海洋硫酸多糖DPS对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

本文采用碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）和白介素－１（ＩＬ－１）氘诱导的大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖模型,以ＭＴＴ法观察了海洋硫酸多糖ＤＰＳ对ＶＳＭＣ增殖的影响。大鼠血管平滑肌细胞在ＤＰＳ浓度为０．００１μｇ／ｍｌ～１００μｇ／ｍｌ的２液中孵育２４ｈ后,分别加入ｂＦＧＦ（５０ｍｇ／ｍｌ）或ＩＬ－１（５０Ｕ／ＭＬ）再孵育２４ｈ,用ＭＴＴ法测定海洋硫酸多糖ＤＰＳ对ＶＳＭＣ增殖的影响。结果表明,     

白细胞介素－1β诱导牛脑微血管平滑肌细胞增殖及药物的拮抗作用

研究白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）对牛脑微血管平滑肌细胞（ＢＣＳＭＣ）增殖的影响。浓度为５～１００ｎｇ·Ｌ－１的ＩＬ－１β与ＢＣＳＭＣ共同孵育２４ｈ，即可明显诱导ＢＣＳＭＣ的增殖，ＩＬ－１β浓度为５０ｎｇ·Ｌ－１时，增殖率为１７％。欧芹素乙，异欧芹素乙，６－（α，α－二苯基乙酰哌嗪基苯基－４，５－二氢－５－甲基－３（２Ｈ）－哒嗪酮（简称ＤＭＤＰ），６－（α－本基乙酰哌嗪基苯基）－４，５－二氢－５－甲基－３（２Ｈ）－哒嗪酮（简称ＰＭＤＰ）分别在不同浓度可显著抑制ＩＬ－１β所诱导的ＢＣＳＭＣ增殖。     

白细胞介素－1β诱导牛脑微血管平滑肌细胞增殖及药物的拮抗作用

研究白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）对牛脑微血管平滑肌细胞（ＢＣＳＭＣ）增殖的影响。浓度为５～１００ｎｇ·Ｌ－１的ＩＬ－１β与ＢＣＳＭＣ共同孵育２４ｈ，即可明显诱导ＢＣＳＭＣ的增殖，ＩＬ－１β浓度为５０ｎｇ·Ｌ－１时，增殖率为１７％。欧芹素乙，异欧芹素乙，６－（α，α－二苯基乙酰哌嗪基苯基－４，５－二氢－５－甲基－３（２Ｈ）－哒嗪酮（简称ＤＭＤＰ），６－（α－本基乙酰哌嗪基苯基）－４，５－二氢－５－甲基－３（２Ｈ）－哒嗪酮（简称ＰＭＤＰ）分别在不同浓度可显著抑制ＩＬ－１β所诱导的ＢＣＳＭＣ增殖。     

Effects of heparin on growth factor-induced mitogenic and proliferative responses of rat pulmonary a

目的：探讨肝素是否能抑制生长因子诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）分裂和增殖．方法：应用含１０％ＦＢＳ的Ｍ１９９培养液培养大鼠ＰＡＳＭＣ．细胞分裂及细胞增殖分别用［ｍｅｔｈｙｌ３Ｈ］ＴｄＲ和细胞计数监测．结果：ＦＢＳ（１０％），以及ＦＢＳ（１％）与ＰＤＧＦ（５０μｇ·Ｌ－１），ＦＧＦ（５０μｇ·Ｌ－１），或ＩＬ１α（１００ｎｇ·Ｌ－１）联合应用均能增加大鼠ＰＡＳＭＣ分裂．肝素（１００ｍｇ·Ｌ－１）抑制１０％ＦＢＳ诱导的大鼠ＰＡＳＭＣ增殖（２８％±６％）和胸腺嘧啶摄取反应（２７％±７％），抑制ＦＢＳ（１％）与ＰＤＧＦ（５０μｇ·Ｌ－１），ＦＧＦ（５０μｇ·Ｌ－１），或ＩＬ１α（１００ｎｇ·Ｌ－１）联用诱导的大鼠ＰＡＳＭＣ增殖（２５％±６％，２７％±７％，２０％±４％），以及胸腺嘧啶摄取反应（２３％±７％，２６％±６％，２０％±６％）．结论：肝素抑制生长因子诱导的大鼠ＰＡＳＭＣ的分裂与增殖．     

高糖增强兔血管平滑肌细胞对内皮素-1的增殖反应性(英文)

观察高糖对内皮素－１（ＥＴ－１）促兔主动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的影响．方法： ＶＳＭＣ分别培养于含正常葡萄糖、高糖或高渗（５．５，２５，葡萄糖 ５．５＋甘露醇 １９．５ ｍｍｏｌ·Ｌ－１）的培养基中［３Ｈ］胸腺嘧啶掺入法检测ＤＮＡ合成速率，蛋白质印迹法检测磷酸化 ｐ４４／４２ ＭＡＰＫ的表达．结果：在 １０至 １０－８ｍｏｌ·Ｌ－１浓度范围内， ＥＴ－１以浓度依赖方式增加 ＶＳＭＣ的［３Ｈ］胸腺嘧啶掺入及磷酸化ｐ４４／４２ ＭＡＰＫ的表达，从 １０－１１到 １０－８ｍｏｌ·Ｌ－１，培养于高糖的 ＶＳＭＣ对相同浓度 ＥＴ－１的增殖反应性高于正常糖或高渗培养条件下的ＶＳＭＣ（Ｐ＜ ０．０５，或 Ｐ＜ ０．０１），而在后两种条件下，ＶＳＭＣ对ＥＴ－１的增殖反应无显著差别．同样，在高糖条件下，ＥＴ－１诱导的ＶＳＭＣ磷酸化ｐ４４／４２ＭＡＰＫ的表达较正常糖和高渗ＶＳＭＣ增加 ６０％－６５％结论：高糖增强ＶＳＭＣ对ＥＴ－１的增殖反应性，可能与磷酸化的 ｐ４４／４２ ＭＡＰＫ高表达有关     

抗人CD3单抗在体外诱导LAK和TIL增殖的实验研究

目的 观察抗人ＣＤ３单抗（ａＣＤ３ＭｃＡｂ）对单核细胞（ＰＢＭＣ）和肿瘤组织中提取的浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）增殖的影响。方法 将外周血中分离出的ＰＢＭＣ和ＴＩＬ进行扩增培养,同时测定其活性。结果 ａＣＤ３ＭｃＡｂ和白细胞介素－２（ＩＬ－２）的浓度是包被法制备ＣＤ３单克隆抗体激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ）的主要影响因素。经选择ａＣＤ３ＭｃＡｂ的最适蛋白浓度为０．１ｕｇ／ｍｌ,ＩＬ－２为２０Ｕ／ｍｌ。结论     

肝素对生长因子诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞分裂和增殖的影响

目的：探讨肝素是否能抑制生长因子诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）分裂和增殖。方法：应用含１０％ＦＢＳ的Ｍ－１９９培养液培养大鼠ＰＡＳＭＣ。细胞分裂及细胞增殖分别用［ｍｅｔｈｙｌ－＾３Ｈ］ＴｄＲ和细胞计数监测。结果：ＦＢＳ（１０％），以及ＦＢＳ（１％）与ＰＤＧＦ（５０μｇ·Ｌ＾－１），ＦＧＦ（５０μｇ·Ｌ＾－１），或ＩＬ－１α（１００ｎｇ·Ｌ＾－１）联合应用均能增加大鼠ＰＡＳＭＣ分裂。肝素（     

鲨鱼肝提取肽诱导PBMC表达mIL-2R及CD25分子

探讨能有效促进成纤维细胞等多种组织细胞增殖分化的鲨鱼肝提取肽对人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）表达ＩＬ－２、ｍＩＬ－２Ｒ及ＣＤ２５分子的影响。方法：将ＰＢＭＣ细胞悬液与鲨鱼肝提取肽共同孵育诱导后,分别采用放射免疫测定法、生物素－链霉亲和素（ＢＳＡ）免疫细胞化学法与流式细胞术检测ＩＬ－２的分泌及表达ｍＩＬ－２Ｒ与ＣＤ２５分子的淋巴细胞。结果：与鲨鱼肝提取肽共同孵育的ＰＢＭＣ,表达ｍＩＬ－２Ｒ的淋巴细胞数目比对照组增高１倍以上（Ｐ＜０．００５）,最适培养终浓度为５０ μｇ／ｍｌ;淋巴细胞表面ＣＤ２５分子表达也明显增加（Ｐ＜０．０５）;但不影响ＩＬ－２的分泌。结论：鲨鱼肝提取肽对改善机体的细胞免疫功能及免疫调节机制有一定的影响。     

Effects of hypoxia/reoxygenation and cytokines on adhesion of leukocytes to cerebral microvascular endothelial cells 1

目的：研究缺氧／再给氧（Ｈ／Ｒ）对中性粒细胞（Ｎｅｕ）和单核细胞（Ｍｏｎ）与诱导的培养牛脑微血管细胞粘附作用的影响．方法：牛脑微血管内皮细胞（ＣＭＥＣ）和平滑肌细胞（ＣＭＳＭＣ）经Ｈ／Ｒ处理或经ＴＮＦα和ＩＬ１α刺激,Ｍｏｎ和Ｎｅｕ与ＣＭＥＣ和ＣＭＳＭＣ粘附的细胞数目用流式细胞仪测定．结果：ＣＭＥＣ先缺氧２ｈ再经复氧与ＴＮＦα（２μｇ·Ｌ－１）作用２ｈ,Ｍｏｎ和Ｎｅｕ与ＣＭＥＣ的粘附率分别提高到３５０％±０９％和３６０％±０６％（ＴＮＦα处理组分别是２８９％±１１％和２８８％±１３％）．ＣＭＳＭＣ也按上述处理,Ｍｏｎ和Ｎｅｕ的粘附率分别显著提高为４９９％±０４％和４３９％±１４％（ＴＮＦα处理组分别为３４０％±１９％和３４０％±１３％）．ＣＭＥＣ和ＣＭＳＭＣ经ＩＬ１α刺激,可得到类似结果．结论：Ｈ／Ｒ提高Ｍｏｎ和Ｎｅｕ与ＴＮＦα和ＩＬ１α诱导的ＣＭＥＣ和ＣＭＳＭＣ的粘附作用．     

雷公藤治疗系统性红斑狼疮免疫机制的研究

目的：探讨雷公藤治疗系统性红斑狼疮的免疫作用机制。方法：用系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）的外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）体外培养观察雷公藤对于ＳＬＥ的Ｔ,Ｂ细胞功能的影响。结果;雷公藤不仅能抑制ＳＬＥ病人ＰＢＭＣ对ＰＨＡ诱导的增殖反应,也能抑制ＳＬＥ病人活化Ｂ细胞的自发增殖以及ＳＡＣ诱导的静止期Ｂ细胞的增殖反应。另外雷公藤还能明显的抑制ＳＬＥ病人ＰＢＭＣ的自发性ＩｇＧ分泌以及ｒ－ＩＬ２诱导的ＰＢＭＣ的Ｉｇ     

甘糖酯对培养的牛脑微血管平滑肌细胞增殖的影响

应用牛脑微血管平滑肌细胞(BCMSMCs)体外培养技术,观察了酸性多糖药物甘糖酯(PGMS)对10％小牛血清(FCS)、白细胞介素1(IL-1)致BCMSMCs过度增殖的影响。将培养的5～8代细胞接种于96孔板,正常组加入含10％FCS的MEM培养液(或含有50u/ml IL-1的0.4％FCS培养液),给药组分别加入含有PGMS0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6mg/ml浓度的10％FCS培养液(或50u/ml IL-1的0.4％FCS培养液),以结晶紫染色,MTT比色,测定72h后细胞生长情况。结果显示,与10％FCS组和IL-1组比较,PGMS组BCMSMCs的增殖受到明显抑制(P<0.01),提示PGMS对10％FCS和IL-1引起的BCMSMCs异常增殖具有明显的抑制作用。     

肿瘤坏死因子对溶血卵磷脂引起脑微血管平滑肌细胞增殖的影响及药物的保护作用

目的研究肿瘤坏死因子（ＴＮＦ α）对溶血卵磷脂（ＬＰＣ）引起脑微血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖的影响及维生素Ｅ（ＶｉｔＥ）,普罗布考（ＰＲＢ）的保护作用。方法用结晶紫染色测定密度（ＯＤ）值的方法观察ＴＮＦ α对ＬＰＣ引起牛脑微血管平滑肌细胞（ＢＣＭＳＭＣ）增殖作用的影响。结果ＴＮＦ α在２５×１０４～１×１０５Ｕ·Ｌ－１范围内能协同ＬＰＣ引起ＢＣＭＳＭＣ增殖,８ｈ时增殖率就明显增加,１６ｈ增殖率达峰值（６７２％）。ＶｉｔＥ２０,５０,１００μｍｏｌ·Ｌ－１,ＰＲＢ１０,２０,５０μｍｏｌ·Ｌ－１呈剂量依赖性地显著降低其增殖率,其最大抑制率分别为７４２％和４９７％。结论ＴＮＦ α对ＬＰＣ引起的ＢＣＭＳＭＣ增殖有协同作用,药物ＶｉｔＥ,ＰＲＢ可拮抗其增殖作用。     

银杏叶提取物对溶血磷脂酰胆碱引起的脑微血管细胞损伤的保护作用

目的：研究银杏叶提取物（ＧｂＥ）对溶血磷脂酰胆碱（ＬＰＣ）引起的小牛脑微血管内皮细胞（ＢＣＭＥＣ）损伤及小牛脑微血管平滑肌细胞（ＢＣＭＳＭＣ）增殖的保护作用。方法：以乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）释放量为指标测定ＢＣＭＥＣ损伤，用结晶紫染色法测定ＢＣＭＳＭＣ增殖。结果：ＬＰＣ５０ｎｍｏｌ／Ｌ可明显增加ＬＤＨ的释放，ＧｂＥ０，５，１０，２０，５０和１００ｍｇ／Ｌ，则ＬＤＨ释放率由４７．０％±０．７％分别下降为３９％±３％，３６．０％±１．３％，２７．０％±２．１％，１６％±６％和１３％±３％，表明ＧｂＥ呈剂量依赖性地抑制了ＬＤＨ的释放。ＧｂＥ对ＬＰＣ引起的ＢＣＭＳＭＣ的增殖抑制作用不明显。结论：ＧｂＥ对ＬＰＣ引起的ＢＣＭＥＣ损伤具明显的保护作用     

甘糖酯对体外培养的晶体上皮细胞增殖的影响

后发性白内障主要是由于术后残留的晶体上皮细胞移行到后囊并增殖所致。用培养的新生大鼠晶体上皮细胞实验,以结晶紫染色和~3H-TdR掺入作指标,表明甘糖酯(0.2～0.8mg/ml)对细胞增殖有明显抑制作用,且比同浓度肝素作用略强。提示甘糖酯对防治后发性白内障可能有效。     

Effect of the double-stranded polynucleotide complex polyadenylate-polyuridylate (poly A-U) on interleukin-6 production by mouse fibroblasts

Cultures of mouse embryonic fibroblasts (L 929) have been shown to produce a factor which promotes the growth of B cell hybridoma (hybridoma growth factor, HGF) i.e. interleukin 6 (IL-6). The aim of the present study was to investigate the effect of Poly A-U on IL-6 production by this cell type. After incubation for 48 h at 37 degrees C of confluent (1 week old) L 929 fibroblasts in the presence or in the absence of Poly A-U, IL-6-like activity in supernatants was measured by the proliferation assay of the IL-6-dependent B cell hybridoma cell line, 7TD1. Poly A-U increased IL-6 activity in supernatants in a dose-dependent manner at doses higher than 50 micrograms/ml, the maximum activity being observed at the highest concentration of Poly A-U used, i.e. 500 micrograms/ml. beta Interleukin-1 (beta IL-1) and poly-cytidylic-polyinosinic (Poly I-C) have been shown to be inducers of IL-6 in fibroblast culture and thus their effect was compared to that of Poly A-U. The IL-6 activity in supernatants induced by 500 micrograms/ml Poly I-C (58.4 +/- 16.4 U/ml; n = 4) was higher than that evoked by 100 U/ml beta IL-1 (5.7 +/- 0.4 U/ml) or 500 micrograms/ml Poly A-U (39.6 +/- 7.8 U/ml). The increased production of IL-6 by Poly A-U may explain part of its previously reported immunomodulatory effects.     

IL-23诱导人外周血单个核细胞对MUTZ-1细胞增殖、凋亡及相关基因表达的影响

目的 白介素-23(IL-23)诱导人外周血单个核细胞对骨髓增生异常综合征(MDS)细胞系MUTZ-1增殖、凋亡及相关基因表达的影响.方法 采用密度梯度离心法分离获得正常人外周血单个核细胞(PBMNC),细胞分4组:阴性对照组(未加IL-23),3个浓度IL-23组(2、10、50 ng/ml),体外诱导72 h,并与MUTZ-1共培养.MTT实验检测MUTZ-1细胞增殖.流式细胞仪检测MUTZ-1细胞凋亡和细胞周期变化.Real time-PCR和Western-blot检测MUTZ-1细胞Bax、Bcl-2、caspase-3、survivin mRNA和蛋白表达.结果 2、10、50 ng/ml IL-23诱导的PBMNC与MUTZ-1细胞共培养后,MUTZ-1细胞增殖速度、S期细胞比例明显降低,细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例明显增加,呈时间和浓度依赖性,与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);同时Bax、caspase-3 mRNA和蛋白表达明显上调,Bcl-2、survivin mRNA和蛋白表达明显下调,呈时间和浓度依赖性,与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 IL-23诱导PBMNC能够明显抑制MUTZ-1细胞增殖,促进MUTZ-1细胞凋亡,其机制与上调Bax、caspase-3表达、下调Bcl-2、survivin表达有关.     

Deoxynivalenol-induced immunomodulation of human lymphocyte proliferation and cytokine production.

Mycotoxins are a structurally diverse group of secondary metabolites produced by different genera of fungi, and include deoxynivalenol (DON), T-2 toxin, aflatoxin B1 (AFB1) and fumonisin B1 (FB1). Despite widespread human exposure and potent immunomodulation in animals, their effects on the human immune system remain to be defined. In this study, the effect of these toxins on human lymphocyte proliferation was evaluated using the MTT assay. Additionally, the effect of DON on cytokine profiles was measured. A 50% inhibition in cell proliferation was observed with a DON concentration of 216 ng/ml. T-2 toxin was more potent with 50% inhibition between 1 and 5 ng/ml. Negligible effects were observed with AFB1 and FB1, and a mixture of DON with either FB1 or AFB1 did not show any synergistic effects in this assay. Short-term treatment of PHA-stimulated lymphocytes with DON (100, 200 and 400 ng/ml) modulated the kinetics of IL-2, IL-4 and IL-6 production. IL-2 levels were up to 12-fold higher (P<0.05) in comparison to control levels at toxin concentrations of 200 and 400 ng/ml 72 h after treatment. IL-4 levels were only slightly elevated and IL-6 levels were slightly inhibited by these DON concentrations. The kinetics of cytokine production was followed for an extended period of 8-9 days at DON concentrations of 200 and 400 ng/ml. At the lower DON concentration (200 ng/ml), IL-2 levels were elevated 17-25-fold with a concomitant mild elevation in IFN-gamma. Consistent with earlier experiments, IL-6 levels were slightly suppressed by DON at this concentration. At 400 ng/ml, IL-2 levels were again significantly (P<0.05) elevated until 6 days post-treatment, while the effects on IL-4 and IL-6 were less marked. These data suggest DON has potent effects on human lymphocyte cytokine production which merit investigation in exposed human populations.     

甘糖酯对豚鼠乳头状肌动作电位和收缩的抑制作用

目的：观察甘糖酯（PGMS）对豚鼠乳头状肌动作电位和收缩力的影响。方法：利用细胞内微电极技术记录豚鼠乳头状肌的块反应动作电位，慢反应动作电位及收缩力。结果：PGMS浓度依赖性地使FAP的动作电位时程缩短和FC减弱，但对静息电位和动作电位幅度及O期最大除极速率均无显影响。PGMS浓度依赖性地使BaCl2诱发的SAP的Vmax和APA降低，APD缩短，PGMS浓度依赖性的使异丙肾上腺素诱发的SAP的APA降低，APD缩短，FC减弱，提高细胞外Ca^2 浓度后，以上各项参数基本恢复正常。结论：PGMS对乳头状肌动作电位和收缩力的影响可能是选择性抑制慢内向电流。     

溶血磷脂酰胆碱刺激脑微血管平滑肌细胞增殖的细胞内信号转导途径

通过测定［³H］胸腺嘧啶核苷(［³H］TdR)参入和结晶紫染色法测定平滑肌细胞增殖,研究了溶血磷脂酰胆碱(LPC)刺激牛脑微血管平滑肌细胞(BCMSMC)增殖的细胞内信号转导途径. 结果显示,LPC能浓度依赖性(1 nmol·L^-1-10 μmol·L^-1)诱导BCMSMC摄取［³H］TdR,在LPC的浓度为10 μmol·L^-1时作用达最大,cpm由366±142升至1761±296(P<0.01);LPC亦能浓度依赖性(1 nmol·L^-1-10 μmol·L^-1)诱导BCMSMC增殖,在LPC浓度为1 μmol·L^-1时促增殖作用达坪值,A_{595 nm}由0.060±0.009增至0.100±0.015(P<0.01). 丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)特异性抑制剂PD 98059(2-50 μmol·L^-1),血小板衍生生长因子受体抑制剂酪氨酸磷酸化抑制剂AG 1296(2-50 μmol·L^-1)以及蛋白质酪氨酸激酶抑制剂除莠霉素A(2-10 μmol· L^-1)能浓度依赖性地抑制LPC的上述作用. 表明LPC能促进BCMSMC增殖,其细胞内信号转导与MAPK途径有关.