输入RSV cpts530L多聚酶突变能提高重组人PIV3 cp45疫苗候选株的减毒水平

作者试图确定呼吸道合胞病毒 (RSV)中的减毒 (att)突变能否转移给副粘病毒属中另一关系较远的病毒 ,3型副流感病毒(PIV3)。RSV的冷传代 (cp)、温度敏感性(ts)疫苗候选株 cpts5 30的 L多聚酶中 5 2 1位点处发生苯丙氨酸到亮氨酸的突变后显示 ts及 att表型。对一些关系较远的副粘液病毒的 L蛋白的这个区域进行序列对比表明 ,该苯丙氨酸是保守的。用反向遗传学研究表明 ,野型 PIV3L 蛋白 45 6位点的苯丙氨酸被诱变为亮氨酸 (F45 6 L )后 ,该称为 r45 6 L的病毒对温度敏感 ,在仓鼠上呼吸道 (而非下呼吸道 )的复制 ,比重组野型 PIV3弱 1…     

重组嵌合1型人副流感病毒疫苗候选株rHPIV3-1cp45在非洲绿猴中的免疫原性和保护性

1、2、3型人副流感病毒 ( HPIV)可使婴幼儿产生严重的呼吸道疾病。将 3型 HPIV疫苗候选株 r HPIV3cp45的融合蛋白和血凝素 -神经氨酸酶开放阅读框架 ,置换成 1型HPIV野毒株的相应序列 ,形成了重组疫苗候选株 r HPIV3- 1 cp45。与 HPIV3cp45相比 ,此重组嵌合病毒在体外复制时表现出较高的温度敏感性 ,在免疫仓鼠的呼吸道内复制明显减弱。本试验以非洲绿猴为动物模型 ,对r HPIV3- 1 cp45的减毒程度和效力进行了研用疫苗。用 r HPIV3cp45及 HPIV1 HN和 F基因特异性引物扩增测序进行确证。同时 ,在不同温度下进行 TCID50 终点…     

表达HPIV3抗原的复制缺陷型痘苗病毒与候选的HPIV3减毒活疫苗的免疫原性和效果比较

由于 3型副流感病毒 (PIV3)可在 6月龄以下婴儿中引起严重疾病 ,故应在存在母传抗体的婴儿早期进行免疫。本研究评价了MVA/PIV3重组体在输入含抗 - PIV3同种血清的恒河猴中的免疫原性和效果 ,并与 cp45PIV3减毒活疫苗进行比较。　　 MVA/PIV3重组体疫苗以在多数哺乳动物细胞内呈复制型缺陷的改良痘苗病毒Ankara株 (MVA)为载体 ,在其 de/ 部位嵌入人 PIV3(HPIV3)的血凝素 -神经氨酸酶(HN)和融合蛋白 (F)基因后 ,可表达 HN和F等 PIV3保护性抗原 ;cp45疫苗由 HPIV3JS野毒株在 2 0℃传 45代获得 ,可表达整个PIV3基因。　　…     

研制能有效抵抗3型副流感病毒感染的重组痘苗病毒疫苗

改良的痘菌病毒(VV)Ankara株(MVA)是在鸡胚细胞中传500代以上的疫 苗株(其基因组发生多处缺失,不能在哺乳动物细胞中复制,在实验动物中也无致病性).用表达流感病毒血凝素(HA)核蛋白(NP)基因的重组MVA免疫小鼠后,可保护小鼠抵抗致死剂量流感病毒的攻击.作者用表达3型副流感病毒(PIV3)融合(F)和血凝素-神经氨酸酶(HN)糖蛋白基因的重组MVA肌肉或鼻内接种棉鼠,同样达到了抗PIV3呼吸道攻击的效果.用BamHI分别从质粒pTZ18R和PGEM3Zf-切下PIV3的F、HN基因,用Klenow酶和脱氧核苷三磷酸切去F基因末端,克隆于含有2个VV早期/晚期启动子的质粒pJS-5中的SnaBI位点.将HN基因也插入其Bam HI位点,成为带HN和F基因的质粒pLW-1.含双启动子盒的HN和F基因转移入质粒GO6,GO6含有MVA侧翼序列,可插入MVA delⅢ中,形成的质粒叫pLW-2.     

表达RSV附着蛋白和融合蛋白的bPIV3可保护仓鼠抵抗hPIV3和RSV的攻击

作者用减毒牛3型副流感病毒(bPIV3)作为病毒载本主链，在bPIV3RNA基因组的HN和L基因之间插入呼吸道合胞病毒(RSV)的附着(G)和融合(F)基因，形成的病毒PIV3／RSV(I)含有2900nt的插入片段，它由两个有转译活性的转录单位组成。尽管基因物质增加，但此病毒在Vero细胞中的增殖仍然可达到高滴度，可表达RSV和bPIV3的表面糖蛋白。     

表达RSV附着蛋白和融合蛋白的bPIV3可保护仓鼠抵抗hPIV3和RSV的攻击

作者用减毒牛 3型副流感病毒 ( b PIV3)作为病毒载本主链 ,在 b PIV3RNA基因组的 HN和 L 基因之间插入呼吸道合胞病毒(RSV)的附着 ( G)和融合 ( F)基因 ,形成的病毒 PIV3/ RSV( I)含有 2 90 0 nt的插入片段 ,它由两个有转译活性的转录单位组成。尽管基因物质增加 ,但此病毒在 Vero细胞中的增殖仍然可达到高滴度 ,可表达 RSV和b PIV3的表面糖蛋白。　　 b PIV3/ RSV( I)鼻内免疫仓鼠后 ,尽管复制水平较低 ,但均能诱生血清中的 RSV中和抗体和人 b PIV3( h PIV3)血凝抑制抗体 ,其滴度仅较野型 RSV和 b PIV3在仓鼠中诱生…     

一种抗呼吸道合胞病毒和3型副流感病毒的原型重组疫苗

呼吸道合胞病毒(RSV)和3型副流感病毒(PIV-3)在婴幼儿中引起严重的呼吸道感染.目前,这两种病毒的灭活或减毒活疫苗均不能提供有效的临床保护作用,所以迫切需要发展新型疫苗.RSV的融合(F)蛋白和PIV-3的血凝素-神经氨酸酶(HN)分别是这两种病毒中可诱生中和抗体的表面糖蛋白.作者选择这两种蛋白抗原,用基因工程方法,将编码F蛋白前526个氨基酸与HN蛋白第54～573个氨基酸片段串联,应用杆状病毒表达系统,在昆虫细胞中获得了含F_(RSV)-HN_(PIV-3)嵌合蛋白的重组病毒株.     

腮腺炎病毒及疫苗研究进展

随着对腮腺炎病毒研究的深入,人们对腮腺炎病毒的基因组结构、病毒蛋白的结构和功能有了更多的认识,病毒表面的两种糖蛋白——血凝素-神经氨酸酶(HN)蛋白和融合(F)蛋白是重要的抗原决定簇,HN蛋白抗体可中和病毒感染,而F蛋白是溶血抗原。现今使用的腮腺炎疫苗为减毒活疫苗,对病毒基因序列分析后发现接种疫苗后出现的脑膜炎病例主要与Urabe株有关,目前正在探索发展新一代腮腺炎疫苗。     

脊髓灰质炎病毒抗原嵌合体可作为一种新疫苗

目前使用的脊髓灰质炎减毒活疫苗由野型病毒在非人灵长类动物和组织培养中经多次传代而得。有证据表明,1型疫苗与亲代野毒株相比,有多处减毒突变;而3型病毒仅有两处突变。在发达国家2和3型Sabin疫苗株与接种者的少数脊髓灰质炎有关。脊髓灰质炎病毒分子生物学和遗传学的最新进展提示有可能制备新的、与1型病毒同样安全的2和3型疫苗。作者将含1型Sabin疫苗抗原位点1的1174个硷基对的PstⅠ限制性内切酶片段亚克隆到噬菌体M13 mp18中。用3型3.370株抗原位点1区的8个氨基酸取     

预防SARS的鼻腔疫苗

接种 1剂由美国国立变态反应和传染病研究所 ( NIAID)研制的鼻腔疫苗能保护猴子抵抗 SARS病毒。这种疫苗最有希望的地方是它能直接释放到 SARS病毒感染的初始部位——鼻腔。　　疫苗针对 SARS病毒表面突起的纤突蛋白 ( SARS- S) ,这种蛋白能使病毒粘附并感染人体细胞。NIAID研制的疫苗是将编码 SARS- S的基因插入减毒型的人 3型副流感病毒 ( HPIV3) ,这种称为 BHPIV3的减毒型病毒是一种正在研制的抗 HPIV3的实验性疫苗。　　将疫苗喷入非洲绿猴的鼻腔 ,一组给予 BHPIV3/SARS- S,另一组则给予对照BHPIV3(不含 SARS…     

编码3型PIV内蛋白和1型PIV表面糖蛋白的嵌合减毒活疫苗诱导对1和3型PIV的抵抗力

作者曾将 １型副流感病毒（ＰＩＶ１）血凝素－神经氨酸酶和融合蛋白基因替代ＰＩＶ３反基因组ｃＤＮＡ中的相应基因，制备重组嵌合 ＰＩＶ３－ＰＩＶ１病毒，称为 ｒＰＩＶ３－１。 ｒＰＩＶ３－１在细胞中和仓鼠体内的生长特性类似于野型病毒，并具有ＰＩＶ１的主要保护性抗原。 本文报道ｒＰＩＶ３－１的衍生物ｒＰＩＶ３－１．ｃｐ４５Ｌ含有在ｃｐ４５－ＰＩＶ３候选疫苗病毒Ｌ基因中所见的３个导致温度敏感性变化和减毒的氨基酸改变。ｒＰＩＶ３－１．ｃｐ４５Ｌ具有温度敏感性，在 ３８ ℃停止增殖，与含有 ３个相同突变的重组病毒株…     

甲型流感(H1N1)疫苗

1 目前已有有效的抗甲型流感(H1N1)病毒的疫苗吗? 目前还没有,但是,这种疫苗的研制工作已在进行中.流感疫苗通常含有死的或减毒的流行病毒株.疫苗刺激机体免疫系统以防御感染,为了增强疫苗的保护作用,疫苗病毒应与流行"野型"病毒密切相配.由于这种H1N1病毒是新的,目前没有用这种特定病毒制备的疫苗.制备一种新流感疫苗可能需要5～6个月.     

甲型流感(H1N1)疫苗

1 目前已有有效的抗甲型流感(H1N1)病毒的疫苗吗? 目前还没有,但是,这种疫苗的研制工作已在进行中.流感疫苗通常含有死的或减毒的流行病毒株.疫苗刺激机体免疫系统以防御感染,为了增强疫苗的保护作用,疫苗病毒应与流行"野型"病毒密切相配.由于这种H1N1病毒是新的,目前没有用这种特定病毒制备的疫苗.制备一种新流感疫苗可能需要5～6个月.     

甲型流感(H1N1)疫苗

1 目前已有有效的抗甲型流感(H1N1)病毒的疫苗吗? 目前还没有,但是,这种疫苗的研制工作已在进行中.流感疫苗通常含有死的或减毒的流行病毒株.疫苗刺激机体免疫系统以防御感染,为了增强疫苗的保护作用,疫苗病毒应与流行"野型"病毒密切相配.由于这种H1N1病毒是新的,目前没有用这种特定病毒制备的疫苗.制备一种新流感疫苗可能需要5～6个月.     

甲型流感(H1N1)疫苗

1 目前已有有效的抗甲型流感(H1N1)病毒的疫苗吗? 目前还没有,但是,这种疫苗的研制工作已在进行中.流感疫苗通常含有死的或减毒的流行病毒株.疫苗刺激机体免疫系统以防御感染,为了增强疫苗的保护作用,疫苗病毒应与流行"野型"病毒密切相配.由于这种H1N1病毒是新的,目前没有用这种特定病毒制备的疫苗.制备一种新流感疫苗可能需要5～6个月.     

B亚群呼吸道合胞病毒活疫苗在动物中的遗传学稳定性和免疫原性

作者将B亚群呼吸道合胞病毒(RSV)野毒株(wt)经不同细胞传16代,又分别在32～21℃和26～22℃冷传代(cp)12和29代或再用5氟尿嘧啶诱变后空斑纯化,获得包括温度敏感(ts)和非ts(宿主范围)等多种减毒突变株,研究了这些突变株在动物中的复制水平、免疫原性和遗传稳定性.首先观察了wt和cp株于32℃、39℃和42℃时在Vero或HEp-2细胞上的空斑表型和形成效力,wt株皆相等,而cp-23和cp-52的空斑在39℃和40℃时比32℃时缩小50%以上.棉鼠鼻腔接种不同病毒株后在肺和鼻甲中的病毒效价(log_(10)pfu/g),wt分别为5.4～5.8和4.7～5.1,cp-12、cp-23和cp-52的效价分别下降30和100倍、400和500倍、≥20000和1000倍.冷传代次数增加,对病毒的复制限制亦增强.cp-52的减毒表型在用环磷酰胺免疫抑制的棉鼠中长期(14天)     

表达HIV-1蛋白的委内瑞拉马脑炎病毒载体:提高疫苗效力的载体设计方案

以减毒疫苗株为基础的促进异源病毒蛋白表达的病毒疫苗载体 ,可诱生抗病毒载体和抗外源蛋白的免疫应答 ,这种策略尤其适用于 1型人类免疫缺陷症病毒 ( HIV- 1)这样的病毒。作者报告了以委内瑞拉马脑炎( VEE)病毒弱毒株为载体表达 HIV- 1蛋白的情况。　　作者将 VEE病毒株改造成含 2个独立的减毒突变 ( E2 Lys2 0 9和 E1Thr2 72 )的突变体 ,并进一步引入 2 6 S亚基因组 m RNA启动子复制拷贝 ,为了产生下游启动子载体 ,将此额外启动子紧接在 E1基因之后插入 ,而上游启动子载体则将额外启动子紧插在真正的 2 6 S启动子的上游。外源性…     

甲型流感(H1N1)疫苗

1 目前已有有效的抗甲型流感(H1N1)病毒的疫苗吗? 目前还没有,但是,这种疫苗的研制工作已在进行中.流感疫苗通常含有死的或减毒的流行病毒株.疫苗刺激机体免疫系统以防御感染,为了增强疫苗的保护作用,疫苗病毒应与流行"野型"病毒密切相配.由于这种H1N1病毒是新的,目前没有用这种特定病毒制备的疫苗.制备一种新流感疫苗可能需要5～6个月.     

甲型流感(H1N1)疫苗

1 目前已有有效的抗甲型流感(H1N1)病毒的疫苗吗? 目前还没有,但是,这种疫苗的研制工作已在进行中.流感疫苗通常含有死的或减毒的流行病毒株.疫苗刺激机体免疫系统以防御感染,为了增强疫苗的保护作用,疫苗病毒应与流行"野型"病毒密切相配.由于这种H1N1病毒是新的,目前没有用这种特定病毒制备的疫苗.制备一种新流感疫苗可能需要5～6个月.     

甲型流感(H1N1)疫苗

1 目前已有有效的抗甲型流感(H1N1)病毒的疫苗吗? 目前还没有,但是,这种疫苗的研制工作已在进行中.流感疫苗通常含有死的或减毒的流行病毒株.疫苗刺激机体免疫系统以防御感染,为了增强疫苗的保护作用,疫苗病毒应与流行"野型"病毒密切相配.由于这种H1N1病毒是新的,目前没有用这种特定病毒制备的疫苗.制备一种新流感疫苗可能需要5～6个月.