抗鼠上皮细胞单克隆抗体的制备及其导致肾损伤的作用

为了探讨膜性肾病的发病机理,作者试图用杂交瘤技术获得针对肾小球上皮细胞的McAb。以大鼠肾小球为抗原,加完全福氏佐剂,免疫BALB/c小鼠。采用对数生长的P3u1与免疫后的脾细胞融合及进行克隆筛选,获得3株针对肾小球上皮细胞的杂交瘤。利用抗原交叉试验(ELISA方法)、McAb亚类鉴定、放射免疫沉淀McAb纯度鉴定、McAb效价测定等方法对杂交瘤细胞进行了鉴定,同时使用免疫电镜的方法,并制备了McAB介导的肾炎模型。结果为:(1)以     

大鼠抗HRP单克隆抗体及其与HRP复合物保存条件的研究

本文以实验室制备的大鼠抗辣根过氧化物酶(HRP)单克隆抗体(McAb)及其与HRP的复合物(PAP)为研究对象,寻求McAb的最适保存条件,观察抗体活性的保存时限,为大鼠抗HRP McAb及其PAP质控鉴定提供可靠的技术资料,并为促进大鼠杂交瘤技术     

抗AFP单克隆抗体对荷肝癌鼠γ-照相的研究

通过杂交瘤技术获得抗AFP McAb。用放射性核素~(125)I,采用改良的氯胺丁法标记AFP McAb(IgG)。 采用裸鼠人肝癌模型和化学致癌剂诱发的大鼠肝癌模型,尾静脉注入~(125)I-AFP McAb     

大鼠单克隆抗体——Ⅶ.用降植烷和福氏佐剂预处理大鼠后腹水产生及单克隆抗体产量的增加

作者研究了腹腔注射降植烷、福氏不完全佐剂(IFA)以及上述两种佐剂的混合物(V/V)(称PIFA)对Louvain大鼠腹水产生及单克隆抗体(McAb)产量的影响。当腹腔注射杂交瘤或免疫细胞瘤细胞的同时注射2ml PIFA可获得最佳结果。若与未经处理的对照大鼠相比,腹水产生增加4.7倍,单克隆抗体产量增加6倍多。 大鼠-大鼠杂交瘤系统有以下优点:①在小鼠系统不适宜的情况下,可用大鼠代     

抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体的研制和初步应用

本文采用体细胞杂交瘤技术和酶联免疫吸附试验筛选技术,获得了6株持续分泌抗人甲状腺球蛋白 McAb 的杂交瘤细胞系。这6种 McAb 对人 T_3/T_4、及家兔、小牛、大鼠的甲状腺球蛋白均无交叉反应,但其中4种 McAb 对狗甲状腺球蛋白有不同程度的交叉反应,包括2种 McAb对人甲状腺微粒体也有交叉反应,余2种 McAb 均无交叉反应。将所得杂交瘤细胞接种 BALB/c鼠腹腔,获得高效价的腹水 McAb。本文还以这些 McAb 用免疫组化法,研究和检测病理甲状腺组织中甲状腺球蛋白的可能性进行了初步探索,并讨论了其临床意义。     

大鼠杂交瘤技术的特点及应用的研究

作者成功地引建了大鼠杂交瘤技术体系,以此技术获得分泌大鼠抗辣根过氧化物酶(HRP)单克隆抗体(McAb)的杂交瘤株。并制备了HRP-大鼠抗HRP(PAP)复合物,在细胞及组织切片上染色效果良好,背景清晰。为促进这一技术体系的推广应用提供有利条件。     

大鼠-小鼠淋巴细胞杂交瘤细胞株的建立

<正> 在建立针对小鼠共有抗原的单克隆抗体(McAb)的淋巴细胞杂交瘤细胞株时,若仍以小鼠(同种)作致敏淋巴细胞的供者,很难使小鼠对这类抗原致敏,因此有必要免疫异种动物以解决这问题。本文报道产生针对小鼠 IgE 决定簇的 McAb 的大鼠-小鼠淋巴细胞杂交瘤的建株。作者用小鼠抗天花粉蛋白的 IgE McAb TE-1(见顾华、叶敏,第三     

人—人B淋巴细胞杂交瘤

Kohlef和Milstein发明的杂交瘤技术是生物学技术的一项重大突破,它对生物学和医学科学发展的推动作用是无可估量的。但是,迄今为止,绝大多数杂交瘤源自啮齿类动物,所产生的单克隆抗体(简称McAb)是小鼠或大鼠免疫球蛋白。因此,它们在某些领域中的应用,特别是在临床治疗中受到了限制。为此,科学家们努力探求     

人体实质性肿瘤的单克隆抗体及其临床应用(文献综述)

<正> 自杂交瘤技术问世以来,现已迅速运用单克隆抗体(McAb)试图解决肿瘤抗原及肿瘤的诊断、治疗等一系列问题。本文主要介绍人体实质性肿瘤McAb的研制近况及探讨用于临床诊断和治疗的可能性。 一、人体实质性肿瘤McAb的研制: (一)已建立的杂交瘤及其McAb的特性:目前制得肿瘤McAb大部分是小鼠骨髓瘤细胞与免疫小鼠的脾脏细胞融合的杂交     

杂交瘤细胞的复苏及分泌单克隆抗体稳定性的观察

单克隆抗体(McAb)杂交瘤技术已在医学生物学各个领域中得到广泛应用。为了解杂交瘤细胞冻存一般时间复苏后产生McAb的稳定性,我们复苏了30株杂交瘤细胞,并用其中一部分细胞株制备McAb腹水。本文就杂交瘤细胞复苏后的生长情况及细胞冻存后分泌McAb的稳定性等进行了探讨。     

大鼠杂交瘤技术的特点及应用的研究

作者成功地引建了大鼠杂交瘤技术体系．以此技术获得分泌大鼠抗辣根过氧化物酶(HRP)单克隆抗体(McAb)的杂交瘤株，并制备了HRP-大鼠抗HRP(PAP)复合物，在细胞及组织切片上染色效果良好．背景清晰，为促进这一技术体系的推广应用提供有利条件。     

抗乙醇诱导的大鼠肝脏微粒体细胞色素P-450单克隆抗体的制备及特性鉴别

从乙醇处理的大鼠分离细胞色素P-450(EtOH-P-450)。纯化后免疫BALB/c雌鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓癌细胞制备杂交瘤。应用固相放射免疫法筛选单克隆抗体(McAb)产生杂交瘤。试验中使用~(35)[S]蛋氨酸标记的大鼠抗小鼠k链McAb作为第二抗体(Yelton,D.E,etal:HYbriboma 1。5-11。1981)。分离31个单独的产生一种单一鼠免疫球蛋白     

杂交瘤技术的进展(文献综述)

<正> 自从1975年Kohler和Milstein建立杂交瘤技术以来,单克隆抗体(McAb)的研制及应用迅猛发展。McAb的应用主要集中在体内诊断、理论性研究以及纯化和鉴定抗原等方面,临床应用尚有一定困难。近年来杂交瘤技术又有进展,为HcAb的制备和应     

单克隆抗体的简易酶标记技术

自从kohler和Milstein 1975年建立杂交瘤技术以来,我国已建立了针对不同抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞系百余种。由这些细胞系分泌的单克隆抗体(McAb)是均一的蛋白质。目前McAb在临床上主要用于疾病诊断和了解人类疾病的发病机理。近年来许多学者进行了这方面的探讨。实验表明,纯化后的McAb不易标记酶和荧光素,往往采用标记第二抗体进行间接法检测,因而使实验研究和临床应用受到一定的限制。最近,我们直接用腹水型单克隆     

单克隆抗体纯化技术的探讨

自Kohler等建立杂交瘤技术以来,单克隆抗体(McAb)研究日益深入。含McAb的细胞培养上清、腹水及血清含中有大量杂蛋白和其它大分子物质,使McAb的实验研究和临床应用受到一定限制。近年来、McAb纯化的研究倍受重视,取得了进展。本文试以小鼠McAb的纯化为主,综述如下。     

一种用于制备McAb杂交瘤的体内和体外联合免疫诱导方法

在研制抗可溶性抗原McAb杂交瘤的免疫过程中,若免疫原的分子量较小、免疫原性较弱或抗原珍贵难以获得时,选择最适的免疫方法和途径对于制备高质量McAb杂交瘤甚为重要。近年来,国内外对此曾进行了一些探讨,并取得一定的进展。本文     

抗体基因工程——重组抗体

七十年代中杂交瘤单克隆抗体问世以来,在医学和生物学的研究及临床应用中,单克隆抗体己越来越显示它的重要性。但是,目前能应用的单克隆抗体(McAb)大多是鼠-鼠杂交瘤,抗体是属鼠的免疫球蛋白(Ig),在进入人体后能激发抗异种蛋白的反应。为此,人们试着获得人型免疫球蛋白(Ig)的McAb。目前除了人-人杂交瘤外,用抗体基因工程方     

诱导细胞凋亡的抗hDR5单抗的研究

目的 研制能诱导肿瘤细胞凋亡的抗人DR5单克隆抗体（McAb）。方法 以可溶性人死亡受体（death receptor，DR）5胞外段免疫小鼠，采用杂交瘤技术制备抗人DR5的McAb；MTT方法筛选分泌有细胞毒活性McAb的杂交瘤细胞；亲和层析方法纯化McAb；夹心ELISA法测定McAb亚型；Western blot和斑点ELISA法检测McAb的抗原表位类型；间接ELISA法检测McAb的特异性；流式细胞仪检测FITC-annexinⅤ／PI双色标记的Jurkat细胞的凋亡率；DNA琼脂糖凝胶电泳测定凋亡细胞的DNA片段化。结果 获得1株杂交瘤细胞，其分泌的McAb命名为mDRA-6，为IgG1；其抗原表位类型为构象表位；其特异性识别hDR5，与hFas、hDR4等无交叉反应。mDRA-6对Jurkat细胞具有细胞毒作用；经McAb mDRA-6处理后，Jurkat细胞膜表面高表达丝氨酸磷脂，并导致Jurkat细胞中的DNA片段化。结论 mDRA-6是一个具有诱导细胞凋亡活性的新的抗人DR5功能性抗体，在以TRAIL／DR5系统进行肿瘤治疗和探讨DR5的功能结构域研究方面具有广泛应用前景。     

抗人甲胎蛋白单克隆抗体的研制及其应用

本文报告将自制的人甲胎蛋白(AFP)抗原免疫小鼠,采用常规杂交瘤技木融合小鼠的脾细胞和SP2/0细胞。经有限稀释法克隆出九株分泌抗人AFP单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。分别用血凝抑制试验、琼脂双扩散、ELISA和放射免疫分析等方法鉴定了McAb对抗原的表位特异性、亲和力及其稳定性和小鼠Ig亚类属性。实验结果表明几种McAb分别作用于AFP抗原上相同或不同的抗原表位。其中大多数McAb具有较高的亲和力。抗原表位特异性不同的McAb在免疫沉淀反应中有协同作用。本文报告的AFP McAb双位点夹心ELISA,对一些临床标本的检测结果与AFP放射免疫试剂盒的结果有着良好的相关性。     

抗慢性B淋巴细胞白血病患者IgM单抗相对亲和力的分析

本文采用间接ELISA法检测了11株抗B-CLL患者IgM腹水和杂交瘤上清McAb的相对亲和力。结果提示,各株McAb结合抗原的相对亲和力不同。根据50％最大结合浓度分为两组。其中4株杂交瘤上清McAb与纯化腹水McAb测得结果基本吻合。实验结果为合理地选用这些单抗提供了重要依据。