼠脂代谢的影响 ,以及体外对HMG CoA还原酶的抑制作用。方法 :造大鼠高脂模型 ,以四氧嘧啶诱导高血糖伴高血脂小鼠模型 ,检测TC、TG等生化指标 ;制备大鼠肝微粒体HMG CoA还原酶液 ,测 1min内A34 0nm的变化。结果 :石榴叶鞣质大中剂量 (15 0、75mg kg)对高脂大鼠的TC和TG具有显著的降低作用 ,大小剂量 (30 0、75mg kg)对高血糖伴高血脂小鼠的TC降低作用明显 ,体外抑制HMG CoA还原酶的最低有效浓度为 1× 10 - 6 g mL ,抑制率 15 16 %。结论 :石榴叶鞣质对高脂模型鼠脂代谢紊乱具有较好的调节作用 ,体外可较强的抑制HMG CoA还原酶活性。     

石榴叶鞣质和鞣花酸体外对大鼠原代脂肪细胞转化及脂代谢相关因子表达的影响

目的：探讨石榴叶鞣质及其鞣花酸对原代大鼠脂肪细胞分化及其相关脂代谢影响因子表达的影响。方法：利用体外培养原代大鼠前脂肪细胞方法,观察石榴叶鞣质及其鞣花酸对脂肪细胞内脂生成及其相关因子mRNA表达的影响。结果：石榴叶鞣质和鞣花酸对脂肪细胞中脂的形成具有明显的抑制作用,对脂蛋白脂酶（LPL）和葡萄糖-3-磷酸脱氢酶（GPDH）活性有一定的抑制作用,促进脂分解,降低胞内脂含量。并且上调PPARγ和脂肪酸结合蛋白（aP2）,下调肥胖基因（ob）。结论：石榴叶鞣质可以抑制脂肪细胞内脂的生成,并能促进脂代谢,鞣花酸是其主要活性成分,具有与石榴叶鞣质相同的作用。     

壮药金花茶叶的降血糖活性筛选

目的考察金花茶叶不同极性提取物对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗量的影响及对Ⅱ型糖尿病小鼠的降血糖作用。方法利用胰岛素诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型,根据细胞对葡萄糖消耗情况,评价金花茶降糖活性。利用高脂高糖饲料联合链脲佐菌素建立小鼠Ⅱ型糖尿病模型,连续灌胃28 d观察血糖变化及糖耐量水平,同时检测血清总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白含量。结果金花茶叶正丁醇和乙酸乙酯提取物均能显著增加胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗量(P0.05)。并且在给药28 d后均能显著降低糖尿病小鼠血糖值和餐后血糖(P0.01),同时显著降低糖尿病小鼠的总胆固醇含量、甘油三酯含量及低密度脂蛋白含量(P0.05)。结论金花茶叶正丁醇和乙酸乙酯提取物能改善HepG2细胞的胰岛素抵抗现象,且能改善Ⅱ型糖尿病小鼠的高血糖高血脂症状。     

糖原磷酸化酶抑制剂山楂酸对小鼠血糖和肝糖原的影响

目的：考察糖原磷酸化酶抑制剂山楂酸对正常和实验性高血糖模型小鼠的降血糖作用及对肝糖原的影响，初步探讨其降糖机制。方法：山楂酸灌胃7天，分别以皮下注射肾上腺素，口服葡萄糖造成小鼠高血糖模型，与正常组一起测定静脉血糖和肝糖原含量结果：山楂酸可显著对抗肾上腺素、葡萄糖引起的血糖升高，对抗肾上腺素引起的肝糖原降解，增加葡萄糖致高血糖小鼠肝糖原含量；可增加正常小鼠肝糖原储备，但不影响正常血糖、结论：山楂酸具有降血糖作用，机制与其抑制肝糖原分解有关。     

菠萝叶酚体外HepG2细胞跨膜转运及其对糖脂分布的影响

菠萝叶主要含酚类成分,具有抗氧化和调血脂作用。其主要成分为对香豆酸。该文以对香豆酸为主要测试成分,观察了菠萝叶酚类成分中对香豆酸体外人源肝HepG2细胞跨膜转运的特点及其对糖脂负荷细胞实验中葡萄糖,总胆固醇和甘油三醇的转运代谢的影响。结果表明,菠萝叶酚具有较好的跨膜转运特点。给药后5 min,菠萝叶酚中的对香豆酸即细胞内达到较高的浓度,60 min达峰值。具有时间和剂量依赖性。在促进葡萄糖转运体（GLUT4）和低密度脂蛋白受体（LDLR）表达的同时,菠萝叶酚能够降低细胞内的糖脂含量。这种降低细胞内脂含量的作用与促进脂蛋白脂酶（LPL）、肝甘油三酯脂酶（HTGL）表达有关,降低细胞内葡萄糖含量的作用与促进肝糖原合成有关。     

石榴叶鞣质与菠萝叶酚对哺乳期小鼠生长的比较

目的:观察石榴叶鞣质和菠萝叶酚通过母乳对哺乳期小鼠生长的影响。方法:给母鼠灌胃不同剂量的药物,观察新生小鼠的一般状况、体质量、尾长及脏器系数肝脏相关脂代谢调控因子的表达。结果:石榴叶鞣质和菠萝叶酚均可以通过母乳明显影响新生小鼠的生长发育,其中石榴叶鞣质的作用强于菠萝叶酚,同时可以明显下调新生小鼠肝脏的脂代谢相关酶的表达。结论:石榴叶鞣质和菠萝叶酚可以通过母乳影响新生小鼠的生长发育,其作用与影响肝脏脂代谢酶表达有关。哺乳期服用该药需引起注意。其临床意义尚有待于深入研究。     

糖元阳片对链脲佐菌素诱导糖尿病小鼠保护作用的研究

目的:探讨糖元阳片对链脲佐菌素诱导的实验性糖尿病小鼠的保护作用。方法:采用链脲佐菌素诱导小鼠糖尿病模型,造模成功的小鼠随机分成5组,即模型组、二甲双胍组及糖元阳片高、中、低剂量组,另设正常对照组,每组10只。各组分别灌胃给药,每天1次,连续21d;正常对照组和模型组灌胃等体积的0.9%氯化钠注射液。检测比较各组小鼠的体质量、血清超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)水平及肝糖原和肌糖原含量、HE染色观察胰腺组织形态学改变。结果:灌胃糖元阳片能显著降低糖尿病小鼠空腹血糖,降低血清中过氧化物MDA含量,增加SOD活力,增加肝糖原、肌糖原贮存。结论:糖元阳片对链脲佐菌素诱导的实验性糖尿病小鼠具有保护作用,其机制可能与提高小鼠机体内的抗氧化能力,修复损伤胰岛有关。     

高浓度绿原酸对非酒精性肝炎的干预作用及其机制研究

目的：本文通过油酸（oleic acid,OA）处理人肝癌细胞系HepG2体外模拟肝细胞非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver disease ,NAFLD）的病理状态,研究了高浓度绿原酸（chlorogenic acid ,CGA）对NAFLD的干预作用,包括对肝细胞脂堆积、糖摄取和氧化应激的影响。 方法：用0.5 mmol/L OA处理HepG2 细胞24h建立体外非酒精性肝炎的模型。正常组和OA诱导组的细胞用CGA（0, 0.5, 1, and 2 mmol/L）处理24h后有油红O染色和生化分析试剂盒检测胞内的脂堆积情况、活性氧( reactive oxygen species, ROS)含量和糖摄取能力。我们还通过Western blot和RT-qPCR检测了脂合成相关指标（SREBP-1c和PNPLA3）和氧化应激相关蛋白（CYP2E1和CYP4A）的相对表达量。 结果： CGA组相对于OA诱导组其细胞内脂滴含量呈上升趋势,SREBP-1c和PNPLA3的mRNA和蛋白表达量呈上升趋势,CGA还可以促进HepG2对荧光葡萄糖的摄取,降低胞内ROS含量,下调CYP450酶2E1和4A的表达。 结论：本文的研究结果提示,高浓度CGA可以通过上调SREBP-1c和PNPLA3的mRNA和蛋白的表达促进脂合成进而导致细胞内脂滴含量增加;CGA还可以促进HepG2对荧光葡萄糖的摄取,下调CYP450酶2E1和4A的表达进而降低胞内ROS含量,减轻氧化损伤。     

高山红景天多糖降血糖作用

高山红景天多糖50,100,200mg/kg,一次或多次腹腔注射、能降低正常小鼠血糖、肝糖原和血总脂。此外对四氧嘧啶、肾上腺素和葡萄糖所引起的小鼠高血糖均有抑制作用,能抑制葡萄糖引起的肝糖原增加和增强四氧嘧啶和肾上腺素引起的肝糖原分解,并使高血糖小鼠血总脂含量降低。     

大黄素、小檗碱对HepG2细胞胰岛素抵抗的预防作用研究

目的：研究大黄素、小檗碱对HepG2细胞产生胰岛素抵抗的预防作用及机制。方法：首先用MTT法筛选大黄素、小檗碱作用于HepG2细胞的实验浓度,然后用软脂酸诱导HepG2细胞,同时分别加入大黄素、小檗碱干预,并设正常组、对照组进行比较,通过葡萄糖氧化酶法、蒽酮法、RT-PCR法,观察大黄素、小檗碱对HepG2细胞上糖代谢及瘦素长型受体、短型受体mRNA表达水平的影响。结果：对照组成为具有胰岛素抵抗的HepG2细胞,且细胞上瘦素长型及短型受体mRNA的表达水平较正常纽显著下降（P〈0．01）;而大黄素、小檗碱组培养液中葡萄糖含量、细胞内糖原含量以及细胞上瘦素长型及短型受体mRNA的表达水平较正常组无明显改变（P〉0．05）。结论：大黄素、小檗碱均能预防HepG2细胞产生胰岛素抵抗,这一作用与它们影响HepG2细胞上糖代谢及瘦素受体mRNA表达水平有关。     

葛根芩连汤含药血清对HepG2肝细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的调节作用

目的:探讨葛根芩连汤含药血清对Hep G2肝细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的调节作用。方法:大鼠分别按含生药6 g·kg-1剂量ig葛根芩连汤,空白组ig给予等量蒸馏水,按3 mg·kg-1剂量ig吡格列酮,2次/d,连续7 d,末次给药1 h后,心脏穿刺取血制备葛根芩连汤、空白和吡格列酮含药血清。采用MTT法检测葛根芩连汤含药血清对细胞增殖的影响;Hep G2细胞以含10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基传代培养,将处对数生长期细胞消化后,用含2%FBS DMEM培养基调整细胞密度为106个/m L,以10 mg·L-1胰岛素处理24 h,复制Hep G2细胞胰岛素抵抗模型,葡萄糖氧化酶法检测葛根芩连汤含药血清对Hep G2细胞葡萄糖消耗的影响;蒽酮法检测细胞内糖原含量;乳酸脱氢酶偶联比色法测定肝细胞磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)的活性。结果:与正常组比较,模型组葡萄糖消耗量明显下降(P0.01),糖原含量显著降低(P0.05),而PEPCK活性升高(P0.05);8%葛根芩连汤含药血清作用Hep G2细胞胰岛素抵抗模型24 h能显著增加葡萄糖消耗量(P0.05),且葛根芩连汤含药血清(8%,16%)能够增加糖原含量,葛根芩连汤含药血清(4%,8%,16%)能够降低PEPCK活性(P0.05)。结论:葛根芩连汤含药血清可调节肝糖代谢,进而可改善肝细胞胰岛素抵抗。     

两色金鸡菊有效成分抑制体内外的代谢紊乱

目的:为了探讨两色金鸡菊乙酸乙酯提取物（EAEC）对高糖高脂引起诱导的大鼠胰岛素抵抗的影响。 方法：采用高糖高脂饲养SD雄性大鼠并灌胃给与EAEC 8周。给药结束后,采取血液测定血糖、胰岛素、血脂等指标,收集肝脏组织进行HE染色观察病理变化。细胞实验中,利用高糖处理HepG2细胞制备胰岛素抵抗模型,使用两色金鸡菊有效成分马里苷处理细胞,观察细胞糖摄取、代谢组学等。 结果：高糖高脂明显导致大鼠血糖、胰岛素、血清TC,TG,LDL-C水平显著升高,而给与EAEC则明显改善血糖代谢和血脂代谢。高糖处理的HepG2细胞显著降低肝糖原的合成,增加PEPCK,G6Pase和三羧酸循环有关的酶的蛋白水平,导致HepG2的细胞代谢紊乱,而马里苷则明显改善高糖诱导的细胞代谢紊乱。 结论：EAEC明显改善大鼠胰岛素抵抗,而马里苷能改善HepG2细胞代谢紊乱。     

鬼针草煎液对DM大鼠模型血糖水平及肝HK、血清FFA含量影响的实验研究

目的:探讨鬼针草煎液对DM模型大鼠的血糖及己糖激酶、肝糖元、游离脂肪酸水平的影响,研究鬼针草的降糖作用及机制。方法:采取长期高脂饮食后腹腔注射STZ复制糖尿病模型大鼠,设立对照组,通过单味鬼针草煎剂不同剂量灌胃观测空腹血糖、肝己糖激酶、肝糖元、游离脂肪酸水平变化。结果:鬼针草煎剂能够显著降低空腹血糖水平、血清FFA(游离脂肪酸)含量,升高肝脏HK(己糖激酶)活性、肝糖原含量。结论:鬼针草煎液能降低DM模型大鼠空腹血糖水平和游离脂肪酸水平。     

小檗碱通过影响糖原结构调节肝糖代谢研究

目的探讨小檗碱调节糖原代谢的机制及对糖原结构的影响。方法采用自发型糖尿病模型db/db小鼠作为疾病模型鼠,考察小檗碱对db/db小鼠血糖水平的影响;提取小鼠的肝糖原进行体积排阻色谱(SEC)和透射电镜(TEM)分析,考察小檗碱对db/db小鼠肝糖原的结构影响,并探讨其影响机制。结果小檗碱可以显著性降低db/db小鼠的空腹血糖,降低db/db小鼠血清胰岛素水平;改善db/db小鼠肝糖原的结构不稳定性;降低db/db小鼠肝组织中糖原磷酸化酶(GP)、糖原脱分支酶(GDBE)和环磷酸腺苷(cAMP)表达水平,降低血清胰高血糖素水平。结论小檗碱可以调控cAMP/GP信号通路,改善db/db小鼠的肝糖原结构,修复受损糖原结构,这可能是其调节肝糖代谢,改善糖尿病症状的机制之一。     

Antihyperglycemic activity of Selaginella tamariscina (Beauv.) Spring

Aim of the study

The present study was designed to investigate the effects of the EtOH and H₂O extracts of Selaginella tamariscina (Beauv.) Spring on hyperglycemia in diabetic rats and HepG2 cells, and to confirm the active fractions of EtOH extract in HepG2 cells.

Materials and methods

HepG2 cells and type II diabetic rats induced by low-dose streptozotocin (STZ) and high-fat diet (HFD) were used to evaluate the hypoglycemic effect of EtOH and H₂O extracts of Selaginella tamariscina. HepG2 cells were used to evaluate the promotive effect of different fractions of EtOH extract obtained from a polyamide column on glucose utilization.

Results

The results in HepG2 cells indicated that the EtOH extract had a better hypoglycemic effect than the H₂O extract. The results in diabetic rats indicated that both EtOH extract and H₂O extract were able to ameliorate the fasting blood glucose (FBG) level and improve oral glucose tolerance (OGTT). Total cholesterol (TC), triglyceride (TG), low density lipoprotein cholesterol (LDL-c), free fatty acids (FFA), tumor necrosis factor-α (TNF-α), alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), blood urea nitrogen (BUN) and malondialdehyde (MDA) levels in serum were lowered. High density lipoprotein (HDL-c), insulin and superoxide dismutase (SOD) levels in serum were elevated as well as the hepatic glycogen content in diabetic rats. Compared with H₂O extract, the effects of EtOH extract were more marked. The 80% ethanol fraction exhibited a stronger hypoglycemic effect than the aqueous and 50% ethanol fractions, but the 95% ethanol fraction did not show any appreciable effects in HepG2 cells.

Conclusions

The results suggested that the EtOH extract had a better hypoglycemic effect than the H₂O extract; the 80% ethanol fraction from polyamide column had a strong hypoglycemic activity in HepG2 cells.     

Thymoquinone attenuates hepatic lipid accumulation by inducing autophagy via AMPK/mTOR/ULK1-dependent pathway in nonalcoholic fatty liver disease

Thymoquinone (TQ) has been proved to exert wide-ranging pharmacological activities, with anti-inflammatory, antioxidant, anticonvulsant, antimicrobial, anti-tumor, and antidiabetic properties. In this study, we investigated the beneficial effects of TQ on a high-fat diet (HFD)-induced nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) in C57BL/6 N mice in vivo and free fatty acid (FFA)-induced human hepatocellular carcinoma HepG2 cells in vitro. Further, the underlying mechanisms of TQ to promote hepatic autophagy were also discovered. Data showed that TQ caused (p < 0.01) body weight reduction, improved glucose homeostasis, alleviated hepatosteatosis, and decreased hepatic lipid accumulation related to the induction of autophagy in HFD-fed mice. In vitro, TQ obviously increased (p < 0.01) autophagic flux in FFA-induced HepG2 cells and consequently reduced the lipid accumulation in combination with activation of AMPK/mTOR/ULK1 signaling pathways. Moreover, pharmacological inhibition of the AMPK pathway by addition with AMPK inhibitor Compound C (CC) or silence of ULK1 by transfection with siRNA(ULK1) into HepG2 cells reversed these beneficial effects of TQ on triggering hepatic autophagy and reducing lipid accumulation (p < 0.01). Taken together, these results suggested that TQ alleviated hepatic lipid accumulation by triggering autophagy through the AMPK/mTOR/ULK1-dependent signaling pathway. Our study supports a potential role for TQ in ameliorating NAFLD.     

熊果酸通过PPARα/γ改善HepG2细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的机制

目的:观察熊果酸对HepG2细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的影响并探讨其机制。方法:通过高浓度葡萄糖诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型,采用葡萄糖氧化酶法,氚标记-葡萄糖法和硫酸蒽酮比色法检测熊果酸对HepG2细胞胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗、摄取和糖原合成量的影响;采用Real time-PCR和Western blot法检测熊果酸对HepG2细胞胰岛素抵抗模型PPARα、PPARγ、PEPCK的mRNA转录水平以及蛋白表达的影响。结果:12.5μmol/L和25μmol/L熊果酸处理HepG2细胞胰岛素抵抗模型后,其葡萄糖消耗量、摄取量和糖原合成量明显高于模型对照组。与正常对照组相比,熊果酸可降低HepG2细胞胰岛素抵抗模型PEPCK的mRNA转录水平和蛋白表达量,提高PPARα的mRNA转录水平和蛋白表达量。结论:熊果酸可改善HepG2细胞胰岛素抵抗模型的糖代谢,其作用机制可能是通过激动PPARα/γ、抑制PEPCK的表达来实现。