原花青素对人胆管癌细胞QBC939抑制的体内外研究

目的研究原花青素(PC)体内外对人胆囊癌细胞的抑制作用。方法常规培养细胞,24 h后随机分为阳性对照组、空白对照组和PC组。MTT法检测PC对人胆囊癌细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;建立QBC939细胞裸鼠异种移植瘤模型。将荷瘤裸鼠随机分为5组:阴性对照组、5-Fu阳性对照组及PC 3个剂量组,每日腹腔注射给药,每隔3 d测肿瘤大小;12 d后,处死裸鼠,剥瘤称重并计算抑瘤率。结果 PC 3个剂量组显著抑制QBC939细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性;将细胞周期阻滞在S期,并诱导QBC939细胞凋亡;PC可抑制QBC939细胞裸鼠异种移植瘤的生长。结论 PC体内外均可抑制SHG-44细胞生长,并诱导肿瘤细胞凋亡。     

雷公藤红素抑制可移植性人脑胶质瘤生长相关分子

目的 研究雷公藤红素在裸鼠胶质瘤动物模型治疗人脑胶质瘤的可行性.探讨雷公藤红素抑制SHG-44胶质瘤裸鼠移植瘤生长的作用机制.方法 建立BALB/c裸小鼠SHG-44胶质瘤移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为5组,采用腹腔内注射给药方法.雷公藤红素按4mg/kg、2mg/kg、1mg/kg三种浓度分组给药;阳性对照顺铂组按2mg/kg给药.定期观察肿瘤生长情况测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率.全部SHG-44裸鼠移植瘤石蜡标本用SP法免疫组化染色,检测移植瘤组织中的微血管计数(MVD)、以及bFGF、周期蛋白D1和PCNA的蛋白表达.结果 与溶媒对照组相比,雷公藤红素4mg/kg组、2mg/kg组均能抑制肿瘤生长(P＜0.05),其体积抑瘤率分别为35%和26.9%.雷公藤红素高剂量组能下调移植瘤组织中bFGF的蛋白表达(P＜0.05);MVD也随之降低(P＜0.05),呈剂量依赖关系.PCNA、周期蛋白D1在雷公藤红素高、中剂量组及阳性对照组移植瘤中的蛋白表达明显低于溶媒对照组(P＜0.05),呈剂量依赖关系.结论 雷公藤红素能明显抑制SHG-44裸鼠移植瘤生长,并存在剂量依赖性.其机制可能是下调bFGF的蛋白表达,抑制肿瘤血管生成,下调周期蛋白D1、PCNA的蛋白表达,对肿瘤细胞周期进行调控.     

去甲斑蝥素对荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤的抑制作用

目的:探讨去甲斑蝥素(NCTD)对荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤抑制作用。方法:建立荷瘤裸鼠胆囊癌模型,应用NCTD对该动物模型进行移植瘤增殖、生长的抑制实验,观察并测量荷瘤鼠移植瘤大小、计算抑瘤率,应用流式细胞术和免疫组化等观测移植瘤细胞的细胞周期,凋亡率,PCNA,Ki-67,Cyclin D1,p27基因蛋白表达。结果:NCTD的半数致死量(LD50)为139．96 mg·kg-1,应用1／5LD50。即可使NCTD组裸鼠移植瘤生长减缦[(5．6±s 0．4)cm3与对照组(9．8±0．6)cm3比较,P<0．011,抑瘤率上升(43±8)％;S期细胞减少、细胞凋亡率上升;免疫组化检测显示,NCTD组PCNA,Ki-67,cyclin D1表达下降,p27表达上升,与氟脲嘧啶(FU) 联合应用时作用明显。结论:NCTD可明显抑制荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤的增殖和生长,与FU合用呈协同效应以加强其抗癌作用;其机制可能与NCTD干扰荷瘤鼠胆囊癌移植瘤细胞周期,抑制细胞增殖,诱导细胞调亡以及改变细胞增殖、细胞周期调控相关基因蛋白表达有关。     

去甲斑蝥素对裸鼠原位结肠癌的抑制作用

目的探讨去甲斑蝥素对裸鼠原位结肠癌的抑制作用,从而研究去甲斑蝥素对结肠癌病人的治疗价值。方法 20只荷人结肠腺癌细胞株HT-29移植瘤裸鼠,随机分成空白(无药)对照组10只和NCTD(实验)组10只。空白对照组0.9%生理盐水腹腔注射0.2mL(1次/2d,d1～d20);NCTD(实验)组NCTD2mg/kg腹腔注射(1次/2d,d1～d20)。给药后第21天处死所有裸鼠留取结肠肿瘤组织,比较原位肿瘤生长情况。结果 NCTD组的瘤体积和瘤重均比空白对照组显著减少,差异有统计学意义(P<0.01)。结论去甲斑蝥素能明显抑制肿瘤细胞的增殖和生长。     

华蟾素对乳腺癌MCF-7移植瘤裸鼠的抗肿瘤作用及机制研究

目的研究华蟾素对人乳腺癌移植瘤裸鼠的抑制作用及作用机制。方法建立MCF-7细胞裸鼠移植瘤模型,随机分为5组：模型组、顺铂阳性对照组及华蟾素3个剂量组,另设正常对照组,腹腔注射给药12 d后,取血检测血常规、肝肾功能及T淋巴细胞亚群;处死裸鼠,剥瘤称重并计算抑瘤率;取脏器,计算脏器指数,检测脾淋巴细胞增殖水平。结果华蟾素可抑制乳腺癌模型裸鼠肿瘤的生长;对荷瘤裸鼠血常规及肝肾功能无明显影响;抑制胸腺增大;促进T淋巴细胞增殖。结论华蟾素既可抑制荷瘤裸鼠肿瘤的生长,也可提高其免疫功能。     

去甲斑蝥素诱导人鼻咽癌细胞CNE1凋亡的实验研究

目的检测去甲斑蝥素对人鼻咽癌细胞CNE1增殖、凋亡的影响,为临床应用NCTD治疗鼻咽癌细胞提供实验基础。方法体外常规培养CNE1细胞用于实验,经NCTD作用后,采用MTT比色法检测细胞增殖情况,流式细胞仪观察鼻咽癌细胞凋亡、细胞周期。结果 NCTD对鼻咽癌细胞的生长有明显的抑制作用,呈剂量依赖性,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);NCTD可剂量和时间依赖性地诱导肿瘤细胞凋亡;NCTD可剂量依赖性地诱导肿瘤细胞周期发生改变,将鼻咽癌细胞阻滞在G2期。结论 NCTD对体外培养的CNE1细胞的生长有明显抑制作用和诱导凋亡的作用。     

SHG-44细胞体内外实验中KDR mRNA 的表达及意义

目的探讨插入型激酶受体(KDR)mRNA在裸小鼠可移植人脑胶质瘤不同生长阶段与不同组织区域中的表达规律,以及探讨其与肿瘤血管形成的作用关系,以期从肿瘤间质角度为胶质瘤选择治疗靶点提供实验依据.方法利用恶性人脑胶质瘤SHG-44细胞进行裸小鼠体内实验:在30只裸小鼠(10组)皮下建立SHG-44细胞移植瘤动物模型,每5天取一组标本,以KDR mRNA原位分子杂交技术处理移植瘤石蜡标本.同时在体外进行SHG-44细胞原位杂交,所得结果和移植瘤比较分析.结果 KDR mRNA高表达于移植瘤中内皮细胞和部分瘤细胞,且在移植的早期(5-15d)和晚期(35-50d)以及在缺氧瘤组织区域上存在相对高表达.体外SHG-44细胞不表达KDR mRNA.结论 KDR mRNA在移植性人脑胶质瘤细胞中有较高表达,在不同的生长阶段和不同的瘤组织区域上存在差异表达的规律性,对肿瘤血管形成具有重要作用.KDR可作为抗胶质瘤血管形成的治疗靶点.     

去甲斑蝥素对非小细胞肺癌模型小鼠免疫功能的影响

目的研究去甲斑蝥素体内对非小细胞肺癌3LL模型小鼠免疫功能的调节作用。方法常规培养3LL细胞,接种于ICR小鼠,将荷瘤小鼠随机分为5组,阴性对照组,5-fu阳性对照组以及NCTD 3个剂量组,另设空白对照组。腹腔注射给药2周后,取血检测血常规以及血清TNF-α和IFN-γ含量;处死小鼠,分别剥取瘤块、脾脏和胸腺,称重并计算抑瘤率和脏器指数;取脾脏,制备脾淋巴细胞并测淋巴细胞增殖情况。结果NCTD体内可抑制3LL模型小鼠肿瘤的生长;增加荷瘤小鼠白细胞总数;上调TNF-α和IFN-γ水平;降低脾脏指数和胸腺指数;促进T、B淋巴细胞增殖。结论 NCTD体内可调节非小细胞肺癌3LL模型小鼠的免疫功能。     

华蟾素对人胆管癌细胞QBC939抑制作用研究

目的观察华蟾素体内外对人胆囊癌QBC939细胞的抑制作用。方法常规培养细胞,24 h后随机分为空白对照组和华蟾素组6个剂量组,分别于3个时相采用MTT法检测华蟾素对人胆囊癌细胞增殖的抑制作用;建立QBC939细胞裸鼠异种移植瘤模型,随机分为阴性对照组、5-Fu阳性对照组及华蟾素3个剂量组,每日腹腔注射给药,观察荷瘤裸鼠的一般活动状况及进食量;12 d后处死裸鼠,剥瘤称重并计算抑瘤率;取血,ELISA法检测血清中细胞因子IL-6、TNF-α和sVCAM-1含量。结果华蟾素6个剂量组对QBC939细胞的增殖均具有抑制作用,与对照组比较差异有统计学意义,并且随着剂量的增加和时间的延长,抑制率也增加;华蟾素腹腔注射给药可改善荷瘤裸鼠的一般活动状况,增加进食量;抑制荷瘤裸鼠移植瘤的生长,与对照组比较差异有统计学意义;提高血清TNF-α水平,降低IL-6和sVCAM-1水平,差异均有统计学意义。结论华蟾素体内外均可抑制胆囊癌QBC939细胞的生长,其体内抑瘤作用机制可能与上调裸鼠血清TNF-α细胞因子水平,下调IL-6和sVCAM-1水平有关。     

人脑恶性胶质瘤细胞体外长期传代培养的研究

报告SHG-44(星形细胞瘤Ⅱ～Ⅲ级)细胞的建系经过。该系的细胞生长旺盛,每7～10天传代一次,每8天细胞数增加8～9倍。细胞的形态有星形和梭形两种。动物异种移植成功率在60%以上,移植瘤经光镜和电镜证实与原来的人脑恶性胶质瘤相似。生化学提示培养细胞和移植瘤的LDH同功酶呈M形。培养细胞中存在胶质细胞标记蛋白S-100蛋白。染色体以超三倍体为主。从移植能、形态学、生化学等提示SHG-44细胞较好地保持了人脑恶性胶质瘤细胞的特征,为我国进一步研究人脑恶性胶质瘤提供了一个工具。     

丹皮酚体内外抗人食管癌Eca-109细胞增殖及诱导凋亡的作用

目的研究丹皮酚(paeonol,Pae)在体内外对人食管癌细胞Eca-109的抑瘤作用及其对细胞凋亡的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)体外试验法和灌胃给药体内抗肿瘤试验。光镜及电镜观察各组的肿瘤组织的形态学变化。应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法测定细胞凋亡指数。结果丹皮酚在体外对Eca-109细胞有明显的细胞毒作用,半数抑制浓度(IC50)为0.342mmol·L-1;体内灌胃给予丹皮酚25、50、100和200mg·kg-1对裸鼠移植人食管癌Eca-109的抑制率分别为10.67%、23.54%、27.91%和34.46%;顺铂5mg·kg-1组抑瘤率为58.71%;丹皮酚在100mg·kg-1剂量下与顺铂5mg·kg-1联合用药抑制率为77.91%。光镜下用药组可见较多凋亡的肿瘤细胞。透射电镜下可见肿瘤细胞核染色质浓缩边聚、胞质浓缩、核碎裂以及凋亡小体形成等典型的凋亡表现。用药组凋亡指数较对照组明显增加。结论丹皮酚在体内外具有抑制人食管癌Eca-109细胞增殖及诱导其凋亡作用。     

血管生成抑制剂联合分化诱导剂治疗结肠癌的实验研究

目的通过建立人LOVO细胞结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,研究血管生成抑制剂（TNP-470）联合分化诱导剂（RA）抗结肠癌生长的效应,二者是否具有协同效果。方法建立人LOVO细胞结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,模型建立后分组治疗,按治疗方式分为对照组、TNP-470组、RA组和联合组（TNP-470＋RA）至治疗结束时处死裸鼠,测量皮下移植瘤重量,计算抑瘤率;检测肿瘤组织结肠癌细胞凋亡指数（AI）。结果裸鼠皮下移植瘤瘤重、抑瘤率,联合组和对照组及TNP-470组、RA组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）,且TNP-470组、RA组和对照组之间差异亦有统计学意义（P〈0.05）。治疗组与对照组癌细胞AI比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;且联合组与RA组和TNP-470组癌细胞的AI比较,差异也有统计学意义（P〈0.05）。结论血管生成抑制剂TNP-470与分化诱导剂RA联合治疗结肠癌裸鼠皮下移植瘤比TNP-470或RA单药治疗具有更强的抑瘤作用,TNP-470通过抑制肿瘤血管生成,切断肿瘤细胞的血供和营养供给,抑制结肠癌裸鼠皮下移植瘤的生长;而RA通过诱导肿瘤细胞凋亡,降低VEGF的表达抑制肿瘤的生长,二者联和应用,抗肿瘤效应明显增强。     

白花蛇舌草在裸鼠胶质瘤间质化疗的实验研究

目的　探讨白花蛇舌草在可移植性人脑胶质瘤间质化疗的剂量及疗效 ,并探讨其作用机制。方法　将低分化人脑胶质瘤体外细胞系SHG 4 4移植于裸小鼠 ,制作成可移植性实体瘤模型 ,用不同剂量的白花蛇舌草及以博莱霉素为对照组 ,肿瘤间质内注射药物 ,观察实体瘤的瘤重及组织细胞形态的变化。结果　将白花蛇舌草每 1ml含总黄酮以芦丁计算不少于 0 2 5mg时 ,每日 1次 ,间质注射 0 5ml持续 12日后 ,肿瘤生长有明显抑制作用 (P <0 0 5 )。结论　白花蛇舌草有明显抑制肿瘤生长的作用。     

白术内酯Ⅰ对人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤生长及凋亡的影响

目的：研究白术内酯Ⅰ（atractylenolide Ⅰ）对人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤生长及凋亡相关蛋白Bax、cleaved caspase-3、p53、Bcl-2表达的影响。方法：建立SGC-7901裸鼠移植瘤模型,观察白术内酯Ⅰ对肿瘤生长的影响;TUNEL法检测移植瘤组织中的细胞凋亡;Western blotting检测瘤组织中Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3及p53蛋白表达。结果：白术内酯Ⅰ不同程度抑制裸鼠SGC-7901移植瘤的生长,与对照组比较,给药后肿瘤体积（TV,tumor volume）、相对肿瘤体积（RTV,relative tumor volume）和相对肿瘤增殖率[T/C（%）,T_RTV/C_RTV]明显下降;移植瘤组织中凋亡细胞明显增多;白术内酯Ⅰ上调移植瘤组织中Bax、cleaved caspase-3及p53的蛋白表达,下调Bcl-2 的蛋白表达。结论：白术内酯Ⅰ能明显抑制人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤的生长,分子机制主要包括增加Bax、cleaved caspase-3、p53蛋白表达,减少Bcl-2蛋白表达,最终导致肿瘤细胞凋亡。     

黄芩素对星形细胞瘤SHG-44细胞增殖、侵袭迁移的影响

目的:观察黄芩素干预人星形细胞瘤SHG-44细胞株后,肿瘤细胞形态、增殖、凋亡、细胞周期以及运动侵袭能力的变化.方法:以体外培养的人星形细胞瘤SHG-44细胞为研究对象,用黄芩素干预后,显微镜观察细胞形态变化,MTT法观察细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,侵袭小室实验观察细胞侵袭力改变.结果:黄芩素对SHG-44细胞增殖的抑制作用随时间的延长和药物浓度的增加,抑制作用逐渐增强,有明显的时间和剂量依赖性;随黄芩素浓度增加,凋亡率增高,差异有统计学意义(P＜0.05);黄芩素将肿瘤细胞阻滞于G0/G1期,与对照组比较S期细胞减少近18％,差异有统计学意义(P＜0.05);侵袭小室实验表明随着黄芩素干预浓度增加,SHG-44细胞48 h后穿过人工基底膜的细胞数量明显更少,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:黄芩素能显著抑制SHG-44细胞的增殖、侵袭及迁移,提示黄芩素对星形细胞瘤治疗具有潜在应用价值.     

PI-88 对 TE-13 细胞及裸鼠移植瘤中乙酰肝素酶表达的影响

目的 探讨硫酸化寡聚多糖 （PI-88） 对食管鳞癌细胞株 TE-13 乙酰肝素酶 （Hpa） 表达的影响, 以及对裸鼠人食管癌移植瘤生长、 血管生成及 Hpa 蛋白表达的影响。方法 体外培养 TE-13 细胞, 实验分为 A 组（对照组）、 B组 （15 mg/L PI-88 干预组） 和 C 组 （30 mg/L PI-88 干预组）。培养 36 h 后 Western blot 检测各组细胞 Hpa 蛋白表达。选取 10 只 BALB/c/nu 裸鼠, 皮下接种 TE-13 细胞建立食管癌裸鼠移植瘤模型, 建模成功后随机均分为观察组及对照组。观察组腹腔注射 PI-88 40 mg/ （kg·d）, 对照组给予等剂量生理盐水, 连续注射 14 d。每 2 d 测量移植瘤体积,注射第 14 天处死动物, 剥除移植瘤行 CD34 染色, 检测微血管密度（MVD）。Western blot 及免疫组化染色检测 Hpa蛋白表达。结果 与 A 组相比, B、 C 组细胞 Hpa 蛋白表达量明显降低 （P < 0.001）, 且存在药物浓度依赖性。观察组裸鼠移植瘤体积、 MVD 值、 Hpa 蛋白表达水平及阳性细胞数均低于对照组（均 P < 0.05）。结论 PI-88 可抑制 TE-13 细胞及食管癌裸鼠皮下移植瘤中 Hpa 表达, 并抑制肿瘤生长和血管生成。