血管紧张素1a型受体基因敲除小鼠肾脏局部肾素-血管紧张素系统的变化及其对糖尿病肾小球硬化的影响

目的 探讨血管紧张素1a型受体（AT1aR）基因敲除小鼠肾脏局部肾素-血管紧张素系统（RAS）的组分改变对糖尿病肾病（DN）肾小球硬化的影响及其可能机制。 方法 AT1aR基因敲除小鼠和野生型小鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ，300 mg/kg）诱导糖尿病模型12周后，取肾脏组织作冰冻组织切片，用激光捕获微切割技术分离肾小球，提取RNA。用实时定量PCR的方法检测肾小球内AT1aR、血管紧张素1b型受体（AT1bR）、血管紧张素2型受体（AT2R）、血管紧张素原、血管紧张素转化酶（ACE）、肾素、醛固酮合成酶（CYP11B2）的mRNA表达。PAS染色观察肾脏病理变化。免疫组化检测转化生长因子β1（TGF-β1）、1型纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)和肾素的表达。比较不同基因型小鼠肾小球细胞外基质和各细胞因子的表达变化。 结果 与野生型小鼠相比，AT1aR基因敲除小鼠肾小球内AT1bR、血管紧张素原、肾素、CYP11B2的表达明显上调（P < 0.05），AT2R表达下调，ACE无明显改变；AT1aR基因敲除小鼠肾小球细胞外基质明显增加（P < 0.05），TGF-β1、PAI-1、MCP-1和肾素的表达均明显增加（P < 0.05）。 结论 AT1aR基因敲除并不能使糖尿病小鼠肾脏病变改善。RAS组分的表达改变（AT1bR的上调和AT2 的下调，肾素的上调和CYP11B2的上调）参与糖尿病肾小球病变过程。     

低蛋白配伍α酮酸饮食对大鼠残肾组织硬化和肾素-血管紧张素系统的影响

目的 观察低蛋白配伍α酮酸饮食对肾大部切除大鼠残肾组织硬化和肾素血管紧张素系统（RAS）的影响。 方法 30只雄性SD大鼠建立肾大部切除的肾衰竭模型,1周后根据不同喂养分组如下：正常蛋白组（NPD组）予18%酪蛋白,低蛋白组（LPD组）予6%酪蛋白,低蛋白+α酮酸组（LK组）予5%酪蛋白＋1%α酮酸,每组10只大鼠。另取10只雄性SD大鼠行假手术后予正常蛋白（18%酪蛋白）饲料作对照。12周后麻醉处死大鼠,常规检测生化指标和24 h尿蛋白定量。糖原染色法观察残肾组织的病理改变。免疫组化和Western印迹法检测残肾组织中转化生长因子（TGF-β1）、肾素（renin）和血管紧张素Ⅱ的1型受体（AT1R）的蛋白表达。实时PCR法检测renin和AT1R的基因表达。放免法和酶联免疫吸附法（ELISA）分别测定皮质匀浆和血浆中血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的含量。 结果 术后12周大鼠的体质量,血清总蛋白和白蛋白水平在各组间的差异无统计学意义（均P > 0.05）。肾衰竭模型大鼠的血肌酐和尿蛋白水平均较对照组显著升高（均P < 0.05）,但3组间血肌酐水平的差异均无统计学意义（均P > 0.05）,而LK组的尿蛋白水平较NPD组和LPD组显著降低（均P <0.05）。肾衰竭模型大鼠的肾小球硬化评分、ECM/肾小球面积之比和TGF-β1表达均显著高于对照组,而LK组和LPD组均显著低于NPD组（均P < 0.05）。肾皮质肾素、AngⅡ和AT1R的表达在LK组中均较NPD组显著降低（均P < 0.05）。 结论 在肾大部切除肾衰竭大鼠中,低蛋白配伍α酮酸饮食能在保证营养状态稳定的情况下减轻残肾组织的硬化,减少尿蛋白量,此肾脏保护作用可能与减轻肾脏局部RAS的活性有关。     

Perindopril对糖尿病大鼠肾小球病变保护作用机理的初步探讨

目的 了解血管紧张素转换酶抑制剂perindopril对糖尿病大鼠肾小球病变的保护作用及其机制。方法 观察perindopril对肾小球基底膜、系膜和尿蛋白的影响及血浆和肾组织肾素活性、血管紧张素Ⅱ(ATⅡ),肾组织血管紧张素原mRNA表达的改变。结果 糖尿病大鼠血浆及肾组织ATⅡ含量升高。perindopril有降低糖尿病大鼠尿蛋白、减慢肾小球毛细血管基底膜增厚的作用,但对系膜影响不大;血浆及肾组织肾素活性升高,ATⅡ含量降低,肾组织血管紧张素原mRNA表达增强。结论 perindopril对糖尿病肾小球病变有保护作用。此作用可能与perindo-pril降低血浆及肾组织肾素血管紧张素系统活性有关。     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对大鼠肝硬化时VEGF基因表达的影响

目的　探讨血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在肝硬化时的作用及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂Losartan对VEGF基因表达的影响。方法　大鼠肝硬化模型由CCl4诱导 ,41只雄性SD大鼠被随机分为 4组 :对照组 10、模型组 11、及治疗组 2 0 (早期 10、中期 10 ) ,除对照组外所有大鼠均给予 5 0 %CCl4灌胃 ,3ml·kg- 1 ·d- 1 ·次 - 1 ,共 9周。治疗组 :早期组同时血管紧张素受体拮抗剂灌胃 ,中期组于造模中期 (5周 )开始给药 ,用量 10mg·kg- 1 ·d- 1 至处死前。免疫组织化学及RT PCR检测VEGF蛋白、mRNA的表达。结果　肝硬化组VEGF蛋白、mRNA的表达由 0 77±0 10到 1 94± 0 2 0明显高于正常对照组 (P =0 0 0 1) ,而与肝硬化组相比Losartan治疗组VEGF表达明显降低到 1 0 2± 0 10及 0 86± 0 15 (P =0 0 0 1)。结论　肝硬化时VEGF表达增加 ,而Losartan可使其表达降低。     

转化生长因子β1在实验性慢性环孢素A肾病中的作用

目的　观察转化生长因子 β1(TGFβ1)在环孢素A(CsA)所致大鼠肾小管间质纤维化中的作用 ,探讨阻断肾素血管紧张素系统对TGFβ1表达的影响。 方法　低盐饮食 (钠质量分数 0 .0 5 % )饲养 7d后随机分成⑴对照组 ;⑵CsA处理组 ;⑶CsA 盐酸维拉帕米处理组 ;⑷CsA 依那普利处理组 ;⑸CsA 氯沙坦处理组。大鼠皮下注射CsA(15mg·kg-1·d-1) 4周 ,制成慢性CsA肾病模型 ,分别用Northernblot检测TGFβ1mRNA、免疫组织化学方法检测TGFβ1、二聚糖蛋白表达。 结果　CsA增加大鼠肾脏TGFβ1mRNA及蛋白水平表达 ,增加二聚糖蛋白水平。依那普利、氯沙坦可显著减少TGFβ1、二聚糖蛋白表达 (P <0 .0 5 ) ,并能明显减轻肾小管间质纤维化。结论　TGFβ1可能介导了CsA引起的肾小管间质纤维化 ;阻断肾素血管紧张素系统 ,可明显减轻肾小管间质纤维化程度     

阿霉素肾病大鼠肾皮质环加氧酶2的表达及调节

目的 探讨阿霉素肾病大鼠肾皮质环加氧酶2(C0X2)的表达及特异性C0X2抑制剂rofecoxib对其的影响。方法 将大鼠随机分为正常对照组(n＝6)、阿霉素肾病(ADR)组(n＝8)、rofecoxib组(n＝7)、吲哚美辛组(n＝8)及氯沙坦组(n＝7)。8周后检测大鼠尿蛋白与尿TXB2的排泄量，检测肾皮质血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)浓度；应用免疫组织化学、RT—PCR及western印迹的方法检测C0X2及C0Xl mRNA及蛋白质的表达。结果 与正常对照组相比，ADR肾病大鼠尿蛋白及肾皮质COX2的表达与尿TXB2排泄明显增多，C0X1表达无明显变化，AngⅡ浓度明显增高；rofecoxib组肾皮质C0X2表达下调，尿TXB2排泄明显减少，C0X1表达无明显变化，AngⅡ浓度降低；吲哚美辛组C0X2及C0X1表达均下调，尿TXB2排泄明显减少；氯沙坦对C0X2及C0X1无明显影响。结论 ADR肾病大鼠肾皮质C0X2的表达与尿TXB2排泄明显增多，C0X1表达无明显变化。特异性C0X2抑制剂(rofecoxib)使C0X2的表达下调，部分抑制肾素—血管紧张素系统的兴奋。     

先兆子痫大鼠循环、胎盘及肾脏局部血管紧张素Ⅱ及其1型受体的表达

目的 研究先兆子痫大鼠模型循环系统、胎盘及肾脏局部血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）及其1型受体（AT1）的表达。 方法 采用一氧化氮合酶抑制剂亚硝基左旋精氨酸甲酯（L-NAME）制备大鼠先兆子痫模型，分别比较先兆子痫大鼠、正常妊娠大鼠、未孕对照组大鼠动脉收缩压（SBP）、尿蛋白量(24 h)、肝肾功能，并对各组大鼠肾组织进行光镜检查。ELISA法和放射性免疫法分别测定各组大鼠血浆及肾脏局部匀浆液AngⅡ水平。Western印迹法检测大鼠胎盘局部AT1表达。免疫组化法及Western印迹法测定大鼠肾脏局部AT1的表达。 结果 在先兆子痫大鼠中，SBP及尿蛋白量(24 h)均较未孕对照组显著升高（P < 0.05）。先兆子痫大鼠血浆AngⅡ显著高于正常妊娠组[（0.706±0.086） ng/L比(0.540±0.085) ng/L，P < 0.05]；胎盘局部AT1表达比正常妊娠组升高46％（P < 0.05）；肾脏局部AngⅡ明显低于正常妊娠组[(65.543±40.634) ng/g比(165.543±33.078) ng/g，P < 0.05]；肾脏AT1表达减少，仅为正常妊娠组及未孕对照组的33％及59％（P < 0.05）。 结论 先兆子痫中，胎盘局部RAS表达增强，循环AngⅡ表达增高，肾脏局部RAS表达下调。     

霉酚酸酯对肾大部切除大鼠肾脏的保护作用

目的 观察霉酚酸酯在肾大部切除大鼠模型中对残肾的保护作用并探讨其可能的机制。方法 采用5/6肾大部切除模型,分别给予霉酚酸酯(MMF,15 mg·kg-1·d-1),福辛普利(25mg·kg-1·d-1)及两药合用。8周后观察大鼠24 h尿蛋白、BUN、Scr以及肾脏病理改变。并用免疫组化观察了胶原Ⅳ、纤连蛋白(FN)、增殖细胞核抗原(PCNA)和巨噬细胞趋化蛋白1(MCP-1)。用RT-PCR的方法测定了肾皮质中转化生长因子β1(TGF-β1)和组织性金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)mRNA的表达。结果 两药均能减少尿蛋白,降低BUN和Scr,合用组减少最为明显。病理上,肾大部切除组可见基质增生,肾小球硬化,用药后病变减轻。其中应用MMF者可见PCNA和MCP-1明显减少。结论 在5/6肾大部切除模型中,MMF能通过抑制肾脏中的异常增殖、减少MCP-1的表达,下调TGF-β1和TIMP-1,减少细胞外基质,减少尿蛋白,从而明显减轻肾脏的损害。     

法舒地尔抑制醛固酮对单侧肾切除大鼠的肾损伤作用

目的 观察Rho/Rho激酶通路是否参与醛固酮加氯化钠诱导的肾脏损伤并探讨可能的机制。 方法 把单肾切除、进饮1%氯化钠的SD大鼠随机分为3组：对照组(2%乙醇皮下泵入)、醛固酮组(2%乙醇+醛固酮0.75 μg/h皮下泵入)和醛固酮+法舒地尔（fasudil）组(2%乙醇+醛固酮0.75 μg/h皮下泵入+fasudil 10 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1皮下注射)。5周后，检测3组大鼠血压、尿蛋白改变；PAS染色和Masson三染法观察肾脏组织学变化；放射免疫方法检测肾皮质血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平；Western印迹法检测血管紧张素转化酶（ACE）、磷酸化(p)RhoA及p-MYPT1水平；实时定量PCR检测转化生长因子β1（TGF-β1）及胶原I、Ⅲ mRNA 表达。 结果 与对照组比较，醛固酮诱发了严重的高血压[（193±3） mm Hg比(130±4） mm Hg， P < 0.05]、大量尿蛋白量（24 h） [（362±93） mg 比（22±3） mg，P < 0.05]及肾小球、肾小管间质损伤，同时伴随肾皮质AngⅡ水平[（154±16） pmol/g 比 （81±8） pmol/g，P < 0.05]及ACE表达增高，RhoA及Rho激酶活性增强，肾皮质TGF-β1、胶原I、胶原Ⅲ mRNA表达增加。而fasudil在抑制Rho激酶活性的同时，在没有影响血压的情况下，显著减少了尿蛋白量（24 h） [（96±22）mg]，减轻了肾小球及肾小管间质损伤，并且减少了肾皮质TGF-β1、胶原I、胶原Ⅲ mRNA表达。但肾内AngⅡ水平[（148±11）pmol/g]、ACE及RhoA表达无改变。 结论 Rho/Rho激酶通路参与了醛固酮加氯化钠诱导的肾损伤。fasudil对醛固酮加氯化钠肾脏损伤的保护作用并非通过抑制肾内ACE 过表达及AngⅡ增多而实现。     

环孢素A对大鼠慢性肾毒性模型肾素-血管紧张素系统的影响

目的　探讨环孢素A (CsA)慢性肾毒性的发生机理。方法　采用放射免疫分析的方法 ,观察进低盐饮食的大鼠在灌服CsA 30mg·kg- 1 ·d- 1 2 8d后血浆肾素活性 (PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ )、醛固酮水平的变化 ,以及复方丹参注射液、贝那普利对上述改变的防护作用。结果　CsA可引起大鼠血浆PRA、AngⅡ水平明显升高 ;丹参对这些改变影响不明显 ,而贝那普利对大鼠PRA、AngⅡ水平的升高有明显的抑制作用。血浆醛固酮水平 ,各组比较 ,只有给予贝那普利者明显下降 ,其余各组之间血浆醛固酮水平的差异无显著性 (P >0 .0 5)。结论　CsA的慢性肾毒性损伤可能与肾素 血管紧张素系统 (RAS)的激活 ,尤其是与AngⅡ的增加有关 ;CsA不引起血浆醛固酮水平的升高     

阿利吉仑对2型糖尿病db/db小鼠肾脏损伤的保护作用

目的 观察肾素抑制剂阿利吉仑对2型糖尿病db/db小鼠肾脏损伤的保护作用。 方法 8周龄db/db和db/m小鼠行单侧肾切除,16周进入实验,分为4组：db/m小鼠对照组（db/m组）、db/db糖尿病小鼠对照组（db/db组）、db/db糖尿病小鼠阿利吉仑3 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1治疗组（db/db+A3组）和db/db糖尿病小鼠阿利吉仑25 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1治疗组(db/db+A25组)。阿利吉仑溶于磷酸盐缓冲液（PBS,350 mg/L）皮下泵入（0.25 μl/h）给药,疗程４周。治疗前后检测体质量、血糖、糖化血红蛋白、尿蛋白量、血压水平;PAS染色观察肾脏组织学变化;ELISA法检测肾皮质转化生长因子β1（TGF-β1）和纤溶酶原激活抑制因子1（PAI-1）含量;间接免疫荧光检测肾小球Ⅳ型胶原（ColⅣ）和纤连蛋白（FN）表达;实时定量PCR检测TGF-β1、PAI-1、ColⅣ、FN和肾素mRNA表达;放射免疫法检测肾皮质肾素活性和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平。 结果 与db/m组小鼠比较,db/db组小鼠有大量蛋白尿,肾小球细胞外基质沉积增加,TGF-β1、PAI-1、ColⅣ和FN蛋白及mRNA表达增加,同时肾皮质肾素mRNA、肾素活性和AngⅡ水平增高（均P < 0.05）。阿利吉仑25 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1治疗在没有影响血压情况下,显著减少db/db小鼠24 h尿蛋白量,减少肾小球细胞外基质沉积,减少TGF-β1、PAI-1、ColⅣ、FN蛋白和mRNA表达,同时降低肾皮质肾素活性和AngⅡ水平（均P < 0.05）。 结论 阿利吉仑对2型糖尿病db/db小鼠肾脏损伤有保护作用。     

全反式维甲酸延缓糖尿病肾脏纤维化进展的实验研究

目的：探讨全反式维甲酸对延缓糖尿病大鼠肾脏纤维化的保护作用。方法：随机选择雄性SD大鼠分为空白对照组（NC）与造模组,制作糖尿病模型分为模型组（DM）与维甲酸治疗组（DM＋atRA）。于模型成型后分别于第8、12周观察各组大鼠24h尿蛋白（Ualb）,内生肌酐清除率（Ccr）,肾重／体重。肾脏病理及电镜观察肾小球基底膜厚度,免疫组织化学方法观察肾组织Ⅳ、Ⅲ型胶原表达。结果：维甲酸组肾重／体重、Ualb、Ccr较同时期模型组下降（P＜0．05）,且12周大鼠肾组织细胞外基质（ECM）重要成分ColⅣ表达（5．75±0．41）、ColⅢ表达（4．98±1．37）与模型组比较显著减少（P＜0．01）。病理观察维甲酸组与模型组比较肾小球系膜细胞和内皮细胞增生减轻,足突融合改善,系膜基质增生缓解,基底膜厚度变薄,减轻了肾脏病理损害。结论：全反式维甲酸能减轻糖尿病大鼠早期肾脏病理损伤,减少细胞外胶原基质积聚,延缓肾脏纤维化。     

高糖对大鼠肾小球内皮细胞肾素-血管紧张素系统的影响及机制

目的 探讨高糖对大鼠肾小球内皮细胞肾素-血管紧张素系统（RAS）的影响及机制。 方法 5 mmol/L、30 mmol/L葡萄糖（加或不加卡托普利、糜蛋白酶抑制剂）分别作用于细胞12、24、48、72 h后,用ELISA法检测上清与细胞内的血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平;实时荧光定量PCR法检测血管紧张素原、肾素mRNA的表达;Western印迹法检测细胞AngⅡ1型受体（AT1R）、AngⅡ2 型受体（AT2R）、血管紧张素原及肾素的表达;激光共聚焦间接免疫荧光法检测AT1R、AT2R、肾素在细胞内的分布及改变。 结果 与对照组相比,高糖刺激细胞12、72 h时,上清AngⅡ水平均升高（P < 0.05）;而在细胞内AngⅡ水平只在72 h时有升高 （P < 0.05）;在高糖刺激24、48 h时,细胞内外AngⅡ水平均未发生明显变化。加入卡托普利、糜蛋白酶抑制剂预处理,然后高糖刺激细胞72 h,上清和胞内AngⅡ水平较不加抑制剂时显著下降（P < 0.05）。高糖可使血管紧张素原mRNA表达上调、肾素 mRNA表达下调（均P < 0.05）。同时,高糖可使血管紧张素原蛋白表达上调、AT1R蛋白表达下调,而AT2R、肾素蛋白表达量无明显变化,但激光共聚焦间接免疫荧光观察到AT2R发生由细胞核到细胞质的转移。 结论 高糖可激活大鼠肾小球内皮细胞内的RAS,这种作用至少与血管紧张素转换酶（ACE）和非ACE途径有关。高糖可通过增加底物水平引起肾小球内皮细胞AngⅡ的改变,同时AngⅡ受体在高糖刺激下也发生相应的改变。     

AG490延长移植心存活时间的探讨

目的 研究AG490在大鼠心脏移植中免疫抑制及延长移植心存活时间的作用,探讨AG490的作用机制.方法 供者为SD大鼠,受者为Wistar大鼠,建立大鼠心脏移植模型.将受者分为4组.对照组(14只):术后1～7 d经尾静脉注射生理盐水0.2 ml·kg-1·d-1;AG490组(14只):术后1～7 d经尾静脉注射AG490 20 mg·kg-1·d-1;CsA组(10只):术后1～7 d经尾静脉注射CsA20 mg·kg-1·d-1;AG490+CsA组(10只):术后1～7 d经尾静脉注射AG490和CsA各20mg·kg-1·d-1.术后各组分别取10只受者,观察移植心存活时间,并在术后1、4和7 d时,检测受者外周血中白细胞介素(IL)-2和IL-6的水平.术后第7天,处死对照组和AG490组受者(各4只)后,分别取移植心组织进行病理学检测.结果 AG490组受者术后移植心存活时间为(26.6±3.81)d,CsA组为(28.4±4.25)d,AG490+CsA组为(31.8±4.39)d,均较对照组的(8.4±0.84)d显著延长(P＜0.05).与对照组相比,AG490组术后外周血IL-2水平显著降低(P＜0.05),IL-6水平虽有所降低,但差异无统计学意义(P＞0.05),而AG490+CsA组IL-2和IL-6水平下降更为显著,与对照组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05).AG490组移植心组织中淋巴细胞浸润程度较对照组明显减轻.结论 AG490具有免疫抑制作用,能延长移植物的存活时间,与CsA联合应用时效果更加明显.AG490的主要作用机制包括降低IL-2表达的水平,抑制移植心组织中淋巴细胞的浸润.     

Protective effect of emodin on renal interstitial fibrosis in mice of unilateral ureteral obstruction via PI3K/Akt/mTOR signaling pathway

Objective To investigate the effect and mechanism of emodin (EM) in renal interstitial fibrosis of unilateral ureteral obstruction (UUO) mice. Methods Male C57BL/6J mice were randomly divided into 4 groups, including sham operation group (n=8), UUO operation group (n=8), UUO operation+losartan (LST) group (n=8) and UUO operation+EM group (n=8). The mice in each group were ingested the suspensions by gavage for 14 days after surgery. Mice in UUO+LST and UUO+EM groups were given 10 mg?kg-1?d-1 LST and 20 mg?kg-1?d-1 EM, respectively. LST and EM were mixed with 0.5% sodium carboxymethyl cellulose. Mice in sham group and UUO group were given 0.5% sodium carboxymethyl cellulose. The mice were sacrificed at the 14th day. Interstitial fibrosis was observed by HE, Masson and PAS stain. Real-time PCR was used to detect LC3, Beclin-1 and mTOR mRNA. Protein expressions of TGF-β1, α-SMA, E-cadherin, LC3, Beclin-1, PI3K, p-Akt and mTOR were detected by Western blotting. The autophagy was observed with transmission electron microscopy in the renal tissue. Results Compared with sham mice, UUO mice at the 14th day displayed obvious renal fibrosis. Meanwhile, UUO mice had increased expressions of TGF-β1 and α-SMA (all P＜0.01), and decreased expressions of E-cadherin (P＜0.01). Their renal expressions of PI3K, p-Akt and mTOR were also raised (all P＜0.01). Compared with those in UUO group, in UUO+LST group and UUO+EM group, expressions of autophagy protein LC3 and Beclin-1 were increased (all P＜0.01), and the number of autophagic was increased. Additionally, expressions of TGF-β1 and α-SMA were reduced in UUO+LST group and UUO+EM group (all P＜0.01), while the expression of E-cadherin was increased by emodin treatment (P＜0.05). And expressions of PI3K, p-Akt and mTOR were decreased in UUO+LST group and UUO+EM group (all P＜0.05), meanwhile renal tissue fibrosis significantly reduced. Conclusions Emodin can promote autophagy, ameliorate renal interstitial fibrosis and protect renal function through PI3K/Akt/mTOR signaling pathway.     

肾脏局部醛固酮对糖尿病肾病大鼠肾小管间质转分化的作用

目的 探讨醛固酮对糖尿病肾病（DN）大鼠肾小管间质转分化的影响。 方法 采用Wistar大鼠腹腔注射链脲菌素（STZ,60 mg/kg）制备糖尿病模型,4周后尿蛋白>30 mg/d为DN模型成功（n=16）,随机分为DN组（n=8）和螺内酯组（SP组,n=8）,以另8只正常大鼠作为对照组（N组）。SP组给予螺内酯40 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1,N组、DN组每日以等量清水灌胃。8周后处死大鼠,收集尿、血浆、肾组织检测24 h尿蛋白定量、血肌酐和肾脏病理变化;用放射免疫法检测血浆、肾组织醛固酮浓度;用免疫组化、Western印迹方法检测E钙黏蛋白（E-cadherin）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）蛋白的表达;用RT-PCR的方法检测E-cadherin、α-SMA mRNA的表达。 结果 与对照组比较,DN组尿蛋白排泄量、血肌酐均显著增加（均 P < 0.01）,肾组织E-cadherin蛋白和mRNA表达显著下调（均P < 0.01）,α-SMA蛋白和mRNA表达均显著上调（均P < 0.01）。DN组大鼠肾组织醛固酮显著升高[（24.71±5.30） ng/g比（16.38±2.85） ng/g,P < 0.01],与尿蛋白排泄量、血肌酐、α-SMA蛋白表达呈正相关（r = 0.737、0.574、0.688,均P < 0.05）,与E-cadherin蛋白表达呈负相关（r = －0.659,P < 0.01）。各组间血清醛固酮含量差异无统计学意义。与DN组比较,SP组大鼠尿蛋白排泄和血肌酐显著下降（均P < 0.01）,E-cadherin蛋白和mRNA表达上调（均P < 0.05）,而α-SMA蛋白和mRNA表达显著下调(均P < 0.01)。 结论 DN大鼠肾组织局部醛固酮参与了糖尿病肾病肾间质转分化,螺内酯可以阻断醛固酮与其受体结合,抑制肾小管间质转分化,从而起到肾脏保护作用。     

白芍总苷对糖尿病大鼠肾小管-间质细胞转分化的影响

目的探讨白芍总苷（TGP）对糖尿病大鼠肾小管-间质细胞转分化的影响。方法建立链脲佐菌素（STZ）诱导的大鼠糖尿病模型,将大鼠随机分对照组、模型组、TGP给药组（50、100、200mg·kg-1·d-1灌胃）,8w后观察肾小管-间质损伤指数（TII）的变化,应用免疫组化方法检测肾组织E-钙黏蛋白（E-cadherin,E-cad）、α平滑肌肌动蛋白（a-smooth muscleactin,α-SMA）以及波形蛋白（Vim—entin,Vh）的表达。结果TGP给药呈剂量依赖性降低糖尿病大鼠24h尿白蛋白排泄率。模型组TⅡ明显高于对照组,TGP给药组（100mg·kg-1·d-1与200mg·kg-1·d-1）TII明显低于模型组。模型组肾小管-间质E-cad表达明显低于对照组（P〈0．05）,TGP50、100、200mg·kg-1·d-1给药组E-cad表达明显高于模型组（P〈0．01）。模型组肾小管-间质α—SMA与Vim蛋白表达明显高于对照组（P〈0．叭）,TGP50、100、200mg·kg-1·d-1给药组肾小管-间质α-SMA与Vim蛋白表达明显低于模型组（P〈0．01）。结论TGP可降低肾小管-间质α—SMA和vim的表达,增加E—cad的表达,抑制肾小管-间质细胞转分化。     

不同降压药对醛固酮输注大鼠足细胞损伤的影响

目的 研究醛固酮（ALD）对肾小球足细胞的损伤作用并探讨醛固酮拮抗剂依普利酮（EPL）、氨氯地平（CCB）和替米沙坦（ARB）对ALD所致损伤的影响及机制。 方法 30只SD大鼠被随机分为对照组（CTL组）、ALD输注组以及ALD输注并用EPL、CCB或ARB治疗组。以1.5 μg/h输注ALD造模，用EPL（100 mg·kg-1·d-1）、CCB（10 mg·kg-1·d-1） 和ARB（3 mg·kg-1·d-1）分别灌胃治疗。检测28 d内血压及尿白蛋白排泄率（UAER）。于28 d处死动物，检测血浆ALD、AngⅡ、血钾、钠、Scr；观察肾脏光镜和电镜病理改变；TUNEL法检测细胞凋亡；免疫组化和RT-PCR法检测nephrin表达。 结果 （1）与CTL组相比，ALD组大鼠7 d时血压开始升高，28 d达高峰（P < 0.01）；EPL组血压和UAER均显著低于同时间点ALD组（P < 0.01）；CCB组UAER显著高于同时间点EPL组，但与ALD组差异无统计学意义。（2）ARB组血浆AngⅡ水平显著高于ALD组、CCB组和EPL组（P < 0.01）。（3）ALD组肾小球出现系膜细胞增殖、系膜外基质增多、足突融合和微绒毛化等病理改变。EPL组肾小球损伤评分和凋亡率显著低于ALD组、CCB组和ARB组（分别P < 0.05，P < 0.01）。（4）ALD组nephrin mRNA和蛋白表达均高于CTL组，EPL组nephrin蛋白和mRNA表达低于ALD组（P < 0.01）。 结论 ALD输注可诱导肾小球足细胞损伤。CCB和ARB能显著降低血压，但不能减轻ALD所致损伤。EPL可通过非血流动力学作用部分阻断ALD的损伤效应。     

Rationale for combining blockers of the renin-angiotensin system

Blockade of the renin-angiotensin system (RAS) with angiotensin I-converting enzyme (ACE) inhibitors and AT1-receptor (AT1R) blockers has become one of the most successful therapeutic approaches in medicine. The question is no longer whether RAS inhibition helps, but rather how we can optimize inhibition to achieve optimal cardiovascular and renal protection. Indeed, numerous data have shown that the RAS is not blocked fully over 24 hours with current doses of RAS blockers because they trigger a counter-regulatory renin release that can offset pharmacologic inhibition of the RAS. This absence of full blockade may have clinical implications. Combination therapy with ACE inhibitors and AT1R antagonists thus has been proposed to inhibit the biological effects of the reactive renin release triggered by single-site RAS inhibition. By using this approach, numerous experimental and clinical studies have suggested that this combination therapy has additive or synergistic effects on blood pressure and on the prevention of cardiovascular and renal lesions. Although similar intensity of RAS blockade can be achieved by either combination therapy or by using high doses of an AT1-receptor antagonist given alone, the ACE inhibitor present in the combination interferes with the bradykinin-nitric oxide pathway and the N-acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro metabolism, which both may have additional biological effects.     

孕早期氯胺酮麻醉对子代大鼠海马c-fos mRNA和c-jun mRNA表达的影响

目的 探讨孕早期氯胺酮麻醉对子代大鼠海马c-fos mRNA和c-jun mRNA表达的影响.方法 孕5～13 d的SD大鼠30只,体重250～300 g,随机分为2组(n=15):对照组(C组)和氯胺酮组(K组).K组经尾静脉注射氯胺酮20 mg/kg,随后以130 mg·kg-1·h-1的速率静脉输注2 h;C组以等量生理盐水替代氯胺酮.子代大鼠于出生后20和30 d时测定认知功能,取海马组织,测定c-fosmRNA和c-jun mRNA表达水平并观察超微结构.结果 与C组比较,K组子代大鼠出生后30 d时认知功能测定第2天逃避潜伏期延长(P＜0.05),海马c-fos mRNA和c-jun mRNA的表达水平差异无统计学意义,出生后20 d上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).K组海马神经元发生损伤.结论 孕早期氯胺酮麻醉抑制子代大鼠认知功能的机制与海马神经元受损有关,但与海马c-fos mRNA和c-jun mRNA表达无关.