胃癌患者血清中微小RNA分子的特异性表达及其临床意义

目的 探讨胃癌患者血清中微小RNA(miRNA,miR)的表达差异及其与胃癌发生发展的可能关系.方法 用miRNA芯片分析24例胃癌患者及24例健康人血清样本中miRNA表达谱,并采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)对差异表达的miRNA在99例胃癌患者及89例健康人血清中进行大样本验证.最后用TargetScan等生物信息学软件分析所筛选miRNA的靶基因.结果 miRNA表达谱芯片分析发现胃癌患者血清中有29条miRNA的表达水平呈现明显变化.qRT-PCR结果表明在胃癌患者血清中miR-27a、miR-370、miR-491-5p和miR-516-3p的表达水平明显下调.生物信息学分析及文献检索发现miR-27a、miR-370、miR-491-5p和miR-516-3p具有肿瘤抑制因子功能,其表达下调与消化道肿瘤的发生发展密切相关.结论 胃癌患者血清中具有特异性miRNA表达谱,miR-27a、miR-370、miR-491-5p和miR-516-3p的表达下调可能在胃癌发生发展中起着重要作用.     

原发性肝细胞癌血清中miR-888-5p的表达及临床意义

背景miR-888-5p高表达于原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织及HCC细胞系,可促进肿瘤细胞侵袭及转移,与疾病分期及预后不良相关.然而HCC患者血清中miR-888-5p的表达水平尚未被检测,血清miR-888-5p对于HCC诊断及预后判断相关价值尚未被评估.目的检测HCC患者血清中miR-888-5p表达水平,探究其对HCC的诊断价值及与临床特征之间的关系.方法收集68例HCC患者、46例慢性乙型病毒性肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者、43例肝硬化(liver cirrhosis,LC)患者及40例同期健康体检者,实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测血清中miR-888-5p表达量,受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估其诊断HCC的价值,并分析与HCC临床特征之间的关系.结果HCC患者血清中miR-888-5p表达量较CHB、LC及健康者显著上调(P<0.05).ROC曲线提示,联合检测ROC曲线下面积(area under curve,AUC)为0.907,敏感性91.18%,特异性72.50%)对HCC诊断价值优于分别检测血清miR-888-5p(AUC=0.737,敏感性79.41%,特异性62.50%)及甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)(AUC=0.819,敏感性73.53%,特异性97.50%),且对AFP阴性HCC也具有较高的诊断价值:AUC=0.793,敏感性90.90%,特异性62.50%.此外,miR-888-5p表达水平与HCC肺转移相关(P=0.01).结论血清miR-888-5p对HCC及AFP阴性HCC具有较高诊断价值,与AFP联合检测诊断价值更高.miR-888-5p表达水平与HCC肺转移相关,有望成为HCC早期诊断及评估预后的新型血清学分子标志物.     

慢性心力衰竭患者血清miR-423-5p表达水平及意义

目的 探讨慢性心力衰竭患者血清微小RNA-423-5p（miR-423-5p）的表达水平及其意义。方法 收集2015年7月至2017年3月我院收治的89例慢性心力衰竭患者为病例组,并于同期随机选取35例健康体检者为对照组,采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）法对两组血清miR-423-5p水平进行检测。结果 病例组血清miR-423-5P水平为（0.97±0.32）,高于对照组的（0.41±0.28）,差异有统计学意义（t=9.072,P<0.001）。慢性心力衰竭miR-423-5p高表达患者血清NT-proBNP、LVEDD水平高于miR-423-5p低表达患者,LVEF低于miR-423-5p低表达患者,心功能分级高于miR-423-5p低表达患者,差异均有统计学意义（P<0.05）。miR-423-5p诊断慢性心力衰竭的灵敏度为89.92%,特异性为93.34%,ROC曲线下面积AUC为0.919（95%CI：0.862~0.975）。结论 miR-423-5p在慢性心力衰竭患者血清中异常表达,并且与心功能密切相关,早期检测可作为评估心力衰竭严重程度、诊断慢性心力衰竭的重要生物学标志物。     

循环microRNA对原发性肝癌诊断价值的初步研究

目的筛选原发性肝癌(primary liver cancer,PLC)相关的miRNA,并探索其对PLC的诊断价值。方法生物信息学方法发掘PLC异常表达的miRNA,结合miRNA靶基因预测及PLC相关高频突变基因,确定目的 miRNA;收集确诊PLC、肝硬化及非肝病对照患者血浆样本及临床资料,定量PCR检测上述目的 miRNA表达水平;以肝硬化为对照,选取有价值的miRNA进行PLC诊断试验,绘制ROC曲线,计算曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度及约登指数(YI)等评价指标。结果筛选得到4种miRNA,分别为miR-10b-5p、miR-21-5p、miR-1258、miR-1269a。纳入确诊PLC 39例、肝硬化38例和无肝病对照者8例,检测上述miRNA血浆表达水平,结果显示,与肝硬化患者比较,PLC患者miR-10b-5p、miR-21-5p表达水平升高,差异有统计学意义(P=0. 028、0. 004);而miR-1258表达水平基本相同(P=0. 985),miR-1269a表达升高,但差异无统计学意义(P=0. 223)。miR-10b-5p、miR-21-5p和AFP诊断PLC的AUC为0. 651、0. 730、0. 731(P 0. 05),YI为0. 273、0. 458、0. 379;以上3个指标两两或三者进行平行诊断试验和系列诊断试验,可显著提高灵敏度或特异度; miR-10b-5p、miR-21-5p、miR-1258和AFP联合诊断PLC的AUC为0. 885(P 0. 001),YI为0. 639。结论生物信息学方法筛选目的 miRNA是简便、可靠的方法,但临床验证过程必不可少。单个miRNA诊断PLC准确性一般,多个miRNA联合或联合AFP可显著提高PLC诊断准确性,有望成为miRNA诊断PLC的主要方法。     

慢性充血性心力衰竭患者血浆miR-423-5p和miR-210-3p的表达变化

目的:探讨血浆miR-423-5p和miR-210-3p在慢性充血性心力衰竭(CHF)患者中的表达及意义。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测30例CHF患者(CHF组)治疗前后及30例健康体检者(对照组)血浆中miR-423-5p和miR-210-3p的表达水平,并分析其与临床特征之间的关系;运用ROC曲线评价其在CHF诊断中的潜在价值。结果:CHF组血浆miR-423-5p表达量较对照组升高,差异具有统计学意义(P0.05)。CHF组治疗前血浆miR-423-5p与N末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)、左室舒张末期内径(LVEDD)存在正相关性(r=0.432、0.386,均P0.05)。CHF组治疗后血浆miR-423-5p和miR-210-3p表达水平均较治疗前降低,均差异有统计学意义(均P0.05);且治疗后miR-423-5p与NT-proBNP存在正相关性(r=0.372,P=0.043)。miR-423-5p ROC曲线下面积为0.916(95%CI:0.845~0.988),灵敏度和特异度分别为83.3%和90.0%;miR-210-3p ROC曲线下面积为0.778(95%CI:0.654~0.901),灵敏度和特异度分别为76.7%和73.3%。结论:CHF患者血浆miR-423-5p和miR-210-3p表达升高,随着心功能好转,其表达水平降低,有望成为CHF诊断及预后的生物学标志物。     

血浆miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p和miR-30a-3p水平与早发冠心病的相关性及其初筛价值

目的]探讨血浆miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p和miR-30a-3p水平与早发冠心病(PCAD)的相关性及其对PCAD的初筛价值。[方法]根据纳入标准及排除标准,纳入6例明确诊断的PCAD患者作为PCAD组,纳入6例健康受试者作为对照组,收集PCAD组和对照组血液,提取血清样本并保存,使用DNBseq平台检测两组血清中miRNA水平,筛选差异水平显著的miRNA。根据纳入标准及排除标准,收集78例PCAD患者、75例晚发冠心病患者和69例健康对照者的血液并对筛选的miRNA进行实时荧光定量PCR验证。分析PCAD患者冠状动脉造影报告,采用Gensini评分评估冠状动脉病变的严重程度。Spearman相关性检验分析有关miRNA水平与冠状动脉狭窄程度的相关性。ROC曲线分析血浆miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p及miR-30a-3p水平对PCAD的诊断价值,多因素Logistic回归分析PCAD发生的影响因素。[结果]DNBseq平台分析显示,差异表达miRNA 33个,其中上调miRNA 17个,下调miRNA 16个,差异水平最为显著的5个miRNA分别为miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p、miR-424-3p和miR-30a-3p;实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,PCAD患者血浆miR-1228-5p升高1.7倍,miR-34a-5p升高1.4倍,miR-192-5p升高0.7倍,miR-30a-3p升高2.5倍(P＜0.05),两组间血浆miR-424-3p水平差异无统计学意义(P＞0.05);血浆miR-1228-5p和miR-34a-5p水平与PCAD患者冠状动脉狭窄程度均呈正相关(r＝0.307,P＝0.004;r＝0.238,P＝0.036);ROC曲线分析显示,miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p和miR-30a-3p诊断PCAD的ROC曲线下面积分别为0.903、0.832、0.731及0.798,其联合诊断PCAD的ROC曲线下面积为0.990,95%CI为0.976～1.000。[结论]PCAD患者血浆miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p和miR-30a-3p水平显著升高,其联合检测诊断PCAD具有较高的准确性,有望成为初筛PCAD的新型生物标志物。     

血浆外泌体miR-452作为胃癌诊断的生物标志物

目的筛选胃癌血浆外泌体中差异表达的miRNA,分析其对胃癌诊断的敏感性与特异性及与胃癌患者的疾病特点之间的相关性。方法收集南京医科大学第一附属医院消化内科病理确诊为胃癌的住院患者与消化内科及体检中心的无癌健康对照人群的血液样本,离心后试剂盒抽提血浆外泌体及其RNA,通过透射电子显微镜观察、蛋白质印迹分析(Western blotting)鉴定标志蛋白及纳米粒径分析(nanoparticle tracking analysis, NTA)对血浆外泌体进行鉴定,定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)鉴定与胃癌发病相关的miRNA。结果共纳入胃癌患者80例和健康对照80名。成功对2例血浆外泌体(GC1和NC1)进行鉴定以证实其相关特性。在初始筛选阶段,对12例胃癌和12名健康对照者的血浆外泌体RNA进行qRT-PCR验证并依据其各自的2~(-△Ct)值,分析受试者的诊断ROC曲线下面积(AUC)。与健康对照者相比,胃癌的血浆外泌体miR-452-5p表达量显著升高(P=0.002),miR-452-5p的AUC值为0.798(95%CI:0.552～0.883)。而后纳入新的68对样本对筛选结果进一步验证,miR-452-5p的表达趋势与初始筛选一致,且诊断AUC值为0.733(95%CI:0.647～0.818)。分析已验证的miR-452-5p表达水平与胃癌病理特征无相关性(P0.05)。结论血浆外泌miR-452-5p可能为检测胃癌的新型潜在生物标志物,然而其对疾病的病理特性的影响仍需更大样本量的实验进一步研究。     

急性心肌梗死患者循环血清mircoRNAs表达的研究

目的:探讨循环血清microRNAs与急性心肌梗死(AMI)的相关性,分析其在早期诊断AMI中的价值。方法:选取2013-10-2014-08于我院心内科住院诊治的AMI患者,其中ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者77例(STEMI组),非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)患者21例(NSTEMI组),以及同期体检的23名健康人群做对照(对照组),通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清中miR-133a、miR-133b、miR-499-5p的含量,同时采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血cTnI的含量并分析其与AMI的相关性。结果:STEMI组和NSTEMI组患者血清miR-133a、miR-133b、miR-499-5p水平较对照组明显升高(均P0.05)。1~4h组血清miR-133a、miR-133b、miR-499-5p表达量较5~12h组和13~24h组明显升高(均P0.05)。此外,受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析显示,miR-133a、miR-133b、miR-499-5p在诊断AMI方面具有明确的特异性和敏感性,但并不优于cTnI。结论:血清miR-133a、miR-133b、miR-499-5p可作为新型的早期诊断AMI的标记物,但并不优于cTnI。     

稳定型心绞痛患者血清microRNA的表达差异

目的:在稳定型心绞痛患者血清中筛选出表达差异的microRNA(miRNA),寻找稳定型心绞痛的血清诊断学生物标记物。方法:采集150例稳定型心绞痛患者及50例对照的血清样本,提取血清中的miRNA,用microarray基因芯片方法在病例组20例及对照组10例混合样本中筛选出差异的血清miRNA,分析结果并采用实时荧光定量PCR对差异性显著的miRNA进行验证。结果:Microarray检测结果显示,部分miRNA在稳定型心绞痛患者血清中表达异常,稳定型心绞痛患者miR-215、miR-502、miR-208和miR-487a表达量上升,miR-29b表达量下降,与对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。5种miRNA的ROC曲线下面积分别为0.992、0.807、0.836、0.991和0.893。其中部分miRNA表达量与冠状动脉粥样硬化程度相关。结论:稳定型心绞痛患者血清中存在miRNA表达差异,miR-215、miR-502、miR-208、miR-487a和miR-29b是潜在的稳定型心绞痛患者血清诊断学标记物。其中部分miRNA可能参与冠状动脉粥样硬化的形成。     

miR-483与结直肠癌关系的研究

背景:胰岛素样生长因子2(IGF2)基因在多种恶性肿瘤中呈高表达,在肿瘤发生中起重要作用。miR-483位于IGF2基因第7号内含子中,与宿主基因共表达,但其具体功能尚未明确。目的:检测miR-483-3p、miR-483-5p在结直肠癌中的表达情况,探讨其作为结直肠癌分子标记物的可能性。方法:收集75对结直肠癌组织和相应癌旁非癌组织样本,以real-time PCR检测miR-483-3p、miR-483-5p表达并分析两者间以及两者与肿瘤临床病理特征的关系,以ROC曲线分析两者对结直肠癌的诊断性能。结果:结直肠癌组织中的miR-483-3p、miR-483-5p相对表达量均显著高于相应癌旁非癌组织(P0.000 1),且两者在癌组织中的表达量呈显著正相关(rs=0.554 5,P0.000 1)。miR-483-3p和miR-483-5p诊断结直肠癌的最佳截点分别为9.22和11.61,相应诊断敏感性、特异性分别为78.67%、62.67%和50.67%、85.33%;如两者联合检测(并联试验),诊断敏感性可提高至89.48%。两者表达与结直肠癌患者的性别、年龄以及肿瘤大小、部位、分化程度和TNM分期均无相关性。结论:miR-483-3p、miR-483-5p在结直肠癌中呈高表达,可能与肿瘤发生有关。两者有望成为结直肠癌诊断潜在的分子标记物。     

细粒棘球蚴病患者外周血微小RNA的差异表达分析及其特异性诊断标志物的筛选

目的对细粒棘球蚴病(cystic echinococcosis,CE)患者外周血微小RNA(microRNA,miRNA)进行差异性表达分析,并筛选新型潜在诊断标志物。方法提取3例临床确诊的CE患者血清和3名健康者血清miRNA,采用芯片Affymetrix miRNA4.0对血清中miRNA进行高通量筛选,通过生物信息学分析,找出差异性的miRNA。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对21例CE患者血清与25名健康者血清的差异miRNA进行验证分析。采用Pearson’s相关性分析法分析miRNA与包囊重量或子囊个数的相关性。采用IBM SPSS 19.0软件分析不同miRNA的受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)与曲线下面积(area under curve,AUC)。结果芯片对比分析结果显示,与健康者血清比较,CE患者血清中有172个miRNA上调2倍以上,35个下调1/2以下。qRT-PCR结果表明,hsa-miR-762、hsa-miR-3536、hsa-miR-6125、hsa-miR-6821-5P、hsa-miR-663a、hsa-miR-24-3P、hsa-miR-191-5P、hsa-miR-320a等8个上调miRNA的表达水平分别为10.28±0.38、5.11±0.34、11.02±0.55、11.87±0.58、5.31±0.36、5.75±0.51、5.75±0.51、4.96±0.36,均高于其对应的健康组(P0.05)。ROC曲线分析结果表明,8个miRNA的AUC均大于0.8,提示这些分子具有潜在的临床诊断价值。相关性分析结果显示,miR-24-3p与包囊重量和子囊数量均呈正相关(r=0.525 0,P0.05;r=0.617 5,P0.05)。结论筛选出的8个宿主miRNA在CE患者血清中有差异性表达,具有潜在的临床诊断价值,其中miR-24-3p还可能与CE的发生发展相关。     

miR-150-5p/362-5p在结核菌潜伏感染者外周血单核细胞中的表达及诊断价值

目的分析miR-150-5p和miR-362-5p在结核菌潜伏感染者(LTBI)外周血单核细胞中的表达水平,并探讨其诊断价值。方法选取LTBI人群和健康对照(HD)各25例,应用Taq Man q PCR测定其外周血单核细胞中miR-150-5p和miR-362-5p表达水平,以U6 snRNA作为内参。应用ROC曲线评价miR-150-5p和miR-362-5p诊断LTBI的效果。结果 miR-150-5p在LTBI人群中的表达水平为(15.95±1.79),显著高于HD(7.09±0.52),差异有统计学意义(P0.01);miR-362-5p在LTBI人群中的表达水平显著低于HD(2.11±0.19 vs 4.94±0.51),差异有统计学意义(P0.01)。诊断LTBI的ROC曲线分析表明,miR-150-5p的敏感性、特异性分别为0.80、0.80;miR-362-5p的敏感性、特异性为0.88、0.76。结论 miR-150-5p、miR-362-5p在LTBI和HD人群外周血单核细胞中表达存在显著差异,对LTBI辅助诊断具有一定参考价值。     

miR-9-3p在2型糖尿病患者血浆中表达水平及其对Sirt1蛋白表达的影响

目的 检测microRNA-9-3p(miR-9-3p)在2型糖尿病(T2DM)患者、血浆中的表达水平,分析miR-9-3p对T2DM的诊断价值,并通过细胞实验检测miR-9-3p对HepG2细胞沉默信息调节因子(Sirt1)转录水平及蛋白水平表达的影响。方法 T2DM患者47例为T2DM组;健康体检人员28例为对照组。抽取患者静脉血,提取miRNA,应用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)以miR-423-5p为内参,检测两组血浆中miR-9-3p表达水平;应用受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆miR-9-3p对T2DM的诊断价值,并以HepG2细胞为切入点,检测miR-9-3p是否对Sirt1表达产生影响。结果 T2DM组血浆miR-9-3p的表达水平显著升高(P=0.000 5);miR-9-3p对于T2DM的诊断价值AUC=0.742(95%CI,0.628～0.857,P=0.000 5);miR-9-3p转染组与阴性对照组Sirt1 mRNA水平无显著差异(P=0.30);miR-9-3p转染组Sirt1蛋白水平显著低于阴性对照组(P=0.017)。结论 miR-9-3...     

慢性充血性心力衰竭患者血浆miR-423-5p的表达及意义

目的：探讨miR-423-5p在慢性充血性心力衰竭（CHF）患者血浆中的表达及其临床意义. 方法：采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）技术检测30例CHF患者及30例对照者血浆中miR-423-5p的表达水平,并分析其与临床资料之间的相关性,运用ROC曲线初步评价其在心力衰竭诊断中的潜在价值. 结果：CHF患者血浆中miR-423-5p水平高于对照组（P＜0.05）;血浆miR-423-5p水平与N末端B型利钠肽原（NT-proBNP）呈正相关（r=0.432,P=0.017）,与射血分数呈负相关（r=-0.34,P=0.032）;miR-423-5p诊断CHF的ROC曲线下面积为0.916（95％CI：0.845～0.988）,灵敏度和特异度分别为83.3％、90.0％. 结论：CHF患者血浆miR-423-5p表达上调,该指标有望成为诊断CHF的生物学标志物.     

急性胰腺炎患者血清miR-551-5p和miR-126a-5p水平与病情严重程度的相关性

目的:探讨急性胰腺炎(AP)患者血清微小RNA-551-5p(miR-551-5p)、微小RNA-126a-5p(miR-126a-5p)表达水平与AP严重程度的相关性。方法:收集127例AP患者的临床资料,根据病情严重程度分为轻症AP(MAP组) 63例和重症AP(SAP组) 64例;另选取健康体检者60例为对照组。采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测3组血清miR-551-5p和miR-126a-5p水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白介素6(IL-6)、白介素18(IL-18)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、淀粉酶(AMS)及脂肪酶(LPS)水平;利用Pearson法分析血清miR-551-5p及miR-126a-5p水平与患者Ranson评分、急性生理与慢性健康评估(APCHEⅡ)评分、血清生化指标的关系;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评估血清miR-551-5p及miR-126a-5p水平对AP的诊断价值;采用Logistic回归分析评估影响AP的危险因素。结果:与对照组比较,SAP组血清TNF-α、IL-6、IL-18、CRP、AMS、LPS水平、Ranson及APCHEⅡ评分显著升高(均P 0. 05),MAP组血清IL-6、IL-18、AMS、LPS水平、Ranson及APCHEⅡ评分显著升高(均P 0. 05);与MAP组比较,SAP组血清TNF-α、IL-6、CRP水平、Ranson及APCHEⅡ评分显著升高(均P 0. 05)。Pearson相关性分析显示,血清miR-551-5p与TNF-α、IL-6、AMS、LPS水平、Ranson及APCHEⅡ评分呈正相关(r值依次为0. 755,0. 684,0. 531,0. 519,0. 712,0. 679,均P 0. 05);血清miR-126a-5p与IL-6、IL-18、AMS水平及Ranson评分呈正相关(r值依次为0. 711,0. 678,0. 628,0. 701,均P 0. 05);血清miR-551-5p、miR-126a-5p诊断SAP的ROC曲线下面积(AUC)分别为0. 809、0. 800,截断值分别为2. 01、1. 54,敏感度分别为73. 1%、85. 3%,特异性分别为82. 8%、72. 4%;二者联合诊断的AUC为0. 965,敏感度为96. 5%,特异性为82. 4%;多因素Logistic分析结果显示高水平血清AMS、LPS、miR-551-5p、miR-126a-5p是AP的危险因素。结论:血清高水平miR-551-5p及miR-126a-5p可能反映AP患者病情严重程度,是评估SAP患者预后的潜在指标。     

血清外泌体miR-32和miR-20a在非小细胞肺癌中表达及其临床价值

目的检测非小细胞肺癌患者血清外泌体中miR-32以及miR-20a的表达水平,并探讨二者在临床诊断中的潜在价值。方法采集非小细胞肺癌患者和健康受试者外周静脉血各30例,分离出血清中外泌体,并提取其中的miRNA。通过实时荧光定量聚合酶链反应对miR-32和miR-20a进行检测,比较二者在两组中的表达水平,并分析与临床病理特征之间关系,通过受试者工作曲线(ROC)评价血清外泌体miR-32和miR-20a联合诊断非小细胞肺癌的价值。结果血清外泌体miR-32在非小细胞肺癌患者中较正常对照组下降,而miR-20a的表达较健康对照组升高,差异均有统计学意义(P0.05)。非小细胞肺癌患者血清外泌体miR-32在年龄、性别以及病理类型中,差异无统计学意义(P0.05),而在肿瘤分期及分化程度方面,差异有统计学意义(P0.05)。血清外泌体miR-20a在年龄、性别、肿瘤分期、分化程度和病理类型上均无显著差异(P0.05)。miR-32、miR-20a和两者联合检测非小细胞肺癌的AUC分别为0.715,0.713和0.825。结论 miR-32和miR-20a可能系潜在的生物标记物,二者联合可能有助于非小细胞肺癌早期诊断。     

不稳定型心绞痛患者miR-9-3p水平及临床意义

目的检测microRNA(miR)-9-3p在不稳定型心绞痛(UA)、健康体检人群血浆中的表达水平,分析miR-9-3p对于UA的诊断价值及与Gensini评分的相关性。方法 UA患者50例为UA组,同期健康体检人员30例为对照组。抽取静脉血,提取miRNA,应用实时荧光定量(qRT)-聚合酶链反应(PCR)以miR-423-5p为内参,检测血浆miR-9-3p表达水平,对UA患者行冠状动脉造影术进行Gensini评分,应用受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆miR-9-3p对UA的诊断价值,判断Gensini评分与血浆miR-9-3p表达水平的相关性。结果 UA组血浆miR-9-3p表达水平显著低于对照组(P0.01);miR-9-3p对于UA诊断价值曲线下面积(AUC)=0.88(95%CI,0.80～0.95,P0.05);Spearman相关性分析显示血浆miR-9-3p与低密度脂蛋白(LDL)水平、Gensini评分呈负相关(P0.05);多元逐步回归分析显示Gensini评分与血浆miR-9-3p表达水平呈显著负相关(P0.05)。结论 miR-9-3p血浆表达水平显著降低可能在UA发病过程中起重要作用。     

溃疡性结肠炎患者血浆miR-106a和miR-363-3p表达水平的变化及意义

目的探究miR-106a和miR-363-3p在溃疡性结肠炎(UC)患者血浆中的表达及其临床意义。方法选择2015年3月至2018年7月在重庆市开州区人民医院消化内科救治的78例UC患者(UC组)、53例CD患者(CD组)及同期46例健康体检者(NC组)作为研究对象。采用RT-PCR法检测3组受试者血浆miR-106a和miR-363-3p的表达水平。评估miR-106a和miR-363-3p表达水平鉴别CD和UC的效能。分析miR-106a和miR-363-3p表达水平与UC患者病情及预后的关系。结果 UC组患者血浆miR-106a和miR-363-3p相对表达量低于CD组,但高于NC组,差异均有统计学意义(P均0.05)。ROC曲线显示,miR-106a和miR-363-3p鉴别CD和UC的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.906和0.846。miR-106a和miR-363-3p联合检测鉴别CD和UC的AUC大于各指标单独检测(P0.05)。活动期UC患者血浆miR-106a和miR-363-3p的相对表达量均高于缓解期UC患者,差异均有统计学意义(P均0.05)。单因素和多因素Logistic回归分析影响活动期UC患者预后的相关因素,结果显示miR-106a和miR-363-3p与活动期UC患者预后密切相关。miR-106a1.14、miR-363-3p1.05的活动期UC患者预后不良。ROC曲线显示,miR-106a和miR-363-3p及两者联合检测诊断活动期UC患者预后的AUC分别为0.836、0.867和0.860,差异无统计学意义(P0.05)。结论检测miR-106a和miR-363-3p表达水平可辅助鉴别CD和UC。miR-106a和miR-363-3p的表达水平可反映UC患者病情,并可评估UC患者预后。     

血清miR-192和miR-29a在肝硬化无创诊断中的应用价值

背景:早期诊断肝硬化并予早期干预可阻止病情进展,避免或延缓肝硬化失代偿发生。筛选血清学无创标记物是肝硬化临床诊断和评估研究的重要内容。目的:评价血清miR-192和miR-29a在肝硬化无创诊断中的应用价值。方法:通过文献检索和real-time PCR筛选验证发现在肝硬化患者血清中差异表达明显的miRNAs——miR-192和miR-29a,以real-time PCR检测两者在120例肝硬化患者和76名健康对照者血清中的表达水平;二元logistic回归建立两者联合检测诊断肝硬化的数学模型,ROC曲线评估诊断效能。结果:肝硬化组血清miR-192表达水平显著高于对照组,血清miR-29a表达水平则显著低于对照组(P0.001)。由两者联合检测数学模型计算得到的风险评分诊断肝硬化的价值明显优于单一指标检测[ROC曲线下面积(AUC):0.968对0.887和0.933],且优于临床常用肝硬化血清学无创诊断指标APRI、FIB-4和ARR(AUC:0.796、0.793和0.571)。血清miR-192、miR-29a表达水平以及两者联合检测的风险评分与肝硬化Child-Pugh分级显著相关(P0.05)。结论:miR-192、miR-29a以及两者联合检测的风险评分可作为肝硬化无创诊断和评估新的血清分子标记物。     

循环微小RNA对高龄急性心肌梗死的早期诊断价值

目的探讨循环微小RNA(microRNA,miR-19b、miR-223和miR-483-5p)在高龄急性心肌梗死(AMI)的早期诊断价值。方法连续入选因"胸痛或其等危症"就诊于我院且疑诊AMI的年龄≥85岁高龄患者70例,按性别和年龄1:1配对原则,分为AMI组35例和非AMI组35例。收集患者入院时首份血标本,检测循环microRNA表达水平。比较2组循环miR-19b、miR-223和miR-483-5p表达差异,绘制ROC曲线评价循环microRNA对高龄AMI的早期诊断价值。结果与非AMI组比较,AMI组miR-19b、miR-223和miR-483-5p表达显著上调(3.42±0.11 vs 1.00±0.00,P<0.01;2.25±0.12 vs 1.00±0.00,P<0.05;2.51±0.12 vs 1.00±0.00,P<0.01)。ROC曲线分析显示,miR-19b、miR-483-5p和血清肌钙蛋白I诊断高龄AMI的曲线下面积(AUC)分别为0.73(95%CI:0.64~0.83)、0.71(95%CI:0.61~0.80)和0.64(95%CI:0.53~0.74),miR-19b、miR-483-5p诊断AMI价值优于血清肌钙蛋白I;miR-19b、miR-223和miR-483-5p三者联合诊断高龄AMI的AUC为0.82(95%CI:0.74~0.90)。结论循环miR-19b和miR-483-5p表达上调有助AMI早期诊断,有望成为高龄AMI的新型诊断标志物。